异丙酚对树突细胞炎症因子分泌的影响

目的 观察异丙酚对树突细胞成熟和分泌细胞因子的影响.方法 取6～8周C57BL/6野生型老鼠(雌雄不限)的骨髓细胞,在FMS样酪氨酸激酶3(Fh3)配基的作用下诱导分化为树突细胞,利用脂多糖刺激树突细胞成熟并检测异丙酚对树突细胞表面成熟标记分子表达和分泌细胞因子的影响.结果 100μM的异丙酚能明显抑制脂多糖诱导的IL-6和IL-12的分泌,同时提高IL-4的分泌.脂多糖能使树突细胞表面表达的成熟分子CD40、CD80和CD86表达量明显上升,200μM异丙酚不影响脂多糖介导的树突细胞成熟分子的表达.结论 异丙酚不影响脂多糖介导的树突细胞的成熟但影响它的分泌从而抑制机体的免疫反应.     

重组人胸腺素α原体外对IFN-γ,IFN-α及TNF-α的影响

目的　体外观察重组人胸腺素α原 (prothymosinα ,ProTα)对几种重要细胞因子分泌的影响。方法　用脾淋巴细胞、脾巨噬细胞及腹腔巨噬细胞 ,以ELISA法检测ProTα对IFN γ ,IFN α和TNF α分泌的影响。结果　 1× 10 - 7mol·L- 1 ProTα明显促进脾细胞分泌IFN γ(P <0 0 5 ) ,该浓度的ProTα也明显刺激小鼠脾巨噬细胞分泌IFN α(P <0 0 1) ;在小鼠腹腔巨噬细胞中 ,ProTα能明显刺激IFN α和TNF α的分泌 (P <0 0 1)。结论　ProTα对细胞因子IFN γ ,IFN α和TNF α的分泌均有促进作用。     

重组人胸腺素α原体外对IFN-γ、IFN-α及TNF-α的影响

目的　在体外实验中考察克隆并表达的人胸腺素α原 (prothymosinα ,ProTα)对几种重要细胞因子IFN γ、IFN α和TNF α分泌的影响。方法　在体外分离脾淋巴细胞、脾巨噬细胞及腹腔巨噬细胞 ,用ELISA法检测ProTα对IFN γ、IFN α和TNF α分泌的影响。结果　 10 - 7mol·L- 1 ProTα明显促进脾细胞分泌IFN γ(P <0 .0 5 ) ,该浓度的ProTα也明显刺激小鼠脾巨噬细胞分泌IFN α(P <0 .0 1) ;在小鼠腹腔巨噬细胞中 ,ProTα能明显刺激IFN α和TNF α的分泌 (P <0 .0 1)。结论　在体外实验中 ,ProTα对细胞因子IFN γ、IFN α和TNF α的分泌均有促进作用 ,这为ProTα进一步体内研究奠定了基础     

柚皮苷对人皮肤角质细胞分泌趋化因子RANTES及其核转录因子-kB信号通路影响的实验研究

目的：研究炎症性细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）和γ干扰素（IFN-γ）对人皮肤角质细胞（HaCaT）分泌趋化因子RANTES的诱导作用;以阿维A为阳性对照药,研究柚皮苷对此诱导作用的抑制作用及其机制。方法：将HacaT分为阴性对照组、模型刺激组（TNF-α＋IFN—γ）、阿维A预处理组（TNF-α＋IFN—γ＋阿维A）和柚皮苷预处理组（TNF-α＋IFN—γ＋柚皮苷）等;采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定HaCaT细胞经单用和合用TNF-α、IFN-γ刺激以及加入阿维A和柚皮苷后RANTES的分泌量。采用免疫细胞化学方法和Western blot法检测HaCaT中核转录因子-KB P65（NF—kB P65）蛋白的表达。结果：单用或合用TNF—α、IFN-γ可显著诱导细胞分泌RANTES,并以合用组作用最显著（P〈0．01）。柚皮苷、阿维A均能明显抑制TNF-α、IFN-γ诱导的RANTES的分泌（P〈O．01）及NF—kB P65蛋白的表达。结论：柚皮苷可以抑制TNF-α、INF-γ诱导RANTES的分泌及相关蛋白的产生,其机制可能是通过抑制NF—kB信号传导途径的活化而实现。     

OK-432肿瘤疫苗对DBA/2小鼠脾脏细胞中Th1细胞因子以及TNF-α分泌的影响

目的利用DBA/2小鼠移植舌癌荷瘤模型,探讨OK-432肿瘤疫苗对DBA/2小鼠脾脏细胞中Th1细胞因子以及TNF-α分泌的影响。方法 ELISA定量检测脾脏淋巴细胞所产生的IFN-γ,IL-2,TNF-α等细胞因子的分泌水平。结果 OK-432肿瘤疫苗组中IFN-γ、IL-2以及TNF-α的含量明显高于实验对照组(P<0.05)。结论 OK-432肿瘤疫苗可刺激荷瘤小鼠脾脏细胞Th1细胞及TNF-α的分泌,增强DBA/2小鼠的抗肿瘤免疫功能。     

柚皮苷对人皮肤角质细胞分泌趋化因子RANTES及其核转录因子-κB信号通路影响的实验研究

目的:研究炎症性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)对人皮肤角质细胞(HaCaT)分泌趋化因子RANTES的诱导作用;以阿维A为阳性对照药,研究柚皮苷对此诱导作用的抑制作用及其机制。方法:将HaCaT分为阴性对照组、模型刺激组(TNF-α+IFN-γ)、阿维A预处理组(TNF-α+IFN-γ+阿维A)和柚皮苷预处理组(TNF-α+IFN-γ+柚皮苷)等;采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定HaCaT细胞经单用和合用TNF-α、IFN-γ刺激以及加入阿维A和柚皮苷后RANTES的分泌量。采用免疫细胞化学方法和Western blot法检测HaCaT中核转录因子-κBP6(5NF-κBP65)蛋白的表达。结果:单用或合用TNF-α、IFN-γ可显著诱导细胞分泌RANTES,并以合用组作用最显著(P<0.01)。柚皮苷、阿维A均能明显抑制TNF-α、IFN-γ诱导的RANTES的分泌(P<0.01)及NF-κBP65蛋白的表达。结论:柚皮苷可以抑制TNF-α、INF-γ诱导RANTES的分泌及相关蛋白的产生,其机制可能是通过抑制NF-κB信号传导途径的活化而实现。     

重组人胸腺素α原体外对IFN-γ,IFN-α及TNF-α的影响

目的体外观察重组人胸腺素α原(prothymosin α,Pro Tα)对几种重要细胞因子分泌的影响。方法用脾淋巴细胞、脾巨噬细胞及腹腔巨噬细胞,以ELISA法检测Pro Tα对IFN-γ,IFN-α和TNF-α分泌的影响。结果1×10^-7 mol·L^-1 Pro Tα明显促进脾细胞分泌IFN-γ(P<0.05),该浓度的Pro Tα也明显刺激小鼠脾巨噬细胞分泌IFN-α(P<0.01);在小鼠腹腔巨噬细胞中,Pro Tα能明显刺激IFN-α和TNF-α的分泌(P<0.01)。结论Pro Tα对细胞因子IFN-γ,IFN-α和TNF-α的分泌均有促进作用。     

来氟米特对类风湿关节炎患者外周血Thl/Tcl细胞的影响

目的探讨来氟米特对类风湿关节炎(RA)患者外周血T淋巴细胞亚群的影响.方法采用细胞内细胞因子染色、三色流式细胞分析法检测单个细胞分泌细胞因子的情况.收集25位RA患者和10例接受来氟米特治疗前及治疗3个月后的RA患者的外周血,对CD4+、CD8+细胞分泌IL-4和IFN的情况进行检测.结果RA患者和健康对照组的外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞中,分泌IFN(的细胞群均比分泌IL-4的细胞群多,同健康对照组相比,RA患者外周血中Th1型细胞明显减少.产生IFN的Th1型、Tc1型细胞和产生IL-4的Th2型细胞在接受来氟米特治疗后明显减少,而Tc2型细胞则无明显增加或减少.结论来氟米特可能通过抑制Th1型和Tc1型的分化、减少Th1/Tc1型细胞因子如IFN(的分泌而发挥抗炎及改变类风湿关节炎病程的作用.     

阿糖胞苷刺激Jurkat细胞B7和细胞因子mRNA表达

目的探讨B7共刺激分子在T细胞活化和分化中的作用。方法阿糖胞苷(Ara-C)刺激Jurkat细胞,流式细胞术检测刺激前、后B7-1、B7-2的表达,RT-PCR检测刺激前、后B7-1、B7-2基因的表达,检测T细胞表面因子IL-3和IFN-γ的表达以及这两种细胞因子在Ara-C刺激Jurkat细胞后12,24,48,72,96,120,144 h时间动态变化。结果经Ara-C刺激Jurkat细胞后,均能使B7-1、B7-2表达上调,并且可诱导T细胞分泌细胞因子IL-3和IFN-γ,而未经Ara-C刺激的Jurkat细胞,无B7-1、B7-2的表达,均未诱导细胞因子的分泌。IL-3在T细胞活化12 h即可检测到,在48 h表达量最高,IFN-γ在T细胞活化24 h即可检测到,在72 h表达量最高。结论Ara-C可有效地刺激Jurkat细胞B7的表达,有效地增强肿瘤细胞的免疫原性,激活T细胞。B7在T细胞活化中起着重要作用。     

雷公藤甲素对类风湿性关节炎患者外周血T细胞的免疫抑制作用

目的:研究雷公藤甲素对类风湿性关节炎(RA)患者外周血T细胞免疫功能的抑制作用。方法:在RA患者外周血T细胞中加入T细胞多克隆刺激剂(0.2μg/ml)以活化淋巴细胞并分泌细胞因子。实验分为空白对照(常规培养液)组、抗人CD3抗体(anti-CD3)刺激(0.2μg/ml)组、雷公藤甲素(anti-CD3 0.2μg/ml+雷公藤甲素1 mmol/ml)组。采用密度梯度离心法分离RA患者的外周血单核细胞(PBMCs),加入雷公藤甲素,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞γ干扰素(IFN-γ)含量,流式细胞仪检测分泌IFN-γ、白细胞介素(IL)-2、IL-4与T细胞活化分子CD69和CD25的CD4+、CD8+T细胞百分比。结果:与anti-CD3刺激组比较,雷公藤甲素组PBMCs中IFN-γ含量减少,分泌IFN-γ、IL-2、IL-4的CD4+、CD8+T细胞百分比降低,分泌CD69和CD25的CD4+、CD8+T细胞百分比降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:雷公藤甲素可能通过抑制T细胞活化和细胞因子分泌来发挥免疫抑制作用,从而发挥对RA的临床治疗作用。     

Ⅱ型干扰素的免疫调节作用

干扰素 (IFN)是在哺乳动物宿主抵抗病原体过程中发挥复杂、主要作用的细胞因子。 型干扰素 (IFN-α和 IFN-β)由病毒感染细胞分泌。 型干扰素 (IFN-γ)由活化的 T细胞 (胸腺衍化细胞 )和自然杀伤细胞 (NK细胞 )分泌。干扰素具有抗病毒、调理吞噬细胞的杀菌活性 ,在抗原呈递中     

葡萄糖及细胞因子对胰岛素瘤相关蛋白-2表达水平的影响

目的探讨葡萄糖、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ对胰岛细胞自身抗原胰岛素瘤相关蛋白(IA)-2表达水平及胰岛素分泌水平的影响。方法以不同浓度的葡萄糖(3、7、11、30mmol/L)、10ng/mlIFN-γ及100ng/mlTNF-α分别刺激胰岛细胞系RIN5F24h和48h,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组RIN5F细胞中IA-2的mRNA表达水平,并用放射免疫法检测上清中胰岛素的浓度。结果RT-PCR结果显示以不同浓度葡萄糖(3、7、11、30mmol/L)分别刺激RIN5F细胞系后IA-2mRNA水平呈浓度依赖性和时间依赖性增加;TNF-α可抑制IA-2mRNA的水平,并且作用48h后IA-2表达水平显著降低(P<0.05);IFN-γ作用24h及48h均可显著抑制IA-2的表达(P<0.05)。TNF-α或IFN-γ刺激RIN5F细胞系后,上清中胰岛素水平均较基础值降低,并且作用48h后差异有统计学意义(P<0.05)。结论葡萄糖可使IA-2的mRNA水平呈剂量依赖性和时间依赖性增加,TNF-α、IFN-γ可抑制IA-2的mRNA表达和胰岛素分泌浓度。     

树突状细胞分泌的IFN-λ在丙型肝炎病毒感染中的作用

近年来在Ⅲ型干扰素(IFN-λ)基因区域的单核苷酸多态性可以很好地预测自发性的或是经过药物治疗的丙型肝炎病毒(HCV)感染患者的愈后。至此,越来越多的证据表明,人体先天性免疫应答与IFN-λ基因型效应息息相关。树突状细胞(DCs)在宿主HCV感染的免疫应答中起到关键作用,并且这些至关重要的作用在IFN-λ基因型效应中也正逐渐体现。DCs可以分为很多个亚群,其中主要分泌IFN-λ的DCs,有骨髓样树突状细胞和浆细胞样树突状细胞。基于DCs生物学的复杂性,本综述旨在总结目前已知的有关DCs在HCV感染中所起到的作用以及IFN-λ与DCs的关系。     

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞分泌功能的影响

目的探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子(TNF)受体-抗体融合蛋白(rhTNFR-Fc)治疗对强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞分泌细胞因子功能的影响。方法于基线,第1、4次给药和停药(第8次给药)后20d收集rhTNFR-Fc开放性随机对照临床试验的10例AS患者(50mg,1次/周)和13名健康对照外周血,用酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测rhTNFR-Fc治疗前后AS患者及健康对照外周血分泌TNF-α、白细胞介素(IL)-2、IL-6和干扰素(IFN)-γ的T细胞数变化情况。并与AS活动指数(BASDAI)及其各子项目、AS功能指数(BASFI)、患者总体评价(PGA)、夜间痛、总体背痛、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、血小板(PLT)等临床指标进行相关性分析。结果基线时分泌TNF-α、IL-2、IL-6和IFN-γ的T细胞数显著高于正常对照组(P值均<0.05),在给药后呈降低→升高→再降低的趋势,到停药后20d与基线时相比降低达到统计学意义。基线时分泌IL-6的细胞数与BASFI有显著的相关性;在给药第4次后,分泌TNF-α的细胞数与BASDAI-E有相关性,分泌IL-6的细胞数与BASDAI、夜间痛、总体背痛、BASDAI-E有显著相关性。结论 AS患者存在TNF-α、IL-6、IL-2、IFN-γ分泌功能的上调;rhTNFR-Fc治疗降低了AS患者T细胞分泌细胞因子的功能;分泌IL-6的细胞数与AS临床评价指标有一定相关性。     

不同细胞因子诱导树突状细胞体外抗肿瘤效应研究

目的研究不同细胞因子诱导的树突状细胞(DC)体外抗肿瘤效应。方法常规分离健康人外周血单核细胞,分别采用粒巨噬集落刺激因子(GM-CSF),白细胞介素(IL)-4,肿瘤坏死因子(TNF),GM-CSF、IL-4、α干扰素(IFN-α)细胞因子组合将其诱导为DC,并分别负载SMMC7721细胞冻融抗原;用流式细胞仪检测第9天时细胞表面HLA-DR、CD1α、CD80、CD83的表达;采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测各组刺激自体淋巴细胞增殖能力,并检测各组DC诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对SMMC7721细胞株的杀伤率。结果第9天显微镜下观察各组细胞,其细胞形态无明显差异,但流式细胞仪显示IFN-α组DC其膜表面标志CD80、CD83、CD1a表达上调,在刺激同种T细胞增殖能力方面,较TNF-α组DC效果明显。且IL-12分泌明显增加。在肝癌细胞株SMMC7221杀伤实验中,培养液中加入IFN-α后杀伤效应明显。结论与TNF-α相比,IFN-α诱导DC一定程度上能增强其特异性杀伤能力。     

重组人IL-18对核辐射损伤小鼠脾细胞因子的影响

为了探讨重组人IL-18(rhIL-18)对核辐射损伤后小鼠脾细胞因子的免疫调节作用,对32只C57小鼠分4组进行核辐射损伤,2周后取小鼠脾淋巴细胞体外培养,用试剂盒测定其培养上清中IL-2、IFN-γ、GM-CSF、IL-4和脾细胞抗体形成量,观察rhIL-18对核辐射损伤小鼠脾细胞因子的免疫调节作用。结果表明与对照组比较,rhIL-18能够提高核辐射损伤前后小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ、GM-CSF和IL-2的能力,辐射损伤后应用rhIL-18组的细胞因子水平高于核辐射损伤前应用rhIL-18组;但对IL-4分泌能力和脾细胞抗体形成量没有影响。结论:rhIL-18具有促进核辐射损伤小鼠脾细胞分泌IL-2、IFN-γ和GM-CSF的作用。     

白癜风患者外周血单个核细胞IL-2 IL-10和IFN-γ的表达特点

目的探讨白癜风患者中Th1/Th2型细胞因子表达的情况。方法采用细胞培养技术对白癜风患者和正常对照者的外周血单个核细胞(PBMC)在刀豆素A(ConA)作用下进行体外培养;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中白细胞介素(IL)2、IL10,干扰素(IFN)γ含量。结果①白癜风患者PBMC产生IL2水平高于正常对照组(P<0.05),IL10水平低于正常对照组(P<0.01)、IFNγ水平高于正常对照组(P<0.05)。②患者和对照组PBMC加ConA刺激孔中IL2高于相应自然增殖孔(P<0.05,P<0.01)。结论白癜风患者Th1型细胞因子的表达增高,Th2型细胞因子的表达降低,可能在发病机制中起一定作用。ConA可刺激PBMC分泌细胞因子。     

围手术期肠外营养(PN)对食管癌患者IFN-γ的影响

目的 观察食管癌患者经肠外营养(PN)支持后辅助性T淋巴细胞所分泌细胞因子IFN-γ的变化,为PN作为一种免疫疗法提供依据。方法 应用酶联免疫吸附法检测食管癌患者体内IFN-γ的含量,同时检测外周血单个核细胞经或不经PHA刺激后培养上清液中的IFN-γ的含量。结果 经肠外营养支持后,体内IFN-γ的含量高于对照组,经PHA刺激后,两组间的这一差异更加明显。结论 围手术期肠外营养支持能够促进T淋巴细胞亚群的移动,提高食管癌患者的细胞免疫功能,有利于改善患者的预后。     

SEA体内杀伤S180肉瘤效果及其细胞因子的测定

目的:研究SEA抗肿瘤的效果及其对细胞因子干扰素(IFN)-γ的影响,探讨其作用机制。方法:采用S180细胞建立小鼠肉瘤模型40只进行体内抑瘤实验,随机分成4组,包括SEA高剂量组(n=10)、SEA中剂量组(n=10)、SEA低剂量组(n=10)和对照组(n=10),前3组分别注射0.5、0.25、0.05mg/kg的SEA,对照组注射生理盐水,接种第5天起测量各组小鼠肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率。治疗结束后取小鼠血清并测定IFN-γ的含量。结果:SEA高、中和低剂量组抑瘤率分别为(44.00±3.21)%、(3.92±2.12)%和(2.33±1.95)%,SEA高剂量组脾脏指数和IFN-γ的含量明显增加,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01),但肿瘤质量却明显减小。结论:SEA通过激活T细胞,分泌细胞因子IFN-γ抑制小鼠体内S180肉瘤生长。     

银杏叶提取物对兔血管平滑肌细胞分泌细胞因子的影响

目的 :探讨氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)对兔血管平滑肌细胞 (VSMC)分泌细胞因子的影响 ,以及银杏叶提取物 (GbE)的干预作用。方法 :兔血管平滑肌细胞分 6组处理 ,以酶联免疫法检测培养上清液中细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα) ,白细胞介素 6(IL 6) ,白细胞介素 8(IL 8)水平。结果 :oxLDL(5 0mg·L-1)对TNFα,IL 6,IL 8分泌水平的增加于刺激后 8h达 6.4～ 8.5倍 ;GbE呈浓度 (1～ 2 0 0mg·L-1)、时间 (1～ 2 4h)依赖地抑制细胞因子分泌 ,并可显著降低oxLDL的上述作用 (与对照组比较均P <0 .0 5 )。结论 :oxLDL可促进兔VSMC分泌细胞因子TNFα,IL 6和IL 8。GbE可能通过抑制基础的及oxLDL刺激的细胞因子分泌对兔VSMC生物学功能发挥调控效用