胸腺五肽对新辅助化疗的乳腺癌患者局部组织中浸润淋巴细胞的影响

目的 探讨胸腺五肽对新辅助化疗的乳腺癌组织微环境中浸润淋巴细胞的影响。方法 自2012年1月~2014年1月,前瞻性收集笔者医院收治的接受新辅助化疗的乳腺癌患者80例,将患者随机分为研究组和对照组,所有患者均行新辅助化疗,研究组在新辅助化疗期间给予胸腺五肽,化疗结束后进行手术切除肿瘤组织,留取乳腺癌组织标本,观察乳腺癌组织中和外周血中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺T细胞比例、外周血中IL-6、IL-10、TGF-β1水平。结果 与对照组比较,研究组患者乳腺癌组织中CD4⁺T细胞显著降低（21.47%±3.29% vs 23.88%±3.43%,P=0.002）;CD8⁺T细胞显著增高（30.36%±4.38% vs 28.43%±4.16%,P=0.047）;CD4⁺/CD8⁺T细胞显著降低（0.71±0.14 vs 0.84±0.18,P=0.001）。两组患者治疗前外周血CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺T细胞、IL-6、IL-10、TGF-β1等比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,研究组患者术后外周血CD4⁺T细胞水平显著增加（27.67%±4.24% vs 25.09%±3.68%,P=0.005）;CD4⁺/CD8⁺T显著增加（0.83±0.14 vs 0.75±0.18,P=0.029）;IL-6水平显著增高（12.39±2.87 vs 9.24±3.38ng/L,P=0.000）;IL-10水平显著降低（8.49±2.59 vs 12.59±3.65ng/L,P=0.006）;TGF-β1水平显著降低（12.47±3.88 vs 17.76±4.12ng/ml,P=0.000）。两组患者住院时间、切口感染、手术部位出血、复发率和病死率等比较,差异均无统计学意义（P > 0.05）。结论 胸腺五肽联合新辅助化疗可能有助于改善乳腺癌组织微环境中免疫状态和全身免疫功能。     

CKD3~5期患者外周血T淋巴细胞CD154表达能力的变化

目的 探讨了CKD 3~5期患者外周血T淋巴细胞CD154表达能力的变化。 方法 以健康人外周血为对照组,以未接受血透析治疗的慢性肾脏病(CKD)3~5期(未透析组)及CKD 5期维持性血液净化治疗的患者(透析组)外周血为实验组,检测各组受试者外周血T淋巴细胞表达频率、CD3⁺CD8^-T细胞CD154的表达比例。 结果 与对照组相比,CKD 3~5期未透析患者外周血淋巴细胞中T细胞所占频率下降,差异有统计学意义(P<0.05);CKD5期透析组与对照组比较差异无统计学意义(对照组为72.05%±2.65%;未透析组为63.06%±3.37%;透析组为68.92%±3.22%)。离子霉素联合佛波酯刺激全血后,各组表达CD154的CD3⁺CD8^- T细胞占CD3⁺CD8^- T细胞比例:未血液净化组(73.61%±1.91%)较对照组(79.78%±2.00%)及血液净化组(78.94%±2.47%)明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);提取PBMC后用离子霉素联合佛波酯刺激,各组间CD154表达差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 CKD 3~5患者存在CD3⁺CD8^- T细胞CD154表达能力下降,可能影响患者的免疫功能。     

Breg Tfh Tfr细胞在免疫性血小板减少症患者中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）、滤泡辅助性T细胞（Tfh）、滤泡调节性T细胞（Tfr）在免疫性血小板减少症（ITP）中的作用和临床意义。方法 选择2017年10月至2019年10月安徽医科大学第一附属医院收治的初次诊断的30例ITP患者为ITP组,同期选择健康对照组25例,应用流式细胞术（FCM）检测外周血Breg、Tfh、Tfr细胞的表达水平并统计分析。结果 ITP组患者外周血CD19⁺B细胞中Breg[（1.93±1.21）%]、IL-10⁺Breg[（28.64±10.31）%]水平低于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;外周血CD4⁺T细胞中Tfh细胞比例高于健康对照组[（12.18±5.26）% vs（6.21±1.78）%],Tfr细胞比例[（1.64±1.01）%]、Tfr/Tfh比值（0.21±0.13）低于健康对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 Breg细胞降低,IL-10分泌减少,Tfr/Tfh比值失衡,在ITP发病过程中可能起到重要的作用。     

CD19+ CD24high CD27+调节性B细胞在儿童传染性单核细胞增多症中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）在儿童传染性单核细胞增多症（IM）中的作用。方法 应用流式细胞术检测53例IM患儿外周血T淋巴细胞亚群,CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达情况。用荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA。同时用ELISA方法分析血清IL-10、TGF-β分泌水平。以50例健康儿童为对照。结果 IM急性期组与对照组比较CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显降低（t=19.99,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显增高（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值降低（t=16.79,P<0.01）。IM恢复期组与急性期组比较,CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显增高（t=21.54,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显降低（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值增高（t=16.68,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平13.4%±1.87%,与对照组比较显著降低,差异有统计学意义（t=14.61,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平与EBV-DNA病毒载量呈负相关（r=-0.52,P<0.01）。经治疗后IM恢复期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平18.3%±2.11%与IM急性期组比较显著增高,差异有统计学意义（t=12.61,P<0.01）。IM急性期组血清IL-10较对照组明显降低,差异有统计学意义（t=11.50,P<0.01）。治疗后IM恢复期组IL-10较IM急性期组明显增高,差异有统计学意义（t=9.40,P<0.01）。结论 IM急性期存在明显免疫失衡,即CD3⁺ CD8⁺ T细胞增多,CD4/CD8比值降低,可能与Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。     

苯吸入对骨髓细胞凋亡和组蛋白去乙酰化酶影响

目的 观察苯吸入对小鼠骨髓细胞损伤情况以及去乙酰化酶水平的变化。方法 自制动式苯吸入装置中放8~9周龄CD1雄性小鼠实验组吸入苯,正常对照组吸空气,6h/d,5天/周,300ml/m³及900ml/m³维持12周。末次吸苯后第2天,获取小鼠骨髓单个核细胞,利用流式细胞仪测骨髓细胞凋亡情况及用去乙酰化酶（HDAC）试剂盒测去乙酰化酶（HDAC酶）活性变化。结果 300ml/m³∶实验组小鼠骨髓细胞中早期凋亡细胞（AnnexinⅤ+PI-）比例（13.80%±5.31%）是对照组（8.33%±0.61%）的1.65倍（P<0.05）;晚期骨髓凋亡细胞（AnnexinⅤ+PI+）比例与对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。900ml/m³∶实验组小鼠骨髓细胞中早期凋亡细胞（AnnexinⅤ+PI-）比例（13.10%±5.39%）是对照组（7.16%±2.18%）的1.83倍（P<0.05）;实验组晚期凋亡骨髓细胞（AnnexinⅤ+PI+）比例（7.11%±3.54%）是对照组（4.54%±0.84%）的1.57倍（P<0.05）。（2）900ml/m³苯浓度吸入小鼠组骨髓单个核细胞去乙酰化酶活性[（7.89±2.58）×10^-3A值/微克]是正常对照组[（5.00±1.52）×10^-3A值/微克）]的1.58倍（P<0.05）。结论 苯吸入可致小鼠骨髓细胞产生凋亡坏死。苯吸入致小鼠骨髓细胞组蛋白去乙酰化酶活性升高。     

Toll样受体4在乙型肝炎相关性肝癌患者外周血CD14+单核细胞表面的表达及意义

目的 通过观察TLR4在乙型肝炎相关性肝癌患者外周血CD14⁺单核细胞表面的表达,探讨其在疾病发生、发展中的作用。方法 实验共选取慢性乙型肝炎患者25例（慢性乙型肝炎组）、乙型肝炎并肝癌23例（乙型肝炎相关性肝癌组）、健康对照16例（对照组）,利用流式细胞术检测研究对象外周血CD14⁺单核细胞表面TLR4阳性细胞表达百分率和平均荧光强度的几何均数（GMF）,并分析TLR4阳性细胞表达百分率和GMF与内毒素水平及CRP、PCT的相关性。结果 乙型肝炎相关性肝癌组TLR4阳性细胞表达百分率和GMF分别为79.56%±8.12%、54.14±12.28,较慢性乙型肝炎组（46.15%±5.35%、32.27±6.46）及正常对照组（14.89%±8.21%、15.21±6.87）显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）。乙型肝炎相关性肝癌患者TLR4阳性细胞百分率和TLR4 GMF与内毒素水平呈正相关（P<0.05）,与临床指标PCT、CRP无显著相关性（均P>0.05）。结论 TLR4在乙型肝炎相关性肝癌患者外周血CD14⁺单核细胞表面表达有显著升高,提示TLR4可能在乙型肝炎相关性肝癌的发生和发展中具有促进作用。     

三维适形放疗联合CIK细胞治疗晚期原发性肝癌患者的疗效

目的 观察三维适形放疗（3D-CRT）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）治疗晚期原发性肝癌患者的临床疗效。方法 选取2013年8月至2015年8月中国人民解放军第105医院肿瘤中心就诊的72例晚期原发性肝癌患者,依据治疗方法不同分为对照组和观察组,每组36例患者。观察组在接受3D-CRT后3个月内给予CIK细胞治疗2次。治疗后3个月,依据肝脏CT、甲胎蛋白（AFP）、流式细胞术检测治疗前后免疫功能的变化情况,综合分析3D-CRT联合CIK细胞治疗晚期原发性肝癌的疗效。结果 治疗结束3个月后,观察组的疾病控制率为80.6%,高于对照组的55.6%,差异有统计学意义（P<0.05）;两组治疗后肿瘤直径和AFP指标监测数据显示,观察组[（4.17±1.65）cm和（348.5±127.2）ng/mL]明显优于对照组[（5.32±1.63）cm和（464.9±134.8）ng/mL],差异均有统计学意义（P<0.05）;观察组CD₃⁺T细胞、CD₄⁺CD₈⁺T抑制/细胞毒性细胞及CD₁₆⁺CD₅₆⁺NK细胞均不同程度增加（P<0.05）。结论 在晚期原发性肝癌的治疗中,三维适形放疗联合CIK细胞治疗可以提高疾病的控制率、增强机体免疫力,有可行性,可进一步探讨。     

18F-FDG PET-CT与乳腺癌新辅助化疗疗效中的关联性分析

目的 本研究旨在探讨¹⁸F-FDG PET-CT与乳腺癌新辅助化疗疗效的关联性。方法 2014年1月~2015年12月,收集笔者医院收治的行新辅助化疗的乳腺癌患者98例。前瞻性分析¹⁸F-FDG PET-CT与乳腺癌新辅助化疗疗效的关联性。结果 与病理无效组相比,病理有效组患者SUV_max0显著增加（9.54±3.11 vs 6.12±3.21,P=0.015）;SUV_max1变化率显著增加（53%±17% vs 29%±11%,P=0.000）;SUV_max2变化率显著增加（61%±21% vs 34%±12%,P=0.000）。与未pCR组相比,pCR组患者SUV_max0显著增加（10.54±4.11 vs 5.87±2.21,P=0.000）;SUV_max1变化率显著增加（57%±17% vs 28%±10%,P=0.000）;SUV_max2变化率显著增加（64%±23% vs 33%±11%,P=0.000）。结论 ¹⁸F-FDG PET-CT可作为评价乳腺癌新辅助化疗效果的一种影像学方式,值得临床进一步推广。     

血红素加氧酶-1的表达对氟尿嘧啶诱导食管癌细胞凋亡的影响

目的 本研究探讨血红素加氧酶-1与氟尿嘧啶诱导食管癌细胞凋亡的关系。 方法 培养ECa109食管鳞癌细胞,实验组分别加入正常培养基,含20μmol/L、80μmol/L锌原卟啉(ZnppIX)的培养基培养12h,后更换为含100μg/ml 5-FU组培养;对照组予正常培养基培养;共培养96h后检测各组细胞凋亡情况。 结果 在凋亡早期细胞中(Annexin V⁺/PI^-),20μmol/L ZnppIX组(25.63%±6.52%)及80μmol/L ZnppIX(22.48%±5.59%)组显著高于5-FU组(12.89%±4.42%,P均<0.05)。在中晚期凋亡细胞(Annexin V⁺/PI⁺)中,20μmol/L ZnppIX组(25.17%±5.53%)显著低于5-FU组(39.89%±6.66%)及80μmol/L ZnppIX组(41.95%±2.92%,P均<0.01)。80μmol/L ZnppIX组caspase-3的活化率显著高于正常细胞(P<0.05)。 结论 ZnppIX抑制HO-1表达后,可以显著增加5-FU诱导的Eca109食管癌细胞凋亡率,caspase-3参与了其诱导细胞凋亡的过程。     

支气管哮喘患者外周血CD3+T细胞趋化因子受体表达的研究

目的 探讨支气管哮喘患者外周血CD3⁺T细胞趋化因子受体表达情况。方法 选取2017年1月—2017年12月山东省立第三医院就诊的40例支气管哮喘患者及同期该院体检的27例健康志愿者，采用流式细胞仪检测所有受试者外周血CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上趋化因子受体CXCR1、CXCR2、CXCR3、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR8的表达。比较轻、中度支气管哮喘患者、重度支气管哮喘患者及健康志愿者，以及不同剂量糖皮质激素使用者趋化因子受体表达的差异。结果 轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1、CCR7阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CCR7阳性表达率低于对照组（P <0.05）。轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。3组吸入不同剂量糖皮质激素患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1的阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。每天吸入>800 μg/g布地奈德组的患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1阳性表达率低于每天吸入< 400 μg/g布地奈德组的患者（P <0.05）。结论 重度支气管哮喘组患者外周血CD3⁺T细胞部分趋化因子表达减少，轻、中度哮喘患者Th1和Th2相关的趋化因子受体参与免疫应答，而重度支气管哮喘患者Th1/Th2应答下降。     

Effects of co-engraftment of Schwann cells with neural stem cells into rats with Parkinson disease

Neural stem cells （NSCs） are effective in treating Parkinsonian animals. Although cell transplantation is considered a promising treatment for Parkinson disease （PD）, its clinical use has been limited to only a few patients. The major limiting factors of this therapy are difficulty in obtaining sufficient viable embryonic mesencephalic tissue and the controversial ethical and/or legal issues raised by the use of human fetal allografts. Some reports suggest that Schwann cells （SCs） can promote the proliferation of embryonic stem cells and the induction of dopaminergic neurons. Our research focused on potential curative effects of co-graft SCs with mesencephalic stem cells into Parkinsonian animals and elucidating the underlying mechanisms.     

脾脏和胸腺淋巴细胞亚群对移植肿瘤的反应——流动细胞测量仪检测结果的分析

BALB/c小鼠移植EMT—6肉瘤细胞后一个月内,随着肿瘤生长,脾脏肿大,胸腺萎缩。用流动细胞测量仪和单克隆抗体间接荧光免疫技术检查了肿瘤生长过程中脾脏和胸腺淋巴细胞亚群的动态变化。带瘤小鼠与同龄对照相比,全脾有核细胞中IgM~+,Lyt_1~+和Lyt_2~+细胞均显著地持续增加;每毫克脾组织中IgM~+细胞稍有增多,但Lyt_1~+和Lyt_2~+细胞均于肿瘤生长的后期减少,Lyt_1~+和Lyt_2~+两个T淋巴细胞亚组的比例则呈进行性下降。胸腺中Lyt_1~+和Lyt_2~+细胞均随肿瘤生长而逐渐减少。讨论了淋巴细胞亚群变化的功能意义。     

DCs和CIK细胞的研究进展

近几年,随着肿瘤的过继免疫治疗的新近发展,DCs和CIK细胞治疗恶性肿瘤逐渐成为国内外关注的焦点。自上世纪80年代发现这种细胞起,人们对于DCs、CIK细胞生物学特征的认识一直在不断的更新,目前以DCs和CIK细胞为主的治疗恶性肿瘤的技术已经在国内临床开展,并有望成为肿瘤综合治疗研究的新方向。     

Research progress on the treatment of spinal cord injury with cellular transplantation

Spinal cord injury(SCI) is a severe trauma to the central nervous system(CNS). This article reviews recent advances in cellular transplantation to treat SCI. Transplanted cells can supply new neurons to replace injured ones, promote regeneration of axons and myelin sheath, modulate the inflammatory response, and thus promote recovery from traumatic injury of the CNS. Cellular transplantation is a promising potential method for the treatment of SCI.     

树突状细胞、Treg细胞在SLE伴血小板计数减少患者外周血中的表达

目的 探讨树突状细胞（DC）及CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺调节性T细胞（Treg）在系统性红斑狼疮（SLE）伴中重度血小板计数减少患者外周血中的表达及临床意义。方法 选取SLE伴中、重度血小板计数减少患者32例,SLE伴血小板计数正常患者28例,正常健康人30例,应用流式细胞术检测各组外周血中髓系DC（mDC）、浆细胞样DC（pDC）治疗前后比率变化及与Treg细胞的相关性,酶联免疫吸附法（ELISA法）检测外周血IL-12、IFN-α、TGF-β水平。结果 SLE伴血小板计数减少组外周血pDC比率显著低于SLE伴血小板计数正常组患者（P<0.05）。SLE伴血小板计数减少组激素治疗后pDC比率较治疗前减少,Treg细胞比率较治疗前增加,pDC与Treg细胞呈负相关（r=-0.537, P<0.05）。SLE伴血小板计数减少组患者外周血DC表面协同刺激分子CD86表达的MFI明显高于SLE伴血小板计数正常组及健康对照组。SLE患者外周血IL-12、IFN-α水平与健康对照组比较显著升高,TGF-β水平显著降低（P<0.05）。结论 pDC可能参与了SLE伴中重度血小板计数减少的免疫发病机制,并与Treg细胞有一定的相关性。     

自制爬片装置用于细胞爬片及细胞染色

目的利用自制爬片装置改进细胞爬片的制备方法。方法通过自制装置和传统方法制备细胞爬片,苏木精- 伊红染色法（HE 染色）观察细胞生长状态,比较两种细胞爬片制备方法的差异;利用自制装置制备同时给予3 种不同干预处理的细胞爬片,验证其应用于制备多干预条件细胞爬片;制备同时含有3 种不同细胞的集成爬片,验证其用于制作细胞集成爬片的应用。结果自制装置可简化细胞爬片流程,细胞直接贴于载玻片上生长,未出现污染和增殖受限,制作多干预或多种细胞集成爬片效果明确,无相互干扰现象。结论自制装置能更简便地制备以满足普通染色及特殊染色实验要求的细胞爬片,是一种更好的制备细胞爬片的方法。     

鼻咽癌患者组织中Treg细胞和Th17细胞与TNM分期相关性研究

目的:探讨Treg细胞和Th17细胞在鼻咽癌TNM分期组织中的表达及相关性.方法:选取我院鼻咽癌患者50例,鼻咽炎患者50例作为对照.采用免疫组织化学法检测初诊鼻咽癌TNM分期组织和鼻咽炎组织中Treg细胞和Th17细胞的表达,并分析其相关性.结果:各组组织中Treg细胞和Th17细胞阳性表达,鼻咽癌各组均高于鼻咽炎,差异具有统计学意义(P＜0.05),并随着分期逐步升高,Ⅰ期与Ⅲ、Ⅳa、Ⅳb期分别比较,差异具有统计学意义(P＜0.05),但Ⅰ、Ⅱ期及Ⅳa、Ⅳb期分别比较,差异无统计学意义(P＞0.05);鼻咽癌患者组织中Treg细胞与Th17细胞的百分率呈正相关性,具有统计学意义(P＜0.05).结论:Treg细胞和Th17细胞的异常表达可能涉及鼻咽癌的发生和发展过程;亦可能与鼻咽癌恶性进展密切相关.     

CIK与DC细胞联合治疗145例晚期恶性实体瘤

目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)和树突状细胞(DC)联合治疗晚期肿瘤. 方法 从外周血分离单个核细胞,体外经GM-CSF和白细胞介素4(IL-4)诱导产生DC细胞,淋巴细胞经干扰素γ(IFN-γ)、IL-2、CD3单抗和IL-1α体外诱导产生CIK细胞,采用流式细胞术检测CIK的表型,并回输患者进行治疗,至少接受3次治疗. 结果 82例可评价病灶的患者中,3例完全缓解(CR),7例部分缓解(PR);31例不可评价病灶的患者中,7例患者胸腹水消失,与治疗前相比,治疗后患者CD3 和 CD8 明显升高(P＜0.05). 结论 CIK细胞治疗晚期恶性实体瘤有一定的临床疗效,为该类患者的治疗提供一种有效的免疫治疗手段.     

DC-CIK联合化疗治疗晚期胃癌的近期疗效观察

目的:探讨树突状细胞(dendritic cell,DC)共培养细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)联合化疗治疗晚期胃癌患者的近期疗效?方法:选取28例确诊为晚期胃癌并采用DC-CIK联合化疗的患者为联合治疗组,选取临床资料相近的同期进行单纯化疗的28例晚期胃癌患者为对照组,观察两组患者治疗前后外周血中T细胞亚群?细胞因子及卡氏评分(Karnofsky,KPS)的变化及临床疗效,并记录其不良反应?结果:联合治疗组患者治疗后CD3+?CD4+?CD56+和CD4+/CD8+的比例无明显变化(P > 0.05),对照组CD3+?CD4+和CD4+/CD8+的比例治疗后明显下降(P < 0.05);联合治疗组的细胞因子IL-12和IFN-γ的水平治疗后有所上升(P < 0.05),治疗组IL-2?IL-12和TNF-α的水平治疗后有所下降(P < 0.05)?联合治疗组的疾病控制率为78.6%,与对照组(53.6%)的差别有统计学意义(P < 0.05),KPS评分总提高率为82.14%,与对照组的57.14%差别有统计学意义(P < 0.05)?结论:与单纯化疗相比,DC-CIK联合化疗能提高患者的免疫功能及生活质量,DC-CIK免疫治疗联合化疗可望成为胃癌有效的过继免疫治疗方法?