亲和素—生物素—酶复合物系统酶联免疫吸附技术

酶联免疫吸附技术(ELISA)巳广泛用于各种抗原和抗体的测定,敏感性仅次于放射免疫法,但无放射性物质的污染,不需复杂的仪器,方法简单,巳被越来越多的人接受。1979年Guesdon 等将亲和素—生物素系统)Avidin—biotin systems,A—B系统)应用于ELISA 法和组织免疫酶染,使     

链霉亲和素—生物素—ELISA方法的建立及其在HBsAg测定中的应用

根据链霉亲和素（ＳＡ）与生物素（Ｂ）之间有很强亲和力的原理，建立了ＥＬＩＳＡ板先用ＳＡ包被再与生物素化抗体结合的间接包被方法。通过试验，选择了生物素化白蛋白（Ｂ－ＢＳＡ）预包被，再连接ＳＡ以制备ＳＡ酶标板。应用生物素化的ＨＢｓ单抗及酶标记的抗ＨＢｓ单抗，建立了检测ＨＢｓＡｇ的ＳＡＢ－ＥＬＩＳＡ方法，得到良好的效果。     

检测和鉴别多种抗原的新的彩色乳凝试验

免疫测定法已被广泛地用于定性或定量检测.但是其中的绝大多数方法只能检出单一的抗原.尽管某标记技术(如酶标记、荧光标记、电镜中的彩色微球标记等)可以弥补上述不足,而实验设备的添置却限制了这一技术的普及.作者结合传统乳凝试验和标记技术的各自优点,使用彩色聚苯乙烯乳胶建立了检测多群沙门氏菌、甲型链球菌(GAS)的新的乳凝试验.方法:用辛酸法平行制备B、C、D群沙门氏菌、甲型链球菌的抗血清和正常兔血清的IgG类抗体,并溶于pH8.2甘氨酸缓冲盐水备用.1ml IgG溶液(0.3～1.0mg/ml)分别与5mg相应色彩的乳     

固相抗体捕获红细胞吸附试验检测甲肝病毒lgM抗体

甲型肝炎的血清学诊断,有赖于特异的HAVIgM 抗体的证实.在检测病毒特异IgM抗体的方法中.抗体捕获法是最好方法之一.该技术已具体在检测许多各种传染因子IgM抗体的固相放射免疫测定(RIA)和ELISA中应用.Duer-meyer等首先在ELISA中用来检测HAV特异IgM抗体.作者建立了一种检测HAV特异IgM抗体的固相抗体捕获血细胞吸附(SPACH)试验.并与HAI和RIA法比较.     

乳凝及乳凝抑制试验用于钩体病诊断的初步研究

用乳凝试验方法检查了615份不同来源的人、畜血清,证明本法敏感性较凝溶试验高。对172份“早期”钩体病人血清的检验,阳性率37.2%,而对83份钩体病恢复期血清,则其与凝溶试验符合率达96.1%,且可测出凝溶滴度较低的抗体。用乳抑试验检查的172份“早期”钩体病人血清,阳性率较低,15.1%。乳凝、乳抑试验二法同时应用,则阳性率可提高至52.3%。但漏检率仍较高。与培养、凝溶试验的总符合率为63.3%。作者初步认为: (1) 乳凝试验适用于基层作钩体病诊断及大量标本凝溶试验前的初筛。(2) 乳抑试验尚不穗定,需提高乳抗质量,改进方法。     

生物素-亲和素呈色法测定血清载脂蛋白多态性

目的 探讨用生物素-亲和素作呈色系统在检测血清载脂蛋白(ApoA)多态性时的灵敏性。方法 应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺垂直板电泳(SDS—PAGE)及免疫印迹分析技术，以ApoA单克隆抗体为一抗，生物素标记的抗IgG为二抗和链霉素亲和素-过氧化物酶系统检测ApoA多态性。结果 检测210例人群，检出率81．4％，检出最小量92ng。结论本法特异性强，灵敏度高。     

重氮乳反向乳凝与乳凝试验用于伤寒、副伤寒病早期快速诊断(文摘)

本文报道应用新型免疫微球—重氮基聚苯乙烯胶乳,研制成功伤寒、副伤寒重氮乳反向乳凝试剂(RDLAT),用于直接检测标本中相应抗原;并用聚苯乙烯胶乳为载体制成伤寒、副伤寒乳凝试剂(LAT),用于检测标本中相应抗体.试验采用玻片凝集法:取印有红圈的黑色反应板,于第1行上下两圈内各加早     

艾滋病病毒抗体检测结果分析

目的 了解重庆市渝北区劳改、劳教人员(下称两劳人员)艾滋病病毒(HIV)的感染情况,以指导今后的防治工作.方法 对辖区内的两劳在押人员进行HIV抗体初筛试验,阳性者送重庆市疾病预防控制中心确认.结果 2006年共检测两劳人员1 396例,初筛阳性9例,确诊8例.结论 两劳人员中艾滋病感染率高于普通人群,因此,艾滋病的防治工作应加大宣传力度,特别是对吸毒人员中HIV感染者的管理.     

应用抗生物素——生物素酶标法(ABC法)检测日本血吸虫抗体

生物素和抗生物素系统(Biotin—AvidinSystem简称BAS)是近年来在免疫学领域的一项新技术。它具有敏感、微量、应用范围广等特点。Rao检测人血清IgE时比较了五种方法,发现ABC—ELISA法的敏感性已达到SPRIA的0.1～5ng的水平。     

疱疹病毒感染者病毒抗原和相应抗体的检测对比

免疫荧光技术用于检测衣原体 ,EB病毒 [1] 抗体等已较广泛 ,但用于测定病毒抗原报道甚少。为此 ,我们采用免疫荧光法检测疱疹病毒 (HSV)抗原 ,并与酶联免疫吸附试验 (ELISA)进行比较。材料和方法一、主要试剂羊抗人 lg G抗体 ,羊抗人 lg G荧光抗体 ,卫生部上海生物制品所产品 ;酶联免疫测定盒广州中山生物制品公司产品。二、标本采集与处理对照组取自健康妇科体检的宫颈刮片 ,淋病及霉菌性阴道炎分泌物 ,梅毒皮损刮取物等标本共 64份 ,患者组取自皮肤性病科和性病防治研究中心初诊为疱疹病毒感染的患者皮肤粘膜损伤处刮片及疱疹液 ,年…     

疱疹病毒感染者病毒抗原和相应抗体的检测对比

免疫荧光技术用于检测衣原体,EB病毒［1］抗体等已较广泛,但用于测定病毒抗原报道甚少。为此,我们采用免疫荧光法检测疱疹病毒(HSV)抗原,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较。 材料和方法 一、主要试剂 羊抗人lgG抗体,羊抗人lgG荧光抗体,卫生部上海生物制品所产品;酶联免疫测定盒广州中山生物制品公司产品。 二、标本采集与处理 对照组取自健康妇科体检的宫颈刮片,淋病及霉菌性阴道炎分泌物,梅毒皮损刮取物等标本共64份,患者组取自皮肤性病科和性病防治研究中心初诊为疱疹病毒感染的患者皮肤粘膜损伤处刮片及疱疹液,年龄18～55岁,刮取物及分泌物均涂布于洁净载玻片上以备检验。 作ELISA检验者取临床初诊为疱疹病毒感染患者的血清作检测。作直接荧光抗体法(DFA)和间接荧光抗体法(IFA)检验的标本,将疱疹液及皮肤粘膜病灶刮取物作细胞涂片,丙酮固定,干燥后分别进行DFA和IFA测定。     

酶免疫法检测PGF_(2a):生物素-链霉素亲生物素蛋白放大系统的应用

血液循环中前列腺素F-2α(PGF_(2a))通过肺部时,失活并代谢为13,14-二氢-15-酮-PGF_(2α)(PGFM)。因此,PGFM 是外周血浆中PGF_(2α)实测的指标。七十年代以后,放射免疫法(RIA)已成功地应用于前列腺素(PGs)的常规测定,具有灵敏、可靠和实用的特点,为了避免RIA 因放射性同位素的使用和管理,而带来的不便。作者发展了一种新型酶免疫系统,更替RIA 来测定PGFM,具有高度灵敏性,特异性和可重复性。实验试剂的研制:1.生物胞素-PGFM 的合成     

乙型肝炎病毒X抗体检测的临床意义

[目的]了解乙型肝炎病毒X抗体（HBxAb）在急慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中的表达情况，探讨HBxAb与上述疾病的相关性及临床意义。[方法]应用单克隆HBxAg包被反应板，检测患者血清中HBxAb的酶联免疫吸附方法。共检测33例急性乙型肝炎、44例慢性乙型肝炎、39例肝癌、59例肝硬化患者血清中抗HBx的分布情况。[结果]在急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝癌、肝硬化患者血清中抗HBx的阳性率分别为27．8％、52．2％、66.7％、64.4％，以在肝癌中的检出率最高。上述抗HBxAb阳性检出率与42例乙型肝炎表面抗原阴性结果比较P〈0．01，有统计学意义。[结论]HBxAb在乙型肝炎后的肝硬化和肝癌患者检出率高。可提示，随着肝病的发展与迁延，抗HBx的表达似乎在增加，提示抗HBx可能参与肝组织的免疫病理性损伤。     

巨细胞病毒抗体试验及其临床评价

近年来,输血引起巨细胞病毒(CMV)感染的传播,越来越受到重视。这一感染司使各种高危受血者产生严重的后果,如早产儿,移植病人和脾切除病人。这些高危病人,使用经选择的 CMV 阴性血液非常有效,一些国家以此作为预防措施。为此,已建立了一种检测 CMV 抗体的酶联免疫测定试验(ELISA),并在供血者巾估价了这一试验。最近,为了简化试验过程,还建立了一种仅一个步骤的 ELISA.本文介绍了使用这一试验所获得的初步结果。结果表明:这一试验与间接血凝试验比较,符合率为98.6%.以补体结合试验作判断,ELISA 的敏感性与特异性分别为98.6%与99%。根据年龄相关的     

亲合素-生物素增强酶免疫斑点法检测甲型肝炎IgM抗体

我们把ABC 引入酶免疫斑点试验(DotImmunobinding Techique 简称DIBT)中建立ABC-DIBT 法,用以检测人体中甲型肝炎早期IgM抗体,并获得满意结果.一、材料1.酯化生物素(BNHS),亲合素-生物素-辣根     

应用反向乳凝法快速检测HBsAg的探讨

HBsAg是最常见，最重要的乙型肝炎标志物，我们于1996年对我区部份中学生进行健康检查中应用反向乳凝法检测了610人份血清的HBsAg、现将结果报告如下：材料与方法：（1）血清：610份血清系1996年临川文昌桥区部份中学生的血清。（2）试剂：HBsAg检测试剂盒由西安市唐都免疫诊断试剂研究所提供。（3）方法：反向乳凝试验：取1滴（约25μl）血清与等量HBsAg检测试剂在清洁玻板上用小棒混合、连续转接促进凝集、在间接光下观察结果。时间不超过6min。反向间接血凝试验（RPHA）：略。结果与讨论：（1）敏感性；将反向乳凝试验与RPHA进行…     

检测病毒特异性IgG和IgM抗体的一种新方法

作者以巨细胞病毒(CMV)作模型介绍一种快速而可靠地检测病毒特异性Igs的新方法.将病人血清与病毒抗原一起孵育,然后离心取得病毒-抗体复合物,再加入抗IgG和抗IgM致敏的乳胶颗粒,确定结合抗体的类别和性质.抗原制备将滴度为10~(4.2)TCID_(50)的CMV接种单层人胚成纤维细胞(F2H或F19H),37℃持续振摇孵育1小时后,加入F-11(MEM:GIBCO)维持液.感染后2～3天换液一次,到第4～6天弃去维持液,用胰酶消化单层细胞,500×g离心10分钟,弃     

1535例育龄妇女巨细胞病毒IgG和IgM抗体检测分析

目的通过对育龄妇女人巨细胞病毒(CMV)IgG和IgM水平的调查,了解育龄妇女对巨细胞病毒免疫力和近期感染状况。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对1 535例育龄妇女进行血清CMV-IgG和CMV-IgM水平检测。结果 1 535例育龄妇女CMV-IgG阳性率为47.82%,其中20~29岁组和30~40岁组阳性率分别为50.51%和42.99%,两组比较有显著差异(P<0.05);CMV-IgM阳性率为10.75%,其中20~29岁组和30~40岁组阳性率分别为11.05%和10.20%,两组比较无显著差异(P>0.05)。结论约有一半的育龄妇女对CMV有免疫力,育龄妇女中CMV近期感染率呈上升趋势。