乳酸脱氢酶-C_4在大鼠不同成熟期生精细胞中的定位

用ABC免疫组织化学法观察乳酸脱氢酶C_4(LDH-C_4)在性成熟后的Wistar大鼠生精上皮细胞中的定位。结果表明:LDH-C_4定位于粗线期初级精母细胞以后的各级生精细胞中,精原细胞中缺如。显微分光光度分析表明,随着精子的发生,LDH-C_4的相对含量逐渐增加,精母细胞中为0.55±0.09,精子细胞中为0.86±0.13,精子中为0.94±0.04,三者之间有显著性差异(P<0.01)。ABC免疫电镜显示LDH-C_4在大鼠精子的细胞质、线粒体及部分细胞膜上均有分布。免疫荧光显示LDH-G_4在精子表面主要定位于尾部的主段和末段,少量分布于精子头冠部。作者对LDH-C_4细胞定位的生理意义作了讨论。     

精液乳酸脱氢酶C4同功酶的底物选择性测定法

目的：建立一 简便、准确测定精浆、精子中的LDH－C4同功酶的检测方法。方法：采用特异底物的酶动力学分光光度法测定子精子、精浆中LDH－C4同功酶活性。其结果与常规的丙烯酰胺凝胶电泳分离,活性染色,光密度扫描法进行比较。结果：两种方法间存在较好的相关(r＝0．932,n＝128）.以5．0mmol/L的α－酮己酸底物浓度可以选择性的检测出精液样品的LDH－C4活性。结论：本方法具有微量、快速的优点,适于在临床检验中推广应用。     

男性不育者精浆及精子乳酸脱氢酶活性的研究

目的探讨男性不育症患者精浆及精子中乳酸脱氢酶同工酶X（LDH-X）活性,分析乳酸脱氢酶同工酶活性与男性不育的关系。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、全谱酶联染色等方法检测精浆及精子中的LDH-X活性并计算其比值;按照WHO人类精液实验室手册要求对精液进行常规分析。结果 124例不育组精浆LDH-X活性（827.3±46.8）U/L与60例生育组LDH-X活性（616.1±22.4）U/L比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,不育组精子LDH-X的活性（8.45±3.62）mU/106小于生育组（16.1±10.6）mU/106,差异有统计学意义（P〈0.01）。两组的精浆及精子中LDH-X的比值比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。两组的精液密度、精子活动率及精子活力无统计学差异。结论精浆及精子LDH-X活性检测能够反应精子的质量、生育功能以及对受精过程的预期,对选择辅助生育的方法有指导意义。     

人精子特异性乳酸脱氢酶DNA疫苗的构建及其免疫效果的初步鉴定

人精子特异性乳酸脱氢酶（hLDH—C4）具有组织器官特异性及较强的免疫原性。多项研究表明其诱导的免疫反应在多种哺乳动物具有抗生育性：在血清中都检测到抗LDH—C4的抗体。动物的生育率明显降低。且作用可逆。LDH—C4作为疫苗用于免疫生育调节一直受到关注。作者构建了精子特异性乳酸脱氢酶真核表达载体pVAX1-hLDHC4，并用该载体免疫BAIB/c小鼠，观察了其诱导的体液免疫反应，现报告如下。     

精子特异性人乳酸脱氢酶的原核表达与鉴定

精子特异性乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase—C4。LDH-C4）特异地存在于哺乳动物发育成熟的睾丸和精子细胞中，具有和其它同工酶不同的独特理化性质，与精子的生成、代谢、获能和受精有密切关系，为精子能量代谢的一个关键酶，其抗生育效果在多种哺乳动物，包括灵长类已得到证实。鉴于在分布上的特异性，LDH—C4一直被当作避孕疫苗的候选对象而受到重视。为了进一步研究LDH—C4的功能，制备针对LDH—C4的特异性抗体，我们构建了人精子特异性乳酸脱氢酶C（HLDH-C4）的原核表达载体，并进行原核表达和鉴定。     

大鼠睾丸乳酸脱氢酶同工酶－C_4的分离纯化研究

采用加热、硫酸铵分段盐析和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０柱层析，从大鼠睾丸中分离纯化了ＬＤＨ－Ｃ４。比活性提高７８４倍，活性回收率为１２．３％，纯化的ＬＤＨ－Ｃ４经聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）鉴定均为一条酶带，位于ＬＤＨ３和ＬＤＨ４之间。     

乳酸脱氢酶同工酶1试剂盒的研制及探讨

乳酶脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶系指催化同一反应（乳酸丙酮酸）而结构不同的一组酶类。其广泛分布于全身各组织，而ＬＤＨ１绝大部分分布于心肌细胞中［１］，所以当心肌细胞发生病变或损伤时，ＬＤＨ１急剧升高，因此测定ＬＤＨ１对诊断心脏疾病具有较高的灵敏性。国内外测定ＬＤＨ１的方法很多，如：电泳法［２］、免疫化学法、ＥＬＩＳＡ法［３］、单克隆法及化学法［４］等。国内常用的电泳法其过程较长而且繁琐，我们用化学抑制剂及生化分析仪对ＬＤＨ１进行测定并就此方法的科学性、实用性进行了探讨。材料和方法材料（ｌ）化学法（供全…     

人体睾丸组织乳酸脱氢酶同工酶相对活性测定的研究

以成人正常睾丸对照胎儿及成人萎缩睾丸,用琼脂糖凝胶电泳法检测了成人睾丸匀浆中LDH同工酶酶谱。只有成人睾丸匀浆中有一特异同工酶区带-LDHx,介于LDH_3与LDH_4之间,其相对活性为15.1%。LDHx作为精原细胞、精子及精液内LDH同工酶的特异分子形式,它对精子发生及生育能力具有重要意义,因此LDHx的消失或相对活性的降低都将反映睾丸组织生育功能的改变。LDHx的检测也展示了对抗生育研究的前景。     

移动电话电磁辐射对睾丸乳酸脱氢酶同工酶的影响

目的 :探讨移动电话的电磁辐射对雄鼠生殖功能的影响。方法 :用移动电话的模拟辐射源对小鼠进行全身辐射 ,辐射频率为 935MHz ,每天 2h ,连续 35d ,平均功率密度分别为 0 ,5 70 ,14 0 0 μW·cm-2 。照射 35d后取双侧睾丸和附睾称重 ,并观察睾丸乳酸脱氢酶 (LDH)及其同工酶 (LDH X)的活性和睾丸组织结构及电镜超微结构的变化。结果 :各组间的睾丸和附睾的脏器系数差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;但 14 0 0 μW·cm-2 辐射组的LDH X活性显著下降 (P <0 .0 5 ) ,并出现精子超微结构的改变。结论 :移动电话的电磁辐射可以降低睾丸乳酸脱氢酶同工酶活性 ,可能存在生殖毒性。     

乳酸脱氢酶同工酶C_4与男性不育的关系

用自制的抗人乳酸脱氢酶同工酶C_4(LDH-C_4)单克隆抗体(McAb),以免疫荧光、BA-ELISA及聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)等方法,测定了110例正常及各种不育症患者精子及精浆中LDH-C_4的含量。结果表明:不明原因性不育症、少精症及无精症患者精液中LDH-C_4的含量明显低于正常对照组,与正常组比较P值均<0.001,有极显著性差异;免疫荧光还发现不育症组伴有各种畸形精子。LDH-C_4含量的明显降低可能与男性不育有关。     

精子抗原表位的研究进展

精子是一种隐蔽抗原,可引起机体产生抗精子抗体。抗精子抗体能够影响生殖细胞的结合、胚胎着床等过程,进而导致免疫性不孕不育。近年来,与免疫性不孕不育密切相关的抗精子抗体所结合的精子表面抗原及其抗原表位已成为抗精子抗体检测及避孕疫苗的主要研究对象之一。该文对与免疫性不孕不育相关的精子表面抗原及其抗原表位的筛选和鉴定,以及当前精子抗原表位研究所面临的难点作一简要的综述。     

RNA-DNA杂交法研究乳酸脱氢酶-C基因在睾丸中特异性表达

用同位32~P标记乳酸脱氢酶-C(LDH-C)cDNA作为探针,与小鼠胸腺、脑、胰、心肌、骨骼肌、睾丸、肾、肺、肝的RNA以及人胰、皋丸、肝、骨骼肌、心肌及脑的RNA分别作点溃杂交(dot blot hybridization)及Northern印迹杂交,证实LDH-C基因只在睾丸中特异性表达。