骨形成蛋白-7在大鼠角膜损伤愈合的表达及作用

目的:通过观察大鼠角膜损伤愈合过程中骨形成蛋白-7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)的表达规律来探讨其在大鼠角膜损伤愈合过程中可能发挥的作用。方法:雄性Wistar大鼠42只,随机分为7组,每组6只,其中一组为正常对照组,动物模型组均取右眼制造角膜针刺损伤模型。于损伤后各时间点(6h;1,3,5,7,14d)取角膜标本,HE染色行组织病理学检查,免疫组织化学染色观察BMP-7的表达与分布,计算机图像分析系统对结果进行分析。结果:鼠角膜上皮BMP-7的表达于损伤后1,3d逐渐升高(P<0.05);损伤后5d时表达逐渐降低,至损伤后14d时表达恢复正常。角膜基质层及角膜内皮层中BMP-7的表达未见明显变化。结论:BMP-7在大鼠角膜上皮层均有表达,可能作为负性的生长因子参与角膜损伤愈合过程。     

神经生长因子在角膜损伤愈合过程中的作用

角膜组织作为最重要的屈光间质 ,由于其结构和功能的特殊性 ,损伤后常严重影响视功能 ,但目前常用药物的疗效还不十分满意。随着分子生物学技术的发展 ,生长因子在角膜损伤愈合过程中的作用越来越受到人们的重视。神经生长因子 (nerve growth factor,NGF)作为最早被发现的生长因子 ,人们对其研究较为深入 ,临床应用较为广泛。本文就NGF在角膜损伤愈合过程中的作用作一综述。1　 NGF的结构及功能1948年 ,Bueker在将肿瘤组织移植于鸡胚的实验中初步观察到某种“因子”对神经的生长发育有促进作用 ,后来L evi- Montalcini与 Hamburger重…     

转化生长因子β2(TGF-β2)对大鼠角膜损伤愈合的影响

目的：探讨转化生长因子β2(TGF-β2)对大鼠角膜针刺损伤愈合的影响。方法：雄性wistar大鼠20只，均取右眼制造角膜针刺创伤模型后随机分成实验组和对照组，实验组用转化生长因子β2(TGF-β2)点眼，对照组用生理盐水点眼，每日6次、至创面愈合止。计算剩余损伤面积、行组织学检查及透射电镜观察。结果：术后两组创面愈合面积比较实验组均快于对照组，且差异显著，组织学检查及电镜观察均显示两组差异。结论：TGF-β2有促进角膜损伤愈合的作用，其可能的机制为TGF-β2是胶原溶酶的主要抑制剂，可抑制基质中胶原酶的合成，降低胶原分解，促进胶原的分泌。     

骨形态发生蛋白-2在正常大鼠角膜成长过程中的表达

目的确定TGF-β超家族成员骨形态发生蛋白-2（BMP-2）在正常鼠角膜生长发育过程中的表达及作用。方法用免疫组织化学方法观察TGF—B超家族成员骨形态发生蛋白2（BMP-2）分别在大鼠胚胎17d，出生当天，出生后4、7、10d和11周角膜蛋白水平的表达。每组选取3只大鼠作为实验对象。结果BMP-2在大鼠胚胎17d时就有表达，于出生当天至出生后10d及成年鼠角膜生长发育过程中呈动态变化过程。结论结果提示TGF-β超家族成员骨形态发生蛋白-2（BMP-2）在鼠角膜的表达随着角膜的生长发育而调节，BMP-2可能与角膜的生长发育及维持出生后角膜的动态平衡有关。     

角膜上皮损伤愈合的药物治疗

角膜上皮损伤愈合的药物治疗孙聪黄振平＊杨丽萍＊（南京市鼓楼医院，２１０００８；＊南京军区南京总院，２１０００２）有数种生理活性物质参与角膜上皮修复过程，文献报导比较集中在表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ），纤维连结蛋白...     

角膜上皮损伤愈合的药物治疗学进展

角膜上皮经常暴露于恶劣的环境中，容易受到物理、化学、微生物、寄生虫、免疫等多种因素的损害，常导致角膜上皮愈合延迟或不愈，严重的可造成角膜溃疡、穿孔等严重并发症，临床治疗颇感棘手；此外，眼科手术和创伤后快速而完整的角膜上皮修复对维持正常视力也是必要的。长期以来，国内外学者对如何促进角膜上皮损伤的愈合进行了大量的研究．近年来，随着分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等基础科学的发展和基因工程、免疫组比等技术的应用；极大地丰富了人们对角膜上皮损伤后愈合的认识，同时也极大地丰富了治疗角膜上皮损伤的方法。本…     

纤维连结蛋白在角膜上皮愈合中的作用

纤维连结蛋白(Fibronectin,FN)是一种具有生物活性的高分子糖蛋白,由纤维母细胞、内皮细胞、巨噬细胞及肝细胞等合成和分泌,存在于血浆、多种细胞表面、结缔组织及基底膜中。近年研究表明,它是细胞与细胞及细胞与基质连结的重要因子,对于促进上皮细胞的移行和修复,维持机体组织细胞的正常结     

兔眼角膜缘干细胞在角膜上皮损伤愈合中作用的实验研究

利用显微手术切除＋０．２５Ｎ氢氧化钠溶液碱烧伤的方法制备动物实验模型。观察兔眼角膜缘干细胞在角膜上皮损伤愈合中的作用。结果显示：全周角膜缘上皮切除合并角膜上皮缺损组，角膜上皮愈合时间长（２５．８天）。愈合后含有大量新生血管和杯状细胞，呈现结膜上皮表型。半周角膜缘上皮切除合并角膜上皮缺损组，上皮愈合时间缩短（６．３天），含有少量新生血管和杯状细胞。保留角膜缘上皮单纯角膜上皮缺损组，上皮愈合时间最短（３天），无新生血管及杯状细胞，呈角膜上皮表型。结果表明：角膜缘上皮干细胞在角膜上皮损伤愈合中起着极重要的作用，是损伤后角膜上皮再生的源泉。     

TGF—α在角膜伤口愈合过程中的作用

ＴＧＦ┐α在角膜伤口愈合过程中的作用钟一声综述王康孙审校上海第二医科大学附属瑞金医院瑞金眼科中心（上海２０００２５）角膜损伤发生后，通过修复过程既可以恢复角膜组织的正常结构，又可导致角膜瘢痕的形成，角膜正常结构的恢复是角膜形态和功能恢复的基础，而瘢痕...     

实验性角膜损伤愈合过程中房水纤维连接蛋白的变化

用酶联免疫吸附试验方法对家兔角膜切伤愈合过程中,房水纤维连接蛋白水平的动态检测。发现在损伤后第1天,房水纤维连接蛋白即比损伤前高1倍以上。1周后又下降,在第9天时,约为损伤前水平的70％,随后又逐渐回升,3周后接近损伤前水平。     

TGF-β2、IL-6及纤维连接蛋白对角膜创伤愈合的影响

目的探讨转化生长因子β2(TGF-β2)、白介素-6(IL6)及纤维连接蛋白(FN)对角膜创伤愈合的作用。方法雄性成年Wistar大鼠24只，随机分为4组，每组6只(双眼)均制造针刺大鼠角膜损伤模型，术后30min开始滴药。第1组：滴TGF-β2；第2组：滴IL-6；第3组：滴TGF—β2联合FN；第4组：滴IL-6联合FN。行裂隙灯检查，计算损伤愈合率。结果第3组和第4组的损伤愈合率明显快于第1组和第2组，而第3组和第4组之间、第1组和第2组之间差异不显著。结论TGF-β2和IL-6联合FN促角膜创伤愈合的疗效明显大于TGF-β2或IL-6单独用药，证明TGF-β介导角膜成纤维细胞分化需要粘连蛋白的加入；说明细胞因子联合细胞外基质蛋白有利于角膜伤口愈合的途径可能是使角膜上皮细胞等对粘连蛋白受体传导信号更敏感。     

血小板源性生长因子与角膜损伤修复

血小板源性生长因子(PDGF)在机体伤口愈合过程中具有重要的调节作用。由于角膜的特殊结构和功能,其伤口愈合的调节显得至关重要。本文简述PDGF的结构、受体、生物学活性及其在角膜伤口愈合中的作用。     

表皮生长因子对家兔角膜内皮损伤修复作用的实验研究

目的 研究表皮生长因子对家兔角膜内皮损伤的修复作用。方法 将溶于透明持酸钠的ＥＧＦ注入角膜内皮已损伤的兔眼前房,对照眼只注入ＮａＨＡ。结果 １０μｇ和５μｇ的ＥＧＦ均可使角膜内皮缺损面积显著缩小,并可使再生的角膜中央内皮细胞密度,六边形细胞出现率显著上升及细胞面积变异系数明显减小。     

Influence of bone morphogenetic protein type IA receptor conditional knockout in lens on expression of bone morphogenetic protein 4 in lens

AIM: To investigate the influence of bone morphogenetic protein type IA receptor [BMPR-IA (ALK3)] conditional knockout in lens on expression of bone morphogenetic protein 4 (BMP4) in lens during the development of the vertebrate eye. METHODS: Cre-positive mice were mated with Cre-negative mice to generate 50% Cre-positive (conditional knockout, CKO) 4 embryos, 8 eyes and 50% Cre-negative offspring (wild type, WT) 4 embryos, 8 eyes. The embryos were fixed in 4% paraformaldehyde, embedded in paraffin, and sectioned to a thickness of 4 μm. Removal of paraffin wax and dehydrating for sections, and then the procedure of in situ hybridization was processed, BMP4 MK1784-m (BOSTER) was used, and observed the expression of BMP4 in the lens in experimental group and control group. We selected SPSS11.0 software for statistical analysis, P<0.05 showed that the difference was statistically significant. RESULTS: Four embryos of each genotype were examined, totally we had 8 embryos, 16 eyes. We got the uniform outcomes in all the embryos. We found ALK3 was required during lens growing, but was not essential for the formation of lens. We observed that the expression of Bmp4 in the lens was significantly reduced in all 8 ALK3 CKO lens, BMP4 expression was normal in all the 8 WT lens, P<0.01. This phenomenon became increasingly visible in accordance with embryo development. The most apparent alteration was present at stage E15.5. CONCLUSION: ALK3 is essential for lens growth. The influence of ALK3 on the expression of BMP4 is present during the development of mice lens.     

P38 MAPK在角膜创伤愈合过程中的作用

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)级联是细胞内重要的信号传导系统。细胞通过这一信号传导系统将细胞外信号传递到细胞核内,介导细胞产生反应,调节细胞生长、增殖、分化和凋亡等生理过程及创伤愈合和炎症反应等病理过程。近年来发现一类新的MAPK通路—p38MAPK信号通路,对其结构和功能以及在角膜创伤愈合修复和炎症反应中的作用已有了进一步的了解,在信号通路水平调控p38MAPK的表达和活性,可能成为临床角膜创伤治疗的新途径。     

Aquaporin-1-facilitated keratocyte migration in cell culture and in vivo corneal wound healing models

Aquaporin-1 (AQP1) water channels are expressed in corneal keratocytes, which become activated and migrate following corneal wounding. The purpose of this study was to investigate the role of AQP1 in keratocyte migration. Keratocyte primary cell cultures from wildtype and AQP1-null mice were compared, as well as keratocyte cultures from pig cornea in which AQP1 expression was modulated by RNAi knockdown and adenovirus-mediated overexpression. AQP1 expression was found in a plasma membrane pattern in corneal stromal and cultured keratocytes. Osmotic water permeability, as measured by calcein fluorescence quenching, was AQP1-dependent in cultured keratocytes, as was keratocyte migration following a scratch wound. Keratocyte migration in vivo was compared in wildtype and AQP1 knockout mice by histology and immunofluorescence of corneal sections at different times after partial-thickness corneal stromal debridement. AQP1 expression in keratocytes was increased by 24 h after corneal debridement. Wound healing and keratocyte appearance near the wound margin were significantly reduced in AQP1 knockout mice, and the number of neutrophils was increased. These results implicate AQP1 water permeability as a new determinant of keratocyte migration in cornea.     

UTP and diadenosine tetraphosphate accelerate wound healing in the rabbit cornea

Nucleotides are naturally occurring substances present in tear film that can stimulate tear secretion in animals and humans. We investigated whether certain nucleotides can affect the rate of wound healing in the cornea of white rabbits. In the absence of any added compound, the rate of healing was 72.4 +/- 2.2 microm h(-1). Of all the tested nucleotides, UTP and Ap(4)A were the most active ones, maximally increasing the rate of healing to 121.6 +/- 3.7 and 93.7 +/- 3.2 microm h(-1), respectively. Responses to UTP were dose dependent. UTP had a pD(2) value of 8.9 +/- 0.1 (EC(50): 1.25 nM). P2 purinoceptor antagonists such as suramin and reactive blue-2, inhibited the effect of UTP indicating the involvement of P2Y receptors. Mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascade inhibitors also abolished the effects of UTP, suggesting that P2Y receptors are coupled to the MAPK cascade, and that this is involved in controlling the rate of epithelial cell migration.     

骨形态发生蛋白在形觉剥夺性近视眼后巩膜中表达的变化

背景眼球伸长过程伴随着巩膜的广泛重塑,而这种重塑受多种生长因子的调控。以往的研究证实转化生长因子-β（TGF-β）在近视形成和发展过程中发挥作用。骨形态发生蛋白（BMPs）属于TGF-β超家族,其在近视的发生中是否发挥作用及如何发挥作用尚不清楚。目的观察豚鼠形觉剥夺性近视（FDM）眼后巩膜中BMPs的表达变化,探讨其在近视后巩膜重塑中的作用。方法1～2周龄花色豚鼠30只,以随机数字表法随机分为实验组和正常对照组,每组15只。任意选择实验组豚鼠的一侧眼作为实验眼,应用半透明眼罩连续遮盖14d以建立FDM动物模型,另一侧眼作为对照眼。形觉剥夺前后所有动物眼经检影验光获得屈光度,用A型超声法测量眼轴长度。造模后第15天取豚鼠后巩膜组织,分别用逆转录PCR（RT—PCR）和Westernblot法检测各组豚鼠后巩膜中BMPsmRNA及其蛋白的表达。结果实验14d后,豚鼠遮盖眼的屈光度为（一0．48±0．51）D,与对侧眼的（3．22±0．34）D比较,差异有统计学意义（t=-12．814,P=0．000）,与正常对照眼的（2．97±0．70）D比较,差异有统计学意义（t=-11．878,P=0．000）。豚鼠遮盖眼的眼轴长度为（8．30±0．05）mm,明显长于对侧眼的（8．11±0．06）mm和正常对照组（8．06±0．06）mm,差异均有统计学意义（t=7．230、9．084,均P=0．000）。正常豚鼠后巩膜可表达BMP-2、BMP-4、BMP-5mRNA,豚鼠遮盖眼后巩膜中BMP-2mRNA和BMP-5mRNA的相对表达值分别为0．41-±0．11和0．65±0．06,较对侧眼的0．62-±0．07和0．84±0．03分别下降了34．48％和23．67％,差异均有统计学意义（t=2．838,P=0．017;t=2．524,P=0．028）;豚鼠遮盖眼后巩膜中BMP-2和BMP-5蛋白表达的相对值分别为0．44±0．06和0．70-±0．05,较对侧眼的0．61±0．05和0．824-0．03分别下降了23．42％和15．21％,差异均有统计学意义（t=2．465,P=0．030;t=2．445,P=0．031）,而形觉剥夺眼与对侧眼后巩膜中BMP-4mRNA及其蛋白相对表达量的差异均无统计学意义（mRNA：t=0．704,P=0．460;蛋白：t=0．987,P=0．365）。结论FDM眼后巩膜中BMP-2和BMP-5的表达下调,提示BMPs在实验性近视后巩膜重塑中可能发挥作用。     

rhEGF基因治疗角膜碱烧伤的实验研究

目的探讨重组人表皮生长因子（rhEGF）基因缓释型滴眼液对免角膜碱烧伤的基因治疗。方法新西兰白兔75只，分为A（rhEGF-pcDNA3．1-脂质体基因滴眼液）、B（rhEGF衍生物滴眼液）、c（pcDNA3.1空质粒-脂质体对照组）三组分别点眼治疗免角膜碱烧伤。每天观察模型眼眼表、荧光素染色并照相。分别测定hEGFmRNA、hEGF和EGFR在角膜组织中的表达。结果A组眼表结膜充血、分泌物、角膜水肿和角膜混浊程度均比B组和C组轻。角膜荧光素染色显示A组角膜上皮的溃疡面积较B组和C组范围小，21d转为阴性。A组基因在行滴眼24h后在全层角膜细胞内可见hEGFmRNA和蛋白质表达，第3d达高峰，细胞阳性率高达95％，随后逐渐降低，21d仍有弱表达。结论rhEGF-PcDNA3．1-脂质体基因滴眼液能够降低角膜的炎症反应，促进角膜上皮细胞的增生，加速角膜碱烧伤的损伤修复过程。