铅镉联合染毒对小鼠初级精母细胞的毒性效应

目的研究乙酸铅和氯化镉对小鼠初级精母细胞(GC-2 spd)的联合毒性效应。方法将处于对数生长期的GC-2 spd细胞分别暴露于0(对照),不同浓度(10、20、40、80μmol/L)乙酸铅和(或)不同浓度氯化镉(1、2、4、8、16μmol/L)染毒24 h,采用CCK-8法检测细胞的存活率。采用活性氧(ROS)试剂盒检测20μmol/L乙酸铅及500μmol/L ROS保护剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)分别与不同浓度氯化镉(0、1、2、4、8、16μmol/L)联合染毒24 h后的ROS水平。结果与对照组相比,20μmol/L乙酸铅染毒组GC-2 spd细胞的存活率上升,40、80μmol/L乙酸铅染毒组和2、4、8、16μmol/L氯化镉染毒组的细胞存活率均下降,差异均有统计学意义(P0.05);而10μmol/L乙酸铅染毒组和1μmol/L氯化镉染毒组的细胞存活率均无明显改变。与对照组相比,除10μmol/L乙酸铅+1μmol/L氯化镉染毒组和20μmol/L乙酸铅+1μmol/L氯化镉染毒组GC-2 spd细胞的存活率升高外,其他联合染毒组的细胞存活率均降低,差异均有统计学意义(P0.05);而20μmol/L乙酸铅+2μmol/L氯化镉组GC-2 spd细胞的存活率无明显变化。与相应浓度氯化镉单独染毒组相比,1μmol/L氯化镉+10、20μmol/L乙酸铅染毒组GC-2 spd细胞的存活率均升高,而1μmol/L氯化镉+40、80μmol/L乙酸铅染毒组的细胞存活率均降低,差异均有统计学意义(P0.05);仅2μmol/L氯化镉+20μmol/L乙酸铅染毒组的细胞存活率升高,而2μmol/L氯化镉+40、80μmol/L乙酸铅染毒组的细胞存活率降低,差异有统计学意义(P0.05);16μmol/L氯化镉+10、20、40、80μmol/L乙酸铅染毒组的细胞存活率均无明显变化,细胞基本全部死亡。与对照组相比,各浓度氯化镉染毒组GC-2 spd细胞的ROS水平均上升,差异有统计学意义(P0.05);与相应浓度氯化镉单独染毒组相比,500μmol/L NAC与不同浓度氯化镉联合染毒组、20μmol/L乙酸铅与不同浓度氯化镉联合染毒组GC-2 spd细胞的ROS水平均下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论乙酸铅和氯化镉对GC-2 spd细胞毒性具有交互作用,表现为乙酸铅对低浓度氯化镉的GC-2 spd细胞毒性具有拮抗作用,对高浓度氯化镉的GC-2 spd细胞毒性具有协同作用。     

PCB153对INS-1细胞毒性作用及机制

目的 探讨2,2＇,4,4＇,5,5＇-六氯联苯(PCB153)对体外培养胰岛β细胞株(INS-1)细胞毒性作用及机制.方法 PCB153设3个剂量组(1、3、6μmol/L),二甲基亚砜(DMSO)为溶剂对照组,染毒INS-1细胞24 h后,检测细胞存活率、凋亡、活性氧(ROS)水平、Caspase 3和Caspase 12等凋亡相关基因表达水平.结果 3、6 μmol/L PCB153剂量组细胞存活率分别为(80.9±8.7)％和(42.2±4.3)％,与对照组比较均有下降(P＜0.05);3μmol/L PCB153剂量组ROS为(9.2±0.4)、凋亡率为(30.7±3.4)％,6μmol/L PCB153剂量组ROS为(13.7±1.6)、凋亡率为(40.4±1.3)％,与对照组比较,ROS水平和细胞凋亡率均增加(P＜0.05);与对照组比较,3 μmol/L PCB153剂量组Caspase 3及3、6μmol/L PCB153剂量组Caspase 12基因表达水平均有增加(P＜0.05).结论 PCB153可诱导INS-1细胞凋亡,氧化应激和内质网信号通路可能参与PCB153对INS-1细胞的毒性作用.     

亚砷酸钠对人胚肺成纤维细胞核因子κB信号通路的影响及其作用机制

目的探讨核因子κB(NF-κB)信号通路在亚砷酸钠染毒致人胚肺成纤维细胞(HELF)损伤中的作用机制。方法将HELF细胞分别暴露于0(对照)、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40μmol/L亚砷酸钠溶液染毒18、24、48 h,采用MTT法检测细胞存活率。将HELF细胞分别暴露于0(对照)、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40μmol/L亚砷酸钠溶液染毒24 h,采用ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)炎性因子的浓度。将HELF细胞分为2组,一组分别暴露于0(对照)、2.5、5、10、20μmol/L的亚砷酸钠溶液,另一组同时加入10μmol/L的NF-κB抑制剂PDTC溶液,染毒24 h后,采用Western blot法检测细胞NF-κB相关蛋白p-IKKβ和p-P65的表达水平。结果与对照组比较,2.5、5、10、20、40μmol/L亚砷酸钠染毒HELF细胞18、24、48 h后的细胞存活率均下降,除2.5 mol/L亚砷酸钠染毒48 h外,差异均有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高和染毒时间的延长,各染毒时间HELF细胞的存活率均呈下降趋势(均P0.01)。与对照组比较,1.25、2.5、5、10、20、40μmol/L亚砷酸钠染毒组HELF细胞上清液中TNF-α的浓度均升高,5、10、20、40μmol/L亚砷酸钠染毒组HELF细胞上清液中IL-6的浓度均升高,各浓度亚砷酸钠染毒组HELF细胞上清液中IL-1β的浓度均升高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,HELF细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β的浓度均呈上升趋势。与对照组和相同浓度PDTC干预组比较,各浓度亚砷酸钠染毒组HELF细胞p-IKKβ和p-P65蛋白的表达水平均升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论亚砷酸钠暴露可激活NF-κB通路,促使炎性因子增加,从而造成HELF细胞损伤。     

补肾祛瘀活血汤辅助治疗慢性肾小球肾炎对患者血清炎性因子及细胞免疫功能的影响

目的探讨补肾祛瘀活血汤联合氯沙坦对气虚血瘀型慢性肾小球肾炎患者血清白介素-6(interleulin,IL-6)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)及细胞免疫功能的影响。方法选取绍兴文理学院附属医院于2017年4月至2018年4月收治的气虚血瘀型慢性肾小球肾炎患者74例,根据随机表法分为观察组37例与对照组37例。对照组采用氯沙坦治疗,观察组在对照组基础上结合补肾祛瘀活血汤治疗。两组疗程均为3个月,比较两组治疗前后肾功能指标、24h尿蛋白定量、IL-6、TNF-α和细胞免疫功能变化。结果观察组总有效率94.60%高于对照组70.27%(χ~2=7.559,P0.05)。观察组治疗后Scr(114.24±12.49)μmol/L和BUN(6.73±0.48)mmol/L低于对照组(143.76±18.84)μmol/L和(8.39±0.73)mmol/L(P0.05)。观察组治疗后24h尿蛋白定量(0.83±0.14)g低于对照组(1.32±0.28)g(P0.05)。观察组治疗后血清IL-6(163.29±18.37)ng/L和TNF-α(2.01±0.45)g/L低于对照组(221.34±26.48)pg/ml和(3.09±0.31)g/L(P0.05)。观察组治疗后CD3~+(69.71±2.76)%、CD4~+(38.97±1.65)%和CD4~+/CD8~+(1.74±0.16)高于对照组(63.87±1.83)%、(34.54±2.02)%和(1.45±0.13)(P0.05)。结论补肾祛瘀活血汤联合氯沙坦对气虚血瘀型慢性肾小球肾炎患者疗效显著,且可降低血清IL-6和TNF-α水平,及改善细胞免疫功能。     

乙型肝炎患者多项血清白介素及NO、CRP、TNF-α、D-D水平变化研究

目的 探讨乙型肝炎患者多项血清白介素及及一氧化氮(NO)、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、D-二聚体(D-D)水平变化.方法 选择医院2009年6月-2011年5月就诊的150例乙型肝炎患者作为研究对象并视为观察组,并选择同期于医院健康体检者148例作为对照组,观察乙型肝炎患者的多项血清白介素(IL-2、IL-10、IL-12)及NO、CRP、TNF-α、D-D水平变化.结果 观察组患者的血清IL-2和IL-10分别为(13.78±1.06)μg/L、(22.47±1.96)μg/L,均明显高于对照组(均P＜0.05),而血清IL-12水平低下、为(31.63±3.40)pg/ml;观察组患者血清NO、CRP、TNF-α、D-D分别为(91.86±27.60) μmol/L、(6.25±1.14)mg/L、(35.00±10.00)pg/ml、(0.67±0.20)μg/ml,与对照组比较均明显升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 乙型肝炎患者多项血清白介素及NO、CRP、TNF-α、D-D水平变化明显,与病毒复制、肝细胞凋亡和坏死等存在一定的关联,可以为乙型肝炎的诊断、治疗提供可靠的临床依据.     

阿特拉津对小鼠腹腔巨噬细胞功能影响的体外研究

目的探讨阿特拉津(ATZ)体外染毒对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响,为其免疫毒性评价积累资料。方法分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,经不同浓度(0~1000μmol/L)阿特拉津处理后,MTT比色法测定细胞活力,中性红(NR)法测定其吞噬功能,硝酸还原酶法测定NO含量,ELISA法测定TNF-α释放能力,DCFH-DA荧光标记流式细胞术测定活性氧含量。结果 MTT法测得ATZ对小鼠腹腔巨噬细胞的24、48、72 h染毒的IC50分别为(887.4±1.11)、(360.2±1.13)、(270.6±1.20)μmol/L。NR吸收法所测得各时间点IC50分别为(214.2±1.14)、(120.0±1.10)、(42.60±1.12)μmol/L。24 h及72 h染毒后,低浓度ATZ剂量组NO含量较对照组增加,高浓度剂量组NO含量较对照组出现下降趋势。72 h染毒后,低浓度ATZ剂量组(0.01、0.1μmol/L)TNF-α的含量高于对照组(P<0.05),但在1μmol/L及以上的ATZ染毒组TNF-α含量较对照组降低(P<0.05)。小鼠腹腔巨噬细胞在ATZ低剂量组(0.01、1μmol/L)染毒24 h和72 h时均能促使ROS的产生(P<0.05),但在100μmol/L剂量组里ROS释放量却降低。结论阿特拉津染毒可影响小鼠腹腔巨噬细胞的活性和吞噬功能,并可干扰其细胞因子/活性氧/活性氮的释放。     

百草枯诱导小鼠脑小胶质细胞的炎症反应

目的观察百草枯(PQ)诱导小鼠脑小胶质(BV2)细胞株的炎症反应。方法取处于对数生长期的BV_2细胞,分别暴露于终浓度为0(阴性对照)、20、40、80μmol/L的PQ溶液继续培养6、12、24、48 h。检测细胞活性和炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、IL-1β及活性氧(ROS)]水平。结果与阴性对照组比较,各剂量PQ染毒组BV_2细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和ROS的水平及细胞抑制率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);与染毒6 h比较,染毒12、24、48 h时BV_2细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和ROS的水平及细胞抑制率均较高,差异均有统计学意义(P0.05)。且随着PQ染毒剂量的升高和染毒时间的延长,BV_2细胞的抑制率及TNF-α、IL-1β、IL-6和ROS水平均呈上升趋势。结论PQ能活化小鼠小胶质细胞,使其分泌炎症因子,同时诱导氧化损伤,加重细胞毒性作用。     

生殖道支原体感染与白细胞介素-1 β、2、6及肿瘤坏死因子-α关系的探讨

目的 通过检测不孕妇女外周血及宫颈黏液白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平,探讨IL-1 β、IL-2、IL-6、TNF-α与不孕妇女生殖道支原体感染的相关性.方法 根据生殖道支原体培养结果,将85例患者分为支原体阳性组(44例)与支原体阴性组(41例),采用放射免疫分析法分别检测两组外周血及宫颈黏液IL-1 β、IL-2、IL-6、TNF-α的水平.结果 支原体阳性组与支原体阴性组比较,外周血IL-1β[(0.85±0.23)、(0.21±0.08)μg/L]、IL-6[(123.61±36.84)、(99.35±14.56)μg/L]、TNF-α[(1.45±0.57)、(1.08±0.18)μg/L]比较差异均有统计学意义(P<0.01),IL-2比较差异无统计学意义(P>0.05);宫颈黏液IL-1 β[(0.31±0.19)、(0.19±0.05)μg/L]、TNF-α[(2.28±3.14)、(0.41±0.13)μg/L]比较差异均有统计学意义(P<0.01),IL-2比较差异无统计学意义(P>0.05).宫颈黏液未检测出IL-6.结论 生殖道支原体感染可引起生殖道局部和全身Th1相关因子水平的升高.     

PBDE-47对INS-1细胞氧化应激和凋亡影响

目的 探讨2,2',4,4'-四溴联苯醚(PBDE-47)对大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1毒性作用及机制.方法 设3个PBDE-47剂量组(1、3、6μmol/L)和二甲基亚砜溶剂对照组,染毒INS-1细胞24h后,检测细胞存活率、凋亡率、活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量、Fas和cytochrome C等凋亡相关基因表达水平.结果 与对照组比较,3、6 μmol/L PBDE-47组细胞存活率[(77.1±5.9)％和(27.5±10.6)％]均下降(P＜0.05);3、6μmol/L PBDE-47组ROS水平分别为(154.1 ±13.3)和(220.1±1.1),MDA含量分别为(26.1±1.0)和(32.7±2.5)μmol/L,6 μmol/LPBDE-47组细胞凋亡率为(38.4±4.2)％,与对照组比较均有增加(P＜0.05);与对照组比较,高剂量PBDE-47组Fas及cytochrome C基因表达水平均有增加(P＜0.05).结论 PBDE-47可诱导INS-1细胞凋亡,氧化应激和线粒体信号通路可能参与PBDE-47对INS-1细胞的毒性作用.     

C5aR拮抗剂在油酸诱导的小胶质细胞炎性改变中的作用

目的观察油酸(oleic acid,OA)及C5a受体(C5aR)拮抗剂(PMX53)干预后小胶质细胞的炎性改变,探讨C5a-C5aR在油酸诱导的小胶质细胞炎症中的作用。方法取新生1 d龄小鼠,分离脑组织,原代培养小胶质细胞并进行分离纯化及鉴定。纯化小胶质细胞随机分成5组,分别为正常对照组、OA 100μmol/L处理组、OA 100μmol/L+PMX53 100 nmol/L处理组、OA 200μmol/L处理组、OA 200μmol/L+PMX53 100 nmol/L处理组。应用Western印迹、ELISA法检测不同浓度OA及OA+PMX53干预后小胶质细胞Iba-1、C5aR蛋白及TNF-α表达变化。结果成功培养小胶质细胞,且纯度≥99%。不同浓度OA干预后,Iba-1、C5aR蛋白表达及TNF-α浓度较对照组明显升高(P<0.01);OA+PMX53干预组较OA组Iba-1及TNF-α浓度有所下降(P<0.01);OA+PMx53干预组较OA组C5aR蛋白表达有所下降(OA100 vs.OA100+PMX53,P<0.05,OA200 vs.OA200+PMX53,P<0.01)。200μmol/L OA干预组较100μmol/L OA干预组Iba-1、C5aR蛋白表达及TNF-α浓度高(P<0.01)。结论应用C5aR拮抗剂可以抑制油酸诱导的小胶质细胞的炎症反应,提示C5a-C5aR参与了油酸诱发的炎症反应,推测C5aR拮抗剂在神经系统炎性损伤中具有神经保护作用。     

对氨基水杨酸钠对染锰大鼠基底核氨基酸类神经递质含量的影响

目的 探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对亚急性染锰大鼠基底核γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)和片氨酸(Gly)等氨基酸类神经递质水平的影响.方法 将40只SD大鼠按完全随机法分为染锰组、低剂量(L-)PAS-Na(PAS)治疗组、高剂量(H-)PAS治疗组和正常对照组,每组10只.给染锰、L-PAS和H-PAS治疗组腹腔注射MnCl2·4H2O 15 mg/kg,对照组腹腔注射等容量生理盐水,每日 1次,每周5 d,共4周.分别给L-PAS治疗组、H-PAS治疗组背部皮下注射PAS-Na 100、200mg/kg,其余组背部皮下注射等容量生理盐水,每日1次,连续3周和6周.用高效液相色谱荧光检测法测定大鼠基底核Glu、Gln、Gly及GABA含量.结果 PAS-Na治疗3周时,染锰组Gly[(0.165±0.022)μmol/g]含量比对照组[(0.271±0.074)μmol/g]低(t=4.65,P＜0.05).PAS-Na治疗6周时,染锰组Glu、Gln和Gly含量[依次为(0.942±0.121)、(0.377±0.070)、(0.142±0.048)tμmol/g]均比对照组低[依次为(1.590±0.302)、(0.563±0.040)、(0.247±0.084)μmol/g;t值分别为7.72、5.85、4.30,P值均＜0.05];L-PAS治疗组、H-PAS治疗组Glu、Gln和H-PAS组Gly含量[依次为(1.268±0.124)、(1.465±0.196)、(0.497±0.050)、(0.514±0.103)、(0.219±0.034)μmol/g]均比染锰组高(L-PAS组Glu、Gln与染锰组比较,t值分别为3.89、3.77,P值均＜0.05;H-PAS组Glu、Gln、Gly与染锰组比较,t值分别为6.78、4.70、3.42,P值均＜0.05).结论 锰对大鼠基底核Glu、Gln和Gly的毒作用明显,以对Gly的毒性影响出现较早,脱离锰暴露后其毒性影响仍然继续发展.PAS-Na对锰的Glu、Gln和Gly毒性影响可能有拮抗作用.

Abstract：

Objective To probe the effect of sodium para-aminosalicylate (PAS-Na) on concentration of amino acid neurotransmitters including glutamate ( Glu), glutamine ( Gln ), glycine (Gly) and gamma-aminobutyric acid (GABA) in basal ganglia of subacute manganese (Mn)-exposed rats. Methods Forty Sprague-Dawley male rats were randomly divided into the control, Mn-exposed, low dose PAS-Na (L-PAS) and high dose PAS-Na (H-PAS) groups. Rats in experiment groups received daily intraperitoneally injections of manganese chloride (MnCl2 · 4H2O, 15 mg/kg), while rats in control group received daily intraperitoneally injections of normal saline (NS),all at 5 days/week for 4 weeks. Then the rats in PAS groups followed by a daily subcutaneously dose of PAS-Na ( 100 and 200 mg/kg as the L-PAS and H-PAS groups,respectively) for another 3 and 6 weeks; while the rats in Mn-exposed and control group received NS. The concentrations of Glu,Gln,Gly and GABA in basal ganglia of rat was detected by the high performance liquid chromatography fluorescence detection technique. Results After treating with PAS-Na for 3 weeks, the concentration of Gly in the Mn-exposed rats decreased to (0. 165 ± 0.022)μmol/L ( control = (0. 271 ±0. 074 ) μmol/L, Mn vs control, t = 4. 65, P ＜ 0. 05 ). After the further 6-week therapy with PAS-Na,the concentrations of Glu,Gln,Gly in the Mn-exposed rats were lower than those of the control rats ((0.942 ±0. 121 ), (0.377 ±0.070), (0. 142 ±0.048), ( 1.590 ± 0. 302), (0.563 ±0.040),(0. 247 ± 0. 084) μ mol/L; t = 7.72,5.85,4. 30, P ＜ 0. 05 ); and also lower than in L-PAS and H-PAS groups, whose concentrations were seperately ( 1. 268 ± 0. 124 ) , ( 1. 465 ± 0. 196 ), ( 0. 497 ± 0. 050 ),(0. 514 ±0. 103 ), (0. 219 ±0. 034) μmol/L ( L-PAS Glu and Gln vs Mn ,t = 3. 87,3. 77 ,P ＜0. 05; H-PAS Glu ,Gln and Gly vs Mn ,t = 6. 78,4. 70,3.42, P ＜ 0. 05 ). Conclusion The toxic effect of manganese on Glu,Gln and Gly in basal ganglia of Mn-exposed rats is obvious,especially appears earlier on Gly. The toxic effect still continues to develop when relieved from the exposure. PAS-Na may play an antagonism role in toxic effect of manganese on concentration of Glu, Gln and Gly in basal ganglia of Mn-exposed rats.     

多氯联苯诱导小胶质细胞凋亡及钙离子紊乱

目的探究多氯联苯(polychlorinated biphenyl,PCB)对小胶质细胞的神经毒作用及机制。方法实验分为对照组及PCB118、138、153、180染毒组,染毒剂量分别为0.000、0.015、0.030、0.050、0.100、0.150μmol/L。通过对细胞存活率检测结果进行统计学分析,最终确定后续实验染毒剂量分为低、中、高3个剂量水平,其中除PCB118高剂量组为0.15μmol/L外,低剂量组均为0.015μmol/L,中剂量组为0.05μmol/L,高剂量组为0.1μmol/L。体外培养小鼠小胶质细胞经不同剂量PCB染毒后,CCK-8法检测细胞生长活性;FITC Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量;荧光探针法(Fluo-4 AM)检测细胞内钙离子含量变化。结果 PCB118、138、153、180均能抑制细胞活性,并随染毒剂量增加细胞存活率降低,凋亡率升高。PCB118染毒剂量在0.15μmol/L时毒作用明显增强,存活率降低至(66.56±0.10)%,凋亡率升高至(27.39±1.80)%;PCB138、153在0.1μmol/L时存活率为(66.66±0.10)%、(67.17±0.12)%,凋亡率达到(48.77±2.43)%及(56.42±3.59)%;PCB180染毒剂量为0.015μmol/L时细胞存活率为(92.07±0.38)%,凋亡率为(6.82±0.51)%,显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。LDH释放量与染毒剂量成正比,低剂量PCB118、138、153、180 LDH释放量分别为(523.78±13.58)、(430.37±22.03)、(540.58±13.08)和(411.88±21.92)U/L,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。PCB染毒组细胞内钙离子(Ca~(2+))平均荧光强度明显增强,染毒剂量在0.015μmol/L时PCB118、138、153、180组细胞内Ca~(2+)平均荧光强度分别为(10.14±2.36)、(32.47±1.56)、(16.54±0.97)和(40.46±2.19),显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论多氯联苯可以引起神经毒性,升高LDH,破坏细胞膜完整性,使胞内钙离子增加,导致细胞凋亡。     

维生素E对PM_(2.5)急性染毒致大鼠心血管损伤的保护作用

目的探讨维生素E(VE)对PM_(2.5)急性染毒致大鼠心血管损伤的干预作用。方法将36只雄性SD大鼠随机分为玉米油对照组(溶剂对照组)、VE对照组、PM_(2.5)染毒组(8.0 mg/kg,以体重计,下同)、PM_(2.5)+VE低、中、高给药组,剂量分别为15.0、30.0、60.0 mg/kg。VE给药组均经VE灌胃28 d后,气管滴注PM_(2.5)悬浊液染毒,隔天1次,共3次。末次染毒24 h后,腹主动脉取血,分析测定血清中白细胞介素1-β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(HS-CRP);谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、血清一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)和心肌缝隙连接蛋白(Cx43)的含量。结果溶剂对照组IL-1β、IL-6、TNF-α、HS-CRP、GSH、GSH-Px、MDA、T-SOD、NO、ET-1及Cx43分别为(68.73±6.21)μg/L、(15.86±0.45)μg/L、(41.12±7.66)μg/L、(1.29±0.26)μg/L、(15.30±2.52)μmol/L、(492.29±28.28)、(10.19±0.74)μmol/L、(272.98±8.59)U/m L,(3.22±0.22)μmol/L、(0.28±0.021)μg/L、(0.42±0.04)μg/L。PM_(2.5)染毒组IL-1β[(1 155.98±100.28)μg/L]、IL-6[(24.94±2.06)μg/L]、TNF-α[(821.45±14.26)μg/L]、HSCRP[(3.10±0.28)μg/L]、MDA[(15.88±1.41)μmol/L]和ET-1[(0.38±0.03)μg/L]的释放量升高,GSH[(4.62±0.37)μmol/L]、GSH-Px[(289.28±30.65)]、NO[(0.97±0.074)μmol/L]、Cx43[(0.26±0.10)μg/L和TSOD[(239.26±4.97)U/m L]含量降低,差异有统计学意义(P0.05);与PM_(2.5)染毒组相比,VE给药组的各项指标均有一定缓解作用,差异均有统计学意义(P0.05),且存在一定的剂量反应关系。结论急性PM_(2.5)染毒可引起大鼠心血管损伤,导致炎性因子、氧化应激指标、血管内皮功能和心肌缝隙链接蛋白的变化,而VE喂饲对PM_(2.5)引起的大鼠急性肺部损伤具有一定的保护作用。     

慢性应激下脑内高糖诱导小鼠海马小胶质细胞M1型极化

目的 观察慢性应激下脑内葡萄糖含量对小鼠海马小胶质细胞极化类型的影响，探讨慢性应激致神经炎症的可能机制。方法 采用慢性不可预见温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)建立慢性应激小鼠模型，并随机分为对照组、应激组。采用葡萄糖检测试剂盒检测小鼠海马及血浆中葡萄糖含量，RT-PCR和ELISA技术检测海马肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)含量。采用免疫荧光技术检测海马小胶质细胞极化类型。细胞水平采用20μmol/L糖皮质激素（glucocorticoid,GC）和20 mmol/L葡萄糖干预小鼠小胶质细胞系BV2模拟慢性应激及高糖后检测炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α的含量。结果 应激组小鼠海马及血浆中葡萄糖含量均升高；应激组小鼠海马区M1型小胶质细胞标志物CD68表达增加，且TNF-α、IL-1β、IL-6含量均升高；20μmol/L的GC、20mmol/L的葡萄糖干预BV2细胞后IL-6、IL-1β、TNF-α水平均升高，且GC复合葡萄糖与GC组、葡萄糖组比较，IL-6...     

慢加急性乙型肝炎肝功能衰竭患者肝功能及血炎性因子与脂氧素A4变化的相关性研究

目的探讨慢加急性乙型肝炎肝功能衰竭患者(ACHBLF)肝功能、血炎性因子与脂氧素A4变化及相关性,分析其在ACHBLF发病中可能所起的作用,为ACHBLF的临床诊治提供参考。方法选取2014年1月-2015年10月在医院诊治的ACHBLF(ACHBLF组)与慢性乙型肝炎(CHB组)患者各50例,检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、脂氧素A4(LXA4)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)。结果 ACHBLF组ALT、AST、TBil、IL-6、TNF-α水平为(241.73±83.65)U/L、(200.51±75.13)U/L、(323.64±84.52)μmol/L、(50.77±8.32)pg/ml、(17.60±1.50)pg/ml,均高于CHB组,LXA4为(8.95±2.31)μg/L低于CHB组,差异有统计学意义(P0.05);ACHBLF组重度患者ALT、AST、TBil、IL-6、TNF-α水平为(287.93±85.88)U/L、(246.97±80.51)U/L、(385.34±83.43)μmol/L、(67.84±6.53)pg/ml、(24.55±2.22)pg/ml,均高于轻中度患者,LXA4为(7.12±2.03)μg/L低于轻中度患者,差异有统计学意义(P0.05);ACHBLF组患者ALT、AST、TBil、IL-6、TNF-α水平均与LXA4水平呈现负相关(P0.05)。结论 ACHBLF患者炎性因子可能参与了病情的发生及发展,肝功能、炎性因子与LXA4水平呈现负相关,检测以上指标变化可有助于判断病情严重程度。     

氧化应激在全氟辛烷磺酰基化合物诱导人胚胎肝细胞凋亡中的作用

目的探讨全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)致人胚胎肝(L-02)细胞凋亡的作用及其机制。方法将处于对数生长期的L-02细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、50、100、150、200μmol/L的PFOS溶液培养24 h。采用MTT法检测细胞活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,并测定细胞线粒体内活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平及线粒体膜电位,采用q RT-PCR法检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-9、bax、bcl-2 m RNA的表达水平。结果与对照组比较,150、200μmol/L PFOS染毒L-02细胞的存活率均降低,而100、150、200μmol/L PFOS染毒组L-02细胞的凋亡率均增加,差异均有统计学意义(P0.05);且随着PFOS染毒浓度的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势,而凋亡率呈上升趋势。与对照组比较,各浓度PFOS染毒组L-02细胞内ROS和MDA水平均增加,而各浓度PFOS染毒组L-02细胞内SOD水平和100、150、200μmol/L PFOS染毒组L-02细胞内GSH水平和线粒体膜电位均较低,差异均有统计学意义(P0.05);且随着PFOS染毒浓度的升高,L-02细胞内ROS和MDA水平均呈上升趋势,而SOD、GSH水平和线粒体膜电位均呈下降趋势。与对照组比较,各浓度PFOS染毒组L-02细胞中caspase-3、caspase-9、Bax m RNA的表达水平均较高,而bcl-2、bcl-2/bax值均较低,除50μmol/L PFOS染毒组caspase-9外,差异均有统计学意义(P0.05﹚。结论在本实验剂量下,PFOS暴露可引起L-02细胞凋亡,其机制与PFOS诱导的氧化损伤和线粒体凋亡途径有关。     

对氨基水杨酸钠干预锰致大鼠海马神经元损伤的体外研究

目的 探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)体外染锰致大鼠原代海马神经元损伤的干预作用.方法 培养至第8天的海马神经元随机分为对照组、染锰组、低、中和高剂量PAS-Na干预组(L-PAS、M-PAS、H-PAS组).对照组给予培养液培养48 h;染锰组神经元暴露于MnCl2·4H2O 50/μmol/L培养液培养24 h后...     

tBHQ对无机砷致人皮肤角质细胞损伤保护作用

目的探讨叔丁基对苯二酚(tBHQ)对亚砷酸钠(NaAsO2)致人皮肤角质细胞系HaCaT细胞损伤的保护作用。方法用Alamar Blue还原法检测细胞活力,用荧光探针2’,7’-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)的生成,用硫代巴比妥酸(TBA)法检测细胞内过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)的生成。结果NaAsO2(25、50μmol/L)单独处理后,各组细胞活力明显下降(P<0.01),分别为82%和59%;细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组细胞活力分别恢复至(101.44±1.63)%和(92.06±9.95)%,tBHQ 50μmol/L组细胞活力分别恢复至(98.88±2.03)%和(91.12±7.87)%;NaAsO2(25、50μmol/L)单独处理后,各组细胞内ROS水平明显上升(P<0.01),分别为对照组的1.64和3.86倍;细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组ROS水平分别下降为对照组的0.95和1.87倍,tBHQ 50μmol/L组ROS水平分别下降为对照组的0.79和1.69倍;NaAsO2(25、50μmol/L)单独处理后,细胞内MDA含量明显上升(P<0.01),分别为2.28、2.96 nmol/(mgμprot);细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组MDA含量分别下降为2.05、2.43 nmol/(mgμprot),tBHQ 50μmol/L组MDA含量分别下降为2.10、2.60 nmol/(mg.prot)。结论 tBHQ对无机砷致人皮肤角质细胞损伤具有保护作用,且具有一定的剂量-反应关系。     

叔丁基过氧化氢体外模拟噪声引起的耳蜗毛细胞氧化损伤模型的建立

目的 研究有机氧化剂叔丁基过氧化氢(t-BHP)体外模拟噪声对耳蜗毛细胞的氧化损伤.方法 用t-BHP染毒,设置从30～4000 μmol/L8个染毒浓度对耳蜗毛细胞(HEI-OC1)细胞染毒12h,绘制100 μmol/L浓度组染毒时间(1～96 h)与耳蜗毛细胞存活率曲线;采用台盼蓝染色法检测细胞存活率,噻唑蓝(MTT)试验检测细胞增殖能力的改变,2’-7’-二氯荧光黄双乙酯(DCFH-DA)探针法检测胞内活性氧(ROS)水平.结果 不同浓度的t-BHP对耳蜗毛细胞染毒12h后,100μmol/L以上浓度组细胞存活率开始出现有统计学意义的下降,其中200～2000μmol/L浓度组细胞存活率呈直线下降.100 μmol/L浓度组t-BHP染毒时间-细胞存活率曲线较为平缓.MTT试验提示,30μmol/L的t-BHP染毒可以促进耳蜗毛细胞增殖,200μmol/L以上各浓度组则抑制细胞增殖.DCFH-DA探针法显示,无染毒细胞镜下无荧光(-),阳性对照为强荧光(+),30和50 μmol/L浓度组则有弱荧光(-+),100μmol/L染毒组为强明亮荧光(++),200～1000μmol/L各组荧光均较强,但随着存活率的迅速降低视野下细胞稀疏.结论 100 μmol/L的t-BHP对HEI-OC1细胞染毒12h可以在不影响细胞外形、增殖能力的前提下提高耳蜗毛细胞内ROS水平,模拟噪声引起的氧化应激.     

血液透析滤过串联血液灌流对维持性血液透析患者体内微炎症和营养不良状态的影响

目的探讨血液透析滤过(hemodiafiltration,HDF)联合血液灌流(hemoperfusion,HP)对维持性血液透析(maintaining hemodialysis,MHD)患者微炎症和营养不良状态的影响。方法选择2014年6月—2015年6月收治的MHD患者60例作为研究对象,随机分为血液透析(hemodialysis,HD)组和HDF+HP组各30例。HD组给予常规HD治疗,4 h/次,3次/周;HDF+HP组在HD组的基础上给予HDF串联HP治疗,1次/2周;两组均连续治疗24周。比较两组治疗前后IL-6、TNF-α、hs-CRP、Hcy水平,同时观察患者Hb、TP、Alb、TRF的变化情况。计量资料组间比较采用t检验,组内比较采用配对t检验,P0.05为差异有统计学意义。结果 HDF+HP组治疗后hs-CRP、IL-6、TNF-α、Hcy分别为(5.75±2.11)、(51.10±7.65)、(81.21±8.41)ng/L、(12.31±2.21)μmol/L,均明显低于治疗前的(14.11±2.20)、(102.22±20.32)、(197.83±24.47)ng/L、(39.96±9.43)μmol/L,差异均有统计学意义(均P0.05)。HDF+HP组治疗后Hb、TP、Alb、TRF分别为(105.65±22.21)、(63.10±22.65)、(39.21±6.41)g/L、(197.31±22.21)μg/L,均明显高于治疗前的(92.21±12.10)、(51.26±11.32)、(31.84±5.47)g/L、(162.96±15.42)μg/L,差异均有统计学意义(均P0.05)。治疗后,HDF+HP组hs-CRP、IL-6、TNF-α、Hcy、Hb、TP、Alb、TRF与HD组[(13.32±1.20)、(96.68±25.65)、(101.32±24.24)ng/L、(38.23±8.34)μmol/L、(93.22±13.10)、(52.32±12.32)、(33.87±4.54)g/L、(163.23±15.33)μg/L]比较差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 HDF联合HP治疗MHD可明显改善患者体内微炎症及营养不良状态。