Dact1基因在结直肠癌组织中的表达及其相关性研究

目的：观测Dact1基因在结直肠癌组织的表达及其启动子甲基化状态,并探讨它们之间的关系及在结直肠癌发生中的作用.方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测结直肠癌组织、癌旁组织各50例及正常对照组织20例Dact1基因mRNA的表达情况,甲基化特异性PCR（MSP）检测Dact1基因启动子甲基化状态.结果：结直肠癌组中,9例Dact1基因mRNA失表达（18%）,20例表达低于正常对照组（40%）;癌旁组织组中,1例Dact1基因mRNA失表达（2%）,3例表达低于正常对照组（6%）;正常对照组中,1例Dact1基因mRNA低表达（5%）.Dact1基因在癌组织、癌旁组织、正常对照组织中的甲基化阳性率分别为46%、12%、5%,癌组织组与癌旁组织组及正常对照组阳性率比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）,而癌旁组织组和正常对照组阳性率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.Dact1基因mRNA的失表达（低表达）与其启动子甲基化状态的相关性分析有统计学意义（P＜0.05）.结论：Dact1基因mRNA的失表达（低表达）可能参与了结直肠癌的发生发展,其失表达可能与Dact1启动子区甲基化相关.     

实时荧光定量PCR检测结直肠癌UbcH10基因的表达

目的：通过检测UbcH10 mRNA在结直肠癌中的表达,探讨UbcH10作为结直肠癌诊断标志物的可能性。方法：采用Trizol提取组织总RNA,RT-PCR获得UbcH10 cDNA,实时荧光定量PCR检测45例结直肠癌患者肿瘤组织与相应癌旁正常组织中UbcH10 mRNA的丰度。结果：在所有肿瘤组织样本中UbcH10 mRNA的相对表达量与其自身的癌旁正常组织样本中的相对表达量相比明显升高,平均表达水平是正常组织的10倍以上（0.0802±0.0907vs0.0079±0.0088,P〈0.01）,其中超过20倍的占37.78%（17/45）。结论：UbcH10基因在结直肠癌患者肿瘤组织中过度表达,可作为结直肠癌诊断的潜在肿瘤标志物及结直肠癌基因治疗的新靶点。     

ERK5在结直肠癌组织中的表达及其与结直肠癌转移的关系

目的: 检测和分析细胞外信号调节激酶5(ERK5)蛋白在原发性结直肠癌组织和癌旁正常黏膜组织中的表达情况及其与结直肠癌临床病理参数的关系,探讨ERK5的临床意义。方法: 使用组织芯片和免疫组化的方法检测338例原发性结直肠癌癌组织和80例癌旁正常组织中ERK5的表达,分析ERK5表达与结直肠癌的临床病理参数及预后的相关性。结果:80例癌旁正常黏膜中,ERK5低表达59例(73.8%)、高表达为21例(26.2%);338例结直肠癌组织中ERK5低表达204例(60.4%)、高表达134例(39.6%);二者中的ERK5蛋白表达有显著差异(P<0.05)。在338例结直肠癌组织中,27例发生远处转移患者的癌组织中ERK5高表达率为63.0%,而311例未发生远处转移患者的癌组织中ERK5高表达率为37.6%,二者之间有显著差异(P<0.05)。但癌组织中ERK5的表达水平与患者性别、年龄、体重指数、肿瘤位置、T分期、N分期、TNM分期和分化程度无明显相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示在结直肠癌组织中ERK5高表达的病人总体5年生存率与低表达组无明显差异(P>0.05)。结论:ERK5蛋白在癌组织中的表达较癌旁正常组织高;发生远处转移的结直肠癌组织中ERK5蛋白的表达水平明显高于未发生远处转移的癌组织中ERK5水平。ERK5可能是一个促进肿瘤远处转移的因子。     

Tpl-2表达与结直肠癌发生发展的关系及意义

目的: 研究Tpl-2在结直肠癌旁正常黏膜、结直肠腺瘤以及结直肠腺癌中的蛋白表达情况,及其与结直肠癌临床病理参数的关系,探讨Tpl-2在结直肠癌发生发展中的意义。方法: 使用组织芯片及免疫组化方法检测Tpl-2在结直肠正常黏膜、腺瘤、癌组织中的表达情况,分析Tpl-2表达与结直肠癌的临床病理参数的相关性。结果: 24例癌旁正常黏膜中,Tpl-2低表达20例(83.3%)、高表达为4例(16.7%);24例腺瘤组织中Tpl-2低表达17例(70.8%)、高表达7例(29.2%);96例癌组织中Tpl-2低表达31例(32.3%)、高表达65例(67.7%)。与正常和腺瘤比较,癌组织Tpl-2表达均明显增高(P<0.01)。腺瘤和正常黏膜中Tpl-2表达无显著差异(P>0.05)。在96例结直肠癌组织中,Tpl-2表达与N分期、TNM分期相关(P<0.05),与性别、年龄、身高体重指数(BMI)、肿瘤大小、分化程度、T分期、M分期以及K-ras基因突变状况无明显相关(P>0.05)。结论: Tpl-2与结直肠癌发生及疾病进展具有较密切的关系,可能是一个促癌因子。     

趋化因子SDF-1调控结直肠癌细胞上皮-间质转化

目的通过检测Twist、SDF-1、E-cadherin在结直肠癌及癌旁组织中的表达,探讨三者与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关性,为肿瘤的分子靶向治疗提供可能的靶标。方法收集结直肠癌和对应癌旁正常新鲜标本组织40例和结直肠癌组织及对应癌旁组织蜡块90例,利用免疫组化SP法和qRT-PCR法检测结直肠癌组织中SDF-1及EMT相关因子E-cadherin、Twist的表达,统计学分析SDF-1表达与E-cadherin、Twist表达之间的相关性。结果 qRT-PCR结果显示,与对应癌旁组织相比,结直肠癌组织中SDF-1、Twist mRNA的表达水平明显升高,而Ecadherin mRNA表达水平显著下降,差异有统计学意义(P0.05);结直肠癌组织中SDF-1、Twist的阳性率分别为75.56%、62.22%,明显高于对应癌旁组织,而E-cadherin在肿瘤中的阳性率为28.89%,显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。SDF-1表达与E-cadherin表达呈负相关,而与Twist表达呈正相关。结论趋化因子SDF-1高表达可能参与结直肠癌细胞的EMT过程,Twist高表达和Ecadherin低表达提示EMT现象参与结直肠癌的形成及转移过程,并促进肿瘤的生成和转移。     

应用蛋白质组学分析结直肠癌促泌素和糖调节蛋白78蛋白变化及其意义

目的分析结直肠癌、配对正常黏膜组织差异表达蛋白质,寻找与结直肠癌发生、发展相关的分子标记物。方法固相pH梯度双向凝胶电泳分离结直肠癌患者配对癌及正常黏膜组织的总蛋白,液相色谱串联质谱鉴定差异表达蛋白质点。半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）、Western blot及免疫组织化学（EnVision法）方法检测促泌素（SCGN）及糖调节蛋白78（GRP78）两个差异表达蛋白质及组织定位,并检测54例神经内分泌肿瘤SCGN的表达。结果比较结直肠癌、配对正常黏膜组织蛋白质表达图谱,共获得5倍以上差异蛋白质点35个,癌组织中表达上调15个、下调20个。质谱分析鉴定14个蛋白质。RT-PCR及Western blot证实结直肠癌组织SCGN低表达,免疫组织化学染色发现正常结直肠黏膜神经内分泌细胞及98％（53／54）的神经内分泌肿瘤SCGN阳性。GRP78蛋白在结直肠癌组织中的表达明显高于正常黏膜组织,但在mRNA水平上癌组织和正常组织之间差异无统计学意义。结论双向凝胶电泳结合质谱分析是筛选肿瘤异常表达蛋白质的有效手段,所获得的35个差异表达候选蛋白质可能与结直肠癌的发生、发展有关。SCGN是一个候选神经内分泌标记物,GRP78蛋白表达增高可能涉及翻译后修饰。     

Gab2在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的:探讨Gab2在结直肠癌组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组化方法检测78例结直肠癌及46例癌旁正常组织中Gab2的表达水平,并结合临床病理学资料进行统计学分析,Western blot方法检测10对结直肠癌组织及相对应的癌旁正常组织中Gab2的表达状况。结果:免疫组化检测结果显示78例结直肠癌组织中Gab2蛋白表达阳性率为53.85%,而癌旁正常组织中Gab2蛋白多不表达或弱表达,两组结果比较差异有显著性(P0.001);Gab2蛋白在结直肠癌中的表达与肿瘤TNM分期及有无淋巴结转移呈正相关(P0.05),与肿瘤大小、分化程度无明显相关性(P0.05);Western blot检测结果显示结直肠癌组织中Gab2蛋白表达显著高于相对应的癌旁正常组织(P0.05)。结论:Gab2在结直肠癌组织中过表达,可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用。     

结直肠癌组织中CD151表达及其临床意义

目的 探讨结直肠癌组织中CD151的表达及其与结直肠癌发生、发展和转移的关系.方法 采用实时荧光定量PCR技术检测22例肠癌组织及癌旁组织中CD151mRNA的表达,采用免疫组化SP法检测此22例及另67例石蜡包埋肠癌组织及癌旁组织中CD151蛋白的表达,并分析其与肠癌临床病理因素之间的关系.结果 CD151mRNA和蛋白在结直肠癌中的表达明显高于癌旁组织,其蛋白的表达与结直肠癌浸润深度、淋巴结转移和TNM分期密切相关,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 CD151可望成为与结直肠癌浸润、转移有关并提示预后不良的指标.     

结直肠癌组织中NF-κB、Notch-1和SOCS-1的表达及临床意义

目的:探讨结直肠癌组织中NF-κB、Notch-1和SOCS-1的表达及临床意义,为临床治疗结直肠癌提供依据。方法:选取55例手术切除的结直肠癌组织标本作为研究组,同时收集癌旁正常大肠黏膜组织标本30例作为对照组,采用免疫组织化学SP法和Western blot检测研究组和对照组中NF-κB、Notch-1和SOCS-1蛋白的表达,分析其与患者病理因素之间的关系。结果:免疫组织化学SP法检测结果:NF-κB蛋白和Notch-1蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率均明显高于正常大肠黏膜组织中阳性表达率(P0. 05),SOCS-1蛋白在正常大肠黏膜组织中的阳性表达率高于结直肠癌组织中的阳性表达率(P0. 05); Western blot检测结果:NF-κB蛋白和Notch-1蛋白在正常大肠黏膜组织中的表达均低于结直肠癌组织中的表达(P0. 05),SOCS-1蛋白在正常大肠黏膜组织中的表达高于结直肠癌组织中的蛋白表达(P0. 05); NF-κB、Notch-1在无淋巴结转移、未浸润浆膜及高中分化的结直肠癌组织中表达明显低于有淋巴结转移、浸润浆膜及低分化的结直肠癌组织的表达,SOCS-1在高中分化结直癌组织的表达明显高于低未分化的结直肠癌中的表达。患者结直肠癌组织中NF-κB与Notch-1表达水平呈正相关性,SOCS-1表达水平与NF-κB、Notch-1呈负相关性。结论:NF-κB、Notch-1和SOCS-1的异常表达与结直肠癌的发生发展有密切联系,其表达参与肿瘤形成、发展、侵袭和转移,可以作为肿瘤预后判断的参考指标。     

结直肠癌中IGF-Ⅱ、IGFBP-6的表达及意义

目的：观察胰岛素样生长因子（ insu1in-1ike growth factor,IGF）-Ⅱ及胰岛素样生长因子结合蛋白（ insu1in-1ike growth factor binding protein,IGFBP）-6在结直肠癌（ co1orecta1 cancer,CRC）组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化MaxVision法及RT-PCR法检测50例CRC组织和50例对应癌旁正常结直肠黏膜组织中IGF-Ⅱ及IGFBP-6的表达。结果（1）CRC组织中IGF-Ⅱ蛋白及mRNA表达量明显高于癌旁正常结直肠黏膜组织;CRC组织中IGFBP-6蛋白及mRNA表达量均明显低于癌旁正常结直肠黏膜组织;（2）IGF-Ⅱ和IGFBP-6表达与肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移及Dukes分期有关（P<0.05）;IGF-Ⅱ及IGFBP-6表达与患者性别、年龄、肿瘤分化程度无关（ P>0.05）。结论 IGF-Ⅱ及IGFBP-6的蛋白表达及mRNA表达量与CRC临床病理特征有明显相关性。联合检测IGF-Ⅱ及IGFBP-6有可能作为CRC发生及预后的生物学指标,为CRC的诊断及治疗提供新的方案。     

Lumican基因在大肠癌中的表达及其预后的关系

目的 研究Lumican基因在大肠癌及癌旁正常组织中的表达,并探讨其与大肠癌生物学行为及预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法,检测205例大肠癌原发灶及50例癌旁正常组织中lumican基因表达情况,观察其表达与大肠癌生物学行为及预后的关系.结果 Lumican在大肠癌组织中阳性表达率为75.61%(155/205);而在大肠癌旁正常组织中Lumican表达阳性率仅为12.0%(6/50),且均为弱阳性表达.Lumican表达水平与肿瘤浸润深度和病理分型密切相关(x2=16.201,P=0.013;x2=9.506,P=0.029),而与肿瘤分期和淋巴结转移无关(x2=15.457,P=0.079;x2=1.887,P=0.596).Lumican表达阴性组、弱阳性组、阳性组和强阳性组患者平均生存时间分别为64.9月、56.6月、41.5月和36.4月,组间差别有统计学意义(x2=35.066,P=0.000).结论 Lumican表达水平与大肠癌侵袭能力密切相关,并可作为判断大肠癌患者预后的重要指标之一.     

PXMP4促进结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨过氧化物酶体膜蛋白4(peroxisomal membrane protein 4,PXMP4)对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 采用生物信息学分析65例配对结直肠癌组织中PXMP4 mRNA的表达.应用免疫组化检测112例配对结直肠癌组织中PXMP4的表达,并进行临床病理相关分析;利用RT-P...     

Lumican and decorin are differentially expressed in human breast carcinoma

Previous studies have shown that lumican is expressed and increased in the stroma of breast tumours. Lumican expression has now been examined relative to other members of the small leucine-rich proteoglycan gene family in normal and neoplastic breast tissues, to begin to determine its role in breast tumour progression. Western blot study showed that lumican protein is highly abundant relative to decorin, while biglycan and fibromodulin are only detected occasionally in breast tissues (n=15 cases). Further analysis of lumican and decorin expression performed in matched normal and tumour tissues by in situ hybridization showed that both mRNAs were expressed by similar fibroblast-like cells adjacent to epithelium. However, lumican mRNA expression was significantly increased in tumours (n=34, p<0.0001), while decorin mRNA was decreased (p=0.0002) in neoplastic relative to adjacent normal stroma. This was accompanied by a significant increase in lumican protein (n=12, p=0.0122), but not decorin. Further evidence of altered lumican expression in breast cancer was manifested by discordance between lumican mRNA and protein localization in some regions of tumours but not in adjacent morphologically normal tissues. It is concluded that lumican is the most abundant of these proteoglycans in breast tumours and that lumican and decorin are inversely regulated in association with breast tumourigenesis.     

高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在不同分化胃癌细胞和组织中的差异表达及意义

目的: 分析高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(GMⅡ)在不同分化人胃癌细胞系和胃癌组织中的差异表达,以探讨GMⅡ在胃癌发生发展中的作用。方法: 收集38例胃腺癌及30例癌旁正常胃黏膜组织,体外培养3株不同分化胃癌细胞系(高分化MKN-28、中分化SGC-7901、低分化BGC-823)和永生化正常胃黏膜上皮细胞系(GES-1),分别应用RT-PCR、免疫组化和Western Blotting检测GMⅡmRNA和蛋白的表达。结果: GMⅡ阳性表达定位于胞浆,其在正常胃粘膜组织及高、中、低分化胃癌组织中的阳性表达率分别为53% (16/30)、 63%(5/8)、83%(15/18)和100%(12/12),各组间差异显著(P<0.05)。细胞爬片显示GMⅡ在正常胃黏膜上皮细胞系和高、中、低分化胃癌细胞系中的表达逐渐增强。与正常胃黏膜上皮细胞系GES-1相比,3种胃癌细胞系MKN-28、SGC-7901、BGC-823中GMⅡmRNA及蛋白表达水平显著增加(P<0.05),且GMⅡ在低分化胃癌细胞系BGC-823中表达最高,而在高分化胃癌细胞系MKN-28中表达最低。与正常胃黏膜组织相比,高、中、低分化胃癌组织中GMⅡmRNA及蛋白表达水平亦显著增加(P<0.05),且GMⅡ表达水平在高分化胃癌组织中最低,而在低分化胃癌组织中最高。结论: GMⅡ参与了胃癌的发生和发展, 其表达水平与胃癌低分化程度更密切相关。