RNF187在前列腺癌细胞中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨环指蛋白187(RNF187)在前列腺癌细胞中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法 通过癌症基因组图谱（TCGA）和高通量基因表达（GEO）数据库分析前列腺癌组织和正常组织间RNF187的表达差异，体外培养正常前列腺上皮细胞系RWPE-1和人前列腺癌细胞系LNCaP、C4-2、DU145、PC-3，用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定RWPE-1、LNCaP、C4-2、DU145、PC-3中RNF187 mRNA表达水平，蛋白免疫印迹法测定RNF187蛋白表达水平。转染RNF187-siRNA1、RNF187-siRNA2至DU145、PC-3,RT-qPCR测定RNF187 mRNA相对表达量、CCK-8法测定细胞活性，5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）法测定细胞增殖能力，Transwell小室测定细胞的迁移和侵袭能力，蛋白免疫印迹法检测RNF187和上皮-间充质转化（EMT）标志蛋白及基质金属蛋白酶（MMP-9）的蛋白表达水平。结果 TCGA和GEO数据集中，前列腺癌组织中RNF187表达量均高于正常前列腺组织，Gleason评分及分期较高者的表达量...     

miR-103a-3p对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响

摘要：目的〓探讨miR-103a-3p在人肺癌组织中的表达及对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响。 方法：收集南通市肿瘤医院52例肺癌患者手术组织标本,qRT-PCR检测肺癌组织及癌旁组织中miR-103a-3p的表达;采用Lipofecta mineTM 3000 将miR-103a-3p mimic、mimic NC、miR-103a-3p inhibitor及inhibitor NC转染至A549细胞中,qRT-PCR检测miR-103a-3p的转染效率;CCK8实验检测其细胞增殖能力;流式细胞术检测其细胞凋亡能力;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力。 结果：miR-103a-3p在肺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织（p＜0.01）;qRT-PCR结果显示,转染miR-103a-3p mimic组细胞中miR-103a-3p的表达水平明显高于mimic NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力受到抑制;而转染miR-103a-3p inhibitor 组细胞中miR-103a-3p的表达水平低于inhibitor NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力增强;但细胞凋亡在4组中变化均不明显。 结论：miR-103a-3p在肺癌组织中低表达,miR-103a-3p能够抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭。     

miR-103a-3p对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨mi R-103a-3p在人肺癌组织中的表达及对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集南通市肿瘤医院52例肺癌患者手术组织标本,q RT-PCR检测肺癌组织及癌旁组织中mi R-103a-3p的表达;采用Lipofecta mineTM3000将mi R-103a-3p mimic、mimic NC、mi R-103a-3p inhibitor及inhibitor NC转染至A549细胞中,q RT-PCR检测mi R-103a-3p的转染效率;CCK8实验检测其细胞增殖能力;流式细胞术检测其细胞凋亡能力;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力。结果 mi R-103a-3p在肺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P0.01);q RT-PCR结果显示,转染mi R-103a-3p mimic组细胞中mi R-103a-3p的表达水平明显高于mimic NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力受到抑制;而转染mi R-103a-3p inhibitor组细胞中mi R-103a-3p的表达水平低于inhibitor NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力增强;但细胞凋亡在4组中变化均不明显。结论 mi R-103a-3p在肺癌组织中低表达,mi R-103a-3p能够抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭。     

过表达miR-132-3p对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的作用

目的探讨过表达miR-132-3p对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡、侵袭以及迁移的影响。方法通过RT-PCR检测人子宫内膜上皮细胞HEEC和子宫内膜癌细胞Ishikawa中miR-132-3p的表达水平。用Lipofiectamine~(TM)2000将miR-132-3p mimics及NC分别转染子宫内膜癌Ishikawa细胞,分为miR-132-3p mimics组、NC组以及对照组,对照组不做处理。通过CCK8法检测24 h、48 h、72 h后,三组Ishikawa细胞的增殖情况。流式细胞仪检测转染后三组Ishikawa细胞的凋亡情况。Transwell小室检测三组Ishikawa细胞侵袭、迁移情况。Western-blot检测三组Ishikawa细胞B淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、BCL2-Associated X(Bax)、细胞增殖抗原标记物Ki-67(Ki-67)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达水平。结果与人子宫内膜上皮细胞HEEC相比,子宫内膜癌细胞Ishikawa中miR-132-3p的表达水平显著下降。CCK8结果显示:与对照组和NC组比,miR-132-3p mimics组子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖受到抑制,Ki-67蛋白表达水平显著下降(P0.05)。流式检测结果显示:与对照组和NC组比,miR-132-3p mimics组子宫内膜癌细胞Ishikawa的凋亡率显著升高,Bax蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著下降(P0.05)。Transwell结果显示:与对照组和NC组比,miR-132-3p mimics组子宫内膜癌细胞Ishikawa侵袭及迁移能力受到抑制,MMP-2蛋白表达水平显著下降(P0.05)。结论 miR-132-3p在子宫内膜癌细胞Ishikawa中低表达,过表达miR-132-3p能够抑制细胞增殖、侵袭及迁移,并促进细胞凋亡。     

Exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p在前列腺癌患者尿液中的表达及意义

目的 探究exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p在前列腺癌患者尿液中的表达及在前列腺癌诊断和预后评估中的价值.方法 回顾性选择2014年5月至2017年3月中国人民解放军联勤保障部队第九○四医院收治的45例前列腺癌患者、31例前列腺增生患者及26例健康对照者作为研究对象.收集3组受试者尿液,检测...     

过表达miR-338-3p对炎症信号通路的影响

目的研究过表达miR-338-3p在内皮细胞系EOMA中对炎症信号通路的影响。方法将EOMA细胞分为四组即对照组、miR-338-3p过表达组、TNF-α处理组、miR-338-3p与TNF-α共处理组。用Real time PCR检测miR-338-3p及黏附分子VCAM-1和ICAM-1mRNA表达水平,Western blot分析ERK/p38 MAPK信号通路活性。结果与对照组比较,miR-338-3p过表达组的黏附分子VCAM-1及ICAM-1mRNA表达水平和ERK/p38信号通路活性明显降低,而TNF-α处理组的黏附分子VCAM-1及ICAM-1mRNA表达水平和ERK/p38信号通路活性明显升高;miR-338-3p与TNF-α共处理组与TNF-α处理组比较,黏附分子VCAM-1及ICAM-1mRNA表达水平和ERK/p38信号通路活性明显降低;miR-338-3p与TNF-α共处理组与miR-338-3p过表达组比较,黏附分子表达水平及ERK/p38信号通路活性不再升高。结论过表达miR-338-3p抑制ERK/p38信号通路活性,降低黏附分子VCAM-1和ICAM-1mRNA表达水平;过表达miR-338-3p能够逆转TNF-α对ERK/p38通路的激活和TNF-α对黏附分子VCAM-1及ICAM-1mRNA表达的促进作用。     

miR-135b-5p调控TIMP3的表达对鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨miR-135b-5p对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、转移的影响及其可能的机制。方法使用Lipofectamine-2000将miR-135b-5p siRNA转染至SUNE-1细胞,并将NC siRNA转染至SUNE-1细胞中作为对照组。实时定量PCR检测NP69、CNE-1、SUNE-1、C666-1细胞系及鼻咽癌组织中miR-135b-5p及TIMP3的表达水平。双荧光素酶报告基因检测miR-135b-5p及TIMP3的调控关系,免疫蛋白印迹实验检测TIMP3蛋白的表达含量,CCK-8实验检验SUNE-1细胞的增殖能力,Transwell实验检验SUNE-1细胞的迁移及侵袭能力。miR-135b-5p的表达与鼻咽癌(NPC)患者的临床病理学参数之间的关联。结果 miR-135b-5p在CNE-1、SUNE-1、C666-1细胞系及鼻咽癌组织中表达含量均上升,并且在SUNE-1细胞系中其的表达水平最低;双荧光素酶报告基因结果显示:抑制miR-135b-5p表达可显著增高SUNE-1细胞中TIMP3的荧光素酶活性;抑制miR-135b-5p表达后,TIMP3蛋白的表达相应上调,同时削弱了SUNE-1细胞增殖、迁移、侵袭能力。同时收集整理NPC患者相关临床资料进行对比分析,结果发现miR-135b-5p的表达与NPC的病理分期相关以及淋巴结转移情况呈正相关。结论抑制miR-135b-5p的表达可抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并靶向上调TIMP3的表达。     

miR-144-3p对K562细胞增殖、周期及凋亡的影响

目的：研究mi R-144-3p对慢性髓性白血病急变期K562细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法：体外培养K562细胞，通过转染试剂分别将模拟物阴性对照、mi R-144-3p模拟物、抑制物阴性对照、mi R-144-3p抑制物转染入K562细胞。将细胞分为空白对照、模拟物阴性对照、mi R-144-3p模拟物、抑制物阴性对照和mi R-144-3p抑制物共5组。采用CCK-8法检测细胞增殖，使用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果：与空白对照、模拟物阴性对照组比较，mi R-144-3p模拟物组细胞增殖率明显减低（P<0.05）,S期细胞明显增加（P<0.05）,G1期细胞明显减少（P<0.05），细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；与空白对照、抑制物阴性对照组比较，mi R-144-3p抑制物组细胞增殖率明显升高（P<0.05）,S期细胞明显减少（P<0.05）,G1期细胞明显增加（P<0.05），细胞凋亡率明显下降（P<0.05）。结论：mi R-144-3p能够抑制K562细胞增殖、促进凋亡，影响细胞周期，将K562细胞阻滞在S期...     

下调胰岛素样生长因子抑制miR-767-5p的表达对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间充质转化的影响

目的 研究抑制miR-767-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化（EMT）的影响。方法 体外培养乳腺癌细胞，将miR-767-5p inhibitor和inhibitor-NC转染到乳腺癌细胞中。细胞分为3组：空白对照组（Control组），miR-767-5p inhibitor组和inhibitor-NC组，采用CCK-8法、Transwell法、划痕实验检测miR-767-5p抑制剂对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。Western blot检测迁移相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-767-5p和胰岛素样生长因子-1(IGF1)的靶向结合作用。RT-qPCR和Western blot实验检测IGF1 mRNA和蛋白的表达水平。采用Western blot检测EMT相关蛋白的表达水平。结果 CCK-8实验结果显示，与Control组和inhibitorNC组相比，miR-767-5p inhibitor组显著抑制MCF-7细胞的增殖（P <0.05）。Transwell实验结果表明，与Contr...     

过表达miR-129-5p对胶质瘤细胞增殖、迁移 及CDK6、N-cadherin表达的影响

目的:研究过表达miR-129-5对胶质瘤细胞增殖、迁移及细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达的影响。方法:培养胶质瘤U87细胞并分为转染阴性对照mimic的对照组、转染miR-129-5p mimic的miR-129-5p组,采用MTS实验检测增殖活力、划痕实验检测迁移活力、Western blot检测CDK6及N-cadherin的表达量,验证miR-129-5p对CDK6、N-cadherin的靶向调控作用。结果:miR-129-5p组的OD490值(0.78±0.15),明显低于对照组的(1.21±0.34)(P0.05);相对愈合面积(32.39±8.79)%,明显低于对照组的(73.39±17.85)%(P0.05);CDK6的表达量(0.28±0.09)及N-cadherin的表达量(0.34±0.08),明显低于对照组的(0.88±0.18)及(0.67±0.15)(P0.05);生物信息学分析及双荧光素酶报告表明miR-129-5p靶向调控CDK6、N-cadherin基因mRNA 3’UTR。结论:过表达miR-129-5p能够抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移,其机制可能与靶向调控CDK6、N-cadherin有关。     

血清miR-148a-3p和miR-485-5p表达对前列腺癌患者后复发转移的预测价值

目的 观察前列腺癌患者术前血清miR-148a-3p和miR-485-5p表达,探讨其对前列腺癌术后复发转移的预测价值.方法 253例前列腺癌患者均行手术治疗,术后常规放、化疗及内分泌治疗.随访至2020年6月30日,99例发生复发转移者为复发转移组,154例未复发转移者为未复发转移组.2组均于术前采用实时荧光定量PC...     

lncRNA PCAT19靶向miR-769-5p促进口腔鳞癌HSC3细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探讨lncRNA PCAT19对口腔鳞癌HSC3细胞增殖、迁移和侵袭的影响及潜在的分子机制。方法 收集45例口腔鳞癌患者癌组织和癌旁组织，qRT-PCR法检测组织中PCAT19和miR-769-5p表达。体外培养HSC3细胞，转染PCAT19小干扰RNA或miR-769-5p模拟物、或共转染PCAT19小干扰RNA与miR-769-5p抑制剂后，CCK-8法和单克隆实验检测细胞增殖；划痕实验检测细胞迁移；Transwell实验检测细胞侵袭；蛋白质印迹法检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验验证PCAT19和miR-769-5p的调控关系。结果 口腔鳞癌组织中PCAT19表达高于癌旁组织，miR-769-5p表达低于癌旁组织（P <0.05）。干扰PCAT19或过表达miR-769-5p后，HSC3细胞OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数、N-cadherin蛋白表达降低，E-cadherin蛋白表达升高（P <0.05）。PCAT19靶向负调控miR-769-5p。下调miR-769-5p逆转了干扰PCAT19对HSC3...     

miR-24-3p靶向CHD5影响甲状腺癌细胞迁移能力、侵袭能力和放射敏感性

目的 探讨miR-24-3p调控染色体质域解螺旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)表达对甲状腺癌细胞迁移能力、侵袭能力和放射敏感性的影响。方法 选取2018年9月—2020年9月杭州市萧山区第一人民医院首次确诊为甲状腺癌的患者125例,收集其癌组织和癌旁组织（距肿瘤边缘>4 cm）和相关临床病理资料。选取人正常甲状腺细胞系Nthy-ori 3-1和人甲状腺癌细胞系KTC1、SW579、TPC-1。检测癌组织、癌旁组织和4种细胞中miR-24-3p、CHD5蛋白的表达。对SW579细胞分别转染miR-24-3p抑制物anti-miR-24-3p(anti-miR-24-3p组)和阴性对照物anti-miR-NC(anti-miR-NC组)、miR-24-3p模拟物miR-24-3p mimics(miR-24-3p mimics组)和阴性对照物miR-NC(miR-NC组)、共转染anti-miR-24-3p和si-NC(anti-miR-24-3p+si-NC组)、共转染anti-miR-24-3p和si-CHD5(anti-miR-24-3p+si-CHD5组)。分析各组细胞的迁移...     

血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p联合检测对妊娠期糖尿病的诊断价值

目的探讨血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p对妊娠期糖尿病的诊断价值。方法选择2018年5—6月该院收治的妊娠期糖尿病患者10例和妊娠24~28周的健康孕妇10例,采用转录组测序技术(RNA-seq)分析血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p的相对表达水平。选择2018年5月至2020年5月该院收治的妊娠期糖尿病患者100例为观察组,妊娠24~28周的健康孕妇100例为对照组。通过实时荧光定量PCR检测2组受试者血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p的相对表达水平。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p单独或联合检测对妊娠期糖尿病的诊断价值。结果RNA-seq检测结果显示,10例妊娠期糖尿病患者血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p的相对表达水平较10例健康孕妇高8倍以上。观察组血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p的相对表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p单独检测对妊娠期糖尿病的诊断灵敏度分别为95%、97%、94%,特异度分别为95%、96%、95%,血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p联合检测对妊娠期糖尿病的诊断灵敏度为98%,特异度为93%,准确性为96%。结论血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p可作为妊娠期糖尿病的潜在诊断标志物。     

miR-505-3p 对胃癌细胞增殖、克隆形成及迁移、侵袭的影响及机制研究

目的 检测胃癌组织及细胞中miR-505-3p 表达,并探究其对胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响及潜在分子机制。方法 利用实时荧光定量PCR 实验（qRT-PCR）检测胃癌组织、癌旁正常组织及胃癌细胞和人正常胃黏膜细胞中miR-505-3p 相对表达;构建miR-505-3p 过表达、c-MYC 过表达和敲低表达细胞系,通过CCK-8 法,克隆斑点形成实验、Transwell 侵袭/ 迁移实验检测miR-505-3p 和c-MYC 对胃癌细胞增殖、克隆形成及迁移、侵袭的影响;裸鼠皮下成瘤实验验证miR-505-3p 对裸鼠肿瘤生长的影响;双荧光素报告实验验证miR-505-3p 和c-MYC 的靶向关系,并探究其两者间的表达调控作用;Western blot 检测miR-505-3p 和c-MYC 对Wnt/β-catenin 通路关键蛋白表达的影响。结果 临床胃癌组织中miR-505-3p 表达水平较正常癌旁组织显著下调（0.92±0.37 vs 1.74±0.59）,差异有统计学意义（t=3.723,P ＜ 0.01）。胃癌细胞系MGC803（1.12±0.35）,AZ521（2.31±0.24）和HGC-27（2.28±0.43）中miR-505-3p 相对表达较人正常胃黏膜细胞系GES1（4.62±0.79）明显降低,差异有统计学意义（F=26.109,P ＜ 0.001）。miR-505-3p 过表达组细胞增殖（0.92±0.27）、克隆形成（51.67±21.75）、迁移（43.25±15.47 ）、侵袭（38.53±14.76）能力较NC组（1.85±0.34,128.36±36.42,100.08±2.12,100.12±1.94）明显降低,差异均有统计学意义（t=3.131 ～ 7.166,均P ＜ 0.05）;miR-505-3p 过表达抑制了裸鼠生长。c-MYC 是miR-505-3p 的靶基因,miR-505-3p 靶向负调控c-MYC。c-MYC 过表达组细胞增殖（2.72±0.68）、迁移（147.15±20.36）、侵袭（145.46±22.73）能力较NC 组（1.85±0.34,100.08±2.12,100.12±1.94）明显增高,差异均有统计学意义（t=2.455 ～ 4.456,均P ＜ 0.05）;c-MYC 过表达可逆转miR-505-3p 对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。miR-505-3p 过表达组Wnt（0.46±0.07 ）,β-catenin（0.50±0.05）蛋白相对表达水平明显低于NC 组（1.01±0.02,1.02±0.02）,差异均有统计学意义（t=8.139,7.342,均P ＜ 0.001）;过表达c-MYC 能够逆转miR-505-3p 对Wnt 和β-catenin 蛋白表达的抑制作用。结论 胃癌中miR-505-3p 显著低表达,其可通过靶向调控c-MYC 表达介导Wnt/β-catenin 信号通路激活进而发挥作用参与胃癌的发生发展过程。     

miR-219-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡与侵袭的 影响及其机制

目的:探索miR-219-5p对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,并探讨其机制。方法:采用RT-PCR检测miR-219-5p在NSCLC细胞系H1299,A549,H1975及正常肺上皮细胞系BEAS-2B中的表达。将NSCLC细胞系H1299分成对照组和miR-219-5p组,用Lipofectamine 2000分别转染miR-219-5p scramble和miR-219-5p mimics,采用MTT法、流式细胞术及Transwell实验分别检测比较两组细胞增殖、凋亡及侵袭能力,Western印迹测定表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及裂解型多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP ribose polymerase,PARP)在两组细胞中的表达。结果:miR-219-5p在H1299,A549和H1975细胞系中的表达量均低于BEAS-2B,差异有统计学意义(P0.05);MTT实验显示在48,72,96及120 h,miR-219-5p组OD490 nm值显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);miR-219-5p组细胞凋亡率显著高于对照组(13.33%±1.20%vs 3.43%±0.12%),差异有统计学意义(P0.01);miR-219-5p组侵袭细胞数显著少于对照组(67.5±9.9 vs 189.5±16.7),差异有统计学意义(P0.05);miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量为0.35±0.07,miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量显著低于对照组(1.0),差异有统计学意义(P0.01);miR-219-5p组裂解型PARP蛋白相对表达量显著高于对照组(2.74±0.17 vs 1.0),差异有统计学意义(P0.01)。结论:miR-219-5p可抑制NSCLC的细胞增殖和侵袭并促进其凋亡,其机制可能与下调EGFR及上调PARP的表达有关。