乳腺癌基质金属蛋白酶-9及前哨淋巴结CKl9 mRNA表达的相关性

目的研究乳腺癌组织中基质金属蛋白酶(matrix metallo-proteinases-9,MMP-9)基因表达与乳腺癌前哨淋巴结(SLN)微转移分子CK19 mRNA检测的关系,揭示乳腺癌的浸润和转移机制.方法应用S-P免疫组化法检测76例乳腺浸润癌组织和20例乳腺非恶性肿瘤组织中MMP-9的表达情况采用原位杂交技术检测同组76例乳腺浸润癌SLN微转移分子CK19 mRNA的表达,同时与常规病检法比较其检测敏感性,并比较淋巴结转移组、微转移组、无转移组患者的临床资料.结果76例乳腺浸润癌中,常规病检无淋巴结转移36例,淋巴结转移40例.MMP-9在淋巴结转移组和无淋巴结转移组原发灶阳性表达的平均秩次为45.95、30.19,转移组明显高于无转移组.两者差异具有显著性(P＜0.05).原位杂交法检出36例阴性淋巴结中9例有CK19 mRNA表达.原位杂交法与常规病检法转移的检出率比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论淋巴结的转移与MMP-9的表达具有相关性.检测MMP-9蛋白表达将有助于判断乳腺癌的转移及预后.应用原位杂交法可明显提高乳腺癌的检出率.     

乳腺癌前哨淋巴结中细胞角蛋白19的表达及临床意义

目的 检测乳腺癌前哨淋巴结(SIN)组织中细胞角蛋白19(CK19)在mRNA和蛋白水平的表达情况,以探讨检测淋巴结CK19的表达对预测乳腺癌前哨淋巴结微转移的临床价值.方法 本组30例可手术的原发性乳腺癌患者,手术中均行肿块周围或乳晕周围注射亚甲蓝进行SLN定位成功,同时常规行腋窝淋巴结清扫,术后对SLN和非SLN均行常规病理学检测,对SLN同时采用RT-PCR和Western Blot方法检测CK19的表达.结果 30例SLN常规病理检测发现8例阳性SLN,阳性率为26.67%(8/30),1例假阴性.应用RT-PCR方法和Western Blot方法检测30例SLN中CK19的表达,结果HE染色阳性的8例SLN及1例假阴性SLN均呈阳性表达,共有12例SLN CK19mRNA表达阳性,阳性率为40.0%(12/30);Western Blot检测发现1I例SLN CK19呈阳性,阳性率为36.67%(11/30).RT-PCR、Western Blot检测结果分别与HE染色结果比较,差异均有统计学意义(P<0.05),假阴性率为0.结论 CK19mRNA可作为标志物来检测乳腺癌SLN中的微转移情况;RT-PCR方法可检测到SLN微转移灶,通过SLN定位后检测其中CK19mRNA的阳性表达,可明显提高乳腺癌SLN的阳性率,降低SLN单纯病理检测的假阴性率.     

CK-19 mRNA表达水平在乳腺癌微转移检测及治疗监测中的应用

目的探讨细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达水平在乳腺癌微转移检测及治疗监测中的应用。方法采用荧光定量PCR(FQ-PCR)和RT-PCR检测45例健康女性、40例良性乳腺肿瘤和86例乳腺癌患者外周血中CK19mRNA水平并进行对比分析。结果CK19mRNA在乳腺癌组表达高于良性乳腺疾病组(P<0.01),乳腺癌淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.01)。FQ-PCR对乳腺癌诊断的灵敏度和特异性均显著高于RT-PCR法。结论FQ-PCR检测CK19对乳腺癌诊断灵敏度和特异性较高,可有效监测乳腺癌微转移和疗效。     

乳腺癌中血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9的表达与淋巴结转移的关系

目的 检测血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在乳腺癌中的表达情况,研究两者与淋巴结转移的关系.方法 采用免疫组化SP法检测92例乳腺浸润癌中VEGF、MMP-9的表达情况.结果 VEGF蛋白在对照组和乳腺癌组中的阳性表达率分别为5.7％ (3/45)和90.2％(83/92),且VEGF在淋巴结转移组中的阳性表达率(53/55)明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05).MMP-9蛋白在正常乳腺组织及乳腺癌中的阳性表达率分别为0(0/45)和92.4％ (85/92),而且MMP-9在淋巴结转移组中的阳性表达率(54/55)明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05).结论 VEGF、MMP-9蛋白在乳腺癌组织中高表达,且均与淋巴结转移有关(P＜0.05),两者可能在乳腺癌的远处转移中起协同作用.     

乳腺浸润性癌中MMP-9和CD44v6的表达及其与淋巴结转移的关系

目的检测MMP-9、CD44v6在乳腺浸润性癌中的表达情况,研究两者与淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测92例乳腺浸润性癌中MMP-9、CD44v6的表达情况。结果 MMP-9蛋白在正常乳腺组织及乳腺癌中的阳性表达率分别为0(0/45)和92.4%(85/92),而且MMP-9在淋巴结转移组中的阳性表达率(54/55)明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。CD44v6蛋白在正常乳腺组织及乳腺癌中的阳性表达率分别为8.9%(4/45)和85.9%(79/92),而且CD44v6在淋巴结转移组中的阳性表达率(51/55)明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论 MMP-9、CD44v6蛋白在乳腺癌组织中高表达,且均与淋巴结转移有关(P<0.05),检测MMP-9、CD44v6有助于判断乳腺癌的恶性程度和转移情况。     

淋巴结K19 mRNA检测在诊断乳腺癌微转移灶中的应用

探讨K19 mRNA表达与乳腺癌病人淋巴结微转移的关系.应用RT-PCR方法检测20例乳腺癌组织及其68枚腋下淋巴结和4份正常乳腺组织、4枚正常淋巴结、5枚良性肿瘤患者腋下淋巴结中K19 mRNA,并与传统病理学检查淋巴结癌转移对照.结果显示:正常乳腺组织及乳腺癌细胞K19 mRNA检测均为阳性,对照正常淋巴结、良性肿瘤患者淋巴结RT-PCR结果阴性;组织病理学检查存在转移的8枚淋巴结其K19 mRNA检测亦阳性,组织病理学检测无转移的60枚淋巴结中有7枚K19 mRNA RT-PCR检测阳性.因此,RT-PCR检测K19 mRNA可更敏感地检出淋巴结中的微转移灶,对乳腺癌转移的诊断有一定的实用价值.     

MMP-9和CD44V6在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-9和CD44V6在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌侵袭,转移的关系。方法采用免疫组化S-P方法对92例乳腺癌(20例导管内癌,72例乳腺浸润癌),20例乳腺增生组织MMP-9,CD44V6进行标记和分析。结果MMP-9和CD44V6在乳腺增生组织中几乎不表达,导管内癌,乳腺浸润癌表达率显著增高,各组间差异有显著性(P<0·05),而且MMP-9与CD44V6过表达与淋巴结转移有关。结论MMP-9和CD44V6的过表达在乳腺癌侵袭和转移中发挥重要,可作为乳腺癌侵袭和转移的重要分子学标志。     

乳腺癌组织中VEGF-C的表达与淋巴结转移及骨髓微转移的相关性的研究

【目的】探讨乳腺癌组织中血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达及其与淋巴结转移和骨髓微转移的关系。【方法】应用免疫组织化学SP法,检测59例乳腺癌组织和10例乳腺良性病变组织中VEGF-C的表达情况;同时抽取相应的骨髓血标本,应用实时定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测标本中细胞角蛋白19（CK19） mRNA 的表达水平,并进行相关性分析。【结果】乳腺癌组织中 VEGF-C 阳性表达率62．71％（37/59）及表达程度均明显高于乳腺良性病变组（0％）,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。乳腺癌淋巴结转移阳性组VEGF-C表达阳性率及表达水平均高于淋巴结转移阴性组（ P ＜0．05）。VEGF-C表达水平与发病年龄、肿瘤大小、病理分型、临床分级、雌激素受体（ER ）水平、孕激素受体（PR ）水平无关,但其表达水平与人类表皮生长因子受体2（HER-2）表达水平显著相关（ P ＜0．05）。CK19 mRNA在乳腺纤维腺瘤患者骨髓标本中未见表达,在乳腺癌患者骨髓血中有34例57．6％（25/59）阳性表达,乳腺癌骨髓微转移阳性组VEGF-C阳性表达率及表达水平均高于骨髓阴性表达组（ P ＜0．05）。骨髓CK19 mRNA表达水平与VEGF-C蛋白表达水平呈正相关（ P ＜0．05）。【结论】乳腺癌患者VEGF-C表达水平与淋巴结转移及骨髓微转移密切相关,提示V EG F-C可能参与了乳腺癌细胞的侵袭和播散。     

以CK20为标志物对乳腺癌微转移检测的研究

目的探讨乳腺癌微转移的标志基因。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法 ,检测了20例乳癌病人正常乳腺组织、癌组织、淋巴结、外周血、10例乳腺纤维瘤,10例非肿瘤病人淋巴结及外周血中细胞角蛋白19（CK19）、角蛋白20（CK20）的表达。结果乳癌组织、正常乳腺组织、转移淋巴结、纤维腺瘤中CK19、CK20均有很高的表达率。CK20在非肿瘤病人淋巴结和外周血中无表达,而CK19有40%表达。结论来源于上皮细胞的良、恶性肿瘤均遗留上皮细胞表达角蛋白的特征;CK20可以作为乳腺癌病人病理检查为非转移淋巴结和外周血中微小转移的标志基因,CK19则不适合。     

基质金属蛋白酶—2与乳腺癌血管生成和肿瘤生物学行为的关系

目的：基质金属蛋白酶能够降解细胞外基质和基底膜，在肿瘤的浸润和转移过程中起重要作用。研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2，MMP-2)及其mRNA在乳腺癌组织和细胞中的表达，探讨其与血管生成及肿瘤生物学行为的关系。方法：实验于2002—01／2004—01在吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室完成。应用免疫组织化学、免疫细胞化学、原位杂交、侵袭实验、明胶酶谱分析及形态定量分析方法，对76例乳腺癌组织和体外培养的：MCF-7细胞中MMP-2及其mRNA、微血管密度(MVD)进行检测。结果：乳腺癌组织中：MMP-2及其mRNA的表达均高于癌旁正常组织；MMP-2及其mRNA主要表达于肿瘤细胞胞浆中，其阳性率分别为77．63％和71．05％；MMP-2及其mRNA的表达均与乳腺癌组织学分级、淋巴结转移密切相关。MVD与乳腺癌组织学分级、淋巴结转移密切相关。MMP-2或其mRNA表达阳性组MVD值明显高于阴性组。MCF-7细胞中MMP-2及其mRNA均为阳性；MMP-2抗体可使MCF-7细胞侵袭细胞数由(56.21&;#177;3．68)个／400倍下降为(20．32&;#177;3．24)个／400倍；直接培养于培养瓶的MCF-7细胞可以分泌MMP-2酶原，培养于Ⅰ型胶原包被培养瓶的MCF-7细胞MMP-2酶原表达增强并且出现活化形式。结论：乳腺癌组织和细胞具有较强的分泌MMP-2的能力，MMP-2促进肿瘤的侵袭和转移，促进乳腺癌血管生成，可作为判定乳腺癌生物学行为、临床治疗和预后的重要指标。     

MMP2、MMP9在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的　探讨基质金属蛋白酶MMP 2和MMP 9在乳腺癌中表达与淋巴结转移和预后的关系。方法　应用免疫组化S P方法检测 34例乳腺癌组织和 12例乳腺良性病变组织中MMP 2和MMP 9表达与乳腺癌的浸润及转移的关系。结果　①在 34例乳腺癌组织中 ,MMP 2和MMP 9阳性表达率分别为 5 5 9% (19/ 34)和 5 8 8% (2 0 / 34) ,明显高于乳腺良性病变 (P <0 0 1)。②淋巴结转移组MMP 2和MMP 9的阳性表达明显高于无淋巴结转移组 (P <0 0 1)。结论　乳腺癌中MMP 2和MMP 9的表达显著高于乳腺良性病变 ;MMP 2和MMP 9的表达与乳腺癌淋巴结转移密切相关 ,可作为判断乳腺癌转移和预后的指标     

CK19 CK20和MMP-9mRNA外周血表达与中晚期肺癌临床相关性

目的：检测肺癌外周血中细胞角蛋白19（CK19）mRNA、细胞角蛋白20（CK20）mRNA和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA,探讨其作为判断晚期肺癌外周血检测其转移及判断预后的指标可行性。方法采用RT-PCR技术检测肺癌患者外周血中CK19mRNA、CK20mRNA、MMP-9mRNA的表达量,按表达阴阳性作为标准对其临床资料及短期疗效进行评估。结果 CK19、MMP-9及CK20表达阳性率化疗3疗程后均下降,其中CK19、MMP-9差异有统计学意义（P值0.003、0.007）;CK19mRNA、CK20mRNA和MMP-9mRNA表达阳性率化疗前后与性别,分化等均无相关性（P＆gt;0.05）;其中化疗前CK19mRNA表达Ⅳ期阳性率高于Ⅲ期患者（P=0.01）;腺癌患者CK19mRNA与MMP-9mRNA表达,化疗前表达阳性率明显高于鳞癌差异有统计学意义（P值为0.01、0.04）;化疗后腺癌CK19mRNA、CK20mRNA、MMP-9mRNA表达较鳞癌表达下降明显（P值为0.04、0.03、0.02）;治疗前CK20mRNA和MMP-9mRNA表达与有无疗效存在相关性,差异有统计学意义（P值为0.04、0.0.02）,CK19mRNA表达无相关性。化疗后CK19mRNA、CK20mRNA表达与有无疗效存在相关性,差异有统计学意义（P值为0.01、0.02）,MMP-9mRNA表达无相关性。结论通过CK19、CK20、MMMP-9mRNA表达检测,判断晚期肺癌患者化疗疗效,指导用药,提高晚期患者的生活质量及预后的监测的重要意义。     

MMP-2、MMP-9在肺癌中的表达及其与肺癌转移和预后关系的研究

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平与肺癌转移和预后的关系。方法:应用免疫组化(LSAB法)检测了108例非小细胞肺癌和19例肺良性病变中MMP-2、MMP-9的表达水平。结果:(1)肺癌组织中MMP-2、MMP-9的表达水平均显著高于癌旁肺组织和肺良性病变肺组织(P<0.01)。(2)伴有淋巴结或/和远外转移的肺癌中MMP-2、MMP-9的表达水平均显著高于不伴有淋巴结或/和远外转移的肺癌(P<0.01或P<0.05)。(3)MMP-2、MMP-9在肺鳞癌中的表达水平显著高于在腺癌和腺鳞癌中的表达水平(P<0.01)。(4)肺癌组织中MMP-2、MMP-9的表达水平呈显著正相关(P<0.05)。(5)多因素COX比例风险模型分析显示:MMP-2、MMP-9的表达水平对于预测肺癌预后具有一定意义。结论:(1)肺癌中MMP-2、MMP-9的表达水平明显升高,且与肺癌的进展和转移有密切关系。(2)肺癌组织中MMP-2、MMP-9的表达水平呈显著正相关(P<0.05)。(3)检测肺癌中MMP-2、MMP-9的表达水平有助于预测肺癌的预后,指导肺癌的多学科综合治疗。     

应用RT-PCR检测乳腺癌前哨淋巴结微转移的研究

目的评价前哨淋巴结（SLN）活检及其微转移检测临床意义。方法本组46例原发性乳腺癌患者，应用美蓝进行前哨淋巴结定位和活检，随后行腋窝淋巴结清扫（ALND），行SLN、腋淋巴结（ALN）中CK19的RT-PCR检查。结果46例乳腺癌患者中，41例检测到SLN（89．1％），SLN的成功定位活检与肿瘤大小有关。对上述41例的SLN的常规病理检查的敏感性是75％，准确性是90．2％，假阴性25％。在行RT-PCR检查中，敏感性是96％，准确性是97．6％，假阴性4％。结论RT—PCR法较常规病理更为敏感，通过SLN定位和RT-PCR的联合应用，可明显提高乳腺癌淋巴结微转移的检出率。     

MMP-2、VEGF在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨MMP-2和VEGF在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌发生发展的关系,本研究拟从基因和蛋白水平研究二者在卵巢癌组织中的表达情况。方法运用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学染色法检测MMP-2和VEGF在正常卵巢组织、卵巢癌组织中的表达情况。结果卵巢癌组织中MMP-2和VEGFmRNA表达水平及蛋白阳性率均高于正常卵巢组织（P〈0.05）,MMP-2、VEGFmRNA表达水平及蛋白阳性表达率与卵巢癌的浸润程度、临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论正常卵巢组织和卵巢癌组织中MMP-2、VEGFmRNA和蛋白含量的变化是一致的;MMP-2、VEGF可能参与了卵巢癌的发生、侵袭和转移;MMP-2、VEGF定量检测可能成为卵巢肿瘤恶化的分子指标及卵巢癌治疗的分子靶标之一。     

乳腺癌组织中基质溶解素的表达及其与微血管密度的关系

目的 研究基质溶解素(MMP-7)和微血管密度(MVD)与乳腺癌临床病理表现特征的关系及MMP-7对乳腺癌MVD的影响.方法 选取乳腺癌患者组织标本60例,应用过氧化物酶标记链酶卵白素法(SP法)检测MMP-7和血管内皮细胞CD34的表达,分析MMP-7、MVD与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移及肿瘤雌激素受体(ER)、催乳素受体(PR)、核增殖抗原(PCNA)、p53、C-erbB-2表达的关系,评价MMP-7、MVD在乳腺癌预后判断中的临床价值.结果 直径>2 cm、有淋巴结转移,PCNA、p53、C-erbB-2阳性乳腺癌组织中MMP-7的阳性表达率(78.1%、74.2%、71.8%、67.6%和72.2%)显著高于其在直径≤2 cm(32.1%)、无淋巴结转移(41.3%),PCNA(38.1%)、p53(38.5%)、C-erbB-2(33.3%)阴性乳腺癌组织中的阳性表达率(P<0.05).MVD在直径>2 cm(34.61±6.97)、有淋巴结转移(34.37±7.50),PCNA(33.24±8.39)、p53(33.28±8.94)、C-erbB-2(33.55±8.57)阳性乳腺癌组织中显著高于其在直径≤2 cm(28.60±9.82)、无淋巴结转移(27.48±8.66),PCNA(26.88±7.89)、p53(21.71±7.59)、C-erbB-2(27.42±7.69)阴性乳腺癌组织(P均<0.05).MMP-7阳性乳腺癌组织的MVD[(33.62±7.36)个/高倍镜]显著高于MMP-7阴性乳腺癌组织(27.86±9.45)个/高倍镜(P<0.05),MMP-7阳性表达与MVD相关(r=0.380,P<0.05).方法 MMP-7和MVD的高表达与乳腺癌的演进和迁移有关,MMP-7具有促进乳腺癌微血管生成的作用.     

MMP-2/MMP-9在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤浸润转移的关系

背景基质金属蛋白酶在肿瘤的浸润和转移过程中起关键作用,但基质金属蛋白酶在乳腺癌中的表达和预后关系还尚未得知.目的研究乳腺癌组织中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(matrix melloproteinases-2/matrix melloproteinases-9,MMP-2/MMP-9)的表达和Ⅳ型胶原(typeⅣ collagen,ColⅣ)的分布形式与肿瘤浸润转移的关系,揭示乳腺癌的浸润转移机制.设计以诊断为依据,设立对照的回顾性研究.地点和对象随机收集福建医科大学附属第一医院外科手术切除的乳腺癌标本存档蜡块82例和对照组30例.本组全部为女性,全部病例均经病理证实.主要观察指标检测乳腺癌组织和乳腺非癌组织中MMP-2,MMP-9的表达情况和ColⅣ的分布形式及其与临床病理参数的关系.方法应用S-P免疫组化方法检测乳腺癌组织和对照组乳腺非癌组织中MMP-2,MMP-9的表达情况和ColⅣ的分布形式及其与临床病理参数的关系.结果①在82例乳腺癌组织中,MMP-2和MMP-9的阳性表达率分别为52%(43/82)和54%(44/82);ColⅣ分布形式中包裹型占15%(12/82)、崩解型占85%(70/82),与对照组比较差异有显著性意义.②MMP-2/MMP-9的表达与ColⅣ的分布形式相关(P＜0.05),MMP-2/MMP-9的阳性者,则崩解型ColⅣ出现的概率大.③MMP-9的表达与腋窝淋巴结转移呈正相关(x2=8.1899,P＜0.05),MMP-2的表达与腋窝淋巴结转移关系虽有差别,但差异无显著性意义(x2=3.3590,P＞0.05).结论乳腺癌MMP-2/MMP-9的高表达与肿瘤浸润或转移密切相关,检测这些指标,有助于判断乳腺癌的恶性度和生物学行为.     

血管内皮细胞生长因子及受体在乳腺癌组织的表达研究

目的 探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）及其受体在乳腺癌组织中表达的意义.方法 使用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及计算机条带分析半定量方法检测了VEGF异构体及受体mRNA在乳腺癌组织及癌周组织的表达水平.对VEGF121 mRNA及KDRmRNA表达水平和肿瘤大小,淋巴结转移及绝经前后的关系进行统计学分析.结果 在乳腺癌组织及癌周组织均检测到VEGF121和KDR,flt-1的mRNA表达,VEGF121和KDR在癌组织表达水平明显高于癌周组织,在癌组织及癌周组织,VEGF121 mRNA表达和KDR121 mRNA表达之间有明显直线正相关及回归依存关系,VEGF121,KDR的mRNA表达在肿瘤≥2cm;淋巴结阳性及绝经前组病人明显高于淋巴结阴性、肿瘤＜2cm和绝经后组病人.结论 VEGF、KDR在乳腺癌组织的表达水平明显高于癌周组织,VEGF积极参与乳腺癌的新生血管增殖过程.