表皮干细胞的研究进展

干细胞是一类具有高度增殖潜能和无限自我更新能力的细胞亚群。角质形成细胞干细胞主要存在于毛囊隆突部，也见于毛囊间表皮网嵴的底部，其特征为慢周期及高度的增殖潜能，它能表达某些整合素亚单位，并可与细胞外基质发生快速粘连，据此特性可将其分离纯化。角质形成细胞干细胞不仅在表皮及其附属器的组织发生学、银屑病的发病机理中具有重要作用，也是肿瘤发生及基因治疗的重要靶细胞。     

表皮干细胞与表皮肿瘤

表皮干细胞具有无限增殖及多向分化的特性，其子代细胞可以形成角质形成细胞、毛囊、皮脂腺的分化细胞。肿瘤一般起源于单个发生癌性突变的细胞，表皮干细胞很可能是各种类型表皮肿瘤发生的主要靶细胞，分化细胞则能通过影响肿瘤干细胞的克隆扩增，对肿瘤的发生起重要作用。     

毛囊间充质干细胞的研究进展

 毛囊间充质干细胞（HFMSCs）是一类具有自我再生能力、高度增殖潜能、可多向分化且来源丰富的慢周期标记滞留细胞,可促进表皮、毛囊和皮脂腺再生。得益于其来源丰富、易获得、可于体外扩增、无需基因操作、不会形成肿瘤和无伦理限制等特点,毛囊间充质干细胞在再生医学中具有重要优势。Wnt、Shh、Notch和BMP等信号通路之间的协同和拮抗作用在干细胞稳态调节、表皮发育和毛囊再生过程中发挥至关重要的作用,这些途径的失调可能导致毛发脱落或者肿瘤的发生。本文综述毛囊间充质干细胞的分类及其特异性生物标记物、毛囊间充质干细胞的活化以及影响毛发再生的生物分子途径,为毛发疾病的治疗提供新的线索和靶点。     

毛囊干细胞研究进展

干细胞是一类具有高度增殖潜能和终生无限的自我更新能力的细胞亚群,毛囊干细胞主要位于毛囊隆突部位,能表达β1整合素,角蛋白(Keratin)K15、K19,转录因子p63等特异性表面标记,据此可以对其进行鉴定和分离。研究毛囊干细胞如何增殖与分化及其调控机制,不但有实现以毛囊干细胞作为种子细胞构建组织工程化皮肤及毛囊来分别治疗皮肤缺损和脱发的重大意义,而且也为治疗某些棘手的皮肤、毛囊疾病带来了希望。     

细胞的胶原黏附:一种简单且保持细胞高生长能力的筛选人类基底层角质形成细胞的方法

毛囊间表皮稳态的维持有赖于连续不断的细胞更新过程.在生理状态下,机体通过严格的调控机制来维持基底层角质形成细胞增殖与最外表的角质细胞脱落之间的平衡.同时,由于表皮特殊的解剖学部位(位于最外层),使其容易受到外伤,并需要在外伤后迅速激活大量的细胞再生来修复伤害.因此,确保基底层角质形成细胞功能的完好对维持表皮的完整性至关重要. 人类基底层角质形成细胞具有干细胞的特征.这种角质形成细胞干细胞库在体内通常保持一种慢循环状态,在促有丝分裂的环境下,可表现出惊人的自我更新和长期生长的能力.角质形成细胞干细胞的主要功能是保持毛囊间表皮具有长期持久的细胞更新能力.根据它们在体内高形成无性系的能力和超过100倍的长期扩增潜力,角质形成细胞干细胞在功能上被定义为"holoclones".与祖细胞相对应,角质形成细胞干细胞的直系后代组成了次级基底层角质形成细胞干细胞库.区别这两种细胞库的主要特征是:祖细胞在体内的循环活性更为活跃,与干细胞相比,它们的生长能力有限,且发育状态更成熟,祖细胞可能主要参与短期的表皮更新过程.     

真皮黑素细胞的研究进展

真皮干细胞具有增殖和多向分化的潜能,角质形成细胞通过表达Wnt3a和E钙黏素来诱导真皮干细胞移行和分化为黑素细胞.研究表明,在黑素细胞形成过程中,真皮黑素细胞与表皮黑素细胞依赖的信号通路明显不同,表皮黑素细胞高度依赖干细胞因子信号通路,而真皮黑素细胞高度依赖内皮素3和肝细胞生长因子信号通路.目前关于色素痣痣细胞的来源尚不清楚,有研究认为,痣细胞来源于能分化为黑素细胞的干细胞,真皮干细胞能分化为黑素细胞,是否是痣细胞的来源尚需进一步研究.     

银屑病患者表皮细胞增殖与cvclinD1的关系研究

银屑病是一种良性增生性皮肤病，其病理特征为表皮过度增殖，伴角化及真皮淋巴细胞浸润。银屑病角质形成细胞动力研究发现表皮内角质形成细胞增生周期变短，进入增生的细胞增多。银屑病表皮细胞增殖较正常皮肤表皮细胞强，与增加循环干细胞数量以加强角质形成细胞向外生长能力有关。为了探讨其细胞增殖能力与细胞循环周期的关系，我们选择了在分     

表皮黑素细胞与毛囊角质形成细胞接触性共培养方法的建立

目的研究表皮黑素细胞与毛囊角质形成细胞在接触性共培养体系中的相互作用。方法胰酶消化游离毛囊和包皮的表皮，分别获取纯化的角质形成细胞和黑素细胞，第3代毛囊角质形成细胞接种于6孔板中，48h后以表皮黑素细胞：毛囊角质形成细胞为1：2、1：10和1：20的比例接种黑素细胞。在1：10接种体系中，加α-黑素细胞刺激素和烟酰胺，干预6d后，NKI／beteb单抗染色。结果毛囊角质形成细胞定植后接种黑素细胞，两种细胞均增殖迅速。以1：10比例接种更能模拟生理状态。1：20接种可清晰观察到黑素细胞树突与角质形成细胞的接触方式。1：2接种可获大量黑素细胞。在单纯黑素细胞和共培养体系中，α-黑素细胞刺激素对黑素细胞增殖无明显影响，但树突明显增多、伸长。烟酰胺对单纯黑素细胞培养无影响，共培养状态下，黑素细胞树突收缩，黑素体聚集在胞体周围。结论毛囊角质形成细胞与皮黑素细胞接触性共培养．适用于人色素系统的研究。     

白介素20及其受体研究新进展

白介素20是新发现的细胞因子,归属于白介素10家族。它可由活化的外周血单一核细胞和角质形成细胞产生。过表达白介素20转基因小鼠角质形成细胞的表型与人类银屑病的表皮改变非常相似。它与其他白介素10家族成员的受体亚单位有交叉反应,但不同受体途径的反应灵敏度不同。白介素20可特异性增强多潜能祖细胞的增殖,而对其他限制性谱系的祖细胞不产生影响。     

真皮干细胞在毛囊周期中的作用

毛囊由表皮(上皮)及真皮(间充质)组成,它们之间的相互作用在毛囊的形态发生及生长中发挥重要作用,二者之间相互作用是毛囊成功重建的关键因素.在毛发形成过程中,真皮细胞是诱导者,上皮细胞是应答者.真皮鞘和毛乳头内存在毛囊真皮干细胞,属于成体干细胞,具有慢周期、未分化、自我更新和体外增殖能力强的特点.真皮鞘中的真皮干细胞较长寿,可以历经几个毛囊周期,重建真皮鞘.在毛囊周期的生长期,真皮鞘中的干细胞产生新细胞提供给毛乳头;在退行期,真皮干细胞子代移出毛乳头或死亡.毛囊真皮细胞对于损伤和疾病之后的毛囊重建及修复具有重要意义.     

人毛囊干细胞的定位及增殖特性

目的 探讨人毛囊干细胞定位和增殖特性.方法 取人枕部头皮毛囊进行角蛋白19(K19)免疫组化染色,并测量阳性段距毛囊下端的距离;将包含毛球部上方阳性段的毛囊上皮组织分别置于含有和不含有间质细胞的凝胶表面气液界面培养,当出现增殖灶时,测量其距毛囊下端的距离,分析K19阳性部位与培养出现的增殖灶之间的关系,并通过透射电镜观察增殖灶的超微结构.结果 人枕部头皮毛囊有两个K19阳性区域,即隆突部和毛球部上方一段外根鞘,毛囊下段上皮组织只在含有间质细胞的凝胶表面培养时毛球部上方出现一增殖灶,统计学分析支持毛球部上方的K19阳性部位和毛囊下段上皮组织培养出现的增殖灶为同一部位.透射电镜显示增殖灶含有幼稚细胞、成熟角质形成细胞和凋亡细胞.结论 人头皮毛囊可能有两个干细胞库,即隆突部和球部上方外根鞘的一个局限区域,干细胞的增殖需要间质细胞(如毛乳头细胞)的存在,增殖的干细胞可能向形成新的干细胞、成熟角质形成细胞和凋亡细胞三个方向演变.     

人角质形成细胞表达三种同种型的甲状旁腺激素相关蛋白的转录,不表达甲状旁腺激素/甲状旁腺激素相关蛋白受体:1,25(OH)_2维生素D_3的效应

甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)与甲状旁腺激素(PTH)的N末端具有同源性,均可结合并激活Ⅰ型PTH/PTHrP受体。表皮的棘细胞层和颗粒层、尤其毛囊的内根鞘,可表达PTHrP。已有实验表明PTHrP可调节角质形成细胞的生长和分化,人的PTHrP可抑制培养的角质形成细胞的增殖和分化。该实验目的:观     

毛囊干细胞与组织工程研究进展

毛囊干细胞研究取得突破性进展的标志是由孙同天、Lavker和Cotsarelis等提出了隆突激活假说,明确了其定位的部位,是少数几种成体干细胞首先被明确定位的干细胞之一,并逐步得到了验证。毛囊干细胞不仅可以分化为毛囊上皮细胞,而且可以分化为皮脂腺细胞、表皮角质形成细胞,其分化过程是干细胞分化为短暂倍增细胞,最后分化为终末分化细胞。近年来进一步证明了毛囊隆突部也是多种干细胞的居住地,包括黑素干细胞,和毛囊干细胞存在同步化激活的机制。Wnt/β-catenin是毛囊发育、再生循环的基本信号通路,使毛囊在再生过程出现着色一致的毛发。诱导和重建毛囊形成是组织工程皮肤最主要的目标之一,毛乳头细胞的凝集性生长特性是诱导毛囊形成的条件,因此,维持毛乳头细胞凝集性生长特性主要有细胞团块法、低黏附性培养板(或高分子材料膜)法、悬滴培养法和胶原凝胶成球法,以实现体外重建毛乳头的目的。毛囊组织工程在体外还不能真正诱导形成,现有的毛囊再生或新生的成功方法还是须移植到动物体内,才能形成完整毛囊并产生毛发。主要方法有移植小室法、混合游离细胞注射法和皮瓣法。诱导毛囊形成比较成功的细胞是啮齿类动物来源的胚胎或新生鼠毛囊细胞和人胚胎毛囊细胞,成年人头皮毛囊来源细胞目前仍未能诱导出毛囊新生或再生。     

分离用于组织工程的纯表皮干细胞群

表皮干细胞可长期保留核标记 ,为标记保留细胞 (ＬＲＣｓ)。表皮干细胞在组织中保持活力 ,缓慢增殖 ,维持着表皮组织的不断更新。表皮基底层细胞通过分裂、增殖和不断取代最外面角质层已分化的细胞 ,以维持表皮组织的完整性。表皮干细胞是自我更新的细胞群 ,每一次表皮干细胞分裂产生一个干细胞和一个一过性放大 (ＴＡ)细胞 ,后者的分裂次数有限 ,其子代细胞分化并最终脱落。表皮中只保留干细胞并不断地终生增殖 ,这意味着任何基因治疗必须直接针对干细胞的基因组 ,但分离纯表皮干细胞群非常困难。该文报告了一种分选分离系统所产生的纯角质…     

皮肤间质干细胞

皮肤干细胞的研究长期限定在表皮和毛囊隆突区,皮肤间质来源的干细胞和造血干细胞同样具有分化成脂肪细胞、平滑肌细胞、骨细胞、软骨细胞,甚至神经元和神经胶质细胞的潜能.毛囊周围结缔组织鞘、毛乳头和毛囊间真皮都可能含有多潜能干细胞,未来可能作为自体移植细胞治疗的潜在供体.主要概述皮肤问质干细胞的定位、表面标记、功能和潜在的临床...     

银屑病患者表皮细胞增殖与cyclinD1的关系研究

银屑病是一种良性增生性皮肤病 ,其病理特征为表皮过度增殖 ,伴角化及真皮淋巴细胞浸润。银屑病角质形成细胞动力研究发现表皮内角质形成细胞增生周期变短 ,进入增生的细胞增多1 。银屑病表皮细胞增殖较正常皮肤表皮细胞强 ,与增加循环干细胞数量以加强角质形成细胞向外生长能力有关2 。为了探讨其细胞增殖能力与细胞循环周期的关系 ,我们选择了在分别细胞增殖周期G1调控作用期和S期表达增高的PCNA及细胞周期素D(cyclinD1)作为检测指标 ,分别检测二者在银屑病皮损处和正常表皮中的表达 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　材料　 2 7例寻常…     

银屑病的发病机理:免疫学证据及展望

目前认为银屑病是T细胞介导疾病 ,T细胞可以改变表皮生长的自稳态 ,引起角质形成细胞过度增殖及分化异常 ,讨论T细胞通过尚不明确的可溶性介质直接激活静止角质形成细胞干细胞的可能性 ,并重点阐述了银屑病免疫发病机理中已发现的证据和假说之间所存在的差距。     

角质形成细胞的凋亡失调及相关皮肤病

角质形成细胞的凋亡在调节表皮发育和抑癌中起着关键作用，凋亡可平衡角质形成细胞的增殖来保持表皮厚度，促使角质层形成和清除恶化前细胞。除正常发展程序外，角质形成细胞的凋亡能被紫外线和其他刺激诱发，凋亡在保持皮肤细胞内环境稳定和一些皮肤病的发病机制中起着重要作用。     

rhFGF-7对体外培养人皮肤角质形成细胞增殖的影响

目的建立一种人皮肤角质形成细胞分离和培养的方法,研究重组人成纤维细胞生长因子7(rhFGF-7)对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。方法取环切术后包皮,分别用胰酶和dispaseⅡ酶消化法分离表皮,用无血清培养基进行无滋养层培养,采用免疫细胞化学方法对培养的细胞进行鉴定,并用细胞计数法测定细胞的生长曲线,MTT法检测rhFGF-7对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。结果与胰酶消化分离表皮相比,dispaseⅡ酶消化获得的表皮,其细胞贴壁率高,增殖速度快,且成纤维细胞污染少;荧光显微镜下细胞胞浆呈黄绿色,为角蛋白阳性染色;培养的角质形成细胞可持续增殖至第8代,10ng/mL的rhFGF-7促角质形成细胞增殖作用最显著。结论所建立的人皮肤角质形成细胞分离和培养方法,可获得高纯度的人皮肤角质形成细胞,rhFGF-7可促进体外培养人皮肤角质形成细胞的增殖。     

p53蛋白在UVB诱导凋亡的富集表皮干细胞的角质形成细胞中的表达

目的研究p53蛋白在中波紫外线(ultraviolet lightB,UVB)诱导凋亡的富集表皮干细胞的角质形成细胞群中的表达情况。方法分离富集人表皮干细胞的角质形成细胞群和正常角质形成细胞群,使用UVB诱导两种细胞群凋亡,蛋白印迹法比较不同剂量UVB诱导前后两组细胞的p53蛋白表达的差异。结果两种细胞在不同剂量的UVB照射后p53蛋白表达均比照射前显著增加,在20mJ/cm2与40mJ/cm2照射剂量时,富集人表皮干细胞的角质形成细胞群p53蛋白表达高于正常角质形成的细胞群,差异有统计学意义(P<0.05)。结论富集人表皮干细胞的角质形成细胞p53蛋白表达比其它角质形成细胞对中波紫外线的照射易感。