荷包牡丹碱对小鼠下丘神经元反应潜伏期的影响

目的 观察荷包牡丹碱对下丘神经元声反应潜伏期改变并分析γ-氨基丁酸(GABA)能神经元在下丘信息处理中的作用.方法 在13只4～5周龄BALB/c小鼠下丘,观察并记录微电泳GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(bicuculline,methiolide,BMI)对神经元纯频声反应特性的影响.提取特征频率下潜伏期等特性进行分析.结果 共记录到30个单单位神经元,在BMI作用后40%(n=12)的神经元动作电位潜伏期延长,23.3%(n=7)出现特征频率改变,其中潜伏期延长的神经元中有50%(n=6)伴有特征频率改变,阈值改变具有线性趋势.结论 小鼠下丘神经元反应潜伏期形成受GABA能抑制作用,并通过侧抑制作用增高神经元频率选择性.推测潜伏期变化能从突触水平反应GABA能神经元的信息整合作用.     

荷包牡丹碱对哮喘小鼠肺组织α-SMA及气道重构的影响

目的 通过观察鼻内注射γ-氨基丁酸受体(GABAR)特异性拮抗剂荷包牡丹碱对慢性哮喘模型小鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)在转录水平及蛋白水平表达及气道重构的影响,探讨拮抗剂在哮喘气道重构中的治疗作用.方法 将BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、拮抗剂干预组和激素干预组,用卵蛋白(OVA)致敏激发建立小鼠哮喘模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫组化的方法研究肺组织α-SMA的表达及气道形态学参数的改变.结果 ①与正常对照组比较,在激发哮喘后哮喘模型组肺组织α-SMA的表达升高(P＜0.05);与哮喘模型组相比较,各药物干预组α-SMA的表达均降低(P＜0.01);拮抗剂干预组和激素干预组比较,小鼠肺组织α-SMA表达无明显差异(P＞0.05);②与正常组比较,哮喘模型组支气管基底膜周径(Pbm)、管壁总面积(Wat)、内壁面积(Wai)及平滑肌面积(Wam)均增高(P＜0.05);与哮喘模型组比较,激素干预组气道形态学参数均下降(P＜0.01),拮抗剂组气道平滑肌面积和管壁总面积下降(P＜0.05),各药物干预组比较无明显差异(P＞0.05).结论 哮喘小鼠肺组织α-SMA过量表达与哮喘发生密切相关,荷包牡丹碱可以抑制慢性哮喘模型小鼠α-SMA的表达及气道形态结构改变,作用与吸入性皮质激素相似.提示GABAR通过上调α-SMA表达,促进气道平滑肌收缩及增生,参与气道重构的调节.     

γ－氨基丁酸及荷包牡丹碱对大鼠脑片旁巨细胞外侧核神经元自发放电的影响

本研究用多管微电极技术在大鼠脑片旁巨细胞外侧核（ＰＧＣＬ）区观察了微电泳γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）及其拮抗剂荷包牡丹碱（ＢＩＣ）对神经元自发放电的效应及ＢＩＣ对ＧＡＢＡ效应的影响。ＧＡＢＡ和ＢＩＣ对自发放电均有兴奋、抑制和无影响三种效应，各占所测试神经无数的５６．１０％，３１．７０％，１２．２０％和６６．６７％，５．８８％，２７．４５％。ＧＡＢＡ的抑制效应和ＢＩＣ的兴奋效应显示量效依赖关系。ＢＩＣ可阻断大多数被试神经元（７８．２６％）对ＧＡＢＡ的反应，本结果从细胞水平上提示ＰＧＣＬ区有内源性ＧＡＢＡ，其神经元上有ＧＡＢＡ＿Ａ受体。     

侧脑室注射荷包牡丹碱对丙泊酚小鼠逆行性遗忘的影响

目的观察丙泊酚对逆行性遗忘作用及其与γ-氨基丁酸A（GABAA）受体的关系。方法按分层随机区组设计将小鼠分成4组（n=8）：丙泊酚200 mg·kg^-1＋侧脑室注射（i.c.v）生理盐水组（P200＋NS组）,丙泊酚200 mg·kg^-1＋i.c.v荷包牡丹碱0.3μg组（P200＋Bic 1组）,丙泊酚200 mg·kg^-1＋i.c.v荷包牡丹碱0.4μg组（P200＋Bic 2组）和丙泊酚200 mg·kg^-1＋i.c.v荷包牡丹碱0.5μg组（P200＋Bic 3组）。用避暗实验测定给药后24 h小鼠的潜伏期及错误次数。结果与P200＋NS组相比,P200＋Bic 1组的潜伏期明显延长（P〈0.05）、错误次数明显减少（P〈0.05）,且似呈剂量依赖性。结论GABAA受体介导了丙泊酚的逆行性遗忘作用。     

去甲肾上腺素、酚妥拉明对异氟醚、丙泊酚小鼠翻正反射消失持续时间的影响

目的探讨全麻药催眠作用与α受体之间的关系。方法小鼠10只，侧脑室注入（icv）10μl酚妥拉明（phentolamine），观察其翻正反射是否消失。另取小鼠40只，随机分为两大组，每组20只，分别给予异氟烷（isoflurrane）、丙泊酚（propofol），待其翻正反射消失后1min，再将每大组均分为两亚组，每组10只，分别icv去甲肾上腺素（noradrenaline，NA）或人工脑脊液10μl，观察2组翻正反射消失的持续时间（简称睡眠时间）。结果酚妥拉明icv不能引起小鼠翻正反射消失。NA虽可使异氟烷、丙泊酚小鼠睡眠时间延长，但与人工脑脊液相比，差异无显著性（P〉0．05）。结论α受体不是全麻药催眠作用的主要靶位。     

一叶秋碱和荷包牡丹碱催醒作用的实验研究

目的分析静脉麻醉药硫喷妥钠、羟丁酸钠、依托咪酯、异丙酚和氯胺酮全麻效应与GABAA受体的关系.方法给小鼠分别腹腔注射麻醉剂量的上述药物,待小鼠翻正反射消失后1min,静脉注射一叶秋碱5mg/kg(0.1ml/10g)或侧脑室注射荷包牡丹碱0.3μg(10μl),对照组分别注射同等剂量的生理盐水或人工脑脊液,观察并记录各组的翻正反射消失持续时间.结果一叶秋碱使依托咪酯的翻正反射消失持续时间由(12.8±7.1)min缩短为(6.5±2.8)min(P＜0.05),却不能缩短硫喷妥钠、羟丁酸钠、异丙酚和氯胺酮麻醉小鼠的翻正反射消失持续时间;而荷包牡丹碱对于上述5种静脉麻醉药均不能缩短其翻正反射消失持续时间.结论一叶秋碱对依托咪酯的全麻效应有一定的非特异性拮抗作用,但不能拮抗硫喷妥钠、羟丁酸钠和异丙酚的全麻效应;荷包牡丹碱对于这5种静脉麻醉药的全麻效应均无拮抗作用.结果提示GABAA受体GABA位点并非硫喷妥钠、羟丁酸钠、托咪酯、异丙酚和氯胺酮全麻作用的主要靶位.     

咪达唑仑和氟马西尼对异丙酚麻醉小鼠大脑皮质环腺苷酸含量的影响

目的了解γ-氨基丁酸A型受体上苯二氮位点激动剂咪达唑仑(Mid)和(或)其拮抗剂氟马西尼(3-羟甲基-β-咔啉,FZ)对小鼠静脉注射异丙酚时不同时程大脑皮质cAMP含量的影响.方法昆明种小鼠64只,随机分为4组.分别在腹腔注射生理盐水(NS)10ml/kg、咪达唑仑1mg/kg和(或)氟马西尼0.5mg/kg后8min,静脉注射20mg/kg异丙酚(Prop),于翻正反射消失时及翻正反射恢复40min时断头取脑,并记录翻正反射消失持续时间.结果Mid+Prop组和Mid+FZ+Prop组与NS+Prop组相比小鼠翻正反射消失持续时间明显延长(P＜0.01);2组相比,后者有明显缩短(P＜0.05).NS+Prop组、Mid+Prop组、FZ+Prop组及Mid+FZ+Prop组翻正反射消失时大脑皮质cAMP含量分别是翻正反射恢复40min时的134.3%、129.8%、125.2%和125.1%,均明显升高(P＜0.05);在翻正反射消失这一时点,Mid+Prop组小鼠大脑皮质cAMP含量为NS+Prop组的115.7%,有升高倾向,但无统计学意义(P＞0.05).结论行为学上,咪达唑仑和异丙酚具有协同效应,氟马西尼可部分拮抗该效应;静脉注射异丙酚时大脑皮质cAMP含量的升高,在其全麻机制中可能发挥重要作用;咪达唑仑和氟马西尼对异丙酚引起不同时程大脑皮质cAMP含量变化无明显影响.     

GABAA受体拮抗剂对吸入麻醉药催眠作用的影响

目的　分析吸入麻醉药乙醚、安氟醚、异氟烷和七氟醚催眠作用与GABAA 受体的关系。方法　给小鼠分别腹腔注射麻醉剂量的乙醚、安氟醚、异氟烷、七氟醚 ,待小鼠翻正反射消失后 1min ,静脉注射一叶秋碱 5mg/kg或侧脑室注射荷包牡丹碱每只 0 .5μg /10 μl,对照组分别注射同等容积的生理盐水或人工脑脊液 ,观察并记录各组的翻正反射消失持续时间。结果　一叶秋碱和荷包牡丹碱对上述 4种麻醉药的翻正反射消失持续时间均无明显影响 (P >0 .0 5)。结论　GABAA 受体并非乙醚、安氟醚、异氟烷和七氟醚催眠作用的主要靶位     

异丙酚对大鼠海马CA1区锥体神经元GABA_A受体的作用

目的 :研究异丙酚对大鼠海马CA1区锥体神经元γ 氨基丁酸A型 (GABAA)受体的作用。方法 :采用膜片钳全细胞记录技术。结果 :临床血药浓度异丙酚 (3～ 12 μg ml)对海马脑片CA1区锥体神经元电压门控性钠、钾、钙离子通道的开放、失活、最大电流幅值没有影响。海马脑片CA1区锥体神经元自发抑制性突触后电位 (sIP SC)可被GABAA 受体特异性阻断剂荷包牡丹碱 (Bic)所阻断。异丙酚对海马脑片CA1区锥体神经元sIPSC具有增频作用 ,但对其幅度没有影响 ,且其增频作用可被Bic阻断。结论 :临床浓度的异丙酚对海马脑片CA1区锥体神经元的sIPSC具有增频作用 ,说明海马可能是异丙酚作用的靶器官     

pH值和剂量对腹腔注射L-精氨酸诱导小鼠急性胰腺炎模型的影响

目的探讨L-精氨酸(L-arginine)不同给药方法诱导小鼠急性胰腺炎模型的效果。方法 L-精氨酸溶液以不同pH值、不同剂量诱导小鼠急性胰腺炎模型,造模后2、4、12、24 h统计小鼠病死率,采集小鼠血浆以淀粉-碘比色法检测淀粉酶活性,取胰腺及肺组织行石蜡切片HE染色观察组织损伤严重程度。结果 pH值为11高剂量组小鼠2 h病死率100%,其余各组各时间点小鼠均存活。3个模型组与对照组相比血浆淀粉酶活性、胰腺组织病理评分均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组之间比较,pH值为7高剂量组胰腺及肺组织损伤最重。结论 L-精氨酸溶液的pH值及给药剂量对胰腺损伤程度有不同程度的影响,20%L-精氨酸溶液pH值为7按4 g/kg的剂量间隔1 h连续2次腹腔注射诱导的小鼠急性胰腺炎模型组织损伤重,且小鼠存活率高。     

GABAA受体激动剂和拮抗剂对大鼠梨形皮质、海马Fos表达的影响及其与癫痫发病的关系

为探讨γ－氨基丁酸受体（ＧＡＢＡＡ）与癫痫发病机制之间的关系,应用免疫组化技术结合脑电图就ＧＡＢＡＡ受体激动剂蝇蕈醇对马桑内酯致痫大鼠大脑皮质、海马Ｆｏｓ表达的影响进行研究,并与ＧＡＢＡＡ受体拮抗剂荷包牡丹碱致痫大鼠的Ｆｏｓ表达进行比较。结果显示：侧脑室注射马桑内酯诱发癫痫发作后１ｈ,双侧齿状回颗粒细胞层、海马锥体细胞层及注射侧梨形皮质有大量Ｆｏｓ阳性细胞,对侧梨形皮质未检测到Ｆｏｓ表达;侧脑室注射蝇蕈醇可明显抑制齿状回、海马Ｆｏｓ的表达,但梨状皮质Ｆｏｓ表达未受影响。一侧侧脑室注射荷包牡丹碱诱发癫痫发作后１ｈ,双侧梨状皮质有较强的Ｆｏｓ表达,但齿状回、海马未见表达。脑电图也证实马桑内酯及荷包牡丹碱均能诱发棘慢波、尖慢波,蝇蕈醇则能明显抑制这种痫样放电。结果提示,ＧＡＢＡＡ受体在癫痫发病过程中起重要作用     

灌胃与腹腔注射对小鼠自主活动的影响

目的:探讨灌胃(irrigation)与腹腔注射(intraperito-nealinjection)两种刺激对小鼠自主活动(locomotor activity)的影响,为评价药物中枢作用提供给药途径上的选择。方法:28只昆明种小鼠,随机分为灌胃组与腹腔注射组,每组14只。实验前,小鼠均置于自主活动记录仪中适应1h。第1d9∶00时,在无干扰下记录各小鼠的自主活动数,每次记录10min,连续3次。第2d9∶00时,灌胃组与腹腔注射组小鼠分别给予生理盐水(0.1ml/10g)灌胃与腹腔注射,操作完成后立即记录每只小鼠的自主活动数,记录方法同上。结果:灌胃与腹腔注射两种刺激均可使小鼠自主活动显著增加,持续约10min(P<0.05),但两组间差异不显著,无统计学意义(P>0.05)。结论:灌胃与腹腔注射两种刺激均可对小鼠自主活动产生影响,但影响程度相当。     

异丙酚抗惊厥作用的实验研究

目的 比较异丙酚和硫喷妥钠对印防己毒素和荷包牡丹碱的惊厥的影响。方法 ＮＩＨ小鼠,随机分为对照组,腹腔注射生理盐水０．１ｍｌ／１０ｇ;异丙酚组,腹腔注射异丙酚２５ｍｇ／ｋｇ、５０和１００ｍｇ／ｋ;太喷妥钠组,腹腔注射硫喷妥钠１２．５ｍｇ／ｋｇ、２５和５０ｍｇ／ｋｇ。尾静脉持续注印防己毒素和荷包牡丹碱诱发小鼠惊厥,测定各组小鼠的惊厥阈值。结果 异丙酚及硫喷妥钠各剂量组均使小鼠印防已毒素和荷包牡丹碱惊     

普鲁泊福对GABAA受体结合功能的影响

目的:观察普鲁泊福对离体小鼠脑细胞膜GABAA受体结合功能的影响.方法:采用放射配体受体结合分析法,测定普鲁泊福对小鼠脑细胞膜3H-GABA特异性结合以及GABAA受体饱和曲线的影响.结果:特异性结合试验显示,与对照组相比,10～300 μmol/L浓度组的普鲁泊福明显增强3H-GABA与脑细胞膜GABAA受体的特异性结合,并呈浓度依赖性(P<0.05),而浓度低于10 μmol/L的普鲁泊福无明显增强作用(P>0.05).GABAA受体饱和试验显示,普鲁泊福组(10 μmol/L)的饱和曲线解离常数Kd2值明显低于对照组(P<0.01),但2组的Kd1、Bmax1及Bmax2值相比无统计学差异(P>0.05).结论:临床相关浓度的普鲁泊福可显著增强内源性GABA与GABAA受体的结合功能,其主要机制是通过提高GABA低亲和力结合位点的亲和性而起作用的.