基于纳米金/多壁碳纳米管-普鲁士蓝-壳聚糖纳米复合物/蛋白A定向固定甲胎蛋白免疫传感器的研究

目的 以金纳米粒子修饰的氧化铟锡(ITO)玻璃为基底电极,将多壁碳纳米管-普鲁士蓝-壳聚糖(MWNTs-PB-CHIT)纳米复合物及蛋白A(PA)共修饰于其表面固载抗体制得高灵敏甲胎蛋白(AFP)电流型免疫传感器.方法 先在ITO电极表面电沉积一层纳米金,随后将MWNTs-PB-CHIT纳米复合物滴涂于ITO玻璃电极的纳米金膜上,最后利用壳聚糖的吸附性及在酸性(pH=6.5)环境的负电性,静电吸附蛋白A并定向固定甲胎蛋白抗体(anti-AFP),制得电流型免疫传感器.结果 在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与AFP浓度在1.0～250.0 ng/ml的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.5 ng/ml, 反应达到稳定电流所用时间为6 min,并且电流值相对标准差小于3%.结论 成功构建一次性使用、价格低廉的新型传感器电极材料.     

基于石墨烯-依来铬青蓝R的新型免标记电化学免疫传感器用于CA19-9检测

目的构建石墨烯-依来铬青蓝R(GO-ECR)免标记电化学免疫传感器高灵敏检测CA19-9的新技术。方法化学法合成氧化石墨烯并滴涂于电极表面,通过循环伏安法电沉积制作GO-ECR修饰玻碳电极,在偶联剂EDC和NHS作用下以共价键合方式将CA19-9抗体固定于修饰电极表面,固定的抗体与CA19-9发生免疫反应形成抗原-抗体复合物。铁氰化钾溶液作为检测探针,对比免疫反应前后铁氰化钾响应信号的差异,利用信号降低程度与CA19-9浓度正相关,实现对CA19-9的特异性高灵敏检测。结果该电化学免疫传感器检测CA19-9的线性范围为0.05～500 U/mL,检测限为0.01 U/mL,且能准确测定临床血清样本CA19-9的浓度。结论构建的GO-ECR免标记电化学免疫传感器可以简单、准确、特异地检测CA19-9。     

用于AFP检测的电流型免疫传感器的研究

目的 研制一种新的检测AFP的电流型免疫传感器。方法 通过把抗体固定在电聚合邻苯二胺膜的铂电极上，夹心法连接HRP标记的AFP抗体，电流法检测HRP作用于底物对苯二酚后的产物产生的还原电流间接检测血清AFP浓度。结果 制得的传感器在5～400ng／ml范围内．电流和AFP浓度的对数成线性关系，相关系数为0．986．最低检测限为0．51ng／ml，初步临床实验结果良好。结论 研制的传感器具有保存时间长、灵敏度高、特异性好、重复性好、无放射性等优点．有望在临床检测中发挥作用。     

基于多壁碳纳米管-壳聚糖-硫堇纳米复合物修饰甲胎蛋白免疫传感器的研究

目的采用多壁碳纳米管-壳聚糖-硫堇(MWCNT-CS-THi)纳米复合物及半胱氨酸盐酸盐共修饰于玻碳电极表面固载抗体制得高灵敏甲胎蛋白免疫传感器。方法先在玻碳电极表面滴涂一层MWCNT-CS-THi纳米复合物,随后利用壳聚糖和硫堇分子中大量的正电荷氨基固定纳米金(GNPs)并吸附半胱氨酸盐酸盐(CH),最后用戊二醛(GA)交联甲胎蛋白特异性抗体制得电流型免疫传感器。结果在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与甲胎蛋白抗原(AFP)浓度在0.1～200.0ng/ml的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.07ng/ml。结论成功建立了甲胎蛋白免疫传感器,该方法制备简单,线性范围宽,检测下线低。     

基于印刷电极的日本血吸虫免疫传感器研究(英文)

目的:探索一种新的免疫传感器,以提高检测的敏感性及抗体滴度的线性范围。方法:将碳油墨和银/氯化银油墨滴在PET板,作为两电极测试条,碳为工作电极,用不同的方法把可溶性抗原固定在工作电极的末端,银/氯化银电极作为对照。在电化学工作站中,采用循环伏安法和示差脉冲伏安法测试抗体的效价,并对这些方法的效果进行比较。在此基础上开发2种固定日本血吸虫抗原的印刷电极免疫传感器:戊二醛交联(GA)传感器和壳聚糖戊二醛(Chit-GA)传感器,并采用循环伏安法和示差脉冲伏安法测试抗体滴度检测范围。结果:GA膜修饰电极的日本血吸虫抗原最佳包被浓度为50μg/L,Chit-GA膜修饰电极的最佳浓度值为10μg/L;2种电极的免疫反应时间均为1 min;GA,Chit-GA免疫传感器检测范围分别为1:1000~1:400,1:1000~1:500。示差脉冲伏安法电流的测试值会随着血清效价增大而增大。结论:GA传感器和Chit-GA的交联传感器具有较高的检测灵敏度,反应时间短,检测抗体滴度线性范围宽,并且与日本血吸虫抗体滴度具有良好的线性关系。     

基于AgI模拟酶纳米材料构建阻抗型免疫传感器用于检测癌胚抗原

目的 设计一种基于AgI模拟酶纳米材料的阻抗型免疫传感器,对血清样品中的癌胚抗原(CEA)进行高灵敏检测.方法 合成一种壳聚糖修饰的碘化银(CS-AgI)纳米材料,利用透射电镜(TEM)和傅里叶红外光谱(FTIR)法对合成的CS-AgI进行表征,以CS-AgI为信号标记物修饰CEA抗体,采用夹心式免疫分析法在金电极表面制备一种高效、灵敏的电化学免疫传感器,采用电化学工作站定量分析检测所构建免疫传感器的电化学性能.结果 成功合成CS-AgI纳米颗粒,颗粒呈球形,粒径约为100 nm.以CS-AgI纳米颗粒为信号标记物构建的免疫传感器在pH7.0的磷酸盐缓冲液中检测CEA时表现出良好的电化学性能,其交流阻抗响应值与样品中的CEA浓度的对数呈线性增加趋势,并在CEA浓度为0.1～80 ng/mL范围内展现出良好的线性关系(r=0.996),检测限达到0.05 ng/mL.结论 基于AgI模拟酶纳米材料构建的阻抗型免疫传感器可以高灵敏检测CEA,同时具有较好的精确性、重现性和选择性,为癌症的早期诊断和早期治疗提供了实验依据.     

基于碳纳米管-硫堇/苝四甲酸二酐衍生物膜/纳米金的新型癌胚抗原电流型免疫传感器的研究

目的探讨采用碳纳米管-硫堇(CNTs-THi)/苝四甲酸二酐衍生物膜(PTC-NH2)/纳米金(nano-Au)构建的新型的高灵敏癌胚抗原(CEA)免疫传感器的性能。方法以氧化铟锡(ITO)电极为基底,在其表面首先电沉积一层纳米金,然后依次修饰CNTs-Thi、PTC-NH2、nano-Au,固载癌胚抗原特异性抗体(anti-CEA)制得新型高灵敏癌胚抗原(CEA)免疫传感器。通过循环伏安法考察电极修饰过程的电化学特性。结果该免疫电极的峰电流响应与癌胚抗原的浓度在1.0～75.0 ng/mL的范围内保持良好的线性关系,相关系数为0.991 5,检测下限为0.5 ng/mL。结论利用该方法制备的免疫传感器具有灵敏度高、线性范围宽、检测下限低等优点。     

辣根过氧化物酶在Au-Gemini纳米复合物修饰玻碳电极上的直接电化学

将辣根过氧化物酶(HRP)固定在Au-Gemini纳米复合物修饰的玻碳(GC)电极表面,制备了HRP修饰电极(HRP/Au-Gemini/GC),研究了HRP在AuGemini纳米复合膜中的直接电化学,考察了其对H2O2的电催化还原作用。研究表明,HRP在AuGemini 纳米复合膜中发生了准可逆的电化学反应,其氧化峰峰电位(Epa)和还原峰峰电位(Epc)分别为-0.236 V和-0.273 V。HRP/Au-Gemini/GC修饰电极对H2O2具有良好的电催化还原响应,其表观米氏常数Km=2.0×10-5 mol/L,H2O2浓度在1.0～7.0 μmol/L范围内与催化电流呈线性关系。该研究为实现氧化还原酶的直接电子传递和生物传感器的构制提供了一种有效途径。     

快速灵敏检测HCV核心抗原的免疫新方法及其性能分析

目的建立一种用于快速、灵敏检测血清丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCcAg)含量的免疫新方法,并对其性能进行评价。方法采用新型纳米材料修饰电极,将HCV核心抗体固定到电极表面,制备检测HCV核心抗原的电化学免疫传感器,并分析该传感器的检测性能。结果该免疫传感器对HCV核心抗原反应灵敏,其线性范围为2.50～300.00ng/mL,相关系数为0.997,检出限为1.20ng/mL。此外,该传感器具有较好的准确性、选择性和精密度。结论该电化学免疫传感器性能良好,可实现对HCcAg的快速、灵敏检测。     

基于氧化锌纳米花的心肌肌钙蛋白I夹心式电化学免疫传感器构建研究

目的 结合氧化锌纳米花及夹心法信号放大策略,构建高灵敏心肌肌钙蛋白I(cTnI)电化学免疫传感器。方法 采用直接沉淀法合成氧化锌纳米花,在其表面标记硫堇与cTnI抗体。另外,采用恒电位溶出法在电极表面沉积纳米金,通过金-氮共价键捕获cTnI抗体作为传感平台,识别检测抗体,构成夹心式、高灵敏cTnI电化学免疫传感器。采用扫描电子显微镜（SEM）表征材料的形貌结构,采用循环伏安法和示差脉冲伏安法（DPV）探究传感界面的构建过程、实验条件以及响应性能。结果 功能化氧化锌纳米花与纳米金呈现出良好的信号放大性能。在最优实验条件下,免疫传感器DPV响应电流与cTnI抗原浓度呈正比,线性范围为0.05～0.25μg/L和0.50～8.00μg/L,检测限为0.014 3μg/L(S/N=3)。构建的电化学免疫传感器具备良好的选择性、重现性及准确度。结论 结合氧化锌纳米花优异的催化性能,成功构建一种双抗夹心式cTnI电化学免疫传感器,提高了cTnI检测的灵敏度与特异度。     

Pt@GR复合物用于构建高灵敏电化学甲胎蛋白传感器的研究

目的 构建基于铂与石墨烯纳米复合物(Pt@GR)的电化学免疫传感器.方法 在洁净的玻碳电极表面滴涂一层壳聚糖与Pt@GR的复合物,通过共价作用将纳米金固定在电极表面,进一步固载甲胎蛋白抗体制得甲胎蛋白免疫传感器,采用循环伏安法(cyclic voltammetry,CV)、示差脉冲伏安法(differential pulse voltammetry,DPV)对实验条件进行优化,对该传感器的响应特性进行研究.同时制备基于普鲁士蓝和石墨烯的免疫传感器以对照研究不同传感器的性能特点.结果 免疫反应最佳时间为24 min,测试底液最佳pH为6.5.在最优的实验条件下,连续扫描100圈,其电流响应下降5.1％.平行测定5支电极的RSD为8.1％,加标回收率为96.40％ ～ 102.49％.在测试底液中加入过氧化氢,其线性范围为0.1 ～ 100.0 ng/mL,检测限为0.026 ng/mL.结论 基于Pt@GR复合物修饰的电化学传感器具有灵敏度高和稳定性好的特点,可用于甲胎蛋白的高灵敏检测.     

压电石英晶体甲胎蛋白免疫传感器的实验研究

目的　构建一种新型压电甲胎蛋白 (AFP)免疫传感器。方法　AT切向、基频 10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定组成检测池 ,抗人AFP单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电AFP免疫传感器。结果　构建的压电AFP免疫传感器对AFP的响应特性良好 ,其线性检测范围为 2 0～ 10 0 0ng ml ,癌胚抗原(CEA)、前列腺特异抗原 (PSA)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)等对AFP的检测基本无干扰 ;传感器可再生后重复使用 5次 ;68例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合 ,两种方法的相关系数为 0 92 ,P <0 0 1。结论　研制的压电AFP免疫传感器是一种灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能重复使用和实时在线检测AFP的新方法 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广价值。     

基于碳纳米管修饰的无酶型新型甲胎蛋白安培免疫传感器研究

目的构建新型甲胎蛋白安培免疫传感器。方法首先在玻碳电极(GCE)表面修饰一层羧基化碳纳米管(CNTs),然后利用带负电荷的DNA分子和带正电荷的硫堇之间的静电作用,层层自组装修饰硫堇以增强检测信号,然后利用硫堇的氨基固定纳米金,以便固定抗体,最后利用牛血清白蛋白封闭未结合位点。结果修饰的碳纳米管能够显著地提高电极的导电性,利用层层组装技术修饰了5层硫堇。在优化的条件下(pH7.0,温浴时间25min),制作的甲胎蛋白免疫传感器线性范围在0.5～25ng/ml内,检测限0.02ng/ml。结论成功利用层层自组装技术构建新型基于碳纳米管修饰的无酶型甲胎蛋白安培免疫传感器,该传感器灵敏度高,特异性好,有望成为原发性肝癌早期诊断的新方法。     

基于Au_(nano)-PB、AEAPS-Dextran-Fe_3O_4和Au_(nano)修饰的前列腺特异性抗原电流型免疫传感器的研究

目的采用普鲁士兰-纳米金(Au_(nano)-PB)、氨基硅烷化-葡聚糖-四氧化三铁纳米复合物(AEAPS-Dextran-Fe_3O_4)及纳米金(Aunano)共修饰于氧化铟锡(ITO)电极表面固载抗体制得高灵敏前列腺特异性抗原电流型免疫传感器。方法先将ITO电极表面滴加适量Au_(nano)-PB,随后将AEAPS-Dextran-Fe_3O_4滴涂在ITO玻璃电极的Au_(nano)-PB膜上,然后通过静电吸附Au-nano并固定前列腺特异性抗体(anti-PSA),制得电流型免疫传感器。结果在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与前列腺特异性抗原(PSA)浓度在该传感器(0.8～20)ng/mL及(20～170)ng/mL的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.6ng/mL。结论成功建立了前列腺特异性抗原免疫传感器,该方法制备简单,操作便捷,检测下限低。     

新型纳米金修饰铂金电极固载白喉抗原免疫传感器的研究

目的报道制作新型电流型免疫传感器的方法。方法用金纳米颗粒吸附白喉抗原,采用聚乙烯醇缩丁醛（PVB）为辅助固定抗原膜基质将其固定在铂金电极的表面,制成白喉抗原免疫传感器。根据抗原抗体特异性结合形成的免疫复合物使电极敏感膜有效扩散面积减小,电流减少的特性,实现对白喉抗体的定量检测。结果该传感器对白喉抗体检测的线性范围是24～600 ng/mL,线性相关系数r为0.9979,检出下限为5.2 ng/mL（S/N=3）。结论我们成功的构建了白喉抗原免疫传感器,并将其用于生物制品中白喉类毒素的检测,其结果较满意。     

基于溶胶凝胶碳糊固定化酶的新型电流式葡萄糖传感器测定葡萄糖含量的价值分析

目的:研究用溶胶凝胶固定化酶构建电流式葡萄糖传感器及其性能。方法:用硅溶胶凝胶技术修饰电化学铂化处理的碳粉与葡萄糖氧化酶混合制成的碳糊电极,构成新型电流式葡萄糖传感器,并用电流分析法研究其对葡萄糖的响应。结果:该传感器在电位0V(相对于Ag/AgC l电极)对葡萄糖产生还原电流,在一定浓度范围呈现良好线性关系,具有理想选择性和稳定性。结论:该传感器可用于分析包括生物体液在内的各种样品中葡萄糖含量。     

羧基化多壁碳纳米管修饰电极对秦皮中秦皮乙素的灵敏测定

目的研究秦皮乙素在羧基化多壁碳纳米管(c-MWCNTs)修饰电极上的电化学行为及其测定方法。方法利用交流阻抗法(EIS)和循环伏安法(CV)表征修饰电极,用CV研究秦皮乙素在电极上的电化学行为,以差示脉冲伏安(DPV)对其含量进行测定。结果 c-MWCNTs修饰电极对秦皮乙素有明显的电催化作用,在pH4.5磷酸缓冲液(PBS)中,氧化峰电流与秦皮乙素浓度在6.0×10-2～8.0μmol/L范围内呈良好的线性关系,检测限为5.0×10-3μmol/L。结论 c-MWCNTs修饰电极与裸玻碳电极(GCE)相比,提高了秦皮乙素的检测灵敏度,可用于实际样品中秦皮乙素含量的测定。     

基于CdTe量子点和磁性纳米材料构建的夹心型电化学免疫传感器

目的 制备新型夹心型电化学免疫传感器,并研究该传感器的性能. 方法 以甲胎蛋白（AFP）作为检测模型,以磁性微球为一抗固定载体,CdTe量子点作为二抗标记物,通过碳二亚胺交联法制备AFP一抗固化的免疫磁珠和AFP二抗固化的CdTe量子点,通过夹心免疫分析模式和电化学溶出伏安法建立新型高灵敏电化学免疫传感器,并采用红外光谱、紫外光谱及电化学方法对该传感器进行表征. 结果 该电化学免疫传感器对AFP抗原检测的线性范围为1～200 ng/mL,检测限为0.025 ng/mL. 结论 该电化学免疫传感器仪器简单、操作便捷、检测结果稳定,并具有较高的灵敏度.     

免疫传感器载体上SPA法固定抗体的条件探讨

目的 以乙肝病毒表面抗体为研究对象,摸索在免疫传感器载体上用葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein, SPA)固定抗体的最佳条件.方法 用SPA法在载体上固定系列浓度酶标记抗体,绘制抗体浓度-吸光度曲线,寻找SPA与抗体的最佳结合条件.结果 实验表明5 μl浓度为1 mg/ml的SPA与10 μl浓度为300 mIU/ml的抗体固定效果最佳.结论 用SPA法在免疫传感器载体上固定乙肝病毒表面抗体,能使检测达到较好的重现性、稳定性、线性和较宽的检测范围,为生物传感器用于临床免疫检测打下基础,具有实际的应用价值.     

抗人AFP单克隆抗体酶联免疫检测法的建立及其应用

报道用抗人甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(McAb)标记辣根过氧化物酶(HRP),以纯化之免抗人AFP多克隆抗体包被徽孔条板,建立用于检测血清中AFP的酶联免疫法。结果表明:该方法具有特异、敏感(10ng/ml)、重复性好(变异系数<10％)和简便等优点。在204例临床血清标本的检测中,本方法与放射免疫法(RIA)的结果相符合。