头孢吡肟在胰腺组织及胰液中的浓度测定及其临床意义

目的探讨头孢吡肟在胰腺外科中预防和治疗感染的效果。方法收集从2004年10月至2005年2月各类胰腺疾病手术患者20例,在静脉应用头孢吡肟后,测定血清、胰腺组织和胰液中头孢吡肟浓度。结果头孢吡肟在血清中的平均浓度为(2.23±0.24)μg/ml(0.23~4.66μg/ml),胰液中的平均浓度为(6.52±2.07)μg/ml,胰腺组织中的平均浓度为(10.93±1.52)μg/g;头孢吡肟在胰液中的浓度要高于血清中浓度(6.52μg/ml vs 2.23μg/ml,P=0.046)。头孢吡肟在各种胰腺疾病之间的血清中浓度无差异(P>0.05),但在慢性胰腺炎患者中头孢吡肟在胰液和胰腺组织中的浓度要大于其他疾病患者(P<0.05)。结论头孢吡肟能有效地通过血胰屏障,对于胰腺疾病和胰腺手术患者可起到良好的预防和治疗感染效果。     

不同浓度rhBMP-2对MC3T3-E1细胞增殖、ALP活性及成骨分化的影响

目的研究不同浓度rh BMP-2对MC3T3-E1细胞增殖、ALP活性及成骨分化的影响规律。方法 MC3T3-E1细胞接种到培养板24 h后,试验组分别加入1.25、2.5、5、10μg/ml的rh BMP-2进行药物干预,对照组加入全培。试验组应用CCK-8法检测细胞增殖活性,PNPP法检测细胞ALP活性,RT-PCR法检测成骨标志蛋白m RNA的表达情况。结果rh BMP-2浓度为2.5μg/ml时开始促进细胞的增殖(P0.05),rh BMP-2浓度为5μg/ml时促进作用达到峰值(P0.05)。rh BMP-2浓度为2.5μg/ml时ALP活性显著提高(P0.05);rh BMP-2浓度为5μg/ml和10μg/ml时,ALP活性较浓度为2.5μg/ml时继续升高,但差异无统计学意义(P0.05)。ALP、COL1-α以及转录因子RUNX-2的m RNA含量均在加入浓度5μg/ml rh BMP-2后明显升高(P0.05),继续加大rh BMP-2浓度,m RNA含量没有明显增加。结论在研究范围内,rh BMP-2对MC3T3-E1的影响呈浓度依赖性。     

甲基强的松龙对体外培养许旺氏细胞的作用

目的探讨甲基强的松龙(MP)对体外培养许旺氏细胞的作用.方法取成年SD大鼠坐骨神经以植块法分离纯化许旺氏细胞,将纯化后的细胞培养2周后分为5组移入96孔板,A、B、C组为MP组(按加入药物浓度不同分组20μg/ml,2μg/ml,0.2μg/ml),D组为神经生长因子(NGF)组(药物浓度0.1μg/ml),E组为对照组.继续培养9d后倒置显微镜下观察细胞生长情况并以MTT法测定各组许旺氏细胞的存活与增殖能力.结果倒置显微镜下观察小剂量MP组及NGF组细胞生长优于其他各组.570nm波长分光光度计测定A值,小剂量(0.2μg/ml)MP组为0.376±0.079,中剂量(2μg/ml)MP组0.286±0.116,大剂量(20μg/ml)MP组0.280±0.086,NGF组0.320±0.121,对照组0.252±0.115,小剂量MP组明显优于大剂量MP组(P＜0.05),同时优于对照组(P＜0.05),余各组间均无明显统计学差异.结论小剂量MP能够促进体外培养许旺氏细胞增殖,从而促进周围神经损伤的修复,细胞培养用药浓度为0.2μg/ml.MP浓度过大(相当于临床冲击剂量的血峰浓度)将抑制细胞增殖.     

自噬在脂质诱导的肾小管上皮细胞损伤中脂质聚集中的作用

目的初步探讨自噬在脂质诱导的肾小管上皮细胞损伤中脂质聚集中的作用。方法将HK-2细胞培养后,分为4组:0μg/ml组(A组)、20μg/ml组(B组)、50μg/ml组(C组)、100μg/ml组(D组)。分别用0μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)刺激肾小管上皮细胞24 h,用油红O法检测细胞内中性脂质,通过透射电子显微镜下观察自噬体形成,荧光显微镜下观察LC3-GFP融合蛋白示踪自噬形成,Wester blotting检测LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ蛋白。结果①油红O显示在0~100μg/ml浓度范围内LDL随浓度增高刺激细胞内脂质增多;②电镜显示正常HK-2细胞内可见少许自噬泡,在0~50μg/ml浓度范围内随LDL刺激浓度增加,细胞内自噬泡逐渐增多,但达到一定浓度(即100μg/ml)后自噬泡急剧减少;③正常HK-2细胞内可见少许LC3-GFP染色阳性,在0~50μg/ml浓度范围内随LDL刺激浓度增加,细胞内LC3-GFP染色阳性逐渐增多,但达到一定浓度即100μg/ml后LC3-GFP染色阳性急剧减少;④正常HK-2细胞内存在少量的LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ,但以LC3-Ⅰ为主,在0~50μg/ml浓度范围内随LDL刺激浓度增加,LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ均增加,但LC3-Ⅱ增加更明显,50μg/ml LDL组LC3-Ⅰ是0μg/ml LDL组的2倍,LC3-Ⅱ表达是0μg/ml的3倍,差异有统计学意义(均P0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值逐渐增高,分别为0.41,0.82,1.23,差异有统计学意义(均P0.05),但LDL达到100μg/ml后LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ均急剧减少,100μg/ml LDL组LC3-Ⅰ降至与0μg/ml组LDL相同(P0.05),LC3-Ⅱ表达降至为0μg/ml LDL组的1.5倍,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值也急剧下降至0.52,差异有统计学意义(均P0.05)。结论肾小管上皮细胞内自噬与脂质有一定关系,自噬可能参与脂质诱导的肾小管上皮细胞内脂质聚集。     

瑞芬太尼对丙泊酚靶控输注患者意识消失及诱发脑电爆发抑制时的半数有效浓度的影响

目的探讨丙泊酚TCI时患者意识消失(LOC)及诱发脑电爆发抑制(BS)时的效应室半数有效浓度(EC50)的影响。方法择期全麻手术患者60例,随机均分为瑞芬太尼组(R组)和生理盐水组(N组)。R组:以4ng/ml靶浓度TCI瑞芬太尼10 min后开始TCI丙泊酚,靶浓度从1μg/ml开始递增,递增梯度为1μg/ml,每一靶浓度输注1min,至脑电监测爆发抑制比(BSR)达到15%后结束试验;N组:以等量生理盐水模拟瑞芬太尼TCI,其余方法与R组相同,期间所有患者每间隔20秒行改良OAA/S评分,改良OAA/S评分2分定义为LOC,BSR15%定义为出现BS现象。记录LOC和BSR达15%时的丙泊酚EC50及其95%可信区间(CI)。结果 LOC时R组丙泊酚效应室EC50为1.73μg/ml(95%CI 1.68~1.79μg/ml),N组为2.35μg/ml(95%CI 2.29~2.41μg/ml)(P0.05)。BSR达15%时R组和N组丙泊酚EC50分别为6.25μg/ml(95%CI 6.18~6.42μg/ml)和6.31μg/ml(95%CI 6.13~6.47μg/ml),两组差异无统计学意义。结论复合TCI瑞芬太尼可降低丙泊酚TCI意识消失时的效应室EC50,但对出现脑电爆发抑制时的丙泊酚效应室浓度无明显影响。     

红景天苷对缺氧肾小管上皮细胞Toll受体2、IL-6表达及其凋亡的影响

目的:观察红景天苷(salidroside Sal.)对氯化钴(cobaltous chloride,Co Cl2·6H2O)诱导的缺氧人肾小管上皮细胞(human kidney tubular epithelia cell,HKC)Toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR-2)表达、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的分泌及细胞凋亡的影响。方法:HKC细胞置于六孔板培养,随机分为正常对照组、缺氧模型组、红景天苷(salidroside Sal.)干预组(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)。其中缺氧模型采用300μmol/L氯化钴处理6 h得到,红景天苷干预组在此模型基础上再用不同浓度的红景天苷处理缺氧细胞24 h。RT-PCR和Western blot检测TLR-2的表达,ELISA检测各组细胞上清中IL-6含量,流式细胞仪检测缺氧HKC凋亡情况。结果:氯化钴诱导HKC TLR-2蛋白(P<0.05)及RNA表达上调(P<0.01)、IL-6分泌增加(P<0.01)及细胞凋亡增加(P<0.01)。25μg/ml和50μg/ml的红景天苷能降低缺氧HKC细胞IL-6的水平(P<0.01),50μg/ml红景天苷抑制作用强于25μg/ml(P<0.05)。与缺氧模型组比较,尽管100μg/ml红景天苷能降低缺氧HKC细胞IL-6的绝对值水平,但差异无统计学意义(P>0.05)。25μg/ml,50μg/ml和100μg/ml红景天苷均能抑制TLR-2蛋白表达(P<0.01),且100μg/ml较25μg/ml红景天苷抑制作用显著(P<0.05),但25μg/ml与50μg/ml、50μg/ml与100μg/ml红景天苷比较,它们抑制作用的强弱差异无统计学意义(P>0.05)。三种浓度的红景天苷也能抑制缺氧HKC TLR-2的RNA表达(P<0.01),50μg/ml及100μg/ml红景天苷抑制作用强于25μg/ml红景天苷(P<0.05),但50μg/ml与100μg/ml红景天苷比较,二者抑制作用差异无统计学意义(P>0.05)。50μg/ml和100μg/ml红景天苷能抑制缺氧HKC凋亡(P<0.01),但25μg/ml红景天苷未表现出抑制凋亡的作用(P>0.05),50μg/ml与100μg/ml红景天苷比较,两者抑制凋亡的作用差异无统计学意义(P>0.05)。结论:红景天苷对缺氧HKC的TLR-2蛋白及RNA表达、IL-6的分泌及细胞凋亡均有抑制作用,但其抑制效应呈现非剂量依赖性。     

超氧对主动脉夹层患者围术期红细胞氧化应激以及能量代谢影响的体外实验研究

目的观察不同浓度超氧对主动脉夹层(aortic dissection,AD)患者围术期体外血液样本中红细胞氧化应激以及能量代谢的影响,为临床应用超氧自体血疗法(ozonated autohemotherapy,ozone-AHT)提供实验基础。方法收集哈尔滨医科大学附属第一医院2016年3～8月20例AD患者[男16例、女4例,平均年龄(48.51±10.21)岁]手术前后的血液标本进行不同浓度(0μg/ml,40μg/ml,60μg/ml,80μg/ml,160μg/ml)的超氧(ozone)预处理。酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)测定氧化/抗氧化指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]以及能量代谢指标[Na~+-K~+-ATP、 2,3二磷酸甘油酸(2,3-DPG)]。结果在对照组(0μg/ml)中,术后MDA含量比术前含量显著增加(P0.05),术后SOD、Na~+-K~+-ATP、2,3-DPG较术前组显著减少(P0.05)。40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml组术后MDA含量比术前组增加(P0.05),SOD、Na~+-K~+-ATP、2,3-DPG较术前组减少(P0.05);术前三个浓度组组间(40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml)与术后三个浓度组组间(40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml)MDA、SOD、Na~+-K~+-ATP、2,3-DPG数值变化差异无统计学意义(P0.05);160μg/ml浓度组与其它所有浓度组相比,术前、术后MDA含量均增加,术前、术后SOD、Na~+-K~+-ATP、2,3-DPG均减少,差异有统计学意义(P0.05)。结论 40～80μg/ml的ozone可以提高AD患者血液样本中红细胞膜抗氧化能力、降低氧化应激反应、提高红细胞膜的能量代谢,因此该浓度范围的ozone应用于AD围术期ozone-AHT是安全可行的。     

靶控输注丙泊酚用于肥胖患者结肠镜检查时的半数有效血浆靶浓度

目的测定肥胖患者结肠镜检查时复合芬太尼麻醉下TCI丙泊酚的半数有效血浆靶浓度(Cp50)。方法选择需行结肠镜检查患者,男27例,女28例,18.5kg/m2≤BMI24.0kg/m2为正常体重组(N组);BMI≥28.0kg/m2为肥胖组(O组)。两组患者的初始血浆靶浓度均设为3.0μg/ml。入选样本从有体动的上一例患者开始计算,其后各例患者血浆靶浓度根据手术过程中有无体动进行调整,浓度变化间隔为0.5μg/ml,按序贯法进行研究,计算丙泊酚的Cp50及其95%可信区间(CI)。结果复合芬太尼1.0μg/kg时,N组丙泊酚的Cp50及95%CI为2.95(2.68~3.24)μg/ml;O组为2.83(2.62~3.05)μg/ml。结论 TCI丙泊酚复合1.0μg/kg芬太尼用于肥胖患者结肠镜检查时的Cp50为2.83μg/ml,肥胖患者TCI丙泊酚意识消失时的Cp50降低。     

普萘洛尔对血管瘤内皮细胞的抑制作用

目的:探讨不同浓度普萘洛尔在不同时间段内对血管瘤内皮细胞的抑制作用。方法:收集手术切除的新鲜婴幼儿血管瘤标本,采用组织块法培养内皮细胞,免疫荧光法对培养的细胞进行鉴定;通过绘制生长曲线和流式细胞仪检测普萘洛尔(propranolol)对血管瘤内皮细胞增殖影响。结果:伴随普诺洛尔浓度增大(0μg/ml,20μg/ml,40μg/ml,60μg/ml,80μg/ml,100μg/ml,120μg/ml)及作用时间的增加(24h,48h,72h)对血管瘤内皮细胞的抑制作用明显增强;流式细胞仪测定不同浓度普萘洛尔作用不同时段后血管瘤内皮细胞凋亡明显。结论:普萘洛尔能抑制血管瘤内皮细胞的增殖并促进其凋亡,抑制血管瘤的生长。     

微丝聚合剂重构大鼠脊髓星形胶质细胞骨架对水通道蛋白4与K+通道蛋白4.1基因表达的影响

【摘要】 目的：探讨不同浓度微丝聚合剂（Jasplakinolide,JSK）对大鼠脊髓星形胶质细胞水通道蛋白4（aquapor?鄄ins-4,AQP4）和K+通道蛋白4.1（potassium ion channel protein-4.1,Kir4.1）基因表达的影响。方法：分离培养原代大鼠脊髓星形胶质细胞并鉴定,采用浓度为0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml、0.40μg/ml的JSK干预细胞2h。噻唑蓝比色法（3-4,5-Dimethylthiazol-2-yl-25-diphenyltetrazolium brom,MTT）检测细胞的增殖情况,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架的变化和Real-time PCR法检测AQP4和Kir4.1 mRNA表达的变化。结果：0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml和0.40μg/ml浓度的JSK在干预细胞2h时与空白对照组相比对细胞的增殖无明显差异（P＞0.05）,各浓度间相比无统计学意义。激光共聚焦显微镜观察0.05μg/ml、0.10μg/ml和0.20μg/ml 浓度的JSK可以使得微丝空间结构发生重构,而0.40μg/ml浓度则使细胞微丝发生破坏。Real-time PCR检测显示,0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml和0.40μg/ml浓度的JSK均能显著降低AQP4和Kir4.1基因的表达,并与对照组相比有统计学意义（P＜0.05）,且0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml和0.40μg/ml浓度间相比也有统计学意义。结论：0.05μg/ml、0.10μg/ml和0.20μg/ml浓度的JSK可使大鼠脊髓星形胶质细胞微丝发生重构且可以下调AQP4和Kir4.1基因的表达。     

利福布汀对非结核分枝杆菌抗菌活性的初步探讨

目的观察利福布汀对非结核分枝杆菌的抗菌活性,探讨利福布汀对常见致病性非结核分枝杆菌的实验室耐药临界浓度,为临床合理应用利福布汀治疗非结核分枝杆菌病提供依据。方法采用液体培养基倍比稀释法检测利福布汀和利福平对50株非结核分枝杆菌（NTM）的最低抑菌浓度（MIC）。结果 （1）对34株鸟分枝杆菌复合群的MIC：76.5%（26/34）菌株的利福平MIC≥1μg/ml,而利福布汀MIC有85.3%（29/34）分布在0.125~2μg/ml,其中在0.125~1μg/ml的有25株;（2）6株偶然分枝杆菌的MIC：利福平的MIC多〉8μg/ml,而利福布汀的MIC为1~8μg/ml;（3）5株脓肿分枝杆菌的MIC：利福平的MIC〉64μg/ml,利福布汀的MIC为2~32μg/ml;（4）其他非结核分枝杆菌：利福平和利福布汀对蟾蜍分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、瘰疠分枝杆菌、不产色分枝杆菌的MIC分别为〉64μg/mlvs1μg/ml、2μg/mlvs0.25μg/ml、8μg/mlvs1μg/ml、4μg/mlvs1μg/ml、4μg/mlvs1μg/ml。结论初步得出利福布汀对常见致病性非结核分枝杆菌的实验室耐药临界浓度为4~8μg/ml。利福布汀对鸟分枝杆菌复合群、勘萨斯分枝杆菌的抗菌活性优于利福平;蟾蜍分枝杆菌、戈登分枝杆菌、瘰疠分枝杆菌、不产色分枝杆菌对利福平体外MIC值达到临床耐药浓度时,利福布汀对其仍有体外抗菌活性。     

普罗布考抑制氧化低密度脂蛋白诱导的人肾近曲小管上皮细胞转分化的作用及机制研究

目的研究普罗布考对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2转分化的保护作用,并探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)及氧化应激在其中的作用和相互关系。方法采用不同浓度Ox-LDL(0~100μg/ml)孵育HK-2细胞,并予普罗布考(20μmol/L)和LOX-1抑制剂多聚肌苷酸(250μg/ml)干预。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞增殖情况,用DCFH-DA法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性,生化比色法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度,Western blot检测E-钙粘素(cadherin)、α平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、LOX-1、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide 2-phosphate reduced tetrasodium salt,NADPH)氧化酶4(NOX4)表达。结果 12.5~200μg/ml浓度范围内的Ox-LDL对HK-2细胞的增殖无明显影响,25~100μg/ml的Ox-LDL以浓度依赖方式促进HK-2细胞LOX-1、α-SMA蛋白表达上升,E-cadherin下降。而多聚肌苷酸、普罗布考能使LOX-1、α-SMA蛋白表达抑制,E-cadherin表达上调。50μg/ml的Ox-LDL能促进NOX4表达上调,ROS活性增加(451.5μg/ml比839.8μg/ml,P0.05),NO含量略增加(46.0μmol/L比46.2μmol/L),但无统计学意义(P0.05)。而多聚肌苷酸、普罗布考能使NOX4表达下调,ROS活性下降,但对NO浓度无明显影响。结论Ox-LDL可诱导HK-2细胞转分化,其机制可能与其结合LOX-1促进氧化应激有关,而普罗布考可以通过降低LOX-1,抑制氧化应激损伤,从而延缓HK-2细胞转分化的进程。     

Galectin-3对外周血内皮祖细胞源性血管内皮细胞增殖能力的影响

目的观察重组人半乳糖凝集素-3(Galectin-3)对外周血内皮祖细胞源性血管内皮细胞增殖能力的影响。方法提取人外周血内皮祖细胞,将其定向诱导为成熟血管内皮细胞,加入不同终浓度的Galectin-3进行培养,观察不同浓度Galectin-3对外周血内皮祖细胞源性内皮细胞增殖能力的影响。结果 0.1、1.0、2.5、5.0和10.0μg/ml浓度组外周血内皮祖细胞源性内皮细胞的增殖能力均高于0μg/ml组,其中0.1,1.0及2.5μg/ml浓度组与0μg/ml组比较差异无统计学意义(P>0.05),而5.0及10.0μg/ml组细胞增殖能力明显高于0、0.1、1.0及2.5μg/ml组,差异有统计学意义(P<0.05),10.0μg/ml浓度组细胞增殖能力又明显高于5.0μg/ml浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Galectin-3可促进体外培养的外周血内皮祖细胞源性血管内皮细胞的增殖能力。     

术前输注头孢呋辛钠后不同靶控浓度丙泊酚对妇科手术患者心室复极的影响

目的观察术前预防性输注头孢呋辛钠后不同靶控浓度丙泊酚对妇科手术患者心室复极的影响。方法选择择期妇科手术患者59例,年龄18~65岁,ASAⅠ或Ⅱ级,采用随机数字表法分为三组。入室补液并静滴头孢呋辛钠2.5g(溶于100ml生理盐水中)后,分别泵注丙泊酚血浆靶控浓度为2μg/ml(P2组,n=20)、3μg/ml(P3组,n=19)、4μg/ml(P4组,n=20)。分别在抗生素输注前(T_0)、抗生素输注完毕(T_1)、及丙泊酚达到靶控浓度时(T_2),测量并计算QT间期、QTc间期、T波峰值至终点时间(T_p-e间期)及Tp-e/QT。结果与T0时比较,T_1时P4组QTc间期[(469.9±34.0)ms vs.(451.2±24.9)ms]、Tp-e间期[(107±25)ms vs.(94±20)ms]、Tp-e/QT(0.260±0.058vs.0.236±0.043)明显延长(P0.05);与T_1时比较,T_2时P2组[(437.4±24.4)ms vs.(453.3±28.0)ms]和P4组[(438.8±29.9)ms vs.(469.9±34.0)ms]QTc间期明显缩短(P0.05)。结论丙泊酚可改善头孢呋辛钠引起的心室复极不均一性。     

葡萄籽多酚体外逆转胆囊癌细胞株GBC-SD多药耐药作用的研究

目的:研究葡萄籽多酚(GSP)逆转胆囊癌先天性耐药细胞株GBC-SD耐药的作用,寻找高效低毒的耐药逆转剂。方法:选择GBC-SD为研究对象,MTT比色法测定各化疗药物的半数抑制浓度(IC50),RT-PCR测定MDR1mRNA的变化,流式细胞仪检测P-gp蛋白和细胞内阿霉素浓度的变化。结果:①无毒(3μg/ml)和低毒(6μg/ml)剂量浓度的GSP处理后各化疗药物的IC50值均明显降低(P〈0.05),能明显逆转GBC-SD的多药耐药性;②无毒(3μg/ml)和低毒(6μg/ml)剂量浓度的GSP能下调GBC-SD细胞MDR1mRNA表达(P〈0.05);③无毒(3μg/ml)和低毒(6μg/ml)剂量浓度的GSP能下调GBC-SD细胞P-gp蛋白表达(P〈0.05);④GSP增加GBC-SD细胞内ADM药物浓度(P〈0.05)。结论:GSP能部分逆转先天性耐药细胞株GBC-SD多药耐药性,作用机制为下调GBC-SD细胞MDR1mRNA及P-gp蛋白表达。     

靶控输注丙泊酚和雷米芬太尼在意识消失和对疼痛刺激反应时的相互关系

目的探讨靶控输注(TCI)丙泊酚和雷米芬太尼的相互关系及对脑电双频指数(BIS)的影响。方法全身麻醉患者100例,根据丙泊酚不同血浆靶浓度随机均分为五组:P1.5组,1.5μg/ml;P2组,2μg/ml;P2.5组,2.5μg/ml;P3组,3μg/ml;P3.5组,3.5μg/ml。待血浆浓度和效应室浓度达到平衡后TCI雷米芬太尼,以血浆浓度0ng/ml为起点,每30秒增加0.3ng/ml,直至患者意识消失及对疼痛刺激(50Hz,80mA,0.25ms强直刺激)无体动反应。记录患者在不同丙泊酚血药浓度下意识消失时和对疼痛刺激无反应时雷米芬太尼的血浆浓度(Cp)和效应室浓度(EC)。结果意识消失时雷米芬太尼Cp50从P1.5组至P3.5组分别为5.0、3.0、2.1、1.2、0ng/ml;疼痛刺激无反应时雷米芬太尼Cp50从P1.5组至P3.5组分别为5.4、4.3、3.9、3.5、3.0ng/ml;疼痛刺激无反应时与意识消失时BIS值的差异无统计学意义。结论BIS值变化与丙泊酚血药浓度呈反比关系,雷米芬太尼对BIS值影响不大。BIS值50～60可以作为丙泊酚和雷米芬太尼静脉复合麻醉时监测意识消失的良好指标。     

靶控输注异丙酚意识消失时血浆和效应室浓度的EC50与脑电双频谱指数的关系多中心大样本临床研究

目的 研究择期手术患者靶控输注（TCI）异丙酚意识消失时血浆、效应室靶浓度的50%患者意识消失时的药物浓度（EC50）与脑电双频谱指数（BIS）的关系。方法 5家医疗中心405例择期手术患者（国人）,ASAⅠ或Ⅱ级。靶控输注异丙酚,以血浆靶浓度1．2μg/ml为起点,到达预期血浆靶浓度后每30秒递增0．3μg/ml,直至患者意识消失。采用概率单位回归分析计算患者意识消失时异丙酚血浆靶浓度、效应室靶浓度的EC05、EC50和EC95及其所对应的BIS。结果 择期手术患者TCI异丙酚意识消失时异丙酚血浆靶浓度EC05、EC50和EC95分别是2．9μg/ml、3．8μg/ml和4．8μg/ml,效应室靶浓度EC05、EC50和EC95分别是1．3μg/ml、2．2μg/ml和3．2μg/ml,50%患者意识消失的BIS是58,5%和95%患者意识消失的BIS分别是77和40。结论 择期手术患者TCI异丙酚意识消失时血浆靶浓度和效应室靶浓度EC50及95%置信区间分别是3．8μg/ml（3．8～3．9μg/ml）和2．2μg/ml（2．2～2．3μg/ml）, 50%患者意识消失的BIS用95%置信区间是58（58～59）。     

丹参酮ⅡA对软骨细胞去分化影响的研究

目的研究丹参酮ⅡA在大鼠膝软骨细胞体外培养中对软骨细胞去分化的影响。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法获取2周龄SD大鼠膝关节原代软骨细胞,体外培养传代至P4进行实验。对照组用含10%小牛血清高糖DMEM培养(基础培养液)。实验组有3个浓度:100μg/ml组用基础培养液+100μg/ml丹参酮ⅡA培养,200μg/ml组用基础培养液+200μg/ml丹参酮ⅡA培养,400μg/ml组用基础培养液+400μg/ml丹参酮ⅡA培养。培养72 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增值情况,光学显微镜观察软骨细胞形态,阿利新蓝染色观察糖胺聚糖(GAG)含量,实时荧光定量PCR检测Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅹ型胶原表达情况。结果 400μg/ml组肉眼可见的细胞密度低于其他各组,且阿利新蓝染色最浅。培养24 h、48 h、72 h,100μg/ml组、200μg/ml组的OD值均大于对照组,而400μg/ml组OD值均小于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。实验组的Ⅰ型、Ⅹ型胶原m RNA含量明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。400μg/ml组Ⅱ型胶原m RNA含量低于对照组,100μg/ml组、200μg/ml组Ⅱ型胶原m RNA含量高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);但100μg/ml组、200μg/ml组差异无统计学意义(P0.05)。结论不同浓度的丹参酮ⅡA对去分化软骨细胞作用有所区别,100μg/ml、200μg/ml时促进软骨细胞增殖,抑制去分化进程;400μg/ml时抑制软骨生长活性,细胞基质分泌减少。     

复合不同靶浓度异丙酚时瑞芬太尼引起神经外科手术病人呼吸抑制的效应室浓度

目的 确定复合不同靶浓度异丙酚时瑞芬太尼引起神经外科手术病人呼吸抑制的效应室浓度.方法 择期拟行神经外科手术的病人80例,年龄18～64岁,体重45～90 kg,随机分为4组(n=20):瑞芬太尼组(R组)、瑞芬太尼复合异丙酚1μg/ml(RP_1组)、瑞芬太尼复合异丙酚1.5 μg/ml(RP_(1.5)组)和瑞芬太尼复合异丙酚2 μg/ml(RP_2组)组.R组、RP_1组、RP_(1.5)组和RP_2组靶控输注异丙酚,血浆靶浓度分别为0、1、1.5、2μg/ml,达到预设的浓度后,靶控输注瑞芬太尼,初始血浆靶浓度为2 μg/ml,随后每3 min增加瑞芬太尼血浆靶浓度2 μg/ml,直至发生呼吸抑制.记录呼吸抑制时瑞芬太尼效应室浓度、瑞芬太尼用量和其他不良反应发生情况.结果 R组、RP1组、RP1.5组和RP_2组呼吸抑制时瑞芬太尼效应室浓度分别为(5.2±2.1)、(3.2±1.0)、(2.9±1.3)和(2.2±1.0)μg/ml.与R组比较,RP_1组、RP_(1.5)组和RP_2组呼吸抑制时瑞芬太尼效应室浓度降低(P<0.01);与RP1组和RP1.5组比较,RP2组呼吸抑制时瑞芬太尼效应室浓度降低(P<0.01);RP1组和RP1.5组呼吸抑制时瑞芬太尼效应室浓度比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 神经外科手术病人清醒状态下瑞芬太尼效应室浓度为(5.2±2.1)ng/ml时可发生呼吸抑制;复合血浆靶浓度1、1.5、2 μg/ml异丙酚镇静时,瑞芬太尼引起呼吸抑制的效应室浓度分别降至(3.2±1.0)、(2.9±1.3)和(2.2±1.0)ng/ml.     

丙泊酚诱导时雷米芬太尼对老年患者意识消失的影响

目的研究靶控输注丙泊酚麻醉诱导时雷米芬太尼对老年人意识消失的影响。方法30名老年患者,随机分两组靶控输注雷米芬太尼4ng/ml组(R组)和生理盐水对照组(C组)。10min后同时靶控输注丙泊酚,效应浓度逐步上升(1,2,4μg/ml)。记录BIS、OAA/S、血液动力学变化、丙泊酚效应浓度及用量。结果OAA/S1分时,R组BIS值为62±18,C组为61±11。R组丙泊酚效应浓度为(1·1±0·4)μg/ml,C组为(2·0±0·4)μg/ml(P<0·05)。R组丙泊酚用量为(63±24)mg,C组为(141±34)mg(P<0·01)。结论雷米芬太尼能协同丙泊酚加强对老年人意识消失的作用。