四种免疫学检查在脑囊虫病诊断和治疗中的应用

目的探讨4种免疫学检查在脑囊虫病诊治中的应用价值及临床意义。方法对确诊的脑囊虫病病人治疗前后血清及脑脊液进行间接血凝试验（IHA）、酶联免疫吸附实验（ELISA）、囊虫循环抗原（CAg）以及短程抗体（IgG4）检测,并对其检测结果进行分析比较。结果治疗前脑囊虫病人血清IHA、ELISA、CAg、IgG4阳性率分别是68.28%、65.19%、51.54%和63.84%。脑脊液IHA、ELISA、CAg、IgG4阳性率分别是30.68%、39.98%、46.03%和41.94%。治疗后血清IHA、ELISA、CAg、IgG4阳性率分别是67.40%、65.63%、12.33%和11.89%。结论血清及脑脊液IHA、ELISA检测囊虫循环抗原（CAg）以及短程抗体（IgG4）,对囊虫病诊断方面均有一定的敏感性,但因抗体可持续数年,因此IHA、ELISA不能作为疗效考核的指标。囊虫循环抗原（CAg）检测以及短程抗体（IgG4）检测可作为疗效考核的指标。     

急慢性血吸虫病循环抗原的检测

目的：探讨急性和慢性血吸生病患者体内成虫的存活率。方法：采用双抗体夹心法检测血吸生病患者血清中循环抗原，并与乳胶凝集试验(LAT)及间接血球凝集试验(IHA)进行比较。结果：急性期和慢性期循环抗原阳性率分别为89．56％及27．40%。明显高于同期LAT及IHA法。结论：循环抗原具有较强的特异性和敏感性，弥补了LAT及IHA法不能区别血吸生病患者体内是否存在活的成虫缺陷，并可作为考核疗效指标之一。     

应用单克隆抗体检测脑囊虫病患者的循环抗原

目的：评价单克隆抗体检测循环抗原（CAg）诊断脑囊虫病的价值。方法：用猪囊尾蚴囊液抗原制备单克隆抗体4B6，ELISA法检测患和对照血清和／或脑脊液中的猪囊虫抗原。结果：82例脑囊虫病患诸 血清CAg阳性率为79．2％（65／82），脑脊液CAg阳性率为100％（26／26），治疗一个疗程后血清CAg转阴率为85％（17／20）。对照标本中未检出猪囊虫CAg。4B6和包虫抗原有轻微交叉反应。结论：脑脊液CAg检测有助于脑囊虫病的诊断，而血清CAg检测有助于疗效考核。     

囊虫病患者尿液中循环抗体与循环抗原的检测

目的探讨检测尿液中囊虫循环抗原和抗体对囊虫病的诊断价值。方法用单克隆抗体夹心-ELISA法检测囊虫病患尿液和血清中循环抗原。间接ELISA法检测尿液和血清中特异性抗体。结果40例囊虫病患尿液中循环抗原阳性率为42．5％,特异性抗体的阳性率为47．5％,30例健康对照均为阴性。结论检测尿液中囊虫病循环抗原和特异性抗体方法简便,为一种非损伤性的囊虫病诊断方法。     

人囊虫病快速ELLISA试剂盒的研制和应用

通过用纯化的猪囊虫的囊液抗原包被聚苯乙烯条板和ＴＭβ显色系统研制的试剂盒，在３７℃孵育的条件下，适当稀血清（１：５０），经１５分钟抗原和抗体即可充分结合通过对临床７９６例多囊虫病人和２００例正常人血清抗体的检测，临床符合率为９２．８％，囊虫病人血清抗体滴度在１：５０－１：８０００，光吸收值范围在０．００７－０．０５。这表明，在检测囊虫病人血清抗体时，该试剂盒有着简便，快速，敏感性高等优点。     

应用聚乙二醇改进的间接血凝试验检测单克隆抗体

本文采用硷化乙醇法制备细菌O抗原,用以致敏醛化红细胞。临用前加入3%聚乙二醇(PEG)、灭活的正常兔血清及绵羊红细胞膜配成间接血凝应用液,以检测杂交瘤产生的抗霍乱弧菌菌体抗原的单克隆抗体。在细胞培养上清和小鼠腹水抗体的检测中,其灵敏度比经典的醛化致敏血球提高4～8倍。     

酶联免疫吸附试验检查抗猪囊虫抗体

酶联接的免疫吸附试验(enzym linked immunosorbent assay.ELISA.简称酶联免疫吸附试验),在血清学诊断中,引起人们的重视。本试验不但敏感性和特异性高,而且操作简便,重复性好。临床实践迫切需要用特异而敏感的血清学方法来检测脑囊虫病人的抗猪囊虫囊液抗原的抗体(简称囊虫抗体)。本文用ELISA和间接血凝试验(简称PHA)检查囊虫抗体,检测了50例脑囊虫病人血清囊虫抗体,同时以50例非囊虫病人血清作为对照。现报告如下。     

单抗胶乳凝集试验和间接荧光抗体试验诊断囊虫病的研究

目的:探讨单克隆抗体胶乳凝集试验(McAb-LAT)和间接荧光抗体试验(IFAT)在囊虫病临床诊断中的价值。方法:应用猪囊尾蚴冰冻切片抗原进行 IFAT 检测囊虫病患者抗体;应用抗猪囊尾蚴单克隆抗体致敏胶乳微球进行 LAT,检测囊虫病患者循环抗原。结果:囊虫病患者的抗体检出率为83.71%,分型抗体检测,混合型及脑型检出率明显高于皮肌型(P<0.01);患者循环抗原的检出率为73.05%,脑型患者囊虫活动期的循环抗原检出率明显高于囊虫钙化期(P<0.01),药物治疗3个月以上患者循环抗原的阳性率降为44.11%。结论:McAb-LAT 和 IFAT 在囊虫病临床诊断中有较高价值,循环抗原的检测在脑型囊虫病活动期诊断和疗效考核中具有重要意义。     

用SDS—PAGE、Western blot和ELISA方法检测猪囊虫囊液中有效抗原的研究

用SDS-PAGE、Western blot和ELISA方法检测猪囊虫囊液中的有效抗原,结果猪囊虫囊液中有8条抗原区带被猪囊虫病患者血清中抗体识别,分子量分别为255、185、105、69、64、60、48、和41kDa。其中第至3第7条免疫活性较强,含量较高,为有希望用于研制猪囊虫病疫苗的抗原分子。     

血吸虫卵抗原致敏冻干血球标准化研究

用血吸虫卵可溶性粗抗原(简称虫卵抗原)致敏冻干血球做间接血凝试验(IHA)诊断血吸虫病,存在着致敏血球批间差异较大、质量不够稳定的缺点.我们自1981年起对虫卵抗原致敏血球标准化的问题进行探讨,重点研究了不同批次和不同用量的抗原致敏血球效果的差异,并通过试验,改进了致敏血球的部分操作方法。现将结果报告如下。     

单克隆抗体反向IHAT检测囊虫病循环抗原

应用抗猪囊虫抗原的单克隆抗体反向间接血凝试验（ＩＨＡＴ），对临床确诊的囊虫病患者进行了血清循环抗原（ＣＡｇ）的检测，阳性率为５１．１４％（６７／１３１）。对１９例脑型囊虫病患者同时测定了血清和脑脊液中的ＣＡｇ，阳性率分别为４７．３６％和７８．９４％，总阳性率为８４．２１％。对治疗０．５３后的１９例患者检测时，血清和脑脊液中ＣＡｇ均呈阴性反应，而检测抗体仍呈阳性反应。５０例正常人、４９例其它寄生虫病及５例其它脑部疾病患者脑脊液的ＣＡｇ均呈阴性反应。结果提示：测定ＣＡｇ对囊虫病活动性感染的诊断及疗效判定均具有一定的实用价值。     

丝虫病循环抗原及抗体的检测

将抗马来丝虫微丝蚴抗原的单克隆抗体致敏羧化聚苯乙烯乳胶,检测班氏丝虫微丝蚴血症者119例,阳性109例,阳性率91.6%,健康输血员36例,阳性4例,阳性率11.11%,肠道蠕虫及原虫感染者12例和猪囊虫病患者14例全部为阴性。对其中103例微丝蚴血症者进行了血清抗体的测定,阳性93例,阳性率90.29%。结果表明,单抗乳胶凝集试验检测丝虫病循环抗原方法简便、经济,敏感性和特异性均较好,便于现场推广应用,尤其对丝虫病活动性感染和早期感染的诊断及流行病学监测有一定实用价值。     

SARS冠状病毒N蛋白在免疫荧光诊断技术中的应用

目的 应用基因工程技术,在昆虫细胞中表达SARS—CoV N基因,产生无感染性的核蛋白,作为诊断抗原,用于检测血清中SAILS特异性抗体。方法 从一例输入性SARS病人血清中提取病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增SAILS—CoV N基因,将它插入昆虫杆状病毒,构建重组昆虫杆状病毒,转染sf 9昆虫细胞,经丙酮固定,制成SARS特异性诊断抗原,建立检测病人血清抗SARS-CoV抗体的免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)。结果 此抗原仅与SARS阳性病人血清起反应,而与正常人及其他发热病人血清不起反应。经双盲试验,与空斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)阳性的2003年SAILS病人血清的符合率为97．8％;检测2004年广东新发4例SAILS病人进展期血清均阳性,发病后第6天即可检出抗体1：40阳性,至第9天,升至1：640.结论 此法用于检测病人血清中SARS抗体,具有特异性强、敏感性高,试剂制备简单、安全,不需P3实验室,为诊断与研究SAILS提供新的途径和手段。     

E血清型沙眼衣原体抗体的制备及检测

目的:制备高效价E血清型沙眼衣原体(CT)的多克隆抗体.方法:用hep-2细胞培养制备并用超速离心方法纯化E血清型CT作为抗原,采用弗氏佐剂乳化抗原,背部皮下多点免疫4只家兔,收获免疫后血清制备多克隆抗体,用Western blot方法进行鉴定,ELISA法检测抗体水平.结果:所有家兔在全程免疫后都产生了高效价的血清抗体,最高滴度达1∶1600.Western blot实验结果显示,本研究制备的CT血清抗体能与CT全菌体抗原发生b异结合.结论:CT菌体抗原免疫家兔可成功制备高效价的血清抗体,为建立沙眼衣原体免疫检测方法打下了基础.     

双向电泳及免疫印记法对囊尾蚴囊液抗原的分析、纯化及鉴定

目的 通过分析、纯化囊液抗原，筛选高免疫反应性和高特异性抗原组分，用于囊虫病免疫诊断。方法 用分辨率极高的双向电泳法对囊液抗原进行分离、纯化，并通过免疫印记，用囊虫病人血清、包虫病人血清和其它异源血清筛选特异性抗原组分，为建立新一代免疫学诊断方法奠定基础。结果 得到了等电点为9．4，分子量为14KD和16．6KD两组抗原组分，特异性达100％，并且仅被急性感染的囊虫病人血清识别，而不被囊虫完全钙化病人血清识别。结论 得到了高免疫反应性和高特异性的蛋白纯品，为囊虫病的免疫诊断奠定了基础。     

鼻咽癌患者血清中EB病毒四种特异性IgG抗体的测定

用间接免疫荧光法检测了２４例鼻咽癌患者与１１９例正常人血清中ＥＢ病毒４种特异性ＩｇＧ抗体，结果表明，正常人血清中ＥＢ病毒衣壳抗原（ＷＣＡ）的抗体效价为１：１６０以下，而鼻咽癌患者血清抗体效价为ｌ：１６０～１：５１２０，抗体阳性率均为１００％；正常人血清中ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ）的抗体效价为１：８０以下，而鼻咽患者血清抗体价为１：８０～１：２５６０，阳性率均为１００％；正常人血清中ＥＢ病毒早期抗原（ＥＡ）的抗体效价为ｌ：１０，阳性率只有１３．３％，而鼻咽癌患者血清抗体效价为ｌ：２０～１：１２８０，阳性率为１００％；正常人血清中ＥＢ病毒抗原（ＭＡ）的抗体效价为１：１０～１：４０，阳性率为７１％，而鼻咽癌患者血清抗体效价为１：１０～１：３２０，阳性率为１００％．以上４种抗体中．ＶＣＡ、ＥＢＮＡ和ＥＡ抗体的效价和分布在正常人与鼻咽癌患者之间有明显差异（Ｐ＜姜勇男，男，３１岁，讲师．延吉市局子街２１号（１３３０００）０．０ｌ），ＥＡ抗体的阳性率也比正常人明显升高（Ｐ＜０．０ｌ），ＭＡ抗体的效价和阳性率与正常人相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）。     

EB病毒膜蛋白家兔免疫血清的制备及其特性研究

目的：制备高效价EB病毒膜蛋白抗体,并对其效价及其与EBV结合的特异性进行鉴定。方法：将B95-8细胞培养至3×10^5/mL时,超声破碎,纯化获得EB病毒膜蛋白抗原;EB病毒膜蛋白抗原经弗氏佐剂乳化,在家兔背部皮下多点免疫注射,间隔2周免疫,共3次,并分别于免疫前和每次免疫后1周取兔血清,检测兔免疫血清抗体IgG;进一步采用Western blot检测制备的血清抗体与EBV结合的特异性,同时采用ELISA法检测兔血清抗体水平及各周抗体滴度的变化趋势。结果：所有家兔在全程免疫后都产生了高效价膜蛋白的特异性抗体,最高滴度达1：6400。结论：用B95-8细胞制备的EB病毒膜蛋白抗原免疫家兔,可成功制备高效价的特异性血清抗体,为EB病毒膜蛋白抗原的免疫学检测奠定了基础。     

ELIB检测脑囊虫病人循环抗原

采用猪囊尾蚴抗原免疫纯系家兔制备免疫兔血清,以酶联免疫印渍(ELIB)法检测40例脑囊虫病人血清中循环抗原。脑囊虫病人分别出现1条～4条 特异反应带,各带分子量分别为53.0、23.0、19.0、17.5 KD;各带出现率分别为90.0％、75.0％、67.5％和87.5％。20例单纯绦虫病患者和20例正常人,除1例绦虫病人呈交叉反应(19.0KD)外均为阴性。结果表明来源广、制备方便的免疫兔血清检测诊断脑囊虫病具有较高的特异性和敏感性。