血管性痴呆小鼠海马NMDA受体mRNA表达特征及石杉碱甲的影响

目的　观测石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马神经元N-甲基D-天门冬氨酸受体原位杂目的　观测石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马神经元N-甲基D-天门冬氨酸受体原位杂交变化的影响,以探讨其在血管性痴呆发病中的作用及石杉碱甲干预作用的机制。方法　双侧颈总动脉线结,反复缺血-再灌注法制备模型,药物组用石杉碱甲溶液灌胃,跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变,采用原位杂交技术观测小鼠海马神经元 N-甲基 D-天门冬氨酸受体的表达变化。结果　石杉碱甲组小鼠学习、记忆成绩优于模型组(P < 0.01),其海马 N-甲基 D-天门冬氨酸受体 mRNA表达也明显增高(P <0.01)。结论　石杉碱甲改善血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩与其恢复海马低水平的N-甲基D-天门冬氨酸受体mRNA有关。     

血管性痴呆小鼠海马胆碱乙酰转移酶mRNA表达特征研究

目的探讨血管性痴呆小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶原位杂交变化特征及其在血管性痴呆发病中的作用。方法双侧颈总动脉线结反复缺血-再灌注法制备模型,利用跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变,采用原位杂交技术观测小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶mRNA的表达变化。结果模型组小鼠学习、记忆成绩较假手术明显降低(P<0.01),其海马胆碱乙酰转移酶mRNA表达也明显下降(P<0.01)。结论血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩下降可能与其海马胆碱乙酰转移酶mRNA低水平表达有关。     

血管性痴呆小鼠海马胆碱乙酰转移酶mRNA变化特征及喜得镇的影响

目的:观测喜得镇对血管性痴呆小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶mRNA变化的影响,以探讨胆碱乙酰转移酶mRNA变化在血管性痴呆发病中的作用及喜得镇对此变化的机制。方法:双侧颈总动脉线结.反复缺血-再灌注法制备模型,药物组用喜得镇溶液灌胃,利用跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变,采用原位杂交技术观测小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶mRNA的表达变化。结果:喜得镇组小鼠学习、记忆成绩优于模型组(P<0.01),其海马胆碱乙酰转移酶mRNA表达也明显增高(P<0.01)。结论:喜得镇改善血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩与其恢复海马低水平的胆碱乙酰转移酶mRNA有关。     

血管性痴呆小鼠海马p38 MAPK mRNA表达特征的研究

目的 探讨血管性痴呆小鼠海马p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)mRNA的表达及其意义.方法 双侧颈总动脉线结反复缺血.再灌注法制备血管性痴呆小鼠模型,并设正常组、假手术组,利用跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变,应用原位杂交技术观测其海马p38 MAPK mRNA的表达变化.结果 血管性痴呆模型组小鼠学习、记忆成绩较假手术明显降低(P＜0.05),其海马p38 MAPK mRNA表达明显增加(P＜0.01).结论 血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩下降可能与其海马p38 MAPK mRNA表达水平增加有关.p38 MAPK mRNA的表达增加是血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩下降的分子学机制之一.     

血管性痴呆小鼠海马NMDA受体mRNA表达特征及喜得镇的影响

目的观察喜得镇对血管性痴呆(vascular dementia,VD)小鼠海马神经元N-甲基D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体原位杂交变化的影响,并探讨NMDA受体原位杂交变化特征及喜得镇对其变化的影响.方法双侧颈总动脉结扎,反复缺血-再灌注法制备模型,药物组用喜得镇溶液灌胃,跳台试验和水迷宫试验观察其行为学改变,采用原位杂交技术观察小鼠海马神经元NMDA受体的表达变化.结果药物组小鼠学习、记忆成绩优于模型组(P＜0.01),其海马N-甲基-D-天门冬氨酸受体表达也明显增高(P＜0.01).结论喜得镇能改善血管性痴呆小鼠模型的学习、记忆功能,这可能与N-甲基D-天门冬氨酸受体mRNA水平正常化有关.     

石杉碱甲对血管性痴呆小鼠模型海马神经细胞静息态[Ca~(2+)]i的影响

目的　观察血管性痴呆 (VD)小鼠海马神经细胞内静息态游离 Ca2 +浓度 ([Ca2 + ]i)变化 ,以及石杉碱甲 (哈伯因 )对 VD的治疗效果和 [Ca2 + ]i的影响 ,进而探讨 [Ca2 + ]i的改变在 VD发病机制中的作用。方法　采用双侧颈总动脉线结、反复缺血 -再灌注法 ,制作小鼠血管性痴呆动物模型 ,并设假手术组作为对照 ,服用石杉碱甲者为治疗组。分别于术后第 2 9天、第 30天进行学习、记忆和行为学测试 ;然后快速制取海马活细胞 ,以 Fluo- 3/ AM为荧光探针 ,在激光扫描共聚焦显微镜下观察各组海马神经细胞静息态 [Ca2 + ]i变化。结果　 (1)模型组的学习和记忆成绩低于假手术组及治疗组 (P<0 .0 5 ) ,治疗组及假手术组间无显著性差别 ;(2 )模型组神经细胞静息态 [Ca2 + ]i显著高于假手术组、治疗组 (P<0 .0 5 ) ,治疗组及假手术组间无显著性差别。结论　石杉碱甲作为中枢神经系统特异性胆碱酯酶抑制剂和 NMDA受体拮抗剂 ,可降低血管性痴呆小鼠海马静息态 [Ca2 + ]i,并改善其临床症状 ;因此提示 :海马神经细胞静息态 [Ca2 + ]i过高参与了血管性痴呆的发病过程。     

石杉碱甲对血管性痴呆小鼠模型海马神经细胞静息态[Ca^2＋]i的影响

目的观察血管性痴呆(VD)小鼠海马神经细胞内静息态游离Ca2+浓度([Ca2+]i)变化,以及石杉碱甲(哈伯因)对VD的治疗效果和[Ca2+]i的影响,进而探讨[Ca2+]i的改变在VD发病机制中的作用.方法采用双侧颈总动脉线结、反复缺血-再灌注法,制作小鼠血管性痴呆动物模型,并设假手术组作为对照,服用石杉碱甲者为治疗组.分别于术后第29天、第30天进行学习、记忆和行为学测试;然后快速制取海马活细胞,以Fluo-3/AM为荧光探针,在激光扫描共聚焦显微镜下观察各组海马神经细胞静息态[Ca2+]i变化.结果 (1)模型组的学习和记忆成绩低于假手术组及治疗组(P<0.05),治疗组及假手术组间无显著性差别;(2)模型组神经细胞静息态[Ca2+]i显著高于假手术组、治疗组(P<0.05),治疗组及假手术组间无显著性差别.结论石杉碱甲作为中枢神经系统特异性胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂,可降低血管性痴呆小鼠海马静息态[Ca2+]i,并改善其临床症状;因此提示海马神经细胞静息态[Ca2+]i过高参与了血管性痴呆的发病过程.     

碱性成纤维细胞生长因子对血管性痴呆大鼠海马胆碱能神经元的影响

目的皮下注射碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)于血管性痴呆大鼠,研究用药前后大鼠海马胆碱能神经元的变化。方法制作血管性痴呆(VD)大鼠模型,随机取用VD大鼠模型12只,分治疗组6只,痴呆组6只。另外,取假手术组6只。皮下注射bFGF于治疗组中血管性痴呆大鼠。治疗5周后,以Morris水迷宫定位航行试验和空间探索试验来检测大鼠的学习记忆能力,乙酰胆碱转移酶(ChAT)免疫组织化学染色观察海马CA1区胆碱能神经元数目的变化。结果治疗组大鼠海马CA1区胆碱能神经元数目较痴呆组明显增多。结论皮下注射bFGF后能迁移至海马,诱导海马产生具有ChAT活性神经元,所产生的ChAT活性神经元可能就是胆碱能神经元。     

盐酸多奈哌齐对血管性痴呆模型小鼠海马神经元ERK表达的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)模型小鼠海马神经元中细胞外信号调节激酶(ERK)表达的影响。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型。将小鼠随机分为假手术组、模型组及盐酸多奈哌齐治疗组,药物组给予盐酸多奈哌齐灌胃治疗。术后第29、30天,采用跳台试验和水迷宫试验对各组小鼠进行行为学成绩测试,采用免疫组化法观察各组小鼠海马神经元ERK表达的变化。结果盐酸多奈哌齐可明显改善VD模型小鼠学习、记忆成绩(P<0.05)。模型组小鼠海马CA1区ERK1、ERK2表达及海马CA3区p-ERK表达较假手术组及治疗组减少(均P<0.05)。结论盐酸多奈哌齐通过增加乙酰胆碱含量,后者作用于毒蕈碱乙酰胆碱受体(M受体)激活ERK,从而有助于改善学习和记忆功能。海马神经元内ERK的表达减少可能参与了VD的发病机制。     

喜得镇对脑缺血再灌注小鼠的行为及海马兴奋性氨基酸受体表达的影响

目的探讨喜得镇对脑缺血再灌注小鼠的行为及海马神经元兴奋性氨基酸N甲基D天门冬氨酸(NMDA)受体表达的影响。方法36只小鼠被随机分为模型组、喜得镇组(用喜得镇溶液灌胃)及假手术组,采用双侧颈总动脉线结、反复缺血再灌注法制作小鼠模型,用跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变;采用免疫组化技术观测各组小鼠海马神经元NMDA受体表达变化,并进行组间比较。结果喜得镇组小鼠学习、记忆成绩优于模型组(均P<0.01),其海马NMDA受体表达明显增高(P<0.01);与假手术组比较差异无显著性。结论喜得镇可改善脑缺血再灌注小鼠学习、记忆成绩,与其提高海马NMDA受体水平有关。     

血管性痴呆小鼠海马组织学改变及乙酰胆碱酯酶活性变化特征

目的:探讨血管性痴呆(VD)小鼠海马组织病理学改变及乙酰胆碱酯酶病理(AchE)活性的变化特征.方法:将50只小鼠随机分为假手术组和模型组。模型组采用双侧颈总动脉反复缺血再灌注法制备VD模型,术后第29天和第30天测试学习记忆成绩,术后第30天检测海马CA1区组织学变化及AchE含量。结果:VD模型组小鼠学习记忆成绩较假手术组明显下降;海马CA1区锥体细胞数目减少,细胞核体积变小;且模型组小鼠海马AchE活性明显低于假手术组(P<0.01)。结论:小鼠海马组织内的AchE活性下降参与了VD的形成,进一步导致VD小鼠的学习和记忆障碍。     

Strain differences in the expression of cholinergic markers in the hippocampus of ApoE-knockout and C57BL/6J mice

Our recent study suggests that mice deficient in ApoE may exhibit impaired learning and memory. Here we designed the present study to investigate the association between ApoE deficiency and cholinergic markers expression in the hippocampus of ApoE-knockout (ApoE-KO) and wild-type (WT) mice. Hippocampal slices were collected and the mRNA levels of choline acetyltransferase (ChAT) and acetylcholinesterase (AChE) and the protein level of ChAT were analyzed. We show that ApoE-KO exhibited a distinctly lower ChAT mRNA and protein levels in the hippocampus compared with WT mice. There were no strain effects on AChE mRNA. Our data provide evidence supporting the role of ApoE in the expression of ChAT, which may suggest a possible link between cholinergic deficit and poorer performance in ApoE-KO mice.     

血管性痴呆小鼠海马突触后致密物95表达的研究

目的:探讨血管性痴呆(vascular dementia,VD)小鼠海马突触后致密物95(postsynaptic density95,PSD-95)表达的变化。方法:双侧颈总动脉线结,反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型,跳台试验观测其行为学改变,免疫组织化学方法观察海马齿状回PSD-95的表达。结果:模型组小鼠学习、记忆成绩下降(P<0.05),其海马齿状回(dentategyrus,DG)PSD-95免疫阳性产物较对照组明显减少(P<0.05)。结论:VD模型小鼠学习记忆能力下降可能与海马PSD-95的表达减少有关。     

苯甲酸雌二醇对慢性脑缺血大鼠海马胆碱乙酰转移酶变化及雌激素的影响

目的观察苯甲酸雌二醇对慢性脑缺血大鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶的影响,以探讨胆碱乙酰转移酶的变化在慢性脑缺血发病中的作用及雌二醇对此变化的影响。方法采用双侧颈总动脉永久性结扎制备慢性脑缺血模型,30只大鼠随机分为假手术组、缺血组和雌二醇治疗组。各组于造模60d后,应用Y迷宫观察其行为学改变,采用免疫组化观测大鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶的变化。结果治疗组较缺血组认知障碍明显改善（P〈0.01）,其海马胆碱乙酰转移酶的表达也明显增高（P〈0.01）。结论苯甲酸雌二醇能改善慢性脑缺血大鼠的认知功能可能与其提高海马区胆碱乙酰转移酶水平有关。     

双氢麦角碱对血管性痴呆小鼠海马乙酰胆碱酯酶活性变化的影响

目的探讨双氢麦角碱对血管性痴呆（VD）小鼠海马组织乙酰胆碱酯酶（AchE）活性变化的影响。方法将75只小鼠随机分为假手术纽、模型组和药物纽。药物组和模型组采用双侧颈总动脉反复缺血再灌注法制备VD模型，术后第29天和第30天测试学习记忆成绩，术后第30天检测海马AchE含量，并研究双氢麦角碱对二者的影响。结果（1）模型组小鼠学习记忆成绩较假手术组明显下降（P〈0．01），治疗组小鼠学习记忆成绩明显优于模型组小鼠（P〈0．01）；（2）模型组小鼠海马AchE活性较假手术组明显降低（P〈0．01），治疗组小鼠海马AchE活性显著高于模型组小鼠（P〈0．05）。结论双氢麦角碱能改善VD小鼠的学习记忆功能，提高海马组织内的AchE活性。     

血管性痴呆小鼠海马CaMPKⅡ表达变化及哈伯因治疗效果

目的:观察血管性痴呆小鼠海马组织CaMPKⅡ基因的表达水平及哈伯因治疗效果,进而探讨血管性痴呆发病的分子生物学机制。方法:用双侧颈总动脉线结、反复缺血再灌注的方法制备血管性痴呆模型,并进行学习、记忆成绩测试,应用RT-PCR技术检测海马细胞内CaMPKⅡ基因的表达。结果:模型组CaMPKⅡmRNA含量显著低于假手术组、哈伯团组(P<0.05);假手术组和哈伯因组间无明显差别。结论:海马CaMPKⅡ的基因表达减少可能参与了血管性痴呆分子生物学发病机制,而哈伯因提高了海马CaMPKⅡ基因表达的同时,也改善临床症状。