重组腺病毒介导脂联素基因对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用机制

【摘要】 目的 研究腺病毒介导的脂联素（APN）过表达对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化（AS）的抑制作用和对NF-κB信号通路的影响。方法 将12周龄雄性ApoE-/-小鼠120只分为空载腺病毒对照组和脂联素干预组,每组60只。两组小鼠均给予高脂饮食诱发AS。在3个不同时间点（0天、4周、8周）处死受试小鼠,取全血和主动脉血管组织。用全自动生化仪检测血脂指标;ELISA法测定血清APN浓度;油红O和HE染色法检测小鼠主动脉血管组织的病理学变化;Masson染色法检测进展性斑块区的胶原含量和纤维帽厚度变化;免疫荧光法测定小鼠主动脉血管APN和NF-κB p65蛋白的表达;免疫印迹法检测主动脉血管APN、NF-κB p65核蛋白和炎症因子的表达。结果 APN过表达抑制了ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成。与对照组相比,脂联素干预组的动脉粥样硬化病理损伤面积明显减少（P<0.01）,动脉粥样硬化损伤程度明显降低（P<0.001）,总体油红O染色测定血管表面损伤百分比,4周时为27.78?.64 vs 33.02?.18 (%);8周时为31.58?.87 vs 52.16?.79 (%)。脂联素减缓了高脂饮食导致的小鼠血清中TC（P<0.001）、TG（P<0.001）、LDL-C（P<0.001）的浓度增加,使血脂水平趋向正常化,减缓了小鼠的体重增长（P<0.05）。随着血清脂联素浓度增加,可以阻遏NF-κB通路的激活,抑制NF-κB p65核蛋白和炎症因子的表达。结论 脂联素过表达对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化具有显著的保护作用,抑制了NF-κB p65核蛋白表达,说明脂联素通过抑制NF-κB通路激活来减轻AS的炎症反应。     

柿叶总黄酮对apoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变中粘附分子表达的影响

目的 探讨柿叶总黄酮对载脂蛋白E基因敲除小鼠胸腹主动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)斑块中粘附分子表达的影响.方法 ApoE-/-小鼠随机分为模型组和黄酮组,C57BL/6小鼠作为对照,胸腹主动脉近心端连续冷冻切片,苏木素伊红(HE)染色观察组织形态学变化,血清检测观察血脂变化,免疫组化染色观察粘附分子在病变部位的表达分布.结果 HE染色结果显示,正常对照组血管内膜平滑,无AS病变,模型组大部分斑块面积较大,突入管腔致管腔明显狭窄,黄酮组大部分病变较轻,无明显管腔狭窄;血脂检测表明,模型组和黄酮组之间血脂水平无显著性差异;免疫组化结果显示,正常对照组小鼠主动脉无阳性染色颗粒表达,模型组斑块的肩部、纤维帽部有较多阳性染色颗粒表达,而黄酮组阳性染色颗粒较少,主要表达于血管内膜,且模型组显著低于黄酮组,差异有显著性(P＜0.05).结论 柿叶总黄酮可在一定程度上抑制P-Selectin、ICAM-1、VCAM-1等粘附分子表达,从而减缓AS病变,但并不依赖于其对血脂的降低作用.     

ApoE-/-高脂模型小鼠肝脏转录组铁死亡潜在分子网络互作的初步探讨

目的：对ApoE^-/-高脂模型小鼠肝脏中铁死亡相关差异基因的生物过程和信号通路进行分析,构建肝脏内铁死亡的分子调控网络,从转录水平揭示高脂血症的发病机制。方法：C57BL/6J小鼠7只作为空白对照组,ApoE^-/-小鼠7只作为模型组,对照组和模型组分别给予普通饲料和高脂饲料,16周后检测小鼠的甘油三酯(triglyceride,TG)、胆固醇(cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL-C)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL-C)血清水平,并对肝脏取材进行HE染色及转录组分析。应用Graph-Pad Prism 8.0.2软件分析铁死亡相关差异基因分布情况,通过STRING11.0平台构建蛋白-蛋白相互作用网络模型,DAVID数据库进行GO生物功能富集和KEGG通路富集,Cytoscape的ClueGO插件对铁死亡相关差异基因的功能及代谢通路进行可视化分析。结果：与对照组TG(1.19±0.09)、TC(2.31±0.15)、LDL-C(0.29±...     

养阴活血方对高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠Treg/Th17失衡及动脉粥样硬化的影响

探讨养阴活血方(YHF)对高脂饮食诱导的ApoE^-/-小鼠Treg/Th17失衡及动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的影响。小鼠给予高脂饮食诱导AS,YHF低剂量(18 g/kg,以生药计)、YHF高剂量(36 g/kg,以生药计)灌胃给药20周进行干预。油红O脂肪染色法观测主动脉斑块面积变化;生化分析血脂水平;流式细胞术检测外周血Treg、Th17比例;荧光实时定量PCR(qRT-PCR)、免疫组化(IHC)及Western blot检测主动脉Foxp3、RORγt mRNA及蛋白表达。分离小鼠脾脏CD4⁺T细胞并用anti-CD3/CD28活化,再经LPS刺激和YHF干预后,qRT-PCR与免疫荧光(IF)检测CD4⁺T细胞Foxp3、RORγt表达。结果显示,YHF显著减小主动脉斑块面积,降低血脂水平,增加Treg/Th17比值;上调主动脉Foxp3表达而下调RORγt表达;且在体外上调CD4⁺T细胞Foxp3表达而下调RORγt表达。本研究表明,YHF可以调节高脂饮食诱导的ApoE^-/-小鼠Treg/Th17比例失衡,减弱LPS对CD4⁺T细胞的炎性刺激影响,从而改善AS。     

芍药苷ApoE-/-对小鼠血脂及主动脉斑块的影响

[目的]观察芍药苷对ApoE^-/-小鼠血脂及主动脉斑块形成的影响。[方法]6周龄ApoE^-/-雄性小鼠经普通饲料饲养4周,髙脂饲料饲养12周后,随机分为ApoE^-/-模型组及芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg剂量组,相同遗传背景的同龄正常C57BL/6J小鼠作为空白对照组。药物干预12周后,检测血脂的变化,并测量主动脉弓部、胸段、腹段斑块面积。[结果]ApoE^-/-模型组甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）显着高于C57BL/6J组（P<0.01）,芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg组的血脂水平显着低于ApoE^-/-模型组（P>0.05,P<0.01）,并且不同程度减小主动脉各段斑块的面积。[结论]芍药苷具有降脂和抑制主动脉斑块形成的作用,表明芍药苷具有抗动脉粥样硬化作用。     

六味地黄方通过上调肠道雌激素受体改善绝经后ApoE-/-小鼠脂代谢异常研究

目的?应用双侧卵巢去势的ApoE-/-小鼠建立绝经后脂代谢异常模型,探究六味地黄方(LW)能否通过调节肠道雌激素受体改善绝经后脂代谢异常。方法?正常饮食的C57/B6小鼠为对照组(n=6),高脂饮食并接受假手术的ApoE-/-小鼠为假手术对照组(n=6),高脂饮食并接受双侧卵巢去势的的ApoE-/-小鼠为模型组(n=6),模型小鼠接受4.5?g/kg (n=6)或9.0?g/kg (n=6)的六味地黄方治疗90?d。生化法检测小鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酸酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）及高密度脂蛋白（HDL-C）水平,HE染色检测小鼠肝脏脂质损伤,油红染色检测小鼠肝脏脂质堆积,免疫荧光染色检测小鼠空肠雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、ABCG5、ABCG8、PI3K p110β及p-AKT的表达水平,免疫化学染色检测小鼠空肠NPC1L1的表达水平,Western blot法检测小鼠空肠NPC1L1、ABCG5及ABCG8的表达水平。结果?六味地黄方可降低模型小鼠血清TC、TG及LDL-C水平,升高HDL-C水平（P<0.05~0.01）;同时,六味地黄方可显著降低模型小鼠的肝脏脂质损伤和脂肪堆积（P<0.05~0.01）。六味地黄方显著增加模型小鼠空肠内降低的ERα和ERβ水平（P<0.05~0.01）。六味地黄方显著降低模型小鼠空肠中NPC1L1的表达水平（P<0.05）,并上调ABCG5和ABCG8的表达水平（P<0.01）。六味地黄方显著增加模型小鼠空肠内PI3K p110β及p-AKT的表达水平（P<0.05~0.01）。结论?六味地黄方可以显著改善绝经后ApoE-/-小鼠脂代谢异常,其机制与六味地黄方调节肠道胆固醇的吸收和外排有关。上调肠道雌激素受体表达和肠道PI3K/AKT信号可能是六味地黄方调节肠道胆固醇吸收和外排的机制。      

津力达对高脂诱导的胰岛素抵抗ApoE-/-小鼠骨骼肌甘油三酯相关酶的影响

目的 探究津力达对高脂诱导的胰岛素抵抗ApoE^-/-小鼠骨骼肌甘油三酯相关基因的影响。方法 将8只雄性C57BL/6J小鼠设为正常组(A组);40只雄性ApoE^-/-小鼠喂养16周后分为模型组(B组)、罗格列酮组(C组)、 津力达低剂量组(D组)、津力达中剂量组(E组)、津力达高剂量组(F组),开始灌胃给药,连续8周。采用酶法、BCA蛋白浓度法测定骨骼肌TG含量;OGTT评价小鼠的胰岛素抵抗程度; RT-PCR和Western blot测定小鼠骨骼肌HSL、ATGL、PPARγ mRNA和蛋白表达。结果 津力达能够不同程度降低小鼠的FBG、TC、TG和LDL-C,升高HDL-C;下调FIns水平,提高ISI,明显改善小鼠糖耐量异常;津力达能够不同程度的上调小鼠HSL、ATGL、PPARγ mRNA和蛋白表达。结论 津力达能够通过调节骨骼肌甘油三酯相关酶的表达,改善高脂诱导的ApoE^-/-小鼠的胰岛素抵抗。     

雷公藤内酯醇对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用研究

目的：研究不同剂量雷公藤内酯醇对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）的治疗效果。方法将4只10周龄雄性ApoE-/-小鼠作为模型组,4只10周龄雄性C57BL/6J小鼠作为对照组,适应性喂养1周后处死,取主动脉标本做HE染色。另将10周龄雄性ApoE-/-小鼠32只作为实验组,按每天每千克体重给药量随机分为4组：50μg/（kg·d）、75μg/（kg·d）组、100μg/（kg·d）、空白对照组,每组8只。10周龄雄性C57BL/6J小鼠8只作为阴性对照组。给药3周后处死小鼠,取主动脉标本做HE染色;收集血清,测定IL-10、IL-12含量。结果（1）在11周龄时两组主动脉HE染色Roberts＆amp;Thompson方法评分分别为：模型组[（5.250±0.500）分]＞对照组[（0.500±0.577）分],差异有统计学意义。（2）经不同浓度雷公藤内酯醇处理3周后,各组主动脉HE染色Roberts＆amp;Thompson方法评分分别为：空白对照组[（6.500±0.189）分]＞100μg/（kg·d）组[（4.625±0.183）分]＞50μg/（kg·d）组[（3.375±0.183）分]＞75μg/（kg·d）组[（1.375±0.183）分]＞阴性对照组[（0.000±0.000）分],差异有统计学意义。（3）75μg/（kg·d）组血清中IL-10浓度升高最明显,与各组比较差异均有统计学意义（P＜0.001）;各组血清中IL-12浓度均较空白对照组降低,其中75μg/（kg·d）组降低最明显,两者之间的差异有统计学意义（ P＜0.01）。结论（1）在11周龄时,ApoE-/-小鼠能形成AS模型。（2）不同浓度雷公藤内酯醇处理3周后,ApoE-/-小鼠AS病变有不同程度缓解,其中75μg/（kg·d）浓度下效果最佳。（3）雷公藤内酯醇能够上调IL-10、下调IL-12的表达水平,抑制炎症反应,减轻粥样斑块的形成,此可能为免疫抑制剂抗动脉粥样硬化的机制之一。     

高脂饮食诱导肥胖小鼠模型中氧化应激、炎症递质对骨代谢的影响及其可能机制

目的：探讨高脂饮食诱导肥胖小鼠模型中氧化应激和炎症递质对骨代谢的影响及其可能机制。方法：选用5周龄C57BL/6雄性小鼠16只,随机平均分为正常饮食组、高脂饮食组,分别用正常饮食和高脂饮食喂养。于实验16周末,测各组动物体质量,处死后取内脏脂肪并测量内脏脂肪/体质量比值;用ELISA法测量血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）、血清骨钙素（OC）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）;分别用硫代巴比妥酸（TBA）法和羟胺法检测胫骨骨组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性;用骨密度仪检测右侧股骨骨密度（BMD）;分别用免疫组织化学技术和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测骨组织骨保护素（OPG）和核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）蛋白及mRNA的表达;HE染色光镜观察左侧股骨组织形态学改变。结果：与正常饮食组相比,高脂饮食组体质量、内脏脂肪/体质量比值、骨组织RANKL mRNA/OPG mRNA比值、血清TRACP-5b、IL-6和TNF-α水平、骨组织RANKL表达及骨组织MDA均明显升高,差异均具统计学意义（P＜0.05）;而血清OC水平、骨组织OPG表达、骨组织SOD及BMD均明显下降,差异均具统计学意义（P＜0.05）。在组织形态学上,发现高脂饮食组股骨干骺端骨小梁分布稀疏,骨小梁变细及断裂,伴骨髓腔中有大量脂肪浸润。各指标的相关分析结果显示：BMD与骨组织SOD呈正相关（r=0.627, P＜0.01）,与内脏脂肪/体质量比值（r=-0.858,P＜0.01）、骨组织MDA均呈负相关（r=-0.538,P＜0.01）;SOD与OPG mRNA呈显著正相关（r=0.637,P＜0.01）,与TNF-α（r=-0.673,P＜0.01）、IL-6（r=-0.874,P＜0.01）、RANKL mRNA（r=-0.760,P＜0.01）及RANKL/OPG比值（r=-0.768,P＜0.01）呈显著负相关;而MDA与TNF-α、IL-6、OPG mRNA、RANKL mRNA以及RANKL/OPG无显著相关性（P＞0.05）。结     

瑞舒伐他汀对动脉粥样硬化APOE-/-小鼠VCAM-1、VEGF和TNF-α表达的影响

目的 探讨瑞舒伐他汀对载脂蛋白E敲除基因(APOE^-/-)小鼠动脉粥样硬化的作用以及对血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）和α肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF-α）表达的影响。方法 将18只8周龄健康雄性APOE^-/-小鼠随机分为3组,即模型组、低剂量治疗组和高剂量治疗组,每组6只,6只C57BL/6小鼠作为对照组;除对照组小鼠用普通饲料喂养外,3组APOE^-/-小鼠均用高脂饲料喂养。喂养8周后,低剂量治疗组按瑞舒伐他汀1.5 mg/kg灌胃给药,高剂量治疗组按瑞舒伐他汀5 mg/kg灌胃给药,对照组和模型组用等量蒸馏水灌胃,1次/d,共8周;取胸主动脉HE染色后,观察主动脉的病理形态学变化,计算主动脉内弹力板周长、外弹力板周长、残腔周长和动脉粥样硬化斑块的面积;分别用蛋白质免疫印迹（Western Blot, WB）法...     

基于PI3K/AKT/eNOS通路研究芪丹通脉片对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响

目的：基于磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)通路探索芪丹通脉片对ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响。方法：从72只SPF级雄性ApoE^-/-小鼠中随机选取12只作为对照组,其余小鼠采用颈总动脉外置管术联合高脂饲料建立小鼠易损斑块模型。将造模成功的60只小鼠随机分为模型组、黄芪甲苷组(40 mg·kg^-1)、丹参酮ⅡA组(90 mg·kg^-1)、黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组(700 mg·kg^-1),每组12只,给予相应药物灌胃12周,每日1次,对照组和模型组给予等体积生理盐水。末次灌胃后,处死小鼠并分离右颈总动脉,TUNEL染色观察细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测CD68、α-actin蛋白表达水平,RT-PCR检测eNOS mRNA...     

田黄方对高脂饮食诱导小鼠肾脏损伤的改善作用及机制研究

目的 探究田黄方(THF)对高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠肾脏损伤的改善作用及机制.方法 将SPF级的C57BL/6J雄性小鼠分为正常组、模型组、田黄方组,高脂饮食诱导5个月及给药干预6周;采用H&E染色观察小鼠肾脏组织病理情况;生化检测试剂盒检测肾脏匀浆脂代谢和氧化应激状态指标:乳酸脱氢酶(LDH)、低密度脂蛋白胆...     

单次大剂量对比多次小剂量STZ诱导C57BL/6J小鼠糖尿病肾病模型的研究

目的 对比研究不同剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)联合高糖高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠糖尿病肾病模型的稳定性.方法 48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为:对照组(注射等体积柠檬酸缓冲液,12只),单次大剂量(150 mg/kg STZ,单次腹腔注射联合高脂高糖,18只),多次小剂量剂量(50...     

肝脏X受体激动剂TO901317对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠认知功能的影响及其机制

目的：肝脏X受体(liver X receptor,LXR)是核受体超家族中的一员,其中LXR-β是脑细胞内胆固醇含量的重要感受器,而LXR-β/类视黄醇X受体(retinoic X receptor,RXR)-α/ATP结合盒转运子A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)胆固醇跨膜转运体系与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发生、发展密切相关。LXR激动剂TO901317能影响APP/PS1双转基因小鼠脑组织中β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)的生成,但其具体机制尚未阐明。本研究旨在观察LXR激动剂TO901317对高胆固醇饲料饲喂的AD小鼠的认知功能的影响,并从胆固醇代谢的角度探讨其可能的机制。方法：选取24只雄性6月龄APP/PS1双转基因AD小鼠,并随机分为4组,即普通饲料(control)组、高胆固醇饮食(cholesterol rich diet,CRD)组、CRD联合LXR激动剂TO901317饲喂组(TO901317组)以及CRD、TO901317联合LXR拮抗剂GSK2...     

苦参碱经TLR4/NF-κB通路对膀胱癌小鼠免疫机制的调控作用

目的:探究苦参碱通过Toll样受体4(TLR4)/核因子(NF)-κB通路对膀胱癌小鼠免疫机制的调控作用.方法:通过皮下注射膀胱癌细胞系T24的方法构建膀胱癌小鼠模型.将36只模型小鼠随机分为对照组、苦参碱低剂量组和苦参碱高剂量组(n=12).苦参碱腹腔注射干预,剂量分别为5、10 mg·kg-1.测量肿瘤生长情况,采...     

TLR4/MyD88信号通路介导LPS抑制CYP4X1表达的分子机制研究

目的 体外实验探讨细胞色素P4504X1(CYP4X1)在炎性环境下的表达情况及其分子机制.方法 人胶质瘤细胞系U251细胞分别给予细菌脂多糖(LPS)联用Toll样受体4(TLR4)抑制剂CLI-095或髓样分化因子(MyD88)的抑制剂ST 2825处理24 h,采用qRT-PCR法检测U251细胞CYP4X1和过...     

基于脂质代谢组学研究羟基红花黄色素A治疗高脂血症LDLR-/-小鼠的作用机制

[目的]基于脂质代谢组学方法考察羟基红花黄色素A(HSYA)对高脂饲料诱导的LDLR^-/-小鼠高脂血症脂质代谢的影响及其机制。[方法]将28只雄性LDLR^-/-小鼠分为对照组与高脂组。对照组喂养普通饲料,高脂组喂养高脂饲料,6周后,高脂组按照血清中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量平均分为4组：模型组、辛伐他汀组、HSYA(3.8 mg/kg)低剂量组、HSYA(7.6 mg/kg)高剂量组。给药11周,给药期间同时给予高脂饲料饲养。全自动生化仪检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、LDL-C含量,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理形态,油红O染色观察小鼠肝脏组织脂肪蓄积情况,采用靶向脂质组学技术对LDLR-/-小鼠血清中脂质进行测定。[结果]与对照组比较,模型组小鼠血清中LDL-C、TC、TG、AST、ALT含量升高(P<0.05),肝组织出现大小不等的脂滴浸润,肝细胞排列紊乱,大量脂质蓄积。与模型组比较,HSYA两组小鼠血清中LDL-C、TC、TG、AST、...     

远志汤有效成分对APP/PS1 小鼠氧化损伤的保护作用机制研究

目的 通过观察远志汤有效成分即β- 细辛醚+ 远志皂苷（TEN）对APP/PS1 双转基因小鼠磷脂酰肌醇3- 激酶（PI3K）/ 蛋白激酶B（Akt）/ 糖原合成激酶3β（GSK-3β）信号通路的调控,探讨远志汤防治阿尔茨海默病（AD）的作用机制。方法 将3 月龄APP/PS1 双转基因小鼠分为模型组、盐酸多奈哌齐组（0.33 mg/kg·d）、β- 细辛醚+TEN 低、中和高剂量组[18.5、37.0 和74.0 mg/（kg·d）],选同月龄C57BL/6 小鼠为空白对照组,采用Morris 水迷宫法和新物体识别实验检测小鼠的学习记忆能力,采用分光光度法检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）活性,以及丙二醛（MDA）含量。采用Western blot 检测GSK-3β、Akt,以及两者磷酸化蛋白表达。结果 β- 细辛醚协同TEN 可增强APP/PS1 双转基因小鼠的学习记忆功能,同时还能升高SOD、CAT 和GSH-PX 的活性,降低MDA 含量,诱导Akt 的蛋白表达,抑制GSK-3β 的表达。结论 远志汤有效成分即β- 细辛醚+TEN 可通过调控PI3K/Akt/GSK-3β 信号通路,对APP/PS1 双转基因小鼠氧化应激损伤发挥保护作用。     

人脐带间充质干细胞通过调控OPG/RANKL比值对骨质疏松大鼠的影响及机制研究

目的：探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)对骨质疏松大鼠的影响及机制。方法：将30只SPF级6月龄雌性SD大鼠随机分为3组：假手术组(Sham组)、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除+HUC-MSCs干预组(4×10~6/3 d,HUC-MSCs干预组),每组各10只,Sham组切除大鼠腹腔少量脂肪,其余各组均去除双侧卵巢建立骨质疏松大鼠模型。建模成功后,HUC-MSCs组用干细胞干预12周,其余2组用等剂量生理盐水干预。干预结束后,通过骨代谢血清指标血钙(calcium,Ca)、血磷(phosphorus,P)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原C端肽(c-terminal peptide of typeⅠcollagen,CTX)、骨组织形态计量学参数测量、骨密度检测、成骨细胞表面积/骨表面积比(osteoblast surface/bone surface,ObS/BS)和破骨细胞表面积/骨表面积比(osteoclast surface area/bo...     

二氢杨梅素改善ob/ob小鼠心脏功能及其相关作用机制研究

目的 探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对瘦素(leptin)突变型ob/ob肥胖小鼠心脏功能的保护作用及其相关分子机制.方法 36只雄性ob/ob小鼠采用随机数字表法分为ob/ob组、DHM 50 mg/kg干预组(ob/ob+ DHM 50 mg/kg)、DHM 100 mg/kg干预组(ob/ob+ DHM 100 mg/kg),每组12只,干预16周;10只C57 BL/6J野生型小鼠作为正常对照组(WT).检测葡萄糖耐量和胰岛素耐量,超声心动图检测心脏功能;HE和Masson染色检测心肌的组织形态和胶原沉积;Western blot检测心肌组织中过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子-1α (peroxisome proliferator activator receptor gamma coactivator-1 alpha,PGC-1 α)和蛋白水解酶剪切Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5(fibrone-ctin type Ⅲ domain-containing protein 5,FNDC5)表达;免疫组织化学法检测心肌组织中FNDC5的表达.结果 与WT组相比,ob/ob组葡萄糖耐量、胰岛素耐量明显受损(P＜0.05);ob/ob组舒张期左室内径(diastolic left ventricular diameter,LVIDd)、收缩期左室内径(systolic left ventricular diameter,LVIDs)、舒张早期峰值血流速度(E峰)与舒张晚期峰值血流速度(A峰)的比值(E/A)等指标无明显变化(P＞0.05),但短轴缩短分数(fraction of shortening,FS)和射血分数(ejection fraction,EF)明显降低(P＜0.05),HE染色和Masson染色未发现明显的心肌细胞肥大及胶原沉积;心肌组织PGC-1α和FNDC5蛋白表达显著降低(P＜0.05).DHM干预16周后,显著改善葡萄糖耐量和胰岛素耐量受损、FS和EF的降低、PGC-1α和FNDC5蛋白表达的降低(P＜0.05).结论 DHM改善ob/ob小鼠心脏功能与PGC-1 α/FNDC5通路相关.