干细胞标志物Oct-4在胃癌组织中的表达及其临床意义的Meta分析

目的系统评价八聚体结合转录因子4（Oct-4）在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法通过检索PubMed、EMBASE、WebofScience、中国生物医学文献数据库（CBM）、中文科技期刊全文数据库（VIP）、中国期刊全文数据库（CNKI）及万方数据库,并辅以文献追溯方法,收集国内外发表的关于Oct-4在胃癌组织中的表达及其临床意义的研究,检索时间均为建库时间至2012年10月。由两位研究者按纳入标准和排除标准筛选文献,并评价纳入研究的质量。采用RevMan5．1软件进行Meta分析。结果共纳入了8个研究,包含胃癌病例623例。Meta分析结果显示：胃癌组织中Oct-4的表达阳性率高于正常胃组织（OR=37．50,95％CI：4．76～295．51,P〈0．01）;低分化胃癌组织的Oct-4表达阳性率高于高．中分化组（OR=0．27,95％CI：0．16～0．45,P〈0．01）,但胃癌组织的淋巴结转移情况（OR=2．09,95％CI：0．63～6．94,P=0．23）及TNM分期（OR=0．62,95％CI：0．25～1．54,P=0．30）与Oct-4表达的相关性均无统计学意义。结论胃癌组织中Oct-4的表达与胃癌的分化程度相关,说明Oct-4可能在胃癌的发生和发展过程中起重要作用,但其可能与胃癌的淋巴结转移及TNM分期无关。     

八聚体结合转录因子4和CD117在骨肉瘤组织的表达及其临床意义

目的探讨八聚体结合转录因子4(OCT4)和CD117在骨软骨瘤组织、骨肉瘤组织中的表达, 及其与骨肉瘤临床特征之间的关系。方法收集2019年9月至2022年10月大庆油田总医院经病理学确诊的34例骨软骨瘤组织和92例骨肉瘤组织标本, 采用免疫组织化学法检测OCT4和CD117在上述组织中的表达, 结合临床资料选用χ2检验进行统计学分析。结果骨肉瘤组织OCT4蛋白表达率53.00%(49/92), 明显高于骨软骨瘤组织OCT4蛋白表达率15.00%(5/34), 两者差异有统计学意义(χ2=15.067, P<0.01)。OCT4表达水平与骨肉瘤患者肺转移、恩内金分期(Eneeking分期)、软组织浸润明显相关(χ2=5.584、6.936、9.676, P<0.05), OCT4蛋白表达水平与骨肉瘤患者病变部位、性别、组织类型、年龄、ALP水平无明显相关(χ2= 0.176、0.010、0.139、0.051、0.304, P>0.05)。骨肉瘤组织CD117蛋白表达率72.73%(60/88), 明显高于骨软骨瘤组织CD117蛋白表达率18.75%(6/32), 两...     

驱动蛋白超家族23和八聚体结合转录因子4在胃癌组织的表达及其临床意义

目的探讨驱动蛋白超家族23(KIF23)以及八聚体结合转录因子4(OCT4)在胃癌组织的表达, 及其与临床病理因素之间的关系。方法选取2018年11月至2022年11月大庆龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)和吉林大学第一医院病理归档资料完整的101例胃癌组织标本和对应癌旁组织标本, 应用免疫组织化学方法检测上述组织中KIF23和OCT4表达水平, 结合临床资料采用χ2检验分析KIF23和OCT4与胃癌临床病理特征之间的关系。结果 KIF23在胃癌组织表达率为77.23%(78/101), 明显高于对应癌旁组织KIF2表达率[11.88%(12/101)], 两者比较差异有统计学意义(χ2=91.283, P<0.01)。KIF23表达水平与胃癌TNM分期(TNM stage, tumor node metastasis stage)、组织学分化程度、淋巴结转移明显相关(χ2=5.602、0.060、6.550, P<0.05), KIF23表达水平与胃癌年龄、性别无相关(χ2=0.004、0.120, P>0.05)。OCT4在胃癌组织表达率为69.31%(70/...     

膀胱癌干细胞关键转录因子Oct4的表达及与肿瘤干细胞的关系

目的检测干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织及细胞系BIU-87中的表达，探讨Oct4的表达在膀胱癌发生发展中的意义及与肿瘤干细胞的关系。方法采用免疫组织化学方法对49例膀胱癌组织病理标本、采用免疫细胞荧光和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法对膀胱癌细胞系BIU-87进行Oct4表达的检测。结果Oct4在膀胱癌中的表达率为81．6％（40／49），Oct4阳性细胞率约为0．6％，Oct4表达的阳性细胞率及强度与膀胱癌的分级、复发和转移无明显相关性（P〉0．05）。在BIU-87细胞中存在少量的Oct4阳性细胞，RT-PCR证实存在Oct4的弱表达。结论膀胱癌中有少量细胞表达全能干细胞标志物Oct4，这些细胞很可能是膀胱癌干细胞，这将为其最终分离和鉴定人膀胱癌干细胞提供重要的基础。     

RNA干扰转录因子激活蛋白4基因表达对结肠癌细胞株SW480的影响

目的观察转录因子激活蛋白4（AP-4）基因对结肠癌细胞株SW480生物学行为的影响。方法设计合成针对AP-4基因外显子7的小分子干扰RNA（siRNA）表达质粒,用脂质体转染SW480细胞,通过RT-PCR技术、Western印迹、四甲基偶氮唑盐实验（MTT法）、流式细胞仪和Transwell体外侵袭实验等检测该siRNA对SW480细胞基因表达、细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡能力和浸润转移能力等生物学行为的影响。结果AP-4siRNA转染SW480细胞96h后,其AP-4mRNA水平下降了58%,培养液上清AP-4蛋白浓度下降了75%（P〈0.01）。细胞增殖受到明显抑制,抑制率达61%～78%;流式细胞仪检测结果显示,AP-4siRNA组SW480细胞凋亡率为（21.70±2.51）%,显著高于阴性对照组的（2.31±0.14）%（P〈0.01）,G0-G1期细胞比例增加（P〈0.01）,G2-M期细胞减少（P〈0.05）;Transwell体外侵袭实验显示,AP-4siRNA能明显抑制SW480细胞的体外侵袭力（P〈0.01）。结论应用siRNA技术沉默AP-4基因能有效抑制SW-480细胞AP-4的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡,为以AP-4为靶向的结肠癌基因治疗提供了新的思路和手段。     

MKK4腺病毒载体的构建及其对胰腺癌细胞增生和浸润能力的影响

目的 观察MKK4对胰腺癌细胞增生和浸润能力的影响.方法 采用Western blot检测常见胰腺癌细胞株中MKK4的表达;构建MKK4的腺病毒载体,感染不表达MKK4的胰腺癌细胞株,采用胸腺嘧啶标记法观察外源性MKK4表达对细胞增生能力的影响,采用体外细胞浸润实验观察外源性MKK4表达对细胞浸润能力的影响.结果 在胰腺癌细胞株AsPC1、BxPC3、Hs766T、MiapaCa2、Pancl中,MKK4在AsPC1和BxPC3细胞中表达缺失.成功构建MKK4的腺病毒载体.以腺病毒LacZ感染作对照,通过胸腺嘧啶标记法观察到AsPC1、BxPC3细胞感染MKK4腺病毒后,细胞增生能力增加53%、61%(P＜0.05);通过体外细胞浸润实验观察到细胞浸润能力增强(8.2±2.7)倍、(15.7±1.6)倍(P＜0.01).结论 MKK4在胰腺癌细胞中表达可增加其增生和浸润能力,具有潜在癌基因作用.     

干细胞转录因子Oct4和CD133蛋白在肝外胆管癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨干细胞转录因子Oct4(Oct4)和CD133蛋白在肝外胆管癌(EHCC)中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化方法检测50例EHCC、30例癌旁胆管组织(TAC)和20例正常胆管组织(NBDT)中Oct4和CD133蛋白表达水平,并结合临床病理特征进行分析。结果:在EHCC中Oct4和CD133蛋白阳性表达率分别为62.0%(31/50)和68.0%(36/50)。EHCC中Oct4和CD133表达阳性率显著高于TAC和NBDT(P0.05)。Oct4和CD133的表达与EHCC的TNM分期、分化程度和转移相关(P0.05),且两者表达呈正相关(r=0.33,P0.05)。结论:检测Oct4和CD133基因蛋白表达可作为评估EHCC生物学行为和预后的参考指标。     

新型神经营养因子TAT-13DNF对胚胎干细胞分化的影响

目的 探讨合成的新型神经营养因子TAT-BDNF对胚胎干细胞(ESCs)分化的影响,为进一步TAT-BD-NF联合干细胞移植治疗脊髓损伤提供实验依据.方法 取ESCs E14进行体外培养,在全反视黄酸诱导分化的基础上加入20μg/L TAT-BDNF,通过免疫细胞化学染色观察此融合蛋白对ESC分化的影响.结果 TAT-BDNF能促使E14胚胎干细胞分化为多巴胺能神经元和γ氨基丁酸能神经元.随着作用时间的延长,表达成熟神经元NF-200的细胞比例逐步提高(7 d时约37.4%±2.7%、21 d时82.3%±7.6%);TH阳性的细胞比例也逐渐增多(7 d时约7.9%±1.6%,21 d时44%±3.5%),而且神经元的轴突也更加细长.结论 新型神经营养因子TAT-BDNF能促进ESCs细胞向神经元分化并促进神经元成熟.     

转录因子FOXO4与胃癌及Hp感染关系的临床研究

目的:探讨FOXO4在胃癌发生过程中的表达、临床意义及其与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法:应用免疫组织化学SP法分别检测16例正常胃黏膜、26例慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、36例异型增生胃黏膜及60例胃腺癌组织中FOXO4的表达,并检测患者Hp感染状况。结果:FOXO4在正常胃黏膜、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、异型增生胃黏膜及胃腺癌组织中的阳性率分别为100%、84.6%、69.4%和40.0%,胃腺癌组阳性率显著低于正常对照组(P<0.01)。FOXO4的阳性率在高、中分化和低分化型胃腺癌组织中呈现递减趋势,且其表达和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生及胃腺癌组织中FOXO4表达与Hp感染之间均无明显相关性(P均>0.05)。癌前病变组织中FOXO4表达与Hp感染率之间呈明显正相关(P<0.01)。结论:在胃黏膜癌变过程中,FOXO4的表达和作用逐渐下调;在癌前病变组织中FOXO4表达和Hp感染密切相关。     

人胰腺癌细胞FHIT基因转染对肿瘤坏死因子敏感性的影响

目的　将FHIT基因导入人胰腺癌 1 990细胞并观察其对TNF敏感性的改变 ,探讨FHIT对胰腺癌肿瘤坏死因子 (TNF)敏感性的关系。方法　通过脂质体转染法将外源FHIT导入有FHIT全基因丢失的人胰腺癌 1 990细胞 ,筛选阳性克隆 ,同时以空载体pRC/CMV作为对照 ,加入TNF后作生长曲线并计算细胞成活数。结果　转染FHIT的 1 990细胞阳性克隆与亲代相比 ,其生长速度分别为 32× 1 0 4 cells/well、78× 1 0 4 cells/well(P <0 .0 1 ) ,诱导了 1 990细胞的凋亡 ,且在TNF为 1 0 3μg/L时其细胞存活率分别为 2 3 %、74% (P<0 .0 5)。结论　FHIT基因转染增强了人胰腺癌 1 990细胞对TNF的敏感性 ,FHIT可能介入了TNF的凋亡途径     

沉默STAT3基因对人胰腺癌细胞体内生长能力的影响

Objective To investigate the effect and mechanism of RNAi-mediated STAT3 gene silence on human pancreatic cancer cells growth in vivo. Methods STAT3 shRNA expression vector was stably transfected to SW1990 cells. STAT3 and p-STAT3 protein was examined using Western blot. The growth ability of SW1990 cells in vivo was determined in a subcutaneous tumor model of nude mice. Western blot was performed to detect the protein expression of Bcl-xL and cyclin D1. Results The protein expression of STAT3 and p-STAT3 decreased by 90% and 92% by stable transfection of STAT3 shRNA expressing vectors(P ＜0. 05). Inhibition of STAT3 with RNAi significantly inhibited the growth ability of SW1990 cells in vivo( P ＜ 0. 05 ). The tumor weight significantly decreased( P ＜ 0. 05 ). Moreover, the relative Bcl-xL and cyclinD1 protein expression in SW1990-RNAi cells reduced by 56% and 50% compared with that of the parental SW1990 cells, respectively (P ＜ 0. 05). Conclusions Inhibition of STAT3 with RNAi significantly inhibits the growth ability of pancreatic cancer cells through down-regulating Bcl-xL and cyclin D1.     

沉默STAT3基因对人胰腺癌细胞体内生长能力的影响

Objective To investigate the effect and mechanism of RNAi-mediated STAT3 gene silence on human pancreatic cancer cells growth in vivo. Methods STAT3 shRNA expression vector was stably transfected to SW1990 cells. STAT3 and p-STAT3 protein was examined using Western blot. The growth ability of SW1990 cells in vivo was determined in a subcutaneous tumor model of nude mice. Western blot was performed to detect the protein expression of Bcl-xL and cyclin D1. Results The protein expression of STAT3 and p-STAT3 decreased by 90% and 92% by stable transfection of STAT3 shRNA expressing vectors(P ＜0. 05). Inhibition of STAT3 with RNAi significantly inhibited the growth ability of SW1990 cells in vivo( P ＜ 0. 05 ). The tumor weight significantly decreased( P ＜ 0. 05 ). Moreover, the relative Bcl-xL and cyclinD1 protein expression in SW1990-RNAi cells reduced by 56% and 50% compared with that of the parental SW1990 cells, respectively (P ＜ 0. 05). Conclusions Inhibition of STAT3 with RNAi significantly inhibits the growth ability of pancreatic cancer cells through down-regulating Bcl-xL and cyclin D1.     

胰腺癌细胞株PANC-1中肿瘤干细胞的体外耐药性研究

目的:根据肿瘤干细胞学说理论,探讨胰腺癌耐药的新机制。方法:通过胰腺癌肿瘤干细胞表面标记途径和侧群(side population,SP)细胞途径,分离出人胰腺癌细胞株PANC-1中的SP/NSP(非SP)细胞及CD44+CD24+/CD44-CD24-细胞亚群,用MTT检测上述各亚群细胞在体外对化疗药物耐受的差异,用AnnexinV-PI双染法检测2种肿瘤细胞的抗凋亡能力,并采用实时荧光定量PCR检测两者耐药基因ABCG2、ABCB1和PLK-1表达的差异。结果:人胰腺癌细胞株PANC-1中的SP细胞比例为(7.64±0.96)%,CD44+CD24+细胞比例为(2.60±0.96)%。相对于NSP和CD44-CD24-细胞而言,SP和CD44+CD24+细胞具有更强的化疗耐受能力(P0.01)和抗凋亡能力(P0.01);荧光定量RT-PCR结果均提示,SP和CD44+CD24+细胞高表达耐药基因ABCG2、ABCB1和PLK1。结论:人胰腺癌细胞株PANC-1中SP及CD44+CD24+细胞具有更强的化疗耐受能力,研究胰腺癌肿瘤干细胞可为克服胰腺癌化疗敏感性差的现状提供新的实验基础和理论依据。     

脂肪间质干细胞促进胰腺癌细胞活性的实验研究

目的 探讨脂肪间质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)对胰腺癌细胞增殖、侵袭的影响及其机制.方法 从腹腔脂肪分离纯化培养ADSCs,通过半透膜在6孔塑料培养板上建立胰腺癌细胞与ADSCs的双层培养体系,单独培养的胰腺癌细胞作为对照.通过cck-8比色法检测ADSCs对胰腺癌细胞增殖的影响;检测ADSCs对胰腺癌细胞侵袭的影响;ELISA法测定培养液中基质细胞源性因子(SDF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP-9)及转化生长因子(TGF-β1)的浓度;qRT-PCR法测定胰腺癌细胞及ADSCs中各细胞因子mRNA的表达;cck-8比色法检测AMD3100对ADSCs与胰腺癌细胞共培养的影响. 结果 成功分离ADSCs;ADSCs可促进各种胰腺癌细胞的增殖与侵袭(均P ＜0.05);与单独培养的胰腺癌细胞相比,ADSCs培养液中含有较多的SDF-1、VEGF、MMP-9,较少的TGF-β1(SDF-1:1100±100比0比0,F=389.134,P＜0.01;VEGF:140 ±4比99 ±5比93 ±4,F=174.102,P＜0.05;MMP-9:61.8±4.2比43.5 ±2.8比54.5 ±3.0,F=76.279,P＜0.05;TGF-β 1:20.6±3.0比35.6 ±2.6比41.3±5.5,F=79.338,P＜0.05);ADSCs促进了胰腺癌细胞中VEGF、MMP-9的表达(VEGF:63.7±5.9比50.6±4.1,t=7.536,P＜0.05;MMP-9:mRNA(55.8 ±3.6比42.7±3.1,t=8.279,P＜0.05).AMD3100能部分降低ADSCs对胰腺癌活性的影响(SW1990:1.539±0.140比1.361±0.066,t=2.835,P＜0.05;PANC-1:1.376 ±0.100比1.281 ±0.031,t=2.860,P＜0.05).结论 ADSCs可能促进胰腺癌细胞的增殖,侵袭.这种作用可能与ADSCs表达的细胞因子有关.     

胰腺癌干细胞的体外增殖与鉴定

目的 建立胰腺癌干细胞体外增殖体系并鉴定所获细胞.方法 ASPC-1胰腺癌细胞以1000细胞/ml的密度培养于含碱性成纤维生长因子、表皮生长因子、胰岛素、转铁蛋白、硒及牛血清白蛋白的DMEM-F12培养基中.待培养10～14 d,部分ASPC-1细胞增殖为细胞球后,收集细胞球进行鉴定.鉴定方法包括克隆形成实验、Hoechst 33342染料染色、CD44抗体免疫细胞化学染色以及实时定量逆转录PCR检测CD44 mRNA水平.结果 小部分ASPC-1细胞可在干细胞体外增值体系中增殖为细胞球.此体系增殖所获细胞中能够排出Hoechst 33342染料的细胞比例远高于普通培养体系中的细胞(>95%v8 2%～3%),且具更高的克隆形成能力[(10.92±3.38)%比(10.92±3.38)%,P<0.01].此外,此增值体系中所获细胞CD44表达率更高[(86.00 ±5.85)%比(18.71 ±3.64)%,P<0.01].结论 部分ASPC-1细胞可在本研究所建立的干细胞体外增殖体系中增殖,增殖所获细胞具有肿瘤干细胞特性.     

人胰腺癌干细胞差异性基因的表达

目的 分选、鉴定人胰腺癌干细胞,运用基因芯片技术分析其差异性基因的表达.方法 运用流式分选技术分选胰腺癌干细胞(CD24+CD44+ESA+),NOD/SCID鼠移植瘤试验进行肿瘤干细胞特性鉴定.采用Affymetrix U133 plus2.0人类全基因组表达谱芯片对胰腺癌干细胞和非干细胞进行差异基因筛选.结果 分选得到人胰腺癌CD24+CD44+ESA+亚群细胞,占所有细胞的0.8%;5×103个CD24+CD44+ESA+细胞就能成瘤(2/4),而阴性细胞1×105才能成瘤(1/4);CD24+CD44+ESA+具有一定的自我更新和分化能力.基因芯片杂交获得6553(11.99%)条差异基因,胰腺癌干细胞中5255(9.61%)条上调表达,1298(2.37%)条下调表达.其中差异基因涉及细胞凋亡、细胞周期、代谢、细胞线粒体结构和耐药等多个方面.结论 胰腺癌于细胞具有自身特征性基因表达谱,为进一步从干细胞层面研究胰腺癌发病机制及靶向治疗奠定基础.     

microRNAs在乳腺癌及乳腺癌干细胞中的研究进展

microRNAs在乳腺癌形成和发展中发挥着重要的作用,其可能扮演着原癌基因、抑癌基因、肿瘤转移侵袭、凋亡、耐药调节者等角色。此外,越来越多的证据表明,miRNAs参与乳腺癌干细胞的增生、自我更新、分化及肿瘤形成。本文分别综述了microRNAs和乳腺癌、乳腺癌干细胞之间的关系及其用于肿瘤治疗的研究进展。     

缺氧诱导因子-1α基因转染人间充质干细胞的体内促血管生成作用

目的研究将缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因转染人间充质干细胞（hMSCs）的体内促血管生成作用，为促进组织工程骨血管化提供新的方法和策略。方法构建pIRES3／HIF-1α逆转录病毒载体，制备含目的基因的重组逆转录病毒，感染hMSCs。用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测转基因hMSCs表达HIF-1α的水平，用免疫组织化学法检测转基因hMSCs在缺氧和常氧条件下HIF-1α蛋白的存在情况。体内促血管生成的实验分为两组：实验组采用转基因hMSCs，对照组采用未转基因的hMSCs。两种细胞分别接种到13d的鸡胚绒毛尿囊膜（CAM），3d后将CAM制片，在显微镜下观察并摄像。用图像分析方法测量并分析血管面积。结果转基因hMSCs中HIF-1α mRNA表达较未转基因的hMSCs明显增高。转染HIF-1α基因的hMSCs，缺氧条件下细胞核内HIF-1α能稳定存在；常氧条件下细胞核内HIF-1α不能稳定存在。图像分析结果显示实验组CAM较对照组CAM血管面积明显增多，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论HIF-1α基因能稳定转染到hMSCs并得到强制表达。转染HIF-1α基因的hMSCs有明显的促血管生成作用，对于促进组织工程骨的血管化有重要作用。