重肌灵对EAMG大鼠免疫调节作用的实验研究

目的　研究中药复方重肌灵对实验性自身免疫性重症肌无力 (EAMG)大鼠免疫调节作用。方法　建立Lewis大鼠EAMG模型 ,将动物分为正常组、佐剂组、模型组、重肌灵组。分别采用 3H TdR掺入法、ELISA法 ,从N2 AchR对淋巴结细胞特异性增殖反应、血清中AchRab滴度、血清IL 4、IFN γ水平等方面观察重肌灵对EAMG大鼠免疫功能的调节作用。结果　与模型组相比 ,重肌灵组可使N2 AchR所致的淋巴结细胞增殖反应受到抑制 (P <0 0 1) ;血清AchRab滴度明显降低 (P <0 0 1) ;血清IL 4、IFN γ水平下调 (P <0 0 1)。结论　重肌灵可能是通过下调血清IL 4、IFN γ ,抑制淋巴结细胞特异性增殖反应 ,抑制AchRab产生而起到治疗作用     

鼻腔AChR耐受低调EAMG大鼠特异性T淋巴细胞反应

用乙酰胆碱受体(AChR)加完全弗氏佐剂(CFA)免疫前,鼻腔给予大鼠AChR可有效地预防实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)。本文结果表明,与非耐受对照组相比,鼻腔AChR耐受组免疫后,腘窝、腹股沟淋巴结(PILN)的单个核细胞(MNC)AChR特异的淋巴细胞增生反应受到明显抑制,鼻腔耐受组PILN中AChR特异的CD4~+/CD8~-克隆增生亦明显受抑制,差异均有显著性。此外,鼻腔耐受组AChR特异性皮肤迟发型过敏反应(DTH)也显著降低。提示鼻腔AChR耐受后引起的特异性T淋巴细胞反应的低调可能是临床肌无力抑制的基础。     

大鼠重症肌无力模型与NO和NOS的关系

目的　探讨重症肌无力 (MG)患者中枢神经系统(CNS)损害与一氧化氮合酶 (NOS)及一氧化氮 (NO)之间的关系 .方法　将MG患者血中提取的IgG注入大鼠脑室系统 ,建立大鼠CNS受损模型 ,然后观察大鼠脑、胸腺、血清中NOS ,NO的变化 .结果　脑室内注入IgG后脑组织、胸腺、血清中NOS升高分别为 :(1.6± 0 .4) ,(2 .7± 0 .9)和 (4 5 .3±6 .0 )kU·L-1(P <0 .0 1) ;而NO在脑组织、胸腺、血清中升高分别为 :(4 9± 1.0 ) ,(12 .7± 9.2 )和 (5 7± 32 .5 )kU·L-1(P <0 .0 1) .结论　大鼠CNS受损MG模型脑、胸腺及血中NOS ,NO水平显著升高 ,表明其在MG患者中枢神经系统损害中可能起重要作用     

“温阳补气”针法对EAMG大鼠神经肌肉接头处AchR蛋白表达的影响

目的: 探讨"温阳补气"针法对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠腓肠肌神经肌肉接头(NMJ)处乙酰胆碱受体(AchR)蛋白表达水平的影响,阐明针灸治疗重症肌无力(MG)的作用机制。方法: 采用AchR α1129-145多肽片段免疫接种Lewis雌性大鼠,建立EAMG大鼠模型。在建模成功的EAMG大鼠中随机选取30只,分为模型对照组10只、药物对照组10只和针刺治疗组10只,并将同期购进的未建模的10只大鼠设为空白对照组。药物对照组大鼠予以18.5 mg·kg^-1·d^-1溴吡斯的明灌胃治疗;针刺治疗组大鼠予以"温阳补气"针法治疗;其余2组不予任何处置作为对照。记录治疗前后各组大鼠Lennon症状评分。治疗结束后,取4组大鼠腓肠肌NMJ处组织,采用Western blotting法检测各组大鼠NMJ处AchR蛋白表达水平。结果: 与空白对照组比较,建模成功后治疗前模型对照组、药物对照组和针刺治疗组大鼠Lennon症状评分明显升高(P<0.01);与模型对照组比较,经过2个疗程治疗后药物对照组和针刺治疗组大鼠Lennon症状评分均明显降低(P<0.01);与空白对照组比较,模型对照组大鼠腓肠肌NMJ处AchR蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与模型对照组比较,治疗后针刺治疗组和药物对照组EAMG大鼠腓肠肌NMJ处AchR蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论: "温阳补气"针法可以提高EAMG大鼠NMJ处AchR蛋白表达水平,发挥治疗EAMG的作用。     

双类似物鼻黏膜耐受对EAMG临床发病的抑制作用

目的　采用双类似物 (Lys2 6 2 Ala2 0 7)通过不同时间点对实验性自身免疫性重症肌无力 (EAMG)模型进行鼻黏膜耐受预防性给药 ,观察临床发病变化 ,并评价疗效 ,探讨其控制EAMG临床发病作用机制。方法　应用AChR加CFA致敏Lewis大鼠建立EAMG模型 ,并在致敏前 10天 (A组 )及致敏当日 (B组 )鼻腔给药。观察给药后A、B组及相应对照组大鼠体重、临床症状及肌电图变化。结果　①急性期和慢性期A、B组体重明显超过、而病情明显轻于相应对照组 ,慢性期A组体重明显超过、病情明显轻于B组 ,P均 <0 .0 5 ;②A、B组低频重复电刺激出现衰减反应D5阳性率明显低于相应对照组 ,P均 <0 .0 5。结论　Lys2 6 2 Ala2 0 7鼻黏膜预防耐受可有效地抑制临床发病 ,为采用双类似物鼻黏膜耐受防治人类重症肌无力提供了依据。     

鱼藤酮对大鼠尾核及血浆中NOS活性和NO含量的影响

目的 研究鱼藤酮慢性中毒大鼠尾核脑区及血浆的一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合成酶（NOS）活性的变化规律。方法 Wistar大鼠每日皮下注射0.335、0.670、1.005mg/kg鱼藤酮共90d。于30、60、90d处死动物，分离血浆和尾核脑组织，以生化方法测定NOS活性和NO含量。结果 在鱼藤酮中毒规律脑组织中NOS活性和NO含量增加，增加程度因中毒剂量的提高而升高、随中毒时间的延长而升高。结论 长期接触鱼藤酮导致血浆和尾核脑组织NOS活性和NO含量升高。     

高蛋白饮食对慢性肾衰模型大鼠NO和NOS的影响

目的探讨高蛋白饮食对慢性肾衰大鼠的血和肾组织NO和．NOS的影响。方法通过先用5／6肾切除大鼠法制作慢性肾衰的动物模型,成功后再分别给予5／6肾切除大鼠不同蛋白饮食喂养2个月。观察不同蛋白饮食喂养的5／6肾切除大鼠血BUN、Scr、24小时尿蛋白定变化;分光光度计比色法检测血．NO和NOS水平;免疫组化法半定量检测肾组织ENOS、NNOS、INOS的表达。结果 给予5／6肾切除大鼠高蛋白饮食,可导致慢性肾衰大鼠大量蛋白尿的产生,同时降低血NO和NOS水平及肾组织ENOS、NNOS的表达,增强肾组织INOS的表达。结论高蛋白饮食可通过导致5／6肾切除大鼠大量蛋白尿,降低N0和NOS对5／6肾切除大鼠的保护作用而加速慢性肾衰的进展。     

重肌灵片治疗ⅡA型重症肌无力的临床研究

目的观察重肌灵片治疗ⅡA型重症肌无力的临床疗效.方法采用随机、双盲双模拟对照的方法,将144例ⅡA型重症肌无力患者分为治疗组72例,口服重肌灵片和强的松模拟片,对照组72例,口服强的松和重肌灵模拟片,观察2组患者临床症状、体征、血清乙酰胆碱受体抗体(AchRab)滴度、电位衰减百分率及白细胞介素-1β(IL-1β)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、白细胞介素-6(IL-6)的变化.结果2组在临床疗效积分变化方面无显著差异.治疗组在中医证候改善方面明显优于对照组(P＜0.01).治疗前后2组血清中AchRab滴度、肌电图电位衰减百分率组间差值比较无显著差异.2组患者IL-1β、sIL-2R、IL-6治疗前后下降程度无显著性差异(P＞0.05).结论重肌灵片治疗ⅡA型重症肌无力疗效确切.     

黄芪注射液对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠IFN-γ的影响

目的探讨黄芪注射液对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠血清IFN-γ表达的影响。方法利用新鲜豚鼠全脊髓匀浆＋完全福氏佐剂免疫Wistar大鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型,选用黄芪注射液干预治疗,观察其对大鼠发病率、神经功能评分和病理学改变的影响,并检测血清IFN-γ的水平。结果黄芪注射液治疗组大鼠发病率明显降低,炎性病灶明显减少,血清中IFN-γ表达减少。结论黄芪注射液可以改善EAE大鼠的临床症状,减轻脊髓内炎症反应,其作用可能与减少血清IFN—γ的表达水平有关。     

一氧化氮供体对自身免疫性重症肌无力大鼠的作用

最新研究表明,对细胞免疫介导的实验性自身免疫性脑脊髓膜炎动物模型给予一氧化氮(NO)供体取得了肯定疗效。但NO供体对抗体介导的实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的作用迄今报道较少,我们在乙酰胆碱受体(AChR)致敏大鼠的同时,给予NO供体3-吗啉-斯德酮亚胺(SIN-1),研究其对EAMG大鼠的作用及机制。     

兔重症肌无力模型的建立

目的:探讨兔重症肌无力模型(MG)的建立方法。方法:采用亲和柱层析法从电鳐电器官中提取乙酰胆碱受体(AChR),给16只日本大耳白兔分两次注射200μg AChR与等量的弗氏完全佐剂混合液,两次注射相隔3周,采用自行设计的评分标准评定其症状的严重性。结果:12只日本大耳白兔出现重症肌无力表现,积分12.83±6.19分。结论:从电鳐电器官中提取AChR,并主动免疫日本大耳白兔能够复制出重症肌无力模型。     

重症肌无力小鼠模型的建立

1961年,在美国召开了一个比较病理学研讨会。40余年后的今天,比较病理学的“比较”理念已扩展到整个医学领域,把一切以比较方法研究包括人类这一物种在内的动物界之正常与异常生命现象及其诊治问题的结果,冠以“比较医学”这一学科名称。以此为名的中国学术期刊、专著与论文也随之出现了。在上述的那次研讨会上,包括人医与兽医等在内的各方与会学者还讨论了如何加     

病程及补体水平对眼肌型重症肌无力患儿疗效的影响研究

目的 探讨补体水平随病程的改变情况及其对眼肌型重症肌无力（OMG）患儿疗效的影响。 方法 选取2007年1月—2013年10月在湖南省儿童医院神经科门诊或住院治疗的OMG患儿134例。根据发病时间分为A（＜30 d,n=48）、B（30 d～,n=44）、C（3～6个月,n=42）3组。3组患儿均采用同一治疗方案(即嗅吡斯的明加激素治疗),采用免疫比浊法检测体液免疫IgG、IgA、IgM、IgE及补体3（C3）、补体4（C4）水平,采用定量重症肌无力评分(QMG)评价OMG疗效。 结果 3组IgG、IgA、IgM、IgE、C4水平间差异无统计学意义（P＞0.05）;而C3水平间差异有统计学意义（P＜0.05）,其中B、C组均低于A组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3组临床疗效间差异无统计学意义（P＞0.05）。3组治疗前后QMG间差异均无统计学意义（P＞0.05）;3组治疗后QMG均低于治疗前,差异有统计学意义（P＜0.05）。C3与病程呈负相关（rs=-0.235,P＜0.05）;C4与病程无相关性（rs=-0.140,P＞0.05）。将3组数据合并后对治疗前后QMG的影响因素分别进行多元线性回归分析,结果均未得到回归方程。3组数据合并后对C3的影响因素进行多元线性回归分析,结果得到回归方程：C3=1.064-0.001×病程。 结论 病程对C3有一定影响,而对C4无明显影响;C3、C4水平短期内对OMG患儿疗效的影响不大。     

有氧运动对衰老大鼠血清NO与NOS的影响

目的：研究有氧运动对衰老大鼠血清NO、NOS的影响,探讨适宜运动抗衰老的作用机制。方法：实验以D-galactose（D-半乳糖）衰老模型SD雄性大鼠为研究对象进行有氧训练。结果：9周有氧运动对衰老大鼠血清NO、NOS有着很大的影响;有氧运动可以改善心血管系统的功能,在预防或延缓心血管疾病的发生、发展中起重要作用。结论：长期适宜运动可以改善心血管功能,可以延缓血管衰老。     

葛根及其配伍对重症肌无力大鼠骨骼肌线粒体结构的影响

目的探讨葛根及其配伍对重症肌无力大鼠骨骼肌线粒体结构的作用机制。方法(1)造模:给模型大鼠以腹部、足垫、背部皮下注射200μL(含R 97-116∶100μg)免疫乳剂进行造模,30 d和45 d后,分别以同样方法对造模大鼠强化接种,以大鼠Lennon肌力评分≥1级为模型鼠。(2)分组与处理:除空白组外,造模成功鼠随机分为模型组、强的松组、葛根组、葛芪组、葛参组、葛妙组、葛芪参妙组,每组20只。造模成功2周后,给予空白组、模型组蒸馏水灌胃,其他组予相应药物灌胃,连续4周。(3)标本检测:透射电镜观察骨骼肌线粒体超微结构;免疫组化法检测FGF、NGF、IGFs表达。结果与模型组比较,各组的线粒体形态均有恢复,其中葛芪组和葛芪参妙组治疗后整体形态恢复较好;与模型组比较,各治疗组FGF、NGF、IGFs的阳性表达率都有所升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论葛根及其配伍可能通过改善肌肉生成调控因子的阳性表达促进线粒体结构的恢复,达到治疗重症肌无力的目的。     

甘草三参合剂对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞NOS和NO的影响

目的探讨甘草三参合剂抗心律失常的作用机制。方法采用心肌缺血再灌注损伤大鼠模型,连续给药7d后,测定体表ECG,取心肌组织匀浆测定NOS,取心房血测定NO。结果：甘草三参合剂能提高总NOS和cNOS活性,降低iNOS话性,使血浆NO的含量提高,与空白对照组和模型组比较有非常显著差异或显著差异（P〈0．01,P〈0．05）,与阳性对照组心律平比较无显著差异（P〉0．05）。结论：甘草三参合剂可能通过调节心肌细胞NOS活性和NO含量,影响细胞内的代谢活动,稳定心律。     

Th1/Th2细胞因子在眼肌型重症肌无力转基因小鼠模型中的作用机制

目的 观察重组人乙酰胆碱受体(H-AChR) γ亚单位免疫HLA-DQ8转基因小鼠眼肌型实验性自身免疫性重症肌无力(oEAMG)模型体外培养上清液中Th1/Th2细胞因子水平变化,探讨其与oEAMG免疫学发病机制的联系。方法 HLA-DQ8转基因小鼠用乳化于完全弗氏佐剂(CFA)的重组H-AChR γ亚单位,或E. Coli提取物,或纯CFA分别免疫,分别于第0天、第30天和第60天共免疫3次。第3次免疫后28 d,处死小鼠后取淋巴结和脾淋巴细胞体外培养,收集培养上清液,采用ELISA法检测白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-6和IL-10水平。结果 H-AChR γ组小鼠淋巴结及脾淋巴细胞体外培养上清液中IL-2(F=42.835,P<0.001;F=38.030,P<0.001)和INF-γ水平(F=76.332,P<0.001;F=34.865,P<0.001)均明显高于E. coli组和CFA免疫组;IL-6(F=1.325,P=0.284;F=1.935,P=0.166)和IL-10水平(F=0.908,P=0.417;F=1.189,P=0.322)与E. coli 组和CFA组差异无统计学意义。结论 Th1细胞因子在重组H-AChR γ亚单位诱导HLA-DQ8转基因小鼠所建立oEAMG模型的发病机制中可能发挥重要作用,而Th2细胞及其细胞因子作用尚不十分明确。