血小板源生长因子-AB对成纤维细胞周期及DNA合成的影响

目的：探讨血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）－ＡＢ在创面愈合及瘢痕增生过程中的作用机制;方法：取第３代～６代体外培养的人正常皮肤成纤维细胞（ＮｓＦｂ）及增生性瘢痕成纤维细胞（ＨＴｓＦｂ）,经ＰＤＧＦ－ＡＢ作用后,用＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法测定ＤＮＡ合成的变化,用汉式细胞术测定细胞周期的变化。结果：ＰＤＧＦ－ＡＢ作用后,两种细胞ＤＮＡ民均明显增加,Ｓ期细胞数百分比均明显增高,Ｇ１期细胞不断进入Ｓ期,但作用有划     

PDGF-AB对成纤维细胞增殖及成纤维细胞-胶原网收缩的影响

引言血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）在创面愈合过程中起重要作用，特别是对一些慢性难愈性伤口如糖尿病溃疡、慢性静脉性溃疡、褥疮、放射性溃疡等均有明显促进愈合作用［１～３］．ＰＤＧＦ是由Ａ，Ｂ两种单体构成的二聚体结构，可以形成ＰＤＧＦ－ＡＡ，ＰＤＧＦ－ＡＢ...     

增生性瘢痕不同时期TGF β1及其受体的表达

目的：研究ＴＧＦ－β１及其受体ＴＧＦ－βＲＩ在务后增生性瘢痕不同时期的表达。方法：免疫组化ＡＢＣ法。结果：在正常真皮成纤维细胞中ＴＧＦ－β１及ＴＧＦ－βＲＩ未检测到阳性表达,增生期的增生性瘢痕的真皮中ＴＧＦ－β１及ＴＧＦ－晨相同的丰纤维细胞亚群中高表达,而萎缩期的增生性瘢痕中两者表达均为阴性。结论：提示增生性瘢痕形成与成纤维细胞对ＴＧＦ－β１的反应性增高有关,同时也与伤口愈合高表达ＴＧＦ－βＲＩ的     

五种生长因子mRNA在兔角膜中的表达

目的 了解ＥＧＦ、ＴＧＦ－α、ｂＦＧＦ、ＴＧＦ－β１和ＰＤＧＦ在兔角膜上皮和基质中的表达情况,探讨其在角膜伤口愈合中的作用。方法 应用原位核酸分子杂交方法检测兔角膜上皮和基质中ＥＧＦ、ＴＧＦ－α、ｂＦＧＦ、ＴＧＦ－β１和ＰＤＧＦ ｍＲＮＡＲ的表达。结果 ＥＧＦ、ＴＧＦ－α和ＰＤＧＦ ｍＲＮＡ仅在正常角膜上此细胞层表达,基质中未见表达;ｂＦＧＦ和ＴＧＦ－β１ ｍＲＮＡ在正常角膜伤口和基质中均有表达。     

苦参碱抑制血小板衍生生长因子诱导的小鼠皮肤成纤维细胞增殖

目的：探讨苦参碱对血小板衍生生长因子－ＢＢ（ＰＤＧＦ－ＢＢ）诱导的小鼠成纤维细胞增殖的影响。方法：取新生ＩＣＲ小鼠皮肤细胞培养成纤维细胞。用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法和细胞计数法分析细胞增殖情况。结果：５０￣２５０μｇ／ｍｌ的苦参碱能剂量依赖地降低血清刺激的细胞增殖,撤除苦参碱后抑制作用能完全逆转。苦参碱（１００￣５００μｇ／ｍｌ）亦能剂量依赖地抑制ＰＤＧＦ－ＢＢ诱导的细胞增殖。结论：苦参碱显示了     

PDGF—B基因的膜型表达产物促进血管平滑肌细胞增殖和胶原合成

考察ＰＤＧＦ－Ｂ基因的膜型表达产物对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增生、胶原合成的影响。制备供转导人ＰＤＧＦ－Ｂ基因的重组逆转录病毒，感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，受染ＮＩＨ３Ｔ３细胞经筛选、扩增后，制备细胞膜上表达产物ＰＤＧＦ－ＢＢ以观察其对ＶＳＭＣｓ生长的影响，并以３Ｈ－ＰｒｏＬｉｎｅ掺入率评估该重组蛋白对ＶＳＭＣｓ胶原合成的影响。结果：重组逆转录病毒介导ＰＤＧＦ－Ｂ基因转移并表达出具有生物学活性的重组ＰＤＧＦ－ＢＢ，免疫荧光细胞化学染色证实其表达；该膜型重组蛋白可促进ＶＳＭＣｓ增殖和胶原合成。     

肺纤维化大鼠炎性细胞因子的对比研究

目的：了解肺纤维化大鼠肺局部细胞因子水平及其与肺泡巨噬细胞的关系。方法：对比观察支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和肺泡巨噬细胞（ＡＭ）培养上清肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）的动态变化。二种细胞因子检测分别采用ＥＬＩＳＡ和生物活性法。结果：①ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α于第１ｄ增高，第３ｄ达高峰，其高峰时间先于ＡＭ源ＴＮＦ－α；ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α与其中中性粒细胞数呈正相关；②ＢＡＬＦ中ＰＤＧＦ与ＡＭ源ＰＤＧＦ同步于第７ｄ达高峰，与ＡＭ总数呈正相关。结论：ＡＭ释放高水平ＴＮＦ－α、ＰＤＧＦ；ＢＡＬＦ中也存在ＴＮＦ－α、ＰＤＧＦ，且呈动态变化；ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α可能还来自ＡＭ外的其它细胞，如ＰＭＮ，而ＢＡＬＦ中ＰＤＧＦ则可能主要来源于ＡＭ。     

胰岛素样生长因子在生长迟缓儿童诊断中的意义

为探讨胰岛素样生长因子在生长迟缓诊断中的意义,我们用免疫放射计量（ＩＲＭＡ）方法以及放射免疫（ＲＩＡ）方法测定身材矮小患儿２２例药物激发试验和１９３例运动激发试验血清中ＩＧＦ－１、ＩＧＦＢＰ－３和ＧＨ水平。结果：①正常对照组ＩＧＦ－１水平在不同年龄不同性别间有显著意义（Ｐ＜００１）ＩＧＦＢＰ－３水平在各年龄组之间差异无显著性意义。②ＧＨＤ组病人ＧＨ、ＩＧＦ－１、ＩＧＦＢＰ－３水平均是降低的。结论：ＩＧＦ－１和ＩＧＦＢＰ－３水平可以反映体内ＧＨ的分泌情况。     

PDGF在肾脏疾病中的研究进展

血小板源性生长因子 (ｐｌａｔｅｌｅｔｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＤＧＦ)是一种重要的细胞因子 ,具有多种生物学作用 ,参与组织器官多种生理活动 ,并在各种病理损伤中发挥重要作用。现就ＰＤＧＦ在肾脏疾病发生、发展中的意义综述如下。1　ＰＤＧＦ的生物学特性ＰＤＧＦ是由Ａ、Ｂ两条紧密相关的家族性蛋白多肽链通过二硫键连接而成的同型或异型二聚体 ,故有三种形式 :ＰＤＧＦ ＡＡ、ＰＤＧＦ ＢＢ、ＰＤＧＦ ＡＢ ,其中Ａ、Ｂ二链有 6 0 %的同源性。ＰＤＧＦ最先发现于血小板的α颗粒中 ,目前已经证明二倍体细胞 ,如单核…     

缺氧对肺动脉内皮细胞PDGF─A、─B链及其受体α、β亚基基因表达的影响

为了研究缺氧性肺动脉高压形成的机理，采用核酸分子杂交技术观察缺氧对肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）－Ａ链、－Ｂ链及其受体α、β亚基基因表达的影响。结果表明低氧和无氧（２．５％Ｏ２和０％Ｏ２）１．５、３ｈＰＡＥＣ的ＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达显著增加（Ｐ＜０．０１，ｖｓ常氧组），而６～４８ｈＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达水平无明显改变。低氧和无氧１．５～４８ｈ均能显著地增加ＰＡＥＣ的ＰＤＧＦ－Ｂ链ｍＲ－ＮＡ表达（Ｐ＜０．０５）。常氧条件下ＰＡＥＣ均能低水平地表达ＰＤＧＦ－α亚基受体和β亚基受体，低氧和无氧则上调此两受体ｍＲＮＡ表达水平（Ｐ＜０．０５）。由此说明缺氧不仅能使ＰＡＥＣ“旁分泌”ＰＤＧＦ参与肺动脉平滑肌细胞增殖调节，也使ＰＡＥＣ通过“自分泌”ＰＤＧＤ及上调其膜上的ＰＤＧＦ受体基因表达，参与缺氧肺动脉内皮细胞自身功能调节，从而在缺氧性肺动脉高压肺血管收缩反应增强及肺血管结构改建中发挥重要作用。     

PDGF-AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩影响的差异

目的：研究血小板衍生生长因子(PDGF)—AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞一胶原网(FPLC)收缩影响的差异,探讨PDGF—AB促进伤口愈合的作用机制及其在瘢痕增生中的作用．方法：取体外培养的人正常皮肤(NsFb)及增生性瘢痕成纤维细胞(HTsFb),建立成纤维细胞—胶原网模型,比较PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩影响的差异．结果：PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩均有明显促进作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异．结论：PDGF—AB可能通过刺激伤口收缩促进创面愈合,同时可能在瘢痕挛缩性疾病中起重要作用。     

增生性瘢痕成纤维细胞生长特性的研究

目的：研究增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞生长特性的差异。方法：应用消化法建立成纤维细胞系，在倒置相差显微镜下观察细胞形态，应用细胞计数方法绘制细胞生长曲线，测定细胞生长速度。结果：增生性瘢痕成纤维细胞比正常皮肤成纤维细胞胞体大，形态不规则。前者细胞倍增时间约为6d，后者细胞倍增时间为3d。细胞融合后前者细胞数为后者的56％。结论：增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞是两种不同基因表现型的细胞。     

PPAR-γ在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达及意义

目的 探讨核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达状况及其意义。方法 应用免疫细胞化学检测3例增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞中PPAR-γ的表达。结果 免疫细胞化学显示PPAR-γ蛋白在增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞中均有表达,但是在增生性瘢痕中表达较正常皮肤低。结论 核内受体PPAR-γ在增生性瘢痕成纤维细胞中呈下调表达,提示激活PPAR-γ的激活可能是增生性瘢痕治疗的一种新方法。     

抑癌基因p27对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及DNA合成的影响

目的：探讨抑癌基因p27对增生性瘢痕的作用。方法：取体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞（HTsFb），将构建的pcDNA3-p27真核表达质粒体外转染HTsFb，经G418筛选获得稳定性表达的细胞克隆，用MTT和^3H-TdR掺入法观察抑癌基因p27对HTsFb增殖及DNA合成的影响。结果：抑癌基因p27对HTsFb增殖及DNA合成均有显著抑制作用。结论：抑癌基因p27可能通过抑制成纤维细胞增殖及DNA合成抑制瘢痕增生。     

珍珠水解液对皮肤增生性瘢痕及正常皮肤来源成纤维细胞bFGF、TGF-β1表达的影响

目的：观察珍珠水解液对正常皮肤及瘢痕皮肤来源成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth fac-tor,bFGF）、转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）的影响,并探讨其对病理性瘢痕的作用.方法：原代培养、分离纯化获得人类皮肤瘢痕和正常皮肤成纤维细胞系.采用荧光实时定量RT-PCR及免疫细胞化学法分别检测成纤维细胞在珍珠水解液作用下bFGF、TGF-β1 mRNA及蛋白表达变化的情况.结果：珍珠水解液可下调增生性瘢痕及正常皮肤来源的成纤维细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达,同时上调bFGF的mRNA和蛋白的表达,且呈现浓度依赖性.结论：珍珠水解液能调节成纤维细胞bFGF、TGF-β1的分泌,其对皮肤瘢痕作用的功效及机制值得进一步研究.     

Cyr61在增生性瘢痕及正常皮肤中的差异表达和意义

目的探讨Cyr61在增生性瘢痕成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞中表达差异及其意义。方法取自愿捐献的增生性瘢痕及正常皮肤标本,采用组织块法进行原代成纤维细胞培养。采用实时定量PCR法及细胞免疫荧光法检测Cyr61在两种细胞中的表达。结果在m RNA水平及蛋白水平上,Cyr61在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达均高于正常皮肤成纤维细胞。结论 Cyr61在增生性瘢痕形成过程中可能存在一定的作用,可能通过调节胶原代谢以及调节成纤维细胞增殖影响增生性瘢痕的形成。     

Effects of TGF-beta and TGF-beta-neutralizing antibody on normal skin fibroblasts and scar-derived fibroblasts

Transforming growth factor-beta (TGF-beta) is known as an important cytokine for scar formation in wound healing. The purpose of the present study was to investigate the effects of TGF-beta and its neutralizing antibody on normal skin fibroblasts and scar-derived fibroblasts in culture. Endogenous TGF-beta levels were similar in all fibroblasts. Cell proliferation increased when TGF-beta 1 or beta 2 was added to the cultures, and the increase was higher and started at a lower level in the scar-derived fibroblasts (p < 0.05). The increase of fibroblasts was suppressed by the addition of TGF-beta-neutralizing antibody to the cultures, and the suppression rate was higher in the scar-derived cells (p < 0.05). Percentages of the cells in the growth phases of cell cycle decreased in the normal skin fibroblasts (p < 0.05) when TGF-beta-neutralizing antibody was added. Our findings showed that scar-derived fibroblasts and normal skin fibroblasts have a different sensitivity to TGF-beta. Further study is needed on the effect of the neutralizing antibody to the cell counts and cell cycle of scar-derived fibroblasts.     

神经生长因子对瘢痕组织中炎性细胞及胶原沉积的影响

目的 研究神经生长因子对局部瘢痕组织中肥大细胞等炎性细胞及胶原沉积的影响,探讨增生性瘢痕病理性胶原代谢的启动因素。方法 以大鼠背部创面愈合后瘢痕为研究模型,采用常规ＨＥ、天青－Ａ及ＶＧ染色和计算机图像分析,研究神经生长因子对局部瘢痕组织中肥大细胞等炎性细胞及胶原沉积的影响。结果 注射神经生长因子后局部瘢痕组织中肥大细胞、巨噬细胞、白细胞及淋巴细胞的数量及活化程度、胶原纤维分布的面密度都非常显著增加     

三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用

目的　观察三七总甙对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用 ,以寻找治疗人增生性瘢痕的有效药物。方法　体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞 ,分别应用MTT比色法和3H 脯氨酸掺入法检测三七总甙作用后细胞增殖及胶原合成的变化。结果　和对照组相比 ,三七总甙能够显著抑制成纤维细胞增殖及胶原合成 (P <0 0 1)。结论　三七总甙具有体外抗纤维化作用 ,可能成为治疗增生性瘢痕的有效药物