应用多重PCR检测细菌性阴道炎支原体

目的探讨多重PCR在检测细菌性阴道炎（BV）患者中3种常见支原体的应用价值,为生殖道支原体感染的监测和快速诊断提供理论依据。方法提取泌尿生殖道标本中解脲脲原体（Uu）、生殖支原体（Mg）、人型支原体（Mh）DNA,多重PCR扩增目的基因,电泳检测扩增产物。结果在31份BV标本中检测Uu阳性标本16例,Mg阳性标本4例,Mh13例。其中6例为Uu和Mh感染,1例为Uu和Mg感染。结论本研究初步验证了多重PCR技术能应用于BV标本3种常见支原体的快速检测,可望成为临床诊断与疾病监测的理想方法。     

多重PCR技术及其在病原体检测中的应用

多重PCR(Multiplex Polymerase Chain Reaction,MPCR)是在常规PCR基础上发展起来的新技术,在同一个反应体系中加入一对以上引物,分别扩增不同的模板,得到不同的目的片段。这种方法既保留了常规PCR方法的特异性、敏感性,又减少了操作步骤及试剂用量,可以在同一反应中检测多种致病菌的特异基因。利用一次多重反应,可同时检测、鉴别出多种病原体。不论在致病微生物引起的传染病诊断方面,还是在环境中致病     

荧光定量PCR在念珠菌性阴道炎诊断中的应用价值

目的探讨荧光定量PCR在念珠菌性阴道炎诊断中的应用价值。方法选取2017年8月至2019年8月禹州市妇幼保健院接收的62例疑似阴道炎患者,分别使用荧光定量PCR和细菌培养法检测患者阴道分泌物。对比两种方法的检测结果,分析荧光定量PCR的诊断价值。结果荧光定量PCR检出率与核酸杂交法诊断检出率相比,差异无统计学意义(P>0.05);荧光定量PCR检出率高于细菌培养法(P<0.05);荧光定量PCR检测的灵敏度、特异度、准确性均高于细菌培养法(均P<0.05)。结论荧光定量PCR诊断念珠菌性阴道炎效果较好,临床值得推广。     

细菌培养法与PCR法对细菌性阴道炎患者的辅助诊断价值

目的:比较细菌培养法和PCR法在细菌性阴道炎患者临床诊断中的辅助诊断价值。方法:细菌性阴道炎患者56例,分别应用细菌培养法和PCR法检测患者阴道分泌物中的细菌种类,比较两种检测方法的阳性检出率。结果:细菌培养法的阳性检出率为73.2%;PCR法的阳性检出率为91.1%。两种检测方法检出率比较差异明显(P<0.05);细菌培养法的加特纳菌、淋球菌、肠球菌、棒状杆菌的检出率分别为51.8%、3.6%、12.5%和16.1%,与PCR法的75.0%、16.1%、28.6%和35.7%比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:PCR法在细菌性阴道炎临床诊断中所具有的辅助诊断价值较细菌培养法更高。     

多重PCR结合毛细管电泳检测儿童呼吸道病原体方法的建立及应用

目的：建立肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,MP）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.au）、肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,P.Ae）、阴沟杆菌（Enterobacter cloacae,Ecl）、白色假丝酵母菌（Candida albicans,Cal）、鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii,Aba）7种儿童呼吸道病原体多重PCR结合毛细管电泳法检测体系。方法：随机收集南京市儿童医院2020年11—12月266例儿童呼吸道病原体样本,针对MP、S.au、KP、P.Ae、Ecl、Cal、Aba保守序列设计特异性引物,设计并优化多重PCR结合毛细管电泳检测体系;将该检测结果与细菌培养以及荧光定量PCR比对,评估该方法的检测性能（灵敏度、特异度）。结果：所设计引物可以特异性扩增出呼吸道病原体;多重PCR结合毛细管电泳检测体系检出敏感性高;与其他呼吸道感染病原体未出现交叉反应,无明显的非特异峰,特异性较好。结论：成功建立一种能够快速筛查7种常见儿童呼吸道病原体的多重PCR结合毛细管电泳的检测方法。     

中西医结合治疗难治性念珠菌性阴道炎的疗效观察

难治性念珠菌性阴道炎的发病率是妇科疾病中最为常见的一种疾病,表现的症状为外阴瘙痒,灼痛、性交痛等,严重影响着广大妇女的生活和工作。我院采用中西医结合的治疗方法治疗难治性念珠菌性阴道炎,选取临床60例随机分为2组,每组30例,进行对比治疗,治疗组在对照组治疗基础上采用中药内服和中药外洗相结合的方法,均以2周为1疗程,观察临床的疗效。结果:治疗组痊愈30例,显效27例,无效3例,有效率占90%;对照组痊愈30例,显效18例,无效12里,有效率占60%。两组对比,差别有统计学意义(P0.05)。结论:中西医结合治疗霉菌性阴道炎临床疗效显著,值得临床推广。     

阴道炎的病因分析

目的：探讨引起妇女阴道炎的主要病原体的感染情况。方法：对1686例患阴道炎的妇女经阴道分泌物检查进行分析。结果：引起阴道炎的各种病原体的感染率为白色念珠菌45％，阴道毛滴虫26．8％，阴道加德纳菌12．1％，淋球菌11．7％，衣原体6．7％，其他5．2％。有127例标本同时有两种病原体合并感染。结论：白色念珠菌与阴道毛滴虫是引起妇女阴道炎的主要病原体。应注意几种病原体合并感染的情况。     

阴道炎五联检验在阴道炎病原体诊断与白带清洁度检测中的应用

目的 探讨阴道炎五联检验在诊断阴道炎及病原体、白带清洁度检测中的应用价值。方法 收集120例疑似阴道炎患者,进行常规镜检、阴道炎五联检验,以临床综合检查结果为参照,比较阴道炎五联检验、常规镜检对阴道炎的诊断价值,分析阴道炎五联检验、常规镜检与临床综合检查结果间的一致性,并比较其对不同类型阴道炎、不同阴道炎病原体及不同白带清洁度的阳性检出率。结果 阴道炎五联检验对阴道炎的诊断灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值、阴性预测值均高于常规镜检（均P<0.05）;阴道炎五联检验与临床综合检查结果之间具有高度一致性;阴道炎五联检验对细菌性阴道炎、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎、加德纳菌、厌氧菌、念珠菌、滴虫的阳性检出率均高于常规镜检（均P <0.05）。阴道炎五联检验与常规镜检对I度、II度、III度、IV度的阳性检出率差异均无统计学意义（均P> 0.05）。结论 阴道炎五联检验对阴道炎具有良好的诊断价值。     

十三种致病菌多重PCR技术检测

目的探讨致病菌多重PCR检测方法。方法利用13种在突发公共事件中可能出现在饮用水水源水体中的致病细菌的特异性序列为靶序列,设计了14对特异性引物并分成3组进行多重PCR反应,建立并优化了多重PCR检测体系。结果通过实验确定适宜的退火温度为66~68℃;3组检测引物的添加比例分别为:第1组引物添加比例为Shi∶Sa∶O157∶Ec∶Sen=1∶1∶1∶2∶3~1∶1∶1∶3∶4,第2组引物添加比例为Lm∶Lp∶Kp∶Hp=1∶1∶4∶1,而第3组引物添加比例为MT∶VC∶BA∶YP∶16S=8∶1∶8∶4∶4;混合引物的用量为0.6~0.8μL。多重PCR的基因组DNA检测灵敏度可达到2×10-2ng/μL;配合浓缩集菌设备,使用研究中建立的多重PCR体系,肠炎沙门菌培养液的检测下限可以达到103cfu/mL。结论该多重PCR检测方法操作简单,速度快,灵敏度高,稳定性和重复性好,具有较广阔的应用前景和较大的经济与社会效益。     

系统用药治疗难治性念珠菌性阴道炎136例疗效观察

目的:探讨治疗女性难治性念珠菌性阴道炎的有效方法。方法:对136例难治性念珠菌性阴道炎采用口服伊曲康唑和阴道放置三维制霉素栓进行系统治疗、追踪随访。结果:用药1个疗程治愈率64.7%,用药2个疗程治愈率90.44%,用药3个疗程治愈率100%。结论:系统治疗念珠菌性阴道炎治愈率高、复发率低,值得临床推广应用。     

1372例阴道炎分泌物的病原体分析

目的：探讨妇科阴道炎病原体感染模式,分析感染趋势,对妇科病预防提供依据。方法：对1372例妇科炎症分泌物病原体进行快速染色法镜检,将有关资料进行统计与分析。结果：感染病原体以真菌为主,占受检人数的18．66％,其次为G-肾形双球菌占8.97％,同时发现多种病原体混合感染模式。对四种混合感染分析,结果以滴虫、G-肾形双球菌混合感染率最高达2．66％,其次为滴虫、真菌混合感染占0．77％。结论：女性阴道炎常见病原体为真菌、G-肾形双球菌、滴虫,其次为混合感染。     

细菌培养法与PCR法对细菌性阴道炎辅助诊断的价值

目的：比较细菌培养法与PCR法诊断细菌性阴道炎的价值。方法选择我院2012年10月至2014年10月收治的208例细菌性阴道炎患者,采集阴道分泌物后,分别用PCR法与细菌培养法鉴别细菌种类,比较两种方法的灵敏度、特异性。结果检出的致病菌种以阴道加德纳菌最常见,占61.8%。PCR法检出阳性率为81.7%,明显高于细菌培养法的65.4%,且PCR法检灵敏度为98.2%,特异性为95.3%,均明显高于细菌培养法的85.6%与86.6%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PCR法较细菌培养法对细菌性阴道炎具有更好的诊断价值,值得临床推广应用。     

多重PcR检测社区获得性肺炎患者中的病原体

目的评价多重PCR在快速诊断社区获得性肺炎病原体中的作用。方法提取痰液标本中的DNA，扩增病原体DNA后电泳并观察其结果，同时给予普通PCR或分离培养作为对照。结果成功检测出32例感染者，与普通PCR符合率达100％，敏感性高于分离培养。结论多重PCR能高通量、快速诊断病原体，值得临床进一步推广。     

多重PCR检测反复上呼吸道感染儿童病毒的研究

目的探讨多重PCR在检测反复上呼吸道感染儿童中病毒的价值。方法获取急性上呼吸道感染儿童的呼吸道临床标本,设计4组病毒套式PCR引物,对其进行基因扩增。结果在102例急性反复呼吸道感染儿童中,66例患者至少有1种病原体阳性,其中以流感病毒A,副流感病毒,呼吸道合胞病毒最常见,但并未检测出冠状病毒如SARS。结论多重PCR能快速检测急性呼吸道感染患者中的多种病毒,可用于临床诊断与疾病监测。     

1280例阴道炎患者分泌物的常见病原体分析

阴道正常菌群较单一，主要是阴道乳酸杆菌。此菌能使糖原转化为乳酸，使阴道保持正常酸性环境。在患有各种感染时，体机免疫功能低下，乳酸杆菌减少或消失，造成菌群失调，引起阴道炎。目前，在性传播疾病中，淋病占首位。且复合念珠菌，滴虫感染也占有相当的比例。本文对1280例阴道炎患者分泌物进行了涂片镜检和淋菌酶标免疫试验，并对不同年龄组进行了分析讨论。现将结果报告如下。l临床材料1．1材料来源：1996年9月一1997年9月在我院妇产科门诊就诊被诊断为不同程度阴道炎患者，共1280例，年龄15－54岁，病程一周至四周。1．2分泌物的采…     

利用多重PCR检测3种食源性致病菌

目的旨在建立一种可以同时检测金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌的多重PCR方法。方法以金黄色葡萄球菌的nuc基因、沙门氏菌invA、志贺氏菌ipaH基因作为靶序列设计3对特异性引物,进行PCR反应得到223bp、302 bp、369 bp扩增片段,经测序证实扩增产物为目的片段。结果采用建立的FTA滤膜结合多重PCR的检测方法同时对这3种食源性致病菌进行检测,灵敏度均达到102 cfu/ml。结论该方法灵敏度高、耗时短,可用于同时检测3种致病菌,为预防控制细菌性食物中毒的暴发流行提供了新的检测方法。     

多重PCR鉴定伤口中3种致病菌方法的建立

目的应用多重PCR技术,建立一种快速、准确检测伤口中金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌等3种常见致病菌的方法。方法根据Gene Bank中3种致病菌的序列分别设计特异性引物,优化该反应体系的同时,对该方法的特异性、敏感性和稳定性进行测试。结果经过优化的PCR体系可准确地鉴定出3种目的菌,且检测方法特异性强,灵敏度高。结论该方法操作简单,能显著缩短检测时间,具有较理想的应用前景。     

石炭酸联合抗菌药物治疗难治性阴道炎的临床应用研究

目的:探讨石炭酸联合抗菌药物治疗难治性阴道炎的疗效。方法:将100例反复发作的难治性阴道炎患者随机分为对照组和实验组,均给予抗菌药物治疗,实验组在此基础上给予石炭酸稀释液阴道擦洗,治疗前后均进行阴道分泌物培养试验,疗程结束后统计治愈率和复发率。结果:实验组患者治愈率明显高于对照组,复发率低于对照组,两组患者临床疗效对比统计学差异显著(P<0.01)。结论:石炭酸联合抗菌药物治疗难治性阴道炎临床疗效较满意。     

弓形虫乙肝病毒多重PCR及芯片杂交技术的研究

目的 建立同时检测弓形虫和乙肝DNA的多重PCR和芯片杂交检测方法，为孕产妇TORCH检测的进一步研究提供实验依据。方法以病人血液及弓形虫RH腹水为样本，多重PCR方法为基础，通过基因片段筛选及引物比例调整，进行弓形虫和乙肝病毒基因片段的扩增。然后进一步建立生物芯片检测法以排除PCR假阳性。结果在确定合适的多重PCR引物比例后，扩增结果清晰可辨。在PCR体系中加入Norwalk扩增监控进一步证实了扩增结果的可靠性。芯片与PCR产物杂交的结果具有较好的灵敏性和特异性。结论 建立的针对弓形虫和乙型肝炎病毒检测的多重PCR和芯片杂交方法是有效的，芯片杂交可用于对PCR检测结果的进一步确认。     

荧光多重PCR对α地中海贫血的基因诊断

目的：建立一种快速、灵敏的α地中海贫血诊断方法。方法：应用荧光引物对正常人和患者进行多重PCR，同时扩增α1和α2珠蛋白基因和内对照β肌动蛋白(α—actin)，用Perkin E1mer ABI PBISM^TM 377 DNA Sequencer自动分析结果，并对所得救据进行统计。用连锁分析的方法PCR扩增同一批模板α2珠蛋白基因上游的(CA)n，跑变性胶并将结果与前一种方法对照。结果：荧光多重PCR自动分析和扩增(CA)n连锁分析得出的结论与实际情况完全相符，结果判断容易。结论：荧光多重PCR法灵敏、简便，单管内就能完成，适合运用于α地中海贫血的快速诊断，并有可能运用于移植前诊断和母体外周血分离胎儿有核红细胞产前诊断。