镁对入脐静脉内皮细胞DNA氧化损伤的影响

目的观察Mg2+对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞DNA氧化损伤的影响.方法取新生儿脐带内皮细胞进行细胞培养.实验分四组1.阴性对照.2.阳性对照,培养液中加H2O2.3.补镁组,培养液中加不同浓度的MgSO4.4.补H2O2与镁组培养液中加H2O2与镁.用单细胞凝胶电泳技术检测各组拖尾细胞率与拖尾细胞长.结果与H2O2组相比,H2O2+Mg2+各剂量组拖尾细胞率下降、拖尾细胞尾长减小.结论Mg2+对H2O2诱导的DNA氧化损伤有明显的拮抗作用.     

镁对人脐静脉内皮细胞DNA氧化损伤的影响

目的 :　观察 Mg2 + 对 H2 O2 诱导的人脐静脉内皮细胞 DNA氧化损伤的影响。方法 :　取新生儿脐带内皮细胞进行细胞培养。实验分四组 :1 .阴性对照。 2 .阳性对照 ,培养液中加H2 O2 。 3 .补镁组 ,培养液中加不同浓度的 Mg SO4 。 4.补 H2 O2 与镁组 :培养液中加 H2 O2 与镁。用单细胞凝胶电泳技术检测各组拖尾细胞率与拖尾细胞长。结果 :　与 H2 O2 组相比 ,H2 O2 +Mg2 + 各剂量组拖尾细胞率下降、拖尾细胞尾长减小。结论 :　 Mg2 + 对 H2 O2 诱导的 DNA氧化损伤有明显的拮抗作用。     

镁对内皮细胞氧化还原相关基因表达的影响

目的 :　研究 Mg2 + 对人脐静脉内皮细胞中氧化还原相关基因 c- fos、c- jun、p5 3和ref- 1表达的影响。方法 :　免疫组织化学染色 ,并用图象分析系统对染色切片进行半定量分析。结果 :　与正常对照组相比 ,H2 O2 组 c- fos、c- jun、p5 3和 ref- 1的表达增强 ,具有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ;Mg2 + 各剂量组 ref- 1表达增强 ( P<0 .0 1 ) ;与 H2 O2 组相比 ,H2 O2 + Mg2 + 各剂量组 c- fos、c-jun和 p5 3表达减弱 ,ref- 1表达增强 ( P<0 .0 1 ) ;H2 O2 + 0 .3mmol/L Mg2 +组 p5 3表达强于 0 .3mmol/L Mg2 + 组 ,具有显著性差异 ( P<0 .0 1 ) ,H2 O2 + 0 .3mmol/L Mg2 + 、H2 O2 + 0 .6mmol/LMg2 +组和 H2 O2 + 1 .2 mmol/L Mg2 +组 ref- 1表达强于相应的 Mg2 +剂量组 ,具有显著性差异 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。结论 :　 Mg2 + 通过影响与细胞氧化还原状态有关的 c- fos、c- jun、p5 3和 ref- 1基因表达来影响氧化还原信号转导通路 ,可能与其抗氧化作用有关。     

茶多酚对氧化型低密度脂蛋白损伤后内皮细胞微管蛋白的影响

目的研究茶多酚(TP)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)α-微管蛋白和β-微管蛋白的影响。方法将实验分为四组TP组(25μg/ml),ox-LDL(200μg/ml)+TP组(25μg/ml),ox-LDL组(200μg/ml)及对照组(等体积溶剂)。采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活性,免疫组化法测定α-微管蛋白和β-微管蛋白的表达。结果MTT结果显示,ox-LDL可明显抑制HUVEC增殖,与对照组相比,增殖率降低了40%(P<0.05)。TP和ox-LDL共同培养,细胞增殖率明显上升,与对照相比仅降低7.8%(P>0.05)。免疫组化结果显示,ox-LDL下调HUVECα-微管蛋白和β-微管蛋白表达,分别为35%(P<0.01)和40%(P<0.01),TP与ox-LDL共同培养后,α-微管蛋白表达无明显升高(12%,P>0.05),β-微管蛋白表达升高了32%(P<0.05)。结论TP具有抑制ox-LDL诱导的HUVEC生长抑制的作用,且可以逆转ox-LDL引起的β-微管蛋白表达的降低作用。     

茶多酚对甲醛致人脐静脉内皮细胞损伤保护作用

目的观察茶多酚对甲醛致人脐静脉内皮细胞氧化损伤的影响。方法体外常规培养内皮细胞,实验设正常对照组、甲醛损伤组(0.1 mmol/L)、茶多酚组(2.5、5、10、20 mg/L)。其中茶多酚先与细胞预孵12 h后加入甲醛,置CO₂培养箱培养4 h,检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活力及乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、一氧化氮和细胞中谷胱甘肽含量,免疫细胞化学法检测核转录因子(NF-κB)。结果2.5、5、10、20 mg/L茶多酚组LDH、MDA含量分别为2 021.02、1 878.17、1 748.56、1 625.72 U/L和3.50、3.30、2.99、2.68 nmol/mL,均分别低于甲醛损伤组,差异有统计学意义(P<0.01);SOD与GSH活力分别为24.16、24.67、25.56、26.02 U/mL和0.334、0.364、0.445、0.449μmol/mg prot均高于甲醛损伤组(P<0.01);茶多酚各组NF-κB活力与甲醛组比较明显下降(P<0.01)。结论茶多酚可提高内皮细胞抗氧化酶活性,减轻甲醛所致氧化损伤。     

镁对过氧化氢诱导内皮细胞热休克基因表达的影响

目的 观察Mg^2 对H2O2诱导的内皮细胞热休克基因表达的影响。方法 在改进入脐静脉内皮细胞培养方法的基础上，分为：(1)正常对照组；(2)H2O2组；(3)补镁组；(4)H2O24—Mg^2 组。TBA法检测细胞脂质过氧化水平，免疫组织化学法检测细胞热休克蛋白70(HSP70)的表达水平。结果 与H2O2组相比，H2O24—Mg^2 各剂量组硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)显降低，P＜0．05;H2O24—Mg^2 各剂量组HSP70基因表达强于H2O2组(P＜0．05，P＜0．01)，且随Mg^2 浓度升高，HSP70基因表达逐渐增强。结论 Mg^2 促进热休克基因的表达可能与其在氧化应激反应中对细胞的保护作用有关。     

镁对内皮细胞脂质过氧化和抗氧化酶的影响

目的 :　研究了 Mg2 + 对氢过氧化物 ( H2 O2 和 t-丁基氢过氧化物 )诱导的人脐静脉内皮细胞脂质过氧化和抗氧化酶超氧化物歧化酶 ( EC- SOD)及含硒和不含硒两类谷胱甘肽过氧化物酶 ( Se- GSH- Px和 non- Se- GSH- Px)活性的影响。方法 :　用培养的人脐带内皮细胞以硫代巴比妥酸反应物 ( TBARS)法检测细胞脂质过氧化水平 ,邻苯三酚自氧化法测定 EC- SOD活性 ,DTNB直接法测定内皮细胞 Se- GSH- Px和 non- Se- GSH- Px活性。结果 :　 1 .与 H2 O2 组相比 ,H2 O2 + Mg2 +各剂量组 TBARS显著下降 ,P<0 .0 5 ;t-丁基氢过氧化物 + Mg2 + 各剂量组与 t-丁基氢过氧化物组相比 TBARS无显著性差异。 2 .与空白对照组相比 ,0 .6mmol/L、1 .2 mmol/L、2 .4mmol/L补Mg2 + 组 SOD活性升高 ,具有显著性意义 ( P<0 .0 5 )。 3.与空白对照组相比 ,补 Mg2 + 各剂量组 Se-GSH- Px活性升高 ,P<0 .0 5 ;与 H2 O2 组相比 ,H2 O2 + Mg2 + 各剂量组 Se- GSH- Px和 non- Se- GSH-Px活性升高 ,具有显著性意义 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。结论 :　Mg2 +能对抗内皮细胞脂质过氧化反应 ,并增强抗氧化酶的活性。     

镁对人体低密度脂蛋白氧化修饰的影响

目的 :　观察镁对人体低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰的影响。方法 :　一次性密度梯度超速离心法制备人天然 LDL,共轭二烯法检测 Mg2 +对 Cu2 +介导的 LDL氧化反应敏感性的影响 ,硫代巴比妥酸反应物 (TBARS)法检测 Mg2 +对 Cu2 +和内皮细胞介导的 LDL氧化修饰程度的影响。结果 :　 1 .LDL+Cu2 + +Mg2 +各剂量组 LDL氧化反应潜伏期较 LDL+Cu2 +组明显延长 ;2 .LDL+Cu2 + +0 .3mmol/L Mg2 +组和 LDL+Cu2 + +0 .6mmol/L Mg2 +组 TBARS低于 LDL+Cu2 + 组 ,P<0 .0 1 ;3.在内皮细胞介导的 LDL氧化体系中 ,补 Mg2 + 各剂量组 TBARS低于空白对照组 ,LDL+Mg2 +各剂量组 TBARS低于 LDL组 ,差异均具有显著性 (P<0 .0 5)。结论 :　在一定实验条件下 Mg2 +可阻断 LDL的氧化反应     

芍药苷对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的 保护作用

摘要:目的　探讨芍药苷对过氧化氢（H2O2）诱导人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）损伤的保护作用。方法　体外培养HUVEC,以200 μmol/L H2O2诱导人脐静脉血管内皮细胞损伤建立模型,同时以100、200、400 μmol/L的芍药苷分别干预,显微镜下观察细胞形态,用噻唑蓝（MTT）法检测HUVEC活力,微板法检测上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的活性及一氧化氮（NO）的含量,酶联免疫吸附法（ELISA）法检测内皮素-1（ET-1）、组织型纤溶酶原激活物（tPA）、纤溶酶原激活物抑制因子（PAI-1）的含量。结果　与模型组比较,芍药苷中、高剂量组细胞活力显著升高,LDH活性显著减低、ET-1和PAI-1含量显著减少,NO和tPA显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。结论　芍药苷对H2O2诱导的HUVEC损伤具有明显的保护作用。     

镁对人脐静脉内皮细胞增殖活力的影响

目的：探讨镁对人脐静脉内皮细胞增殖活力的影响及对心血管系统的保护作用。方法：在改进人脐静脉内皮细胞培养方法的基础上,用MTT法检测Mg^2对传统2－3代人脐静脉曲皮细胞增殖活力的影响,实验分为空白对照组LH2O2组;补镁组;H2O2 Mg^2组,结果：补镁各剂量组OD值高于空白对照组,H2O2＋Mg^2各剂量组OD值高于H2O2组,均具有显著性差异。结论：提示镁对内皮细胞增殖有明显的促进作用。     

氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞基因表达

目的 通过研究氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein。Ox-LDL)诱导血管内皮细胞基因表达谱的改变，为阐明氧化型低密度脂蛋白致内皮细胞功能障碍及动脉粥样硬化形成的分子机制提供科学依据。方法 采用含有4000条全长已知人类基因cDNA，以及96条参照基因cDNA克隆制作的基因表达谱芯片，筛查氧化型低密度脂蛋白(100mg／L)作用6h对人脐静脉血管内皮细胞的基因表达谱改变的影响。结果 Ox-LDL可诱导3条基因表达下调，5条基因表达上调。结论 氧化型低密度脂蛋白的早期作用即可诱导内皮细胞相关基因的表达改变；首次发现氧化型低密度脂蛋白可诱导内皮细胞H731蛋白，ST2蛋白，CyclinB1(细胞周期蛋白B1)和KDRF(KM-102-derived reductase-like factor。KM-102源性还原酶样因子)等基因表达的改变，为揭示氧化型低密度脂蛋白引起血管内皮细胞功能障碍的机制提供线索。     

阿魏酸钠对氧化低密度脂蛋白拮抗作用

目的 在体外培养条件下,探讨阿魏酸钠(SF)拮抗氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)的作用机制。方法 在体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中分别和同时加入SF和Ox-LDL,采用基因芯片技术分析内皮细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)的基因表达改变;用实时PCR技术(RT-PCR)检测IL-1βmRNA表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β蛋白表达。结果 基因芯片检测结果显示,HUVEC受Ox-LDL诱导后,IL-1β基因表达上调,比空白对照组高2.4倍;而采用SF+Ox-LDL处理后,IL-1β基因表达下调,是Ox-LDL组的2.6倍。RT-PCR与ELISA结果显示,Ox-LDL组与空白对照组比较,IL-1βmRNA及蛋白表达均明显增高;SF+Ox-LDL组与空白对照组比较,IL-1βmRNA表达差异无统计学意义;蛋白表达则明显降低。结论 结论 Ox-LDL可诱导内皮细胞的IL-1β表达明显增强,阿魏酸钠能够抑制Ox-LDL活性,下调IL-1β的mRNA表达,可减少IL-1β对血管内皮细胞的损害。     

低密度脂蛋白影响巨噬细胞的SAPK信号通路

目的　研究氧化型低密度脂蛋白 (oxidizedlowdensitylipoprotein ,Ox -LDL)对巨噬细胞增殖、坏死及凋亡影响的非清道夫受体途径 ,及对应激活化蛋白激酶 (stress -activatedproteinkinase ,SAPK)信号通路的影响。 方法　采用 3个时间水平 (2 4,48,72h)、4个剂量水平 (0 ,50 ,10 0 ,2 0 0mg/L)的两因素析因设计 ,观察Ox -LDL对清道夫受体A(scavengerreceptorA ,SRA)基因敲除小鼠巨噬细胞增殖、坏死及凋亡影响的时间、剂量效应关系 ;Ox -LDL对该细胞SAPK活性的影响。结果　Ox -LDL可诱导SRA基因敲除小鼠巨噬细胞增殖、凋亡及坏死 ,并与其作用浓度和剂量相关 (P <0 0 1) ,同时Ox -LDL可引起SAPK活性水平发生变化。结论　Ox -LDL对SRA基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞的影响主要为诱导增殖作用 ,高浓度时伴有一定致凋亡、坏死作用 ,其致细胞增殖、凋亡作用可能部分与SAPK信号途径有关 ,提示非清道夫受体途径在Ox -LDL导致巨噬细胞功能改变过程中可能起重要作用     

氧化修饰低密度脂蛋白对血管内皮细胞氧化损伤的研究

目的　用氧化修饰低密度脂蛋白 (OX LDL)建立对血管内皮细胞的氧化损伤模型。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于OX LDL环境下 ,测定细胞活力及丙二醛含量。结果　当内皮细胞暴露于OX LDL不同剂量组 (10、5 0、10 0 μg ml) 2 4h后 ,其细胞活力显著降低 ,丙二醛含量增加 ,特别是OX LDL高浓度组最为明显。结论　OX LDL对内皮细胞有明显损伤作用 ,能促发动脉粥样硬化的形成。     

茶色素抑制单核-内皮细胞粘附及其机制研究

为研究茶色素 (TP)对氧化型低密度脂蛋白 (Ox- L DL)损伤血管内皮细胞所致单核细胞粘附的影响 ,应用硫酸铜诱导低密度脂蛋白 (L DL )氧化 ,用细胞粘附实验、流式细胞仪荧光强度测定、细胞 EL ISA等方法分别从细胞、蛋白表达等方面研究茶色素对细胞间粘附分子 (ICAM- 1)和血管细胞间粘附分子 (VCAM-1)表达的影响。结果显示 ,80、40、2 0 mg/ L的 TP抑制 Ox- L DL诱导的单核细胞 -内皮细胞粘附 ,抑制 Ox-L DL 诱导的 ICAM- 1和 VCAM- 1表达并呈浓度依赖性。提示 TP抑制 ICAM- 1和 VCAM- 1的表达是其抑制单核细胞 -内皮细胞粘附及抗动脉粥样硬化的机制之一。     

抗氧化维生素对氧化低密度脂蛋白作用的主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤的影响

为深入探讨抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）损伤内皮细胞的防治作用及可能机理,我们以体外培养的小牛主动脉内皮细胞为模型、在培养的主动脉内皮细胞中加入不同剂量的抗氧化维生素,共同培养１２ｈ,再与终浓度为０．１ｇ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ继续培养２４ｈ,取贴壁细胞及培养液,通过硫代巴比妥酸荧光比色法（ＴＢＡ）和单核细胞（ＨＬ６０）粘附计数法观察不同浓度的抗氧化维生素对ｏｘＬＤＬ损伤的内皮细胞脂质过氧化及单核细胞粘附性的影响。结果表明,抗氧化维生素各组细胞培养液中丙二醛（ＭＤＡ）含量以及内皮细胞粘附的ＨＬ６０细胞数均明显低于ｏｘＬＤＬ组,提示维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素三种抗氧化维生素均可减轻ｏｘＬＤＬ对内皮细胞的脂质过氧化损伤,阻止单核细胞的粘附。这些可能是抗氧化维生素防治动脉粥样硬化的重要机理之一。     

人脐静脉内皮细胞的培养与鉴定

对血管内皮细胞体外培养的常规方法进行了改进 ,采用胰蛋白酶 胶原酶 (1∶1)混合酶液消化方式分离人脐静脉内皮细胞 ,简化完全培养液的组成成分 (不添加血管内皮细胞生长因子、肝素等辅助因子 ) ,机械刮擦法分离单层细胞进行传代培养。培养细胞用形态学、超微形态学和免疫组织化学染色法进行鉴定 ,证实培养的细胞是血管内皮细胞。     

银杏叶提取物对急性脑梗死病人血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平影响的研究

目的观察银杏叶提取物注射液对脑梗死病人血浆氧化修饰低密度脂蛋白（OX-LDL）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平的影响。方法60例急性脑梗死病人分为两组：试验组30例，静脉滴注银杏叶提取物注射液20ml／次，qd，连续14d；对照组30例，每日静脉滴注香丹注射液20ml，连续14d。于治疗前和治疗后14d分别检测血浆0X—LDL、SOD、MDA的水平变化。结果试验组病人治疗前血浆0X—LDL、SOD、MDA水平分别为（0．70±0.19）mg／L、（81．0±8．0）kU／L、（6．6±1．3）μmol／L，治疗后分别为（0．52±0．26）mg／L、（106．0±6．0）kU／L、（4．2±1．2）μmol／L，治疗前后有非常显著差异（P〈0．01）；对照组治疗前后血浆OX-LDL、SOD、MDA水平变化不明显（P〉0．05）。治疗期间两组病人均未出现明显不良反应。结论银杏叶提取物注射液具有清除自由基、降低血浆OX-LDL水平的作用。     

银杏叶提取物对急性脑梗死病人血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平影响的研究

目的观察银杏叶提取物注射液对脑梗死病人血浆氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影响。方法60例急性脑梗死病人分为两组:试验组30例,静脉滴注银杏叶提取物注射液20 ml/次,qd,连续14 d;对照组30例,每日静脉滴注香丹注射液20 ml,连续14 d。于治疗前和治疗后14 d分别检测血浆OX-LDL、SOD、MDA的水平变化。结果试验组病人治疗前血浆OX-LDL、SOD、MDA水平分别为(0.70±0.19)mg/L、(81.0±8.0)kU/L、(6.6±1.3)μmol/L,治疗后分别为(0.52±0.26)mg/L、(106.0±6.0)kU/L、(4.2±1.2)μmol/L,治疗前后有非常显著差异(P<0.01);对照组治疗前后血浆OX-LDL、SOD、MDA水平变化不明显(P>0.05)。治疗期间两组病人均未出现明显不良反应。结论银杏叶提取物注射液具有清除自由基、降低血浆OX-LDL水平的作用。