MS-CTA容积重建技术评价兔脑SAH后迟发性脑血管痉挛

目的动态评价多层螺旋CT血管成像(MS-CTA)容积重建技术(VR)在迟发性脑血管痉挛(DCVS)的应用价值。方法22只日本大耳白兔,采用枕大池二次注血法制作兔脑基底动脉DCVS模型,分别在第1、4、7、14d行MS-CTA检查后,立即处死动物并在光镜下测量基底动脉直径。MS-CTA使用GE Lightspeed pro 16层螺旋CT扫描仪,原始图像三维后处理采用容积重建(VR)技术。结果MS-CTA VR图像上,DCVS在第1d出现,第7d达到高峰,第14d可见基底动脉痉挛有一定程度缓解,光镜下基底动脉直径的时相变化与MS-CTA相似。结论MS-CTA VR能快速准确地评价DCVS的血管动态变化。     

蛛网膜下腔出血大鼠基底动脉血小板源性生长因子的表达变化

目的探讨血小板源性生长因子(PDGF)在大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)血管壁的表达及关系。方法将30只大鼠按照枕大池二次注血的方法建立模型,然后分别于建立模型后的1 d、3 d、5 d、7 d、14 d将大鼠处死,取出基底动脉制作石蜡切片在光镜下观察。采用免疫组化法检测大鼠基底动脉血管壁PDGF的表达水平。结果模型组中PDGF在基底动脉血管壁上的表达,3 d和5 d组最明显,与脑血管痉挛程度的变化是一致的。结论通过枕大池二次注血能够成功的模拟SAH后CVS的发生。PDGF参与了SAH后CVS的过程,并可能起了重要的作用。     

蛛网膜下腔出血后白细胞介素-8基因在兔脑基底动脉中表达的变化

目的探讨实验性蛛网膜下腔出血（SAH）诱发脑血管痉挛时,白细胞介素-8（IL-8）基因在兔脑基底动脉中表达的变化及在诱发脑血管痉挛中的作用。方法35只健康日本大耳白兔随机分为生理盐水组、SAH组。SAH组根据第一次注血时间又分为四组,分别为第一次注血后第1、4、7、14天。以枕大池二次注血法构建迟发性脑血管痉挛模型,采用RT—PCR法观察兔基底动脉中细胞因子IL-8mRNA表达的变化。结果IL-8mRNA在SAH组第一次注血后第4—7天升高,14天趋于正常。SAH组IL-8的表达水平与基底动脉的狭窄程度呈正相关（r=0．642,P〈0．01）。结论IL．8在基底动脉中的表达水平与脑血管痉挛的程度紧密相关,提示IL-8可能作为免疫／炎症因素因素参与了SAH后迟发性脑血管痉挛的发生。     

蛛网膜下腔出血后白细胞介素-8基因在兔脑基底动脉中表达的变化(英文)

目的探讨实验性蛛网膜下腔出血(SAH)诱发脑血管痉挛时,白细胞介素-8(IL-8)基因在兔脑基底动脉中表达的变化及在诱发脑血管痉挛中的作用。方法 35只健康日本大耳白兔随机分为生理盐水组、SAH组。SAH组根据第一次注血时间又分为四组,分别为第一次注血后第1、4、7、14 天。以枕大池二次注血法构建迟发性脑血管痉挛模型,采用RT-PCR法观察兔基底动脉中细胞因子IL-8 mRNA表达的变化。结果 IL-8mRNA在SAH组第一次注血后第4- 7天升高,14 天趋于正常。SAH组IL-8 的表达水平与基底动脉的狭窄程度呈正相关(r = 0.642,P < 0.01)。结论 IL-8在基底动脉中的表达水平与脑血管痉挛的程度紧密相关,提示IL-8可能作为免疫/炎症因素因素参与了SAH 后迟发性脑血管痉挛的发生。     

川芎嗪对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛病理变化的影响

目的探讨川芎嗪对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后CVS病理变化的影响。方法健康成年SD大鼠6 0只随机分为四组(n=1 5)。①A为NS组:枕大池两次穿刺注入生理盐水②B为SAH+NS组③C为SAH+N imotop组④D为SAH+TMP组。B、C、D三组均在枕大池两次注入自体动脉血制作成SAH模型后,自当天开始分别经腹腔注人生理盐水2 m l,或尼莫同0.1 mg,或川芎嗪2 0 mg,每日一次直到动物处死。各组动物分别在第1、4、7天分三批处死,每批5只。结果 A组动物基底动脉组织结构正常。B组动物基底动脉在第1天时出现血管痉挛,第4天时出现血管壁增厚,均以第7天时最为显著。C组动物血管痉挛程度有不同程度缓解,但第4天亦出现血管壁增厚,在第7天明显。D组动物血管痉挛及血管壁增厚明显缓解,血管壁NF-кBp6 5,Cox2的表达与同时间段B组和C组比较明显减弱(P<0.0 5)。结论川芎嗪对SAH脑血管痉挛具有一定的预防作用。     

基底动脉中Caspase3、8的表达与蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的关系

目的探讨天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3、8(Caspase3、8)在蛛网膜下腔出血(SAH)后在基底动脉中的表达及其与脑血管痉挛的关系。方法新西兰大白兔36只,随机分成对照组(n=6)和实验组(n=30),后者再随机分为SAH后1、3、5、7、10d等5个亚组,每亚组各6只。采用枕大池二次注血法建立SAH模型,应用免疫组化和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记法分别检测基底动脉内皮细胞Caspase3、8表达和凋亡。结果凋亡细胞在实验组SAH后第1天出现,第7天凋亡水平达到最高。实验组Caspase3、8表达水平明显高于与对照组(P<0.05)。Caspase3、8的表达在SAH后第1天就可观察致到,第5天和第7天出现强烈表达,第l0天表达明显减弱。结论本结果提示在兔脑血管痉挛的基底动脉中存在细胞凋亡;Caspase3、8可能参与了SAH后脑血管痉挛的发生和发展。     

细胞色素C在兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛中的作用

目的 观察兔蛛网膜下腔出血(SAH)后基底动脉细胞色素C(Cyt-C)的表达规律,以探讨其在细胞凋亡中的作用及与脑血管痉挛(CVS)的关系.方法 36只新西兰大白兔随机分为对照组(6只)和SAH组(30只).SAH组采用枕大池二次注血法建立兔CVS模型,对照组行枕大池二次注入生理盐水.应用苏木精-伊红染色观察基底动脉形态学变化,TUNEL法检测基底动脉上细胞凋亡情况,免疫组化检测基底动脉内皮细胞和平滑肌细胞的Cyt-C表达.结果 对照组基底动脉结构正常,偶见凋亡细胞和Cyt-C表达.SAH组基底动脉出现相应病理学改变,管腔狭窄呈双相期改变;基底动脉上细胞凋亡和Cyt-C表达均在SAH后增多,于第7天达高峰,第10天逐渐下降.与对照组比较,SAH组内各时间点基底动脉直径和Cyt-C表达差异均有统计学意义(P<0.05).结论 兔CVS模型的基底动脉中存在细胞凋亡,Cyt-C是启动细胞凋亡的重要因素,在CVS发生和发展过程中起重要作用.     

盐酸法舒地尔对蛛网膜下腔出血后血管痉挛的实验研究

目的通过建立大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）模型,探讨盐酸法舒地尔对蛛网膜下腔出血后血管痉挛的缓解作用和神经保护作用,并与尼莫地平对比,观察疗效。方法通过枕大池二次注血法建立大鼠SAH模型,观察基底动脉和海马神经元形态变化,测量基底动脉管径和管壁厚度,计算海马CA1区神经元密度,检测基底动脉内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）的表达。结果各组模型大鼠的基底动脉均出现血管痉挛,海马CA1区正常神经元数目明显减少,多数神经元发生变性,基底动脉的eNOS表达明显减弱。但注射法舒地尔组与其他模型组相比能较大程度的缓解以上变化,具有统计学差异（P〈0.05）,且优于尼莫地平。结论法舒地尔可以有效缓解SAH后的迟发性脑血管痉挛,具有神经保护作用,其缓解迟发性脑血管痉挛作用和神经保护作用与动脉壁产生的一氧化氮（NO）有关。     

大鼠蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛和血管壁增殖关系的实验研究

目的探讨大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛(DCV)的发生和血管壁增殖之间的关系。方法SD大鼠78只,随机分为SAH组(A组,36只)、生理盐水组(B组,36只)和正常对照组(C组,6只)。A组采用枕大池二次注血法建立SAH模型,B组同法注射等量生理盐水。A、B组分别在首次注血(或生理盐水)后4、7、10、13、16、20d取基底动脉(BA)行HE染色后测量其内径周长、血管壁厚度,观察血管结构改变;免疫组化染色后检测BA增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达。结果B、C组BA血管结构正常、无DCV发生,A组第4天出现DCV,第7天达到高峰,高峰期持续至第10天,后逐渐缓解,20d基本恢复正常;A组除20d外,各时相有不同程度的内膜增厚皱折、平滑肌层增厚等改变。PCNA在B组及C组BA中无表达,A组各时相均有表达,第7天有较强表达(P<0.05)。结论SAH后DCV的发生和严重程度与血管壁增殖程度密切相关。     

Intracisternal administration of SB203580, a p38 mitogen-activated protein kinase inhibitor,attenuates cerebral vasospasm via inhibition of tumor-necrosis factor-α

Tumor-necrosis factor-α (TNF-α) is critical to the development of cerebral vasospasm after subarachnoid hemorrhage (SAH). Hence, therapeutic strategies targeting TNF-α can attenuate cerebral vasospasm. This study investigated the effects of SB203580, a p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) inhibitor, on TNF-α concentration in the cerebral arteries and the cerebrospinal fluid (CSF) after SAH and on subsequent cerebral vasospasm. Twenty-three rabbits were divided into four groups: (i) control (without SAH), (ii) SAH (SAH only), (iii) dimethylsulfoxide (DMSO, vehicle), and (iv) SB203580. The severity of vasospasm and the immunoreactivities of TNF-α and phosphorylated p38 MAPK in the brain vessels were determined in all animals, and the concentrations of TNF-α in the CSF were also assessed. Severe vasospasm was observed in the rabbits from the SAH and DMSO groups. SB203580 reversed vasospasm after SAH. Lower immunoreactivities of TNF-α and phosphorylated p38 MAPK were found in the basilar artery in the SB203580 group than in the DMSO group. The concentration of TNF-α in the CSF increased after SAH, but treatment with SB203080 after SAH suppressed this increase. Our data show that SB203580 reversed cerebral vasospasm by inhibiting the phosphorylation of p38 MAPK in the basilar artery and by suppressing the increase in TNF-α in the basilar artery and CSF after SAH. SB203580 could therefore potentially be used for the treatment of cerebral vasospasm after SAH.     

CCK-8对家兔SAH后迟发性脑血管痉挛病理变化的影响

目的:利用胆囊收缩素-8(CCK-8)的抗炎作用,观察其对自发性蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛病理改变的影响。方法:雄性新西兰白兔60只随机分为四组(n=15)。①假手术组:仅进行枕大池穿刺和假注血;②SAH组:经家兔枕大池二次注射自体动脉血(0．8ml／kg)制作SAH模型;③SAH+CCK-8组:对SAH模型自day 0开始经枕大池注入 CCK-8(8μg／kg,0．5ml),每日一次直到动物处死;④SAH+生理盐水组:对SAH模型自day 0开始经枕大池注入等量37℃生理盐水,每日一次直到动物处死。各组分别在day 4、day 7和day 14分三批处死动物,每批5只。结果:假手术组动物基底动脉组织结构正常。SAH组动物基底动脉在day4、day7时出现血管痉挛,以day 7时最为显著,day 14血管痉挛得到缓解。CCK-8治疗组动物的血管痉挛程度有不同程度缓解,血管壁NF-κB、TNF-a表达明显减弱,与同时段SAH组和SAH+ 生理盐水组比较以day7时最为显著(P<0．05)。结论:CCK-8对SAH后迟发性脑血管痉挛具有一定的预防作用。     

上胸段硬膜外阻滞对兔蛛网膜下腔出血后急性期脑血管痉挛的预防作用

目的建立兔的上胸段硬膜外阻滞（HTEB）模型和蛛网膜下腔出血（SAH）模型，探讨HTEB对SAH后脑血管痉挛（CVS）的预防作用。方法用切开置管法制备HTEB模型的新西兰兔30只，随机分为3组（n=10）：正常组、对照组（单纯SAH）和实验组（HTEB＋SAH）。采用枕大池穿刺一次注血法（0．5ml／kg）制成兔SAH模型。1d后用经颅多普勒检测兔基底动脉血流速度（Vm）。处死后取基底动脉，光镜下观察其形态学变化。结果与正常组相比，对照组和实验组的基底动脉Vm均明显升高（P〈0．05或〈0．01）；但实验组的基底动脉Vm则明显低于对照组（P〈0．05）。在光镜下，对照组基底动脉管壁收缩、管腔变窄，实验组变化程度轻于对照组。结论HTEB可以减轻兔SAH后急性CVS的程度。     

Neurologic evaluation in a canine model of single and double subarachnoid hemorrhage

The pathophysiology of cerebral vasospasm is complex and multifactorial. The present study sought to identify the degree of correlation between cerebral vasospasm as observed angiographically and clinical evaluation of an animal's neurologic status in the canine model following a single and double experimental subarachnoid hemorrhage (SAH) protocol. Nineteen mongrel dogs underwent single or double experimental SAH by percutaneous needle puncture of the cisterna magna and placement of a subarachnoid blood clot in the basal cistern on day 1 and day 4, respectively. At 72 h after each experimental SAH, vertebral angiography was performed and compared to control angiography. Basilar artery diameter measured at multiple positions was expressed as percentage of control diameter. Clinical evaluation of the animals was performed every day throughout the experiments. To assess the degree of neurologic impairment we developed a coma scale that efficiently estimated motor ability, eye response and eating habits of the animals. Vasoconstriction after experimental SAH reduced mean basilar artery diameter to 79.1% (±5.4) of control diameter following single SAH and to 69.0% (±2.1) of control diameter following double SAH. No changes were observed in the neurologic behavior of the animals throughout the experiment. Since a principal characteristic of human cerebral vasospasm is the close correlation between arterial constriction and neurological deficit, we believe that the canine model of SAH, although good in creating cerebral arterial vasoconstriction, does not fully represent the best model of human cerebral vasospasm.     

兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛与脑细胞外液相关性实验研究

目的探讨蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛的脑代谢变化规律及其与脑血管痉挛程度的相关性。方法 16只成年新西兰白兔随机分为:枕大池2次注生理盐水组(NS组)8只,枕大池2次注血组(SAH组)8只。两组均采用微透析仪于注血(或生理盐水)前、后第1,3,5,7天检测脑细胞外液的葡萄糖、乳酸、丙酮酸、谷氨酸及天冬氨酸的浓度,并计算乳酸与丙酮酸(L/P)比值。经颅多普(TCD)测定两组兔基底动脉血流速度;DSA测定两组兔基底动脉直径。结果与注血前相比,SAH组注血后各指标均有不同程度变化。基底动脉直径显著缩小及血流速度明显增快均于第3天开始(P0.05),并于第5天达高峰;且轻度和中度脑血管痉挛血流速度与管径呈负相关(γ轻=0.673,P0.01;γ中=0.613,P0.01)。乳酸和L/P比值均于第1天明显升高(P0.05),第5天达高峰;且与基底动脉直径变化呈负相关(γ乳酸=0.624,P0.01;γL/P=0.713,P0.01)。谷氨酸第1天显著升高(P0.05),后急剧下降。结论 TCD可通过检测血流速度变化判断兔脑血管痉挛情况,但痉挛程度的判断存在局限性。脑细胞外液乳酸和L/P比值变化可预测兔脑血管痉挛的发生并判断其痉挛程度。     

Therapeutic effect of caspase inhibitors in the prevention of apoptosis and reversal of chronic cerebral vasospasm

One of the important histological changes in cerebral vasospasm after subarachnoid hemorrhage (SAH) is endothelial cell damage, which involves apoptosis. The current study was undertaken to determine whether anti-apoptosis therapy prevents apoptosis and reverses vasospasm in a dog SAH model. Twenty-three mongrel dogs of either sex, weighing 17-25 kg, were subjected to autologous arterial blood injection into the cisterna magna on day 0 and day 2, and sacrificed on day 7. Angiography was performed on day 0 before blood injection and on day 7 before sacrifice. Caspase-2 (Z-VDVAD-FMK, 10 microM) inhibitor, caspase-3 (Z-DEVD-FMK, 10 microM) inhibitor, or vehicle (DMSO) were injected intrathecally from day 2 to day 6. The effects of caspase inhibitors on apoptosis and vasospasm were evaluated by angiography and transmission electron microscopy. The residual diameter of the basilar artery on day 7 in SAH dogs without treatment was 53.4+/-5.5% of the day 0 diameter. Marked damage to the endothelial cells, including apoptotic like changes, was observed in these arteries. Both caspase inhibitors prevented apoptosis in the endothelial cells. Only caspase-3 inhibitor, however, had a near-significant effect on reducing 13.3% of angiographic vasospasm. Higher doses and early treatment, as well as other more potent apoptosis inhibitors, are recommended for future studies.     

尼莫地平对蛛网膜下腔出血大鼠额叶转化生长因子-β1表达的影响

目的：探讨尼莫地平对蛛网膜下腔出血（SAH）大鼠额叶转化生长因子-β1（TGF—β1）表达和血管痉挛的影响。方法：枕大池二次注血法制作SAH模型。54只成年健康雄性SD大鼠随机分为对照组（n=6）、SAH组（n=24）和尼莫地平处理组（n=24），其中SAH组和尼莫地平处理组随机均分为1、3、5和7d等4组（n=6）。尼莫地平处理组于二次注血后30min时经股静脉注入尼莫地平2mg／kg，此后每天经腹腔注射尼莫地平2mg／kg。HE染色光镜下观察基底动脉病理学变化，测定内径；免疫组化法检测各组大鼠额叶TGF—β1表达。结果：SAH组和尼莫地平处理组基底动脉内径显著小于对照组（P〈0．01），而SAH组与尼莫地平处理组无显著差异。SAH1d时，TGF—β1表达增加，3d时达高峰，5d和7d时显著低于1d和3d时（P〈0．01），但仍照著高于对照组（P〈0．01）。与SAH组相比，尼莫地平处理组1d和3d时TGF-β1表达无显著差异，5d和7d时显著增加。结论：SAH后额叶TGF—β1表达发生改变，与脑血管痉挛有关，提示TGF-β1参与了脑血管痉挛的病理学过程。尼莫地平可能通过增加SAH后啮组织中TGF-β1表达对缺血脑组织起着保护作用。     

Role of p53 and apoptosis in cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage.

Our previous studies indicate that apoptosis in endothelial cells of major cerebral arteries contributes to cerebral vasospasm after subarachnoid hemorrhage (SAH). This study examined the pathologic roles of tumor suppressor p-53 in cerebral vasospasm using an established dog double-hemorrhage model. Twenty mongrel dogs were divided into four groups: (1) control, (2) SAH, (3) SAH+DMSO (vehicle), and (4) SAH+pifithrin-alpha (PFT) (p53 inhibitor). The p53 inhibitor (200 nmol/L) was injected into the cisterna magna daily from Day 0 through Day 3. Angiogram was performed on Day 0 and Day 7. Western blot, cell proliferation assay, histology, and TUNEL staining were conducted on the basilar arteries collected on Day 7 after SAH. The arterial diameter on Day 7 was 42%+/-4%, 40%+/-5%, and 59%+/-4% for SAH, SAH+DMSO, and SAH+PFT, respectively. In addition, positive staining of TUNEL and increased protein expression of p53, Bax, and PCNA in the basilar artery were observed on Day 7. PFT suppressed apoptosis in endothelial cells and proliferation in smooth muscle cells, and attenuated angiographic vasospasm. In conclusion, p53 may be a key factor in endothelial apoptosis and smooth muscle proliferation after SAH. Inhibition of p53 may potentially reduce or even prevent cerebral vasospasm.     

促红细胞生成素对迟发型脑血管痉挛抑制作用的实验研究

目的研究全身应用重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对蛛网膜下腔出血后(SAH)迟发型脑血管痉挛(DCVS)的抑制作用。方法清洁级雄性wistar大鼠40只随机分为四组:空白组、SAH组、SAH+rHuEPO组、SAH+安慰剂组。采用枕大池2次注血法建立蛛网膜下腔出血模型。注血后7d取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测测血浆中内皮素-1(ET-1)含量,原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测颞叶神经元凋亡情况,通过测定基底动脉血管横截面积判断脑血管痉挛情况。结果实验显示SAH后第7dSAH+rHuEPO组基底动脉横截面积比SAH组和SAH+安慰剂组相比明显变大(P<0.01);血浆ET-1浓度SAH+rHuEPO组与SAH组和SAH+安慰剂组相比明显减少(P<0.01);TUNEL染色显示SAH+rHuEPO组皮质神经元凋亡程度较SAH组和SAH+安慰剂组显著减轻。结论早期全身应用rHuEPO可以有效预防SAH后迟发型脑血管痉挛,并有脑保护作用,部分与rHuEPO能抑制ET-1的产生有关。     

甘珀酸对兔脑血管痉挛时缝隙连接蛋白43磷酸化表达的影响

目的 探讨甘珀酸对兔实验性蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)时缝隙连接蛋白43(Cx43)磷酸化表达的影响.方法 建立兔二次SAH模型,脑池及静脉分别给予甘珀酸,脑血管造影及光镜观察分析基底动脉直径及形态学变化并应用Western blot检测基底动脉Cx43蛋白磷酸化表达的变化.结果 SAH组与正常组相比,脑血管造影及光镜观察结果 证实基底动脉痉挛明显;痉挛动脉肇磷酸化的Cx43(P-Cx43)蛋白表达显著升高,但去磷酸化的Cx43(NP-Cx43)蛋白表达显著减少.甘珀酸脑池处理组及静脉处理组与SAH组相比,脑血管造影及光镜观察结果 证实基底动脉痉挛显著减轻;痉挛动脉壁P-Cx43蛋白表达显著减少,但NP-Cx43蛋白表达显著升高.结论 SAH后,Cx43蛋白磷酸化表达发生变化,脑池或静脉给予甘珀酸能明显缓解SAH后CVS,其作用机制可能与基底动脉Cx43蛋白磷酸化表达变化有关.