石蜡切片过氧化酶预染色

病理组织切片的过氧化酶染色,需用新鲜冰冻切片才能成功。我们在无冰冻切片设备的条件下,对骨髓液凝块标本,在石蜡包埋前,采用过氧化酶预染色,获得较理想的效果,现介绍如下。     

微小组织冷冻切片方法的改进

快速冷冻切片是一种在术中做出病理诊断以便决定进一步治疗方案的快速诊断技术。然而在临床实践中 ,常因组织微小 ,制作不出良好的切片而难以作出病理诊断。我们在实践工作中摸索出一种快速简便的微小组织冷冻切片方法 ,介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　 (1)德国产Ｌｅｉｃａ恒冷切片机。 (2 )冷冻切片组织为我院活体组织检查中取出的微小组织 ,如纤支镜、胃镜、膀胱镜等活检组织 ,肝、肾、甲状腺和乳腺穿刺组织 ,脱落细胞收集物等。 (3)小滤纸片 ,将大滤纸用剪刀剪成 1ｃｍ× 1ｃｍ× 1ｃｍ大小 ,多片重叠成厚约 0 5～ 1ｃｍ ,放在组织…     

Tween-40软化剂在组织切片技术上的应用

在制备临床和科研组织标本时 ,我们常会遇到一种既韧又硬的组织 ,如病变的指甲和眼球中的晶状体。以前对该类组织没有相适宜的技术方法制备组织切片 ,病甲的切片只有放弃 ;全眼切片只能把晶状体从眼球中挑出后进行 ,破坏了眼球的完整结构。这对于该类组织的结构和病变的研究十分不利。笔者参考有关文献[1] ,配制了 10 %～ 2 0 %的Ｔｗｅｅｎ 4 0软化剂 ,可以很好的软化该类组织并制备石蜡组织切片 ,然后进行ＨＥ染色和免疫组织化学染色 ,效果十分满意。一、材料和方法1 指甲 :把病人剪下的指甲 (如灰指甲 )投入 4 %甲醛液中固定 2～ 3ｄ ,置…     

冰冻和石蜡切片对TUNEL染色结果的影响

目的与方法：为比较不同组织切片方法对细胞凋亡TUNEL反应结果的影响，用雏鸭胸腺分别制成冰冻(8 μｍ)和石蜡(6 μｍ)切片，然后进行TUNEL染色。 结果： 冰冻切片组细胞凋亡阳性率高，背景清晰，特异性好。石蜡切片组则阳性率相对较低，反差较小，容易出现假阳性。 结论： 不同制片法对TUNEL结果有影响，即冰冻切片可能较石蜡切片具有更高的反应敏感性。     

应用恒温冷冻切片机制作最佳癌症组织切片的体会

胃癌、卵巢癌、膀胱癌等疾病被认为是多基因遗传病[1]。组织冰冻切片在临床肿瘤病理学快速诊断中占有重要的位置,它的优点是快速简便,准确高效。如利用组织冰冻切片做免疫组织化学染色、组织切片原位杂交等。本研究室采用德国LEICA CM1800恒温冷冻切片机制作膀胱癌、卵巢癌、胃癌组织及脑、肌肉、皮肤(正常对照)冰冻切片,取得了较好的效果,主要体会如下。1.组织冰冻切片的适宜温度不同的组织标本需要不同的切片温度,各种组织常用合适温度[2],其切片温度比我们实际操作的切片温度相对偏高,易使组织硬度不够,进刀慢,切片易粘刀,直接影响切…     

间变性大细胞性淋巴瘤--浆细胞样小细胞变型

1　临床资料患者男 ,2 7岁。临床表现为左腹股沟包块伴皮肤破溃 ,查体发现 1 2ｃｍ× 0 8ｃｍ× 0 5ｃｍ的包块 ,在当地医院体检未发现明显异常 ,切除包块并送病检。标本经常规 10 %福尔马林液固定 ,石蜡包埋 ,切片 ,分别进行ＨＥ染色及免疫组织化学染色。病理诊断 :“高度疑为淋巴浆细胞性淋巴瘤” ,后来我院病理科会诊。2　病理检查2 .1　镜检　低倍镜下表现为淋巴结结构不清、完全破坏 ,瘤细胞侵犯淋巴结周围组织 ,瘤细胞呈弥漫性、浸润性、破坏性生长 ,局部区域出现大片坏死。高倍镜下见大部分瘤细胞排列疏松。细胞间缺乏粘附 ,局部区…     

石蜡切片后粘胶技术在免疫组化染色中的应用

在临床病理诊断中 ,免疫组化染色是必不可少的技术 ,特别是外院来会诊的石蜡切片和蜡块 ,大多数是需要进行免疫组化染色 ,但这些切片往往经抗原修复技术处理后部分或全部从载玻片上脱落 ,延误诊断。我们在工作中发现石蜡切片后粘胶技术能克服这种现象 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　材料　取外院会诊自带未经处理的石蜡切片白片 5 0张 ,石蜡块 2 0个 (其中 10个蜡块曾在免疫组化染色中脱落过 )按常规石蜡切片 ,切片厚 4 μｍ ,附贴在未经粘合处理的载玻片上 ,6 0℃温箱中烤片 1ｈ ,取出备用。1 2　方法　不同病例的切片按常规脱蜡至水洗 ,…     

一种病理组织切片恒温染色台的设计

目的设计一种可提高组织切片苏木精-伊红(HE)染色速率及染色质量的病理组织切片染色装置。方法设计制作由水浴箱、带盖染色缸、电控箱三部分构成的组织切片恒温染色台,实验比对组织石蜡切片上的石蜡膜溶于二甲苯的互溶速率和镜下染色效果。结果在37.0℃条件下,石蜡膜在二甲苯中的溶脱时间比室温条件下缩短了近一半的时间,互溶速率两组比较差异有显著统计学意义(P<0.001);在减少1/2染色时间染制的切片组织色泽与室温条件下的染色效果类似,而且细小颗粒着色清晰。结论应用该设备条件的组织切片染色效果优于传统常温方法。     

塑料包埋不脱钙大块骨组织切片及染色

近 1年来 ,笔者采用Ｌｅｉｃａ 2 5 0 0型切片机 ,制作塑料包埋不脱钙大块骨组织切片 ,获得 8～ 10 μｍ厚完整切片。游离片染色 ,着色效果良好。1　材料与方法1.1　取材部位　狗桡骨 ,大小 35ｍｍ× 15ｍｍ ,于 10 %～2 0 %中性福尔马林液内固定 1～ 2ｄ ,流水冲洗 1～ 2ｈ。1.2　包埋剂的制备　 1号试剂 :甲基丙稀酸甲脂 40 0ｍｌ,邻苯二甲酸二丁酯 10 0ｍｌ,二甲苯 5 0 0ｍｌ。 2号试剂 :甲基丙稀酸甲酯 80 0ｍｌ,邻苯二甲酸二丁酯 2 0 0ｍｌ。 3号试剂 :甲基丙稀酸甲酯 80 0ｍｌ,过氧化苯甲酰 2 0ｇ ,邻苯二甲二丁酯2 0 0ｍｌ。 4号试剂…     

石蜡切片显示大脑神经细胞方法探讨

以片显示大脑各种神经细胞一般都是用含有重铬酸钾的固定液固定,用硝酸银浸染的方法进行,所以要想制作大批教学标本只能用传统的方法。而大脑神经细胞的特殊染色,只能用火棉胶切片或冰冻切片制作标本,操作步骤复杂、时间长。为此我们对石蜡切片、镀银染色显示大脑神经细胞的方法进行了探讨。本实验选用小白鼠大脑,组织块大小为2×2cm,勿超过3cm;固定后入1%～1.5%硝酸银水溶液浸染5～7天;蒸馏水洗2分钟;用还原液作用24小时;组织块脱水、透明、浸蜡、包埋、切片,因低浓度酒精易使组织块退色,因此组织块经还原后在酒精内的脱水时间一定要精确。…     

皮肤申克孢子丝菌病临床病理分析

1　材料与方法1.1　标本来源　 1983年～ 2 0 0 0年我科组织活检标本 4 1例 ,均经培养证实为申克孢子丝菌病 ,其中男 16例 ,女 2 5例 ,平均 4 9 8岁。临床分型 :皮肤淋巴管型 10例 ,皮肤固定型 31例。活检处皮损形态 :结节 30例 ,其中 7例破溃 ,斑丘疹 10例 ,囊肿 1例。标本大小约 (1～ 1 5 )ｃｍ× (0 3～ 0 6 )ｃｍ× (0 3～ 0 5 )ｃｍ。1.2　方法　复习ＨＥ切片 ,每例均做淀粉酶消化的ＰＡＳ染色和六胺银染色 (ＧＭＳ染色 ) ,其方法按实验室常规进行 ,组织病理学分类参照陈锡唐等〔1〕主编的《实用皮肤病理学》。2　结果2 1　组织形…     

提高脑组织冰冻切片质量的几点体会

目的:探讨减少脑组织冰冻切片脱片和增加脑组织冰冻切片免疫组织化学染色结果准确性的方法,为脑组织冰冻切片的广泛使用进一步奠定实验基础。方法:在保证实验真实性和科学性的前提下,将现有的脑组织冰冻切片技术结合在脑组织冰冻切片过程中所遇到的问题,以明胶硫酸铬钾处理载玻片,预冷的NS和4%多聚甲醛灌注固定组织,液氮速冻脑组织进行冰冻切片。结果:明胶硫酸铬钾处理载玻片的方法减少了冰冻切片脱片,预冷的NS和4%多聚甲醛提高了脑组织灌流固定效果,液氮速冻脑组织减少了冰晶产生。结论:此方法使脑组织冰冻切片脱片情况下降,冰晶产生减少,提高了脑组织冰冻切片免疫组织化学染色结果的准确性,该方法值得在临床和科研实验室中积极推广使用。     

应用端粒酶原位杂交技术检测大肠癌端粒酶活性

笔者利用国产端粒酶原位杂交检测试剂盒在大肠癌组织的石蜡切片中检测端粒酶活性 ,获得满意结果。现将应用该方法的体会简要介绍如下。1　材料与方法1.1　观察对象　手术切除的新鲜大肠癌组织 2 0例 ,对离体组织立即液氮冷冻 ,- 80℃冰箱保存。标本分为 2份 ,1份在做 5 μｍ厚连续冷冻切片 ;另 1份经 10 %中性福尔马林或4 %多聚甲醛固定 ,石蜡包埋 ,做 5 μｍ厚石蜡切片。1.2　试剂　 (1)端粒酶原位杂交检测试剂盒为武汉博士德公司产品 ,购自天津ＴＢＤ公司 ,编号ＭＫ115 9。端粒酶逆转录成分 (ＴＥＲＴ )来源于人基因ＴＥＲＴ ＮＭ 0 0 32 …     

采用超声波法制作牙骨龈组织联合切片的体会

我们在制作牙骨龈组织联合切片的实际工作中 ,体会到采用超声波处理牙骨龈组织制作常规石蜡切片的过程中 ,注意在关键环节上的处理 ,可获得令人满意的效果。一、材料和方法1.组织标本来源于我院的相关科研课题以及颌面外科术后组织标本。人体牙骨龈标本有切牙、尖牙、磨牙 ,12个牙位。动物牙骨龈标本有猪、狗、兔的切牙、磨牙 ,44个牙位。使用超声波快速组织处理仪 (高频震谐 80万次 /ｓ,温度2 7～ 99℃ ,功率为 2 2 0Ｖ ,5 0ＨＺ <6 80ＶＡ)。2 标本处理 :新鲜标本经 4%甲醛固定数小时后 ,用金钢沙外圆切割器片切标本为 2～ 4ｍｍ的薄片 ,…     

脱髓鞘假瘤一例

患者女 ,31岁。头痛 2 0余天 ,左上肢无力 10余天且逐渐加重 ,于 2 0 0 1年 8月入院 ,外院ＣＴ及ＭＲＩ均提示右顶深部占位性病变 ,首先考虑胶质瘤 ,不能除外转移癌或脓肿。在神经导航系统定位下探查右顶皮层下病灶 ,大小约 3ｃｍ×3ｃｍ× 2ｃｍ ,灰白色 ,边界欠清 ,质地较韧 ,血供一般 ,伴局部囊性变 ,含黄色液体 2ｍｌ。术中冷冻切片不考虑胶质瘤 ,压片上细胞境界清楚 ,分布较分散 ,胞质丰富泡沫状 ,圆形或略有突起 ,核圆形浅染。病理检查 :送检标本破碎 ,总体积 2 .5ｃｍ× 2 .0ｃｍ× 2 .0ｃｍ ,石蜡切片中病变区与周围脑组织分界较清…     

快速冰冻切片对异位妊娠诊断价值的初探

目的：探讨快速冰冻切片对临床可疑宫外孕患者的诊刮标本中是否带有胚胎产物检查的准确性，以协助异位妊娠的诊治。方法：对可疑子宫内膜诊刮标本的冰冻切片、石蜡切片及临床资料进行回顾性分析，若最后石蜡切片病理诊断与冰冻切片一致，则认为冰冻切片正确。结果：其中８５例（８５／９１，９３．４％）快速冰冻切片诊断是正确的，冰冻切片的敏感性为７９．２％，特异性为９８．５％，其阳性、阴性预测值分别为９５％、９３％。结论：快速冰冻切片在判断临床怀疑宫外孕患者的子宫内膜诊刮标本确定有无胚胎产物方面有很好的准确性，是一项很有临床实用价值的方法。     

石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用

在肾穿刺组织的病理诊断中,采用常规冷冻切片免疫荧光染色、石蜡切片HE染色、PAS染色、Masson染色、PASM染色以及电镜观察,以得到准确的病理诊断。但由于肾穿刺为有创性检查,再加上术者技术精疏有别以及患者个体差异,不仅所取组织十分细小,而且标本质量亦常不尽人意;另外,没有能力购置电镜的单位难以做超微诊断。因此需要我们摸索新的方法,以达到最大限度获得疾病信息,同时又省时、省力,且节约成本。作者实验室前期已经建立了石蜡切片免疫荧光染色法,其他学者也有相关报道[1-3]。最近又建立了肾活检组织石蜡切片免疫组化结合PAS染色方法,取得了较好的效果,现报道如下。     

琼脂石蜡双包埋切片在胸水细胞学诊断中的应用

目的探讨胸水琼脂石蜡双包埋切片在肿瘤细胞学诊断中的意义。方法对44例胸水沉淀物分别进行常规涂片和琼脂石蜡双包埋切片,并对琼脂石蜡双包埋切片进行免疫组织化学染色。结果在确诊的21例恶性胸水中,琼脂石蜡双包埋切片法检测癌细胞的阳性率为90.48%,显著高于涂片法52.38%。11例涂片法阳性的标本中,只有5例做出了病理分类诊断,而19例琼脂石蜡双包埋切片阳性的标本均做出了病理分类诊断。琼脂石蜡双包埋切片的免疫组织化学染色阳性结果定位准确,图象背景清晰。结论琼脂石蜡双包埋切片细胞集中,可以提高恶性胸水癌细胞的检出率和做出分型的病理诊断,利于以及进行免疫组织化学检测。     

陈旧肾脏HE染色切片退掉盖玻片后行免疫组化检测

<正>在临床和科研工作中切片大部分都是以HE染色树胶封片,这样可样将切片长期保存。但是往往因为原有组织块丢失而或其他原因需要在原有石蜡HE染色切片原位基础上行免疫组织化学检测。本文就上述问题做了尝试并得到了较好的效果。1材料与方法实验室中存放的陈旧HE染色小鼠肾脏组织切片     

石蜡切片浸银染色显示大脑锥体细胞的新方法

目的 :组织学包埋制作大脑组织切片的特殊染色方法 ,用火棉胶技术。此法操作时间长 ,步骤复杂 ,单张切片 ,不宜批量教学标本的制作。为此我们研究了一种操作简单 ,适于大批制作的方法。方法 :用石蜡包埋组织块浸银染色显示大脑锥体细胞。结果 :锥体细胞显示清晰。结论 :与传统方法比较 ,此实验方法比较简单、稳定 ,且可连续切片 ,有利于大批教学标本的制作。