气隙式气敏电极的制备及性能

一种基于酸碱平衡的气隙式气敏电极,用标准玻璃磨口件及平头pH电极改制,性能优良,制作简便。用作氨电极时(以0.02mol/L NH_4Cl为中介液),测得NH_4Cl浓度在1×10~(-4)～1×10~(-1)mol/L,电极线性良好,30℃时斜率为56mV/PX;当用作二氧化碳电极时(以0.02mol/L NaHCO_3为中介液),测得NaHCO_3浓度在5×10~(-3)～5×10~(-2)mol/L,电极线性良好,级差为1.04pH。     

山莨菪碱对乙酰胆碱和去甲肾上腺素引起的兔虹膜释放前列腺素的影响

本文报告了654-2对Ach及NE引起的兔虹膜释放PGE_2及6-Keto-PGF_1α作用的影响。Ach及NE使虹膜释放PG_s增加,654-2对Ach释放PG_s的作用呈剂量依赖性抑制,当654-2浓度为3×10~(-5)mcl/L时,Ach(5×10~(-5)mol/L)引起的PGE_2及6-Keto-PGF_1α的释放量分别降低31％和30％。654-2浓度高于6×10~(-5)mol/L时显著抑制NE(5×10~(-5)mol/L)释放虹膜PG_5的作用,当654-2浓度为3×10~(-4)mol/L时,使NE增     

马来酰肼的示波极谱法测定

在0.2mol/L LiCl 底液中,用示波极谱法一次导数或二次导数测定马来酰肼,产生一个清晰的阴极波。峰电位为-1.95伏(Vs SCE)。当马来酰肼浓度为1.0×10~(-4)～2.0×10~(-5)mol/L 和1.0×10~(-5)～4.0×10~(-6)mol/L 时(PH5.6～9.3),均与峰电流呈良好的线性关系。检出限量为2.0×10~(-6)mol/L。各种方法间的误差,其相对偏差小于0.3%。作者认为,本研究为测定马来酰肼的纯度提供了一种简单、快速、准确的分析方法。     

β-内啡肽对正常人外周血单核细胞膜HLA-DR抗原表达的影响

浓度为3.2×10~(-8)mol／L的β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)可使人类白细胞抗原-DR分子阳性(HLA-DR~+)的人单核细胞(Monocyte,Mon)的百分率显著增加(P＜0.01)。正常血浆浓度及低于3.2×10~(-8)mol/L的β-内啡肽对人单核细胞HLA-DR抗原的表达无明显影响。     

他莫昔芬对子宫内膜癌细胞株增殖的影响

目的 探讨他莫昔芬(Tamoxifen,TAM)对人子宫内膜癌Ishikawa细胞体外增殖的影响.方法 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法研究他莫昔芬对Ishikawa细胞增殖的影响.结果 TAM浓度为1×10-8～1×10-6mol/L时,呈剂量依赖性促进Ishikawa细胞的增殖,TAM浓度为1×10-5mol/L时,可抑制细胞的增殖.而且这种促进作用呈现剂量-时间-效应关系.结论 低浓度的TAM具有促进子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞增殖的作用.     

三尖杉酯碱与牛血清白蛋白相互作用的研究

本文于体外进行了天然抗肿瘤药物三尖杉酯碱与牛血清白蛋白相互作用的研究,采用平衡透析法(pH=7.40±0.01,μ=0.2)在恒温25±1℃,振荡频率为110～120次/min,振荡16～18h的条件下,测定了其结合参数。实验结果表明,当三尖杉酯碱浓度为8.5×10~(-4)～1.55×10~(-3)mol/L,牛血清白蛋白浓度固定为4.5×10~(-4)mol/L时,其结合常数为3.51×10~2,结合部位数为0.93即三尖杉酯碱对牛血清白蛋白只有一个结合部位群。经荧光光谱法检测,证明该结合部位群在牛血清白蛋白分子的U部位。     

伪麻黄碱对离体豚鼠心房及大鼠肛尾肌肾上腺素α受体的作用

目的研究伪麻黄碱(p-Eph)对肾上腺素α受体的作用.方法心房及肛尾肌离体标本张力实验.结果p-Eph(10-6～1×10-4mol/L)浓度依赖性增加豚鼠右心房率及左心房收缩力的作用,不受酚妥拉明(10-5mol/L)的影响;p-Eph(10-6～3×10-4mol/L)浓度依赖性收缩大鼠离体肛尾肌,受育亨宾(10-6mol/L)和哌唑嗪(10-7mol/L)预处理而抑制.结论伪麻黄碱对心房α受体无影响,对肛尾肌肾上腺素α受体有激动作用.     

连续顶空气相色谱法测定微生物活性研究

以大肠杆菌(E.coli)为实验菌种,CO_2为测定指标.10~(?)个/ml菌液浓度的萄葡糖肉汤培养液。在顶空分析瓶中38℃培养。每隔1h顶空气相色谱法(HS-GC)测定CO_2,CO_2随时间变化相关曲线:Y=a+bx+cx~2;(r>0.98)。对4次测定曲线方程作统计分析,差异无显著性(P>0.05).CO_2检出限为2mmol/L。重金属对E.coli生长有抑制作用,其影响顺序为As_2O_3>CdCh_2>Fb(Ac))_2,阈浓度分别为3.10×10~(-5)mol/L、1.6×10~(-4)mol/L、1.33×10~(-3)mol/L。     

ANF和ACTH对体外培养的人正常肾上腺组织分泌醛固酮的影响

将体外培养的人正常肾上腺组织,用不同浓度的心钠素(atrial natriuretic factor,ANF)和ACTH作用不同时间,观察其醛固酮分泌的变化。结果表明:ANF10~mol/L作用0.5h能刺激正常肾上腺组织分泌醛固酮,而作用24h则呈现抑制作用;同浓度ANF能抑制同时有ACTH10~(-8)mol/L参与作用的醛固酮分泌。ACTH10~(-8)moL/L单独作用不能刺激正常肾上腺组织分泌醛固酮,当浓度增加到3×10~(-8)或5×10~(-8)mol/L时才能使醛固酮分泌增加。以相同浓度的ANF和ACTH(3×10~(-8)或5×10~(-8)mol/L)同时作用于肾上腺组织,ANF不能完全抑制由ACTH引起的醛固酮分泌增加的作用。提示体外培养的正常肾上腺组织分泌醛固酮的反应与ANF和ACTH的剂量及作用时间有关。     

丹酚酸B及欧芹素乙对溶血磷脂酰胆碱刺激牛主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的　研究溶血磷脂酰胆碱 (L PC)对牛主动脉平滑肌细胞 (BASMC)增殖的影响及丹酚酸 B和欧芹素乙的抑制作用。方法　体外培养 BASMC,用 MTT法测定细胞增殖。结果　 L PC在 2 .5× 10 - 9～ 2 .5× 10 - 6 g/ L 剂量依赖性地促进 BASMC增殖 ;丹酚酸 B(1× 10 - 9～ 1× 10 - 6 mol/ L)和欧芹素乙 (1× 10 - 7～ 1× 10 - 3m ol/ L)浓度依赖性地抑制 L PC的作用。结论　 L PC可促进 BASMC增殖 ,丹酚酸 B和欧芹素乙可抑制 L PC的作用     

ATRA诱导肺癌细胞株A549分化与凋亡

目的:体外研究维甲类化合物的衍生物ATRA对A549肺癌细胞株作用,探讨ATRA对肿瘤防治作用的可能机制。方法:取对数生长期的常规培养的肺癌A549细胞用于试验,试验分1×10-5mol/L,1×10-6mol/L,1×10-7mol/L三组药物浓度和对照及空白对照5组,加药48h进行MTT测定,第6 d对1×10-5mol/L,1×10-6mol/L及对照组细胞进行流式细胞检测,并对1×10-5mol/L,1×10-6mol/L浓度进行电镜观察。结果:不同浓度ATRA对细胞增殖有明显地抑制作用,与阴性对照组比较,有统计学意义(P<0.01)。增殖抑制有良好剂量效应关系,(r=0.968),细胞阻滞于G0/G1期,高浓度组电镜下见凋亡细胞。结论:ATRA可诱导A549细胞分化及凋亡,为临床应用ATRA化学预防肺癌提供理论依据。     

荧光光谱法研究锆离子存在下槲皮素及人血清白蛋白的相互作用

目的 采用荧光光谱法研究有无锆离子（Zr^4＋）共存时槲皮素与人血清白蛋白（HSA）的相互作用。方法 于10 mL的比色管中,依次加入0.20 mol/L Tris-HCl缓冲溶液（pH 7.40）2.50 mL,0.10 mol/L NaCl溶液1.0 mL,一定量的HSA溶液,Zr^4＋溶液,槲皮素溶液,用二次蒸馏水定容至10 mL。HSA荧光激发/发射波长为281/352 nm,激发和发射光狭缝宽度为3 nm,在波长300～500 nm内记录荧光光谱。结果 测得了有无锆离子存在时槲皮素-HSA结合反应的平衡常数和结合摩尔位点数分别为1.032×10⁶ L/mol、2.964×10⁵ L/mol,1.13、1.07;确定槲皮素-HSA的作用类型为静态猝灭过程。结论 锆离子、槲皮素对HSA荧光均有猝灭作用,而且二者共存时对HSA荧光有协同猝灭作用,其猝灭机制为槲皮素与锆离子形成配合物后再对HSA的荧光有猝灭作用,而不是槲皮素和锆离子各自猝灭的简单累加。     

叶酸受体靶向土大黄苷前药与HSA相互作用研究

目的 从分子水平上研究叶酸受体靶向土大黄苷前药(FRHA)与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的结合作用.方法 模拟生理条件,采用荧光光谱和紫外-可见光谱研究FRHA与HSA结合反应的光谱学特征,探讨药物对蛋白质内源性荧光的淬灭机制,并结合三维、同步荧光光谱和圆二色谱分析FRHA对HSA微环境及构象的影响.结果 FRHA-HSA复合物的形成将导致HSA发生荧光淬灭,298、302、306和310 K时FRHA与HSA相互作用的结合常数分别为1.4322×105、1.1793×105、0.9334×105和0.7896×105 L/mol.由实验计算出热力学参数焓变ΔH为-38.772 kJ/mol,熵变ΔS为-31.39 J/(mol·K).结论 FRHA-HSA复合物的形成是自发进行的,范德华力和氢键作用力是使该复合物稳定的主要作用力,并且复合物的形成使HSA的微环境和构象发生改变,进而导致HSA发生荧光淬灭,淬灭机制为静态淬灭.     

碱性成纤维细胞生长因子对间充质干细胞增殖的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对间充质干细胞(MSCs)增殖的影响及其信号机制。方法:全骨髓贴壁法培养MSCs,流式细胞仪分析其表面MSCs标记(CD45、CD34、CD90、CD29)以及成骨、成脂肪等多向诱导分化潜能,鉴定其特征。MTT法分析不同浓度bFGF对MSCs增殖的影响,确立最佳浓度bFGF诱导MSCs增殖的时间特征,分别以磷脂酰肌醇3-激酶、促分裂素原活化蛋白激酶、磷脂酶C、蛋白激酶C、钙通道和钙泵选择性抑制剂等处理P3MSCs后,观察其对bFGF介导MSCs增殖的影响。结果:培养的MSCs表现CD90、CD29强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;bFGF诱导MSCs增殖呈时间和剂量依赖特征,5.4×10-4mol/L bFGF作用48 h时MSCs增殖达峰值;磷脂酶C阻断剂U73122、钙通道阻断剂和选择性蛋白激酶C阻断剂等明显抑制了bFGF所介导的MSCs增殖效应;尤其是非选择性PKC抑制剂Straurosporine、钙泵选择性抑制剂thapsigargin以及蓝尼定受体抑制剂Ryandoine均抑制bFGF所诱导的MSCs增殖。结论:bFGF通过Ca2+/PKC/Erk1/2途径促进MSCs的增殖。     

促性腺激素释放激素类似物那法瑞林对人乳腺癌细胞BCaP-37生长的影响

目的：观察促性腺激素释放激素(LHRH)类似物那法瑞林对体外培养的人乳腺癌细胞BCaP-37生长的影响。方法：培养的BCaP-37细胞,经下列条件作用4 d后进行细胞计数：(1) 加入10-5-10-9mol/L的那法瑞林;(2)加入10-7-10-10mol/L的雌二醇(E2);(3)在含10-8mol/L E2的条件下,加入10-6-10-8mol/L的那法瑞林或他莫昔芬;(4)加入10ng/ml或50ng/ml的表皮生长因子(EGF);(5)在含10ng/ml EGF的条件下,加入10-5-10-7mol/L的那法瑞林。结果：那法瑞林在10-5-10-9mol/L浓度下对BCaP-37培养细胞的生长无显著抑制作用,在10-6-10-8mol/L浓度下可拮抗10-8mol/L E2对BCaP-37细胞的生长促进作用,对10ng/ml EGF抑制BCaP-37细胞生长的作用无显著影响。他莫昔芬拮抗E2促进BCaP-37生长的作用与那法瑞林相似。结论：那法瑞林对人乳腺癌细胞BCaP-37体外培养生长无显著抑制作用,但能拮抗E2对BCaP-37细胞的生长促进作用。     

胃泌素干预影响人结肠癌细胞P190RhoGAP磷酸化的机制

目的:研究胃泌素对人结肠癌细胞P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平的影响。方法:使用胆囊收缩素2受体(CCK2R)的真核表达载体pCR3.1/CCK2R转染人结肠癌细胞株Colo320,上调胃泌素表达;使用胃泌素拮抗剂下调胃泌素表达。使用相同浓度的胃泌素(1×10-7mol/L)按时间梯度刺激细胞;采用蛋白质印迹法检测总FAK、酪氨酸磷酸化的FAK的表达情况,并确定FAK最大磷酸化时间点;以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测FAK最大磷酸化时间点的P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平。结果:胃泌素引起FAK最大酪氨酸磷酸化作用时间点为12 h,胃泌素刺激12 h较0 h、胃泌素拮抗剂+胃泌素刺激12 h后P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平明显增加。结论:P190RhoGAP为FAK的下游信号分子,酪氨酸磷酸化的P190RhoGAP在胃泌素-CCK2R-FAK信号通路引起肿瘤细胞的侵袭、浸润、转移过程中发挥重要作用。     

香草醛缩氨基均三唑席夫碱对肝癌细胞分化相关酶和蛋白的影响

目的:研究香草醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞SMMC-7721的诱导分化作用。方法:用不同剂量的3-吡啶-3-基-4-[(4-羟基-3-甲氧基-苯亚甲基)氨基]-5-甲硫基-1,2,4-三唑(LH-37)与SMMC-7721细胞共同培养,以MTT法检测细胞增殖和LH-37对细胞增殖的抑制作用;镜下观察细胞形态改变;采用酶联免疫法检测细胞甲胎蛋白含量,金氏法检测细胞碱性磷酸酶活性的变化。结果:LH-37在1×10-5~1×10-3mol/L的浓度范围均能抑制细胞增殖且抑制率随浓度的的增加而增高(P<0.05或P<0.01),细胞形态和结构向正常肝细胞方向逆转,1×10-5mol/L和1×10-6mol/L的LH-37均可使细胞甲胎蛋白含量明显下降,碱性磷酸酶活性明显升高。结论:香草醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌SMMC-7721细胞具有抗增殖、促分化作用。     

全反式维甲酸对人卵巢癌细胞株HO8910增殖、侵袭能力的影响

目的:观察全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)对体外培养人卵巢癌细胞株HO8910增殖、侵袭能力的影响,为ATRA应用于卵巢癌的临床治疗提供实验依据.方法:选用人卵巢癌细胞株HO8910进行体外培养,以不同浓度的ATRA处理HO8910细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制情况,倒置显微镜进行形态学观察,Transwell小室体外侵袭实验检测细胞侵袭能力.结果:(1)ATRA浓度为10~(-7)～10~(-5)mol/L时,均明显抑制HO8910细胞的增殖(P<0.05),并具有时间-剂量依赖性.24、48、72 h ATRA抑制HO8910细胞增殖的IC_(50)值分别为2.331×10~(-5)、0.998×10~(-6)、0.891×10~(-7)mol/L.(2)倒置显微镜可观察到经10~(-6)mol/LATRA处理的HO8910细胞部分发生形态学的良性分化.(3)体外侵袭实验显示经10~(-6)mol/L ATRA处理的HO8910细胞,穿膜细胞数目明显减少(P<0.05).结论:ATRA能明显抑制人卵巢癌细胞株HO8910的增殖、侵袭能力,有望为ATRA应用于卵巢癌的临床治疗提供新的有效的途径.     

三氮唑席夫碱衍生物对肝癌细胞裂亡的影响

目的:研究3-吡啶-3-基-4-[(4-甲氧基-苯亚甲基)氨基]-5-甲硫基-1,2,4-三唑(LH-38)对肝癌细胞BEL-7402裂亡的作用。方法:BEL-7402细胞常规培养于RPMI-1640培养液中,细胞生长至对数生长期加LH-38(终浓度分别为1×10-4mol/L和1×10-5mol/L),连续培养48 h或72 h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,荧光染料Hoechst33258和PI联染检测细胞死亡,免疫细胞化学法检测激活型Caspase-3表达。结果:LH-38抑制BEL-7402细胞增殖并呈浓度依赖关系,IC50为3.0×10-4mol/L;1×10-5mol/L浓度的LH-38处理细胞72 h,镜下可见多倍体细胞明显增多,可见微核或多核细胞染色体自发性的凝集,有丝分裂异常,存活或死亡的多核或单核巨细胞同时存在,存活细胞的激活型Caspase-3表达阴性;1×10-4mol/L浓度LH-38处理细胞48 h,可明显诱导细胞凋亡。结论:不同浓度LH-38可以引起人肝癌细胞BEL-7402细胞裂亡或细胞凋亡,即两种不同形式的细胞死亡。     

雌激素对人正常皮肤成纤维细胞的影响

目的:探讨雌激素对人正常皮肤成纤维细胞的影响,为进一步探讨雌激素抗皮肤衰老的机制和开发抗衰老护肤品提供新思路。方法:采集正常成人皮肤标本,分离培养真皮成纤维细胞;以流式细胞术检测17β-E2作用前后成纤维细胞内活性氧(ROS)水平的改变,以及检测丙二醛(MDA)含量和三种抗氧化酶(SOD,GSH-px,Cat)的活性。结果:①雌激素浓度为1×10-6-1×10-10mol/L(生理浓度至药理浓度范围之内)时,可促进人皮肤成纤维细胞的增殖;②雌激素浓度为1×10-7-1×10-10mol/L时,可以减少人正常皮肤成纤维细胞内MDA的生成,加速三种抗氧化酶的产生;③1×10-6-1×10-10mol/L雌激素作用于人皮肤成纤维细胞后,可以降低细胞内活性氧(ROS)的产生。结论:雌激素在一定浓度时具有改善人正常皮肤成纤维细胞生物学特性的作用,且药物浓度与对人皮肤成纤维细胞的作用密切相关。