诊断超声照射大鼠早孕胚胎组织细胞Bcl-2表达的影响

目的 研究诊断超声照射大鼠早孕胚胎组织细胞Bcl-2表达的影响,探讨诊断超声诱导细胞凋亡的机制.方法 采用频率为3.5 MHz超声分别照射孕7 d大鼠腹部子宫体表投影区,分为照射0 min组、10 min 组、20 min 组、30 min 组,超声照射后24 h取胚胎组织,SP免疫组织化学检测Bcl-2蛋白表达水平的变化.结果 随着照射时间的延长,各组Bcl-2阳性表达率逐渐下降,与照射时间呈负相关.其中10 min组与0 min组相比差异无显著性(P>0.05),20 min组、30 min组与0 min组相比差异有非常显著性(P<0.01).结论 诊断超声持续照射大鼠早孕胚胎超过20 min使Bcl-2 蛋白水平表达下调,提示诊断超声长时间照射能抑制抗凋亡因子Bcl-2的表达,从而诱导细胞凋亡.     

诊断剂量彩色多普勒超声对小鼠早孕胚胎组织细胞安全性的影响

目的：检测诊断剂量彩色多普勒超声不同时间照射后对早孕小鼠胚胎组织细胞凋亡及超微结构的影响。方法：应用3.5MHz探头固定持续照射孕鼠腹部，24小时后取出标本，琼脂糖凝胶电泳观察不同照射时间的DNA片段情况及细胞超微结构的变化。结果：琼脂糖凝胶电泳显示，除对照组外，其余3组均出现凋亡梯形，且随时间的延长，梯形越明显，电镜结果显示，除对照组外，其余各组均可见不同程度的凋亡特征改变；细胞核变形，染色质稀疏；线粒体变形，肿胀，嵴模糊，消失，部分空泡化；内质网网腔扩张，核糖体部分脱落；凋亡小体形成，结论：诊断超声持续照射小鼠胚胎可引起胚胎组织细胞凋亡及超微结构的变化。且这种影响有时间依赖性。     

诊断用彩色多普勒超声辐照对小鼠早孕胚胎细胞凋亡的影响

目的：探讨诊断用彩色多普勒超声对小鼠早孕胚胎组织细胞凋亡的影响。方法：20只孕6-7 d成年昆明种小鼠,按彩超辐照时间不同随机等分为4组,Ⅰ组（对照组）、Ⅱ组（辐照10 min组）、Ⅲ组（辐照20 min组）、Ⅳ组（辐照30min组）,仪器采用百胜公司DU-8型彩色超声诊断仪。照射条件：腹部凸阵探头,探头频率为3.0MH z,M I=0.9,T is=0.9,照射后24 h取小鼠胚胎标本。利用流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。结果：各组胚胎组织均存在凋亡细胞,照射30 min组凋亡细胞百分率高于0 min组,差异有显著性（P〈0.05）。结论：诊断用彩色多普勒超声过度辐照早孕小鼠,可诱发胚胎组织细胞凋亡。     

彩色多普勒超声对大鼠早孕胚胎组织细胞凋亡及Caspase3表达的影响

目的探讨诊断用彩色多普勒超声对大鼠早孕胚胎组织细胞凋亡及Caspase3（天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3）表达的影响。方法探头频率为2.5MHz的彩色多普勒超声固定持续照射孕鼠子宫体表位置，60只大鼠按照射时间分为0、5、10、20、30及60min组。利用Western blotting检测胚胎组织Caspase3表达强度变化，进行Caspase3活性测定，流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。结果各组胚胎组织中Caspase3蛋白均有表达，照射30、60min组Caspase3表达增强，与0min组比较，相差有显著性意义（P〈0.05）。照射20、30、60min组Caspase3活性高于0min组，相差有显著性意义（P〈0．05）。各组胚胎组织均存在凋亡细胞，照射30、60min组凋亡细胞百分率高于0min组，相差有显著性意义（P〈0．05）。结论诊断用彩色多普勒超声过度照射早孕大鼠，可促使凋亡基因Caspase3蛋白合成增加，活性升高，诱发胚胎组织细胞凋亡。     

彩色多普勒超声对大鼠早孕胚胎组织细胞凋亡及Bcl-xl表达的影响

目的 探讨诊断用彩色多普勒超声对大鼠早孕胚胎组织细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-xl基因(Bcl-xl)表达的影响.方法 彩色多普勒超声固定持续照射孕鼠子宫体表位置,60只大鼠按照射时间分为0、5、10、20、30、60 min组.利用Western blotting检测胚胎组织Bcl-xl表达强度变化,流式细胞仪检测胚胎组织凋亡细胞百分率.结果 各组胚胎组织中Bcl-xl蛋白均有表达,照射20 min、30 min组较0 min组Bcl-xl表达增强(P<0.05),照射60 min组较 0 min组Bcl-xl表达减弱(P<0.05).各组胚胎组织均存在凋亡细胞,照射30 min组、60 min组凋亡细胞百分率高于0 min组 (P<0.05).结论 诊断用彩色多普勒超声过度照射早孕大鼠,可诱发胚胎组织细胞凋亡,抑凋亡基因Bcl-xl参与了细胞凋亡的调节过程.     

诊断超声对大鼠输卵管组织细胞凋亡的影响

目的：检测诊断超声对大鼠输卵管组织细胞凋亡状况的影响，探讨诊断超声的安全性。方法：应用超声诊断仪，采用不同超声输出功率，对SD大鼠输卵管持续辐照30min。结果：对照组和各照射组大鼠输卵管组织细胞凋亡率有显著差异（P＜0．01），12h细胞凋亡率增加，24h增加最多，48h细胞凋亡率下降。光学显著镜观察到细胞凋亡的形态学改变：染色质致密固缩聚集于细胞核核膜，细胞核裂解。结论：诊断超声辐照大鼠输卵管可诱导细胞凋亡增加，但存在一定的可复性，且细胞凋亡率与超声输出功率呈正相关。     

诊断超声对大鼠子宫组织细胞凋亡状况的影响

目的　检测诊断超声对大鼠子宫组织细胞凋亡状况的影响 ,探讨诊断超声的安全性。方法健康SD雌性大鼠 42只 ,鼠龄为出生后 80～ 85d ,体重 (2 3 0± 5 )g ,随机分为 7组。应用诊断超声对SD大鼠子宫持续辐照 3 0min ,按输出功率及辐照后时间不同分组 ,对照组为空照组。进行常规石蜡包埋切片 ,TUNEL技术检测上述各组凋亡细胞 ,光学显微镜进行形态学观察 ,透射电子显微镜观察超微结构。结果　超声辐照后 12h细胞凋亡率增加 ,2 4h增加最多 ,48h细胞凋亡率下降 ,96h细胞凋亡率继续下降 ,12 0h恢复至对照组水平。光学显微镜和透射电子显微镜观察到细胞凋亡的形态学改变 :染色质致密 ,固缩聚集于细胞核核膜 ,呈境界分明的块状或新月形小体 ,细胞核裂解和凋亡小体形成。结论　诊断超声辐照大鼠子宫可诱导细胞凋亡增加 ,但存在一定的可复性 ,且细胞凋亡率与超声输出功率呈正相关     

低频超声照射兔胚胎后对胎盘组织细胞凋亡的影响

目的探讨低频超声终止妊娠的可能性并观察低频超声对兔胎盘组织细胞凋亡的影响。方法利用353kHz低频超声6种声强各60s直接照射妊娠第10d兔胚胎,妊娠20d时观察各组胚胎死亡率;选用完全抗孕剂量(45W/cm2×60s)照射胚胎,照后24、48、72、96、120、168、192h留取胎盘,TUNEL技术检测各组凋亡细胞数量。结果照射组中声强30W/cm2、35W/cm2及≥40W/cm2组的胚胎死亡率分别为25.00%(12/48)、72.88%(43/59)和100%(64/64、43/43、40/40、35/35)。超声辐照胚胎后24h细胞凋亡增加,96h凋亡细胞增加最明显,120h凋亡细胞数量下降,192h细胞凋亡恢复至对照组水平。结论低频超声抗早孕具有潜在的可行性,低频超声辐照胚胎可诱导胎盘组织细胞凋亡增加,但存在一定可复性。     

诊断级超声诱导早孕绒毛细胞凋亡

目的通过研究诊断级超声诱导早孕绒毛细胞凋亡的可能性来评价孕期超声诊断的安全性.方法采用电镜技术、流式细胞分析技术研究超声对绒毛细胞的凋亡诱导.结果①流式细胞仪分析可见实验组有较高的凋亡峰(M1峰),凋亡率随辐照时间增加而显著上升(P＜0.005);②电镜观察绒毛细胞有凋亡的特征染色质浓缩、边聚、核裂解,内质网扩张、空泡化.结论孕早期接受一定剂量的超声辐照能够诱导绒毛细胞凋亡.     

诊断超声对大鼠卵巢细胞凋亡的影响

目的探讨诊断超声对大鼠卵巢细胞凋亡状况的影响.方法健康SD雌性大鼠30只,鼠龄出生后80～85 d,体重(230±5)g,随机分为5组,应用Siemens Sonoline Prima超声诊断仪,探头频率 7.5 MHz,超声输出功率 3.9 mW,空间峰值时间平均声强(ISPTA)为13 mW/cm2,对SD大鼠卵巢持续辐照3 0 min,分别于辐照后12 h(Ⅰ组)、24 h(Ⅱ组)、48 h(Ⅲ组)取材;超声输出功率 2.0 mW,ISPTA为7 mW/cm2,对SD大鼠卵巢持续辐照30 min,辐照后24 h取材(Ⅳ组).对照组为空照组.进行常规石蜡包埋,切片,TUNEL技术检测上述各组凋亡细胞,光学显微镜进行形态学观察,透射电子显微镜观察超微结构.结果对照组和各辐照组大鼠卵巢组织细胞凋亡率差异有显著性意义(P <0.01),12 h细胞凋亡率增加,24 h增加最多,48 h细胞凋亡率下降.光学显微镜和透射电子显微镜观察到细胞凋亡的形态学改变染色质致密,固缩聚集于细胞核核膜,呈境界分明的块状或新月形小体,细胞核裂解.结论诊断超声辐照大鼠卵巢可诱导细胞凋亡增加,但存在一定的可复性,且细胞凋亡率与超声输出功率呈正相关.     

超声波对鼠胚胎生长发育及其分泌生长因子的影响

目的：研究超声波对小鼠胚胎生长发发泌表皮生长因子（ＥＧＦ）、转化生长因子１（ＴＧＦ－β１）、胰岛素样生长因子－Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）功能的影响。方法：将正常及经超声波照射照组的小鼠二细胞胚胎体外培养至囊胚期,观测其生长发育状况,同时用放免法／酶免法检测胚胎培养液中ＥＧＦ、ＴＧＦ－β１、ＩＧＦ－Ⅱ的含量并进行比较,用原位杂交法检测两组胚胎ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达。结果：１．两组胚胎的各面形态学指标比较,     

超声诱导K562细胞凋亡机制的研究

目的本实验探讨超声体外诱导K562细胞凋亡的影响及其机制。 方法频率为1．8MHz的超声波辐照正常外周血单核细胞和体外培养的K562细胞，辐照后用光学显微镜观察凋亡细胞形态学改变、流式细胞仪检测原位末端脱氧核苷酸转移酶（TUNEL）和p53、bcl-2、caspase-3、Fas、FasL蛋白表达水平。 结果电压为10mV超声辐照细胞10min后12h和24h，光学显微镜下可见凋亡小体形成等典型形态学改变，K562细胞凋亡率及p53、caspase-3、Fas、FasL蛋白表达水平分别显著高于对照组（P〈0．001）；而bcl-2蛋白表达水平明显低于对照组（P〈0．001）。 结论超声可以诱导K562细胞凋亡，其机制可能与p53、caspase-3、Fas、FasL蛋白表达增高及bcl-2蛋白表达降低有关。     

诊断超声与大鼠角膜细胞凋亡

目的：探讨诊断超声对大鼠角膜细胞凋亡的影响。方法：４０只ＳＤ雄性大鼠随机分为５组：对照组为空照组、超声照射后即刻取材组、１２小时取材组、２４小时取材组、４８小时取材组。应用ＨＰ８５００彩色多普勒超声诊断仪对大鼠眼球进行３０分钟的持续照射,２４小时后经动物取角膜进行凋亡检测。结果对照组和即刻组大鼠角膜上皮细胞、基质细胞和内皮细胞的凋亡率无差异,１２小时凋亡细胞增加,２４小时增加最多,４８小时凋亡数下     

诊断超声对大鼠睾丸生殖细胞凋亡的研究

目的 检测诊断超声不同时间照身后对大鼠睾丸组织细胞凋亡的影响。方法 应用ＨＰ８５００彩色多普勒诊断仪（探头频率７．５ＭＨｚ,超声输出功率６．８Ｗ,空间平均时间平均声强（Ｉｓａｔａ）３．４ｍＷ／ｃｍ＾２）固定特续照射大鼠睾丸组织,分为５分钟组、１０分钟组、２０分钟组,３０分钟组和空照组。照射后２４小时取睾丸,应用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（ＴＵＮＥＬ）技术检测上述各组凋亡细胞。结果 超声持续照射５     

诊断超声对不同发育阶段大鼠睾丸组织凋亡的研究

目的探讨诊断超声对不同发育阶段大鼠睾丸组织生精细胞凋亡的影响。方法３６只ＳＤ雄性大鼠随机分为６组。应用ＨＰ８５００彩超仪对大鼠睾丸进行３０ｍｉｎ持续照射,２４ｈ后取睾丸进行凋亡检测。结果不同年龄组生精细胞均有不同程度的细胞凋亡,以出生后３０ｄ凋记细胞数最多,随着龄增长凋亡细胞数有减少趋势,超声照射３０ｍｉｎ后各实验组凋亡细胞数均有显著增加。结论不同发育阶段大鼠睾丸生精细胞凋亡率不同,超声照射３０ｍ     

超声波抗小鼠早孕的动物实验研究Ⅱ．引起早孕期胚胎急性死亡的超声波剂量及温热机制研究

妊娠第１０～１１和第１４～１５天的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠被麻醉后，经腹正中切口将子宫角外置于腹壁上。右、左侧子宫角近卵巢的第一或第二个着床点分别定为辐照组或假照组。用０．８ＭＨｚ连续超声波分别以五种强度（Ｏｗ／ｃｍ~２一假照；８Ｗ／ｃｍ~２，１２Ｗ／ｃｍ２，１６Ｗ／ｃｍ~２，２０Ｗ／ｃｍ~２）辐照妊娠鼠的１５８个着床点，实时观察心电变化后，还纳子宫，关腹，于妊娠第１８天时检查。另有６０只妊娠鼠作超声热效应研究。结果：心电消失后未再出现组中，胚胎的死亡率为１００％，在妊娠第１０～１１天组中超声波致胚胎急性完全性死亡剂量为２０Ｗ／ｃｍ~２，６１秒；１６Ｗ／ｃｍ２，１０１秒；而妊娠第１４～１５天组的剂量则是：２０Ｗ／ｃｍ~２，６８秒。用１２Ｗ／ｃｍ２，１６Ｗ／ｃｍ~２和２０Ｗ／ｃｍ~２三组声强辐照妊娠第１４天胚胎着床点９０秒，胚胎体内温度平均升高６．８８℃，１１．７９℃和２６．５９℃。     

不同孕期不同条件超声辐照对胎鼠生长发育的影响

本实验研究了孕鼠在孕早期和孕中期接受不同的时间、不同次数诊断超声辐照后，母鼠产仔情况及胎鼠身长，体重，脏器系数与胎鼠生长发育的关系，结果显示：孕早期接受超辐照２、４、６次，每次３分钟孕中期接受超声辐照２、４、６次，每次３分钟和１０分钟各组之间均有显著性差异。     

超声辐照对大鼠颈总动脉损伤后细胞凋亡的影响

目的　观察不同频率 ,不同声强的超声辐照对大鼠颈总动脉球囊过扩张后平滑肌细胞凋亡的影响 ,为超声防止再狭窄筛选适宜的治疗参数。方法　 3 5只雄性Wistar大鼠 ,体重 ( 3 5 0± 5 0 )g ,随机分为 7组 ,对照组用 2F球囊导管对大鼠颈总动脉进行过扩张 ;治疗组为球囊扩张 +超声辐照 ,在球囊扩张后分别用频率为 70 5kHz ,2 .17MHz ,5 .48MHz ,强度为 1W cm2 ,2W cm2 (共 6组 )的连续型超声波对损伤血管局部进行 3min照射。喂养 2周后取材 ,TUNEL标记法检测凋亡细胞百分率的改变 ,以观察超声辐照对血管平滑肌细胞凋亡的影响。结果　球囊损伤 2周后治疗组TUNEL阳性细胞率分别有不同程度的升高 ,与对照组比较 70 5kHz ,1W cm2 升高明显 [( 3 0 .2± 3 .8) %vs( 18.6± 2 .4) % ,P <0 .0 5 ) ] ,有显著差异 ,而其它 5组的TUNEL阳性细胞率有不同程度的升高 ,但与对照组比较 ,经统计学分析无差异显著(P >0 .0 5 )。结论　一定剂量的超声辐照能诱导大鼠颈总动脉损伤后血管平滑肌细胞凋亡。在本实验设置的参数中 ,70 5kHz、1W cm2 超声辐照能增加平滑肌细胞凋亡 ,一定程度上减轻了其狭窄程度     

超声波致小鼠胚胎急性死亡的机理及剂量研究

妊娠第10~11和第14~15天的BALB/C小鼠被麻醉后,经腹正中切口将子宫角外置于腹壁上。右、左侧子宫角近卵巢的第一或第二个着床点分别定为辐照组或假照组。用0.8MHz连续超声波分别以五种强度(OW/cm~2-假照:8W/cm~2,12W/cm~2,16W/cm~2,20W/cm~2)辐照158只妊娠鼠着床点,实时观察心电变化后,还纳子宫,关腹,于妊娠第18天时检查60只妊娠鼠作超声热效应研究。结果:心电消失后未再出现组中,胚胎的死亡率为100%,在妊娠第10~11天组中超声波致胚胎急性完全性死亡剂量为20W/cm~2,61秒:16W/cm~2,101秒,而妊娠第14~15天组的剂量是:20W/cm~2,68秒。用12W/cm~2,16W/cm~2和20W/cm~2三组声强辐照妊娠第14天胚胎着床点90秒,胚胎体内温度平均升高6.88℃,11.7℃和20.59℃。