神经毒素在脊髓损伤中的作用

目的 探讨神经毒素兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）和神经肽在脊髓损伤的作用。方法 应用高效液相色谱法检测脊髓损伤后伤段组织中谷氨酸（Ｇｌｕ）天门冬氨酸（Ａｓｐ）两种ＥＡＡ的含量变化；应用放射免疫分析技术测定脊髓损伤段组织中神经肽之一强腓肽ＤｙｎＡ１－１３含量的变化；观察了蛛网膜下腔注射Ｇｌｕ，ＤｙａｎＡ１－１３兴奋性氨基酸受体拮抗剂３－（２－羧基哌嗪）丙基－１－磷酸（ＣＰＰ），ＤｙｎＡ１－１３抗血清（Ａｎ－     

脊神经节损伤介导的脊髓背角EAAs和IAAs变化的实验研究

目的：研究脊神经节（ＤＲＧ）炎性损伤时,脊髓背角兴奋性氨基酸（ＥＡＡｓ）、抑制性氨基酸（ＩＡＡｓ）含量和脊髓背角谷氨酸（Ｇｌｕ）、天门冬氨酸（Ａｓｐ）免疫组织化学的变化,及其与实验动物神经行为异常变化之间的关系。方法：健康家兔５４只,随机分为手术对照组（ｎ＝２４）;炎症损伤组（ｎ＝２４）和正常对照组（ｎ＝６）。采用组织氨基酸的含量分析仪测定脊髓背角Ｇｌｕ、Ａｓｐ、γ氨基丁酸（ＧＡＢＡ）、牛磺酸（Ｔａｕ）、苏氨酸（Ｔｈｒ）和色氨酸（Ｓｅｒ）含量,采用免疫组化法观察脊髓背角Ｇｌｕ和Ａｓｐ分布特点及变化。结果：ＤＲＧ炎症损伤介导脊髓背角ＥＡＡｓ和ＩＡＡｓ释放增加。结论：ＥＡＡｓ在痛觉过敏的形成和维持中具有重要作用,而ＩＡＡｓ的增加则与机体抗伤害性保护反应相关。ＤＲＧ炎症损伤初期,脊髓背角ＥＡＡｓ／ＩＡＡｓ动态平衡的破坏是伤害性神经细胞兴奋性损伤和伤侧肢体痛觉过敏的主要原因。     

强啡肽A在脊髓继发性损伤中阿片样及非阿片样受体机制的实验研究

为探明强啡肽Ａ在脊髓继发性损伤病理过程中的受体机制，本实验首先观察了鞘内注射抗强啡肽Ａ１～１３血清（ＡｎＤｙｎＡ）或高选择性阿片肽κ受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ（ｎｏｒ－ｂｉｎａｌｔｏｒｐｈｉｍｉｎｅ）对大鼠脊髓损伤后功能恢复的影响；然后，比较了ｎｏｒ－ＢＮＩ拮抗不同剂量强啡肽Ａ１～１３或强啡肽Ａ２～１７鞘内注射致瘫效果。神经功能和病理学观察结果表明，脊髓损伤后，鞘内分别注射ＡｎＤｙｎＡ１～１３或ｎｏｒ－ＢＮＩ均可改善大鼠神经功能的恢复，但无论是作用强度，还是持续时间，ＡｎＤｙｎＡ１～１３的功能都大大超过ｎｏｒ－ＢＮＩ；ｎｏｒ－ＢＮＩ能对抗低剂量（２０ｎｍｏｌ），而不能对抗高剂量（３０ｎｍｏｌ）ＤｙｎＡ１－１３鞘内注射所致瘫痪。Ｄｙ－ｎＡ２～１７不作用于阿片受体，但鞘内注射同样可引起大鼠双后肢瘫痪，预先鞘内注射阿片肽Ｋ受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ无预防或阻止其鞘内注射致瘫的作用。以上结果提示：强啡肽Ａ在大鼠脊髓继发性损伤作用中的受体机制是阿片样和非阿片样联合作用的结果。     

大鼠脊髓损伤后兴奋性氨基酸的变化及其对血流量的影响

采用Ａｌｌｅｎ＇ｓ打击法复制大鼠脊髓损伤（ＳＣＩ）模型，氨基酸微量检测技术和氢清除法分别测定伤段脊髓组织２４ｈ内兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）即谷氨酸（Ｇｌｕ）、天冬氨酸（Ａｓｐ）含量和脊髓灰质血流量（ＳＣＢＦ）的变化，并观察脊髓蛛网膜下腔注射ＥＡＡ受体激动剂Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）对ＳＣＢＦ的影响，探讨ＥＡＡ在ＳＣＩ中的作用。结果发现：ＳＣＢＦ在伤后１０ｍｉｎ即有明显下降，２ｈ较１ｈ略有回升，４～８ｈ又进一步下降，第二次下降与第一次下降相差显著。伤后脊髓蛛网膜下腔注射ＮＭＤＡ明显加剧ＳＣＩ后脊髓缺血。Ｇｌｕ、Ａｓｐ伤后１０ｍｉｎ均明显升高，１～２４ｈＡｓｐ较对照组明显降低，８ｈ较２ｈ略有回升；Ｇｌｕ在伤后１０ｍｉｎ有所下降，但仍高于对照组，４ｈ、８ｈ较２ｈ略增加。ＥＡＡ变化与ＳＣＢＦ呈显著负相关。结果提示ＳＣＩ后ＥＡＡ的过度释放是ＳＣＩ后继发损伤的重要因素。     

一氧化氮对伤段脊髓兴奋性氨基酸含量动态变化的影响及其意义

目的：为了探讨一氧化氮（ＮＯ）在继发性脊髓损伤中的作用机制。方法：本实验通过微透析技术及反相高效液相色谱荧光法动态地观测了ＮＯ对急性脊髓压迫伤后伤段脊髓局部兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量动态变化的影响。结果：脊髓伤前３０ｍｉｎ蛛网膜下腔注射左旋精氨酸（ＬＡｒｇ）明显升高了伤段脊髓组织谷氨酸（ＧＬＵ）及天门冬氨酸（ＡＳＰ）的浓度,而蛛网膜下腔注射亚硝基左旋精氨酸甲酯（ＬＮＡＭＥ）则降低了其上升的幅度。结论：急性脊髓损伤早期ＮＯ的产生能促进ＥＡＡ的释放,从而加重继发性脊髓损伤。     

一氧化氮对创办仍髓兴奋性氨基酸含量动态变化的影响及其意义

目的：为了探讨一氧化氮（ＮＯ）在继发性脊髓损伤中的作用机制。方法：本实验通过微透析及反相高效液相色谱荧光法动态地观测了ＮＯ对急性脊髓压迫伤后伤段脊髓局部兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量动态变化的影响。结果：脊髓伤前３０ｍｉｎ蛛网膜下腔注射左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）明显升高了伤段脊髓组织谷氨酸（ＧＬＵ）及天门冬氨酸（ＡＳＰ）的浓度,而蛛网膜下腔注射亚硝基或旋精氨 酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）则降低了其上升的幅度。     

硬膜外麻醉下血浆内源性阿片肽水平与胆心反射

采用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定３０例硬膜外麻醉胆囊切除术中血浆内源性阿片肽（ＥＯＰ）水平变化。并观察其与ＭＡＰ，ＨＲ变化间的相互关系，探讨ＥＯＰ有胆心反射中的作用，结果表明，硬膜外麻醉本身对ＥＯＰ释放无明显影响。进腹探查激活ＥＯＰ系统，血浆强啡肽（ＤｙｎＡ１－１３）水平呈上升趋势，β－内啡肽（β－ＥＰ）水平显著升高（Ｐ〈０．０５），牵拉／分离胆囊时胆心反射组血浆ＤｙｎＡ１－１３水平急剧增高（Ｐ〈     

实验性脊髓损伤后N－甲基－D－天门冬氨酸受体的变化及其意义

兴奋性氨基酸（ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙａｍｉｎｏａｃｉｄ，ＥＡＡ）已被证明在中枢神经系统的创伤中具有神经毒性作用。为进一步揭示其受体机制，本实验用大鼠脊髓突触质膜作受体制剂，［３Ｈ］ＣＰＰ作标记配基，建立体外Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体分析的方法，并以Ａｌｅｎ脊髓损伤模型分析了脊髓损伤后ＮＭＤＡ受体的改变。结果表明脊髓ＮＭＤＡ受体亲和力（Ｋｄ）为３．５１±０．２６ｎＭ，最大结合数量（Ｂｍａｘ）为６６２．８２±４７．５９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白质。脊髓损伤后ＮＭＤＡ受体的改变具有时间相关性，创伤后［３Ｈ］ＣＰＰ特异结合在损伤后急性期内逐渐减少，其中伤后４小时减少最明显（Ｐ＜０．０１），至２４小时已有恢复。Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析表明ＮＭＤＡ受体的改变表现为受体数量的减少（Ｐ＜０．０１），受体亲和力未见显著改变。这些结果为ＮＭＤＡ受体参与脊髓继发性损伤提供了证据。     

颈髓损伤后内皮皮及其受体mRNA表达与血脊髓屏障损害的关系

目的：为了探讨颈髓损伤后内皮素－１（ＥＴ－１）ｍＲＮＡ、内皮素受体－Ａ（ＥＴＲ－Ａ）ｍＲＮＡ与血脊髓屏障损害的关系。方法：应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测颈髓损伤后颈髓组织ＥＴ１ｍＲＮＡ、ＥＴＲ－ＡｍＲＮＡ表达,观察伤后血脊髓屏障通透性变化。结果：伤后６～７２ｈ颈髓组织ＥＴ１ｍＲＮＡ、ＥＴＲ－ＡｍＲＮＡ均较对照组明显增高（Ｐ〈０．０１）。伤后６～７２ｈ颈髓组织伊文思蓝含量、水含量呈不同程     

家兔脊髓缺血损伤后谷氨酸受体活性变化

目的：探讨谷氨酸（Ｇｌｕ）及其受体（ＧｌｕＲ）在脊髓缺血过程中的量变特征在继发损伤中的作用及２氨基膦酸基戊酸（ＡＰＶ）的治疗作用。方法：选用体重２～２５ｋｇ的日本大耳白家兔７０只,用腰动脉分支阻断法建立脊髓缺血模型,用放射配基结合分析法检测脊髓缺血损伤后０５～２４ｈ期间及在缺血６０ｍｉｎ时用ＡＰＶ处理后脊髓神经细胞膜的ＧｌｕＲ活性（Ｂｍａｘ,ＫＤ）。结果：缺血６０ｍｉｎ后ＧｌｕＲ的最大结合量降低,亲和力升高,开始再灌流后最大结合量迅速升高,至２ｈ到达高峰,之后迅速下降,至再灌流４ｈ降至最低,此后缓慢回升,而亲和力在再灌流０５ｈ时继续升高,然后下降,再灌流２ｈ降至最低,此后趋势与最大结合量变化相反。ＡＰＶ在再流灌早期使受体活性增高,再灌流４ｈ后无显著性差异。结论：Ｇｌｕ通过其受体中介参与了脊髓缺血再灌流损伤,但在缺血再灌流过程中ＧｌｕＲ活性的变化可能具有不同的作用效应,同时也说明脊髓继发性损伤机制单以Ｇｌｕ兴奋性损伤是解释不了的。