ICAM-1和VCAM-1的结构与表达调控

细胞间粘附分子 - 1(ICAM- 1)和血管细胞间粘附分子 - 1(VCAM- 1)属于免疫球蛋白超家族 (IGSF)成员。人 ICAM- 1基因定位于染色体 19p13.3～ 13.2区 ,长 15 .5 kb,其受体为淋巴细胞功能相关抗原 - 1(L FA- 1,CD11a/ CD18)和 Mac- 1;VCAM- 1基因定位于染色体 1p31～ 32区 ,长约 2 5 kb,其受体为极迟抗原 - 4 (VL A- 4 )和整合素α4β7。 ICAM- 1和 VCAM- 1的表达受 NF-κB、SP1、GATA、PKC、STAT- 1等相关的机制所调控     

感染性早产小鼠胎盘TLR4，NF-κB和TNF-α的表达及NAC的干预作用研究

目的:通过研究感染性早产小鼠胎盘Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4),核转录因子-kappaB p65(Nuclear factor-kappaB p65,NF-κBp65)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的表达以及N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)的干预影响,探讨一种预防小鼠感染性早产发生的新策略.方法:利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法检测早产小鼠胎盘TLR4、NF-κBp65、TNF-α mRNA和蛋白的表达,以及NAC干预后早产率、TLR4、NF-κBp65和TNF-α的表达变化.结果:对照组都有TLR4、NF-κBp65、TNF-α的少量表达,LPS模型组和对照组相比三者表达都显著升高(P＜0.05);NAC+LPS和模型组相比,TLR4表达无明显变化,而NF-κBp65和TNF-α表达明显减少(P＜0.05),并且早产率也明显下降(P＜0.05);LPS+NAC治疗组和模型组相比无统计学意义.结论:NAC可以降低感染性早产小鼠胎盘NF-κBp65和TNF-α的表达,在早产的预防中有一定作用.     

TNF-α抗体对Sp1和NF-κ B p65在兔粘连腹膜表达的影响

目的探讨TNF-α抗体对实验兔腹膜损伤粘连修复演变过程中核转录因子Sp1和NF-κB p65活化的影响。方法实验兔随机分3组:正常对照组(不做任何处理)、模型组(腹膜腔内注入生理盐水)、TNF-α抗体组(造模后后腹膜腔内注入TNF-α抗体),每组30只,共90只。建立实验兔腹膜回盲部手术动物模型,ELISA检测腹水Sp1、NF-κB p65的表达,Masson染色检测Sp1在腹膜的表达、免疫组化SP法检测NF-κB p65在腹膜的表达,监测腹膜粘连分级变化。结果 TNF-α抗体导致Sp1和NF-κB p65在损伤腹膜和腹水中的表达水平显著减低(0.01),并有效减轻腹膜粘连形成。结论 TNF-α抗体有效减轻腹膜粘连形成可能与其下调Sp1和NF-κB p65表达相关。     

核因子-κB/IκB信号通路介导实验性肾炎肾组织中单核细胞趋化蛋白-1表达

目的　探讨核因子 κB(NF κB) /IκB信号通路在肾毒血清性肾炎肾组织单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)表达中的作用。方法　肾毒血清肾炎应用兔抗鼠肾小球基底膜肾毒血清制备。应用凝胶电泳迁移率 (EMSA)和Western印迹检测肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF κB活化、p6 5亚基核转位以及IκBα和IκBβ的降解 ;采用免疫组织化学及核酸酶保护法检测肾组织中MCP 1表达 ,并分析其与NF κB活化的关系。结果　模型组肾小球及肾小管中MCP 1表达分别为 (2 4 37± 7 0 6 )个 /肾小球横切面和 (5 4 78± 11 4 9) % ,较正常对照组显著升高 (P <0 0 1) ;肾组织中NF κB活化显著增强 ,p6 5由胞质转移至胞核 ,胞质内IκBα和IκBβ降解明显增加 ;NF κB活化与MCP 1表达呈显著正相关。 结论　NF κB/IκB信号通路介导肾小球肾炎肾组织中MCP 1表达。     

妊娠滋养细胞疾病中NF-κBp65和IκBα的表达及临床意义

目的:分析核转录因子κB p65(NF-κBp65)和核转录因子κB抑制蛋白α(IκBα)在正常早孕绒毛及妊娠滋养细胞疾病中表达的差异性,以及与妊娠滋养细胞肿瘤(GTN)(包括侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌)患者年龄及临床分期的关系。并探讨两者在妊娠滋养细胞肿瘤组织中的相关性。方法:采用免疫组化方法(SP法)检测20例正常早孕绒毛组织、30例葡萄胎组织、13例侵蚀性葡萄胎和15例绒毛膜癌中NF-κBp65和IκBα的表达情况。结果:NF-κBp65在正常早孕绒毛组与侵蚀性葡萄胎组、正常早孕绒毛组与绒毛膜癌组、葡萄胎组与侵蚀性葡萄胎组、葡萄胎组与绒毛膜癌组之间阳性表达率比较差异均具有统计学意义(P=0.013,0.018,P=0.026,0.035,P<0.05);IκBα在正常早孕绒毛组与侵蚀性葡萄胎组、正常早孕绒毛组与绒毛膜癌组、葡萄胎组与侵蚀性葡萄胎组、葡萄胎组与绒毛膜癌组之间阳性表达率比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。NF-κBp65和IκBα在GTN中的表达与临床分期有关(P=0.043,0.042,P<0.05),与患者年龄无关。NF-κBp65与IκBα在GTN中呈负相关(r=-0.403,P=0.034,P<0.05)。结论:NF-κBp65上调、IκBα的下降或缺失可能与滋养细胞肿瘤的发生发展以及侵袭、转移有关,NF-κBp65、IκBα两者在妊娠滋养细胞肿瘤组织中的表达呈负相关。     

厄贝沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用及对ICAM-1与VCAM-1表达的影响

目的:从影响细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达的角度,探讨厄贝沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能机制。方法:Wistar大鼠24只,随机分为对照组、模型组、药物组,每组8只。链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,药物组大鼠每日给予厄贝沙坦150mg/kg灌胃,持续8周。8周后抽血测空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr);测定24h尿微量白蛋白(mAlb),计算尿白蛋白排泄率(UAER)。处死Wistar大鼠,取其肾脏,计算肾脏肥大指数,用免疫组化方法检测ICAM-1,蛋白质印迹法(Westernblot)检测VCAM-1蛋白表达水平。结果:模型组和药物组的FBG、HbA1c、BUN、Scr均高于对照组,上述指标在模型组与药物组之间无统计学差异。模型组UAER高于对照组,而药物组则低于模型组。药物组ICAM-1与VCAM-1蛋白表达量低于模型组。结论:厄贝沙坦对实验性糖尿病大鼠的肾脏有保护作用,其机制可能是通过抑制ICAM-1与VCAM-1在肾脏的表达来实现的。     

胎盘部位滋养细胞肿瘤中NF-κBp65、CD44v6、Kiss-1的表达及相关性

目的 探讨细胞核因子-κBp65(NF-κBp65)、CD44v6、Kiss-1在胎盘部位滋养细胞肿瘤中的表达及相关性.方法 采用免疫组化PV 6000两步法检测20例正常早孕绒毛、15例葡萄胎、15例绒癌、10例胎盘部位滋养细胞肿瘤(placent site trophoblastic tumor,PSTT)中NF-κBp65、CD44v6、Kiss-1的表达情况及相关性.结果 NF-κBp65、CD44v6分别在正常早孕绒毛、葡萄胎、PSTT、绒癌中表达呈升高趋势,差异有统计学意义(P1＜0.01、P2＜0.01).NF-κBp65、CD44v6在PSTT中表达高于正常早孕绒毛和葡萄胎中的表达,差异有统计学意义(P1＜0.01、P2＜0.01、P3＜0.01、P4＜0.05);NF-κBp65在PSTT和绒癌中表达差异有统计学意义(P＜0.01);CD44v6在PSTT和绒癌中表达差异无统计学意义(P>0.05).Kiss-1在正常早孕绒毛、葡萄胎、PSTT、绒癌中表达呈下降趋势,差异有统计学意义(P＜0.01).Kiss-1在PSTT中表达低于正常早孕绒毛和葡萄胎中的表达,差异有统计学意义(P1＜0.01,P2＜0.01);在PSTT和绒癌中表达差异无统计学意义(P>0.05).NF-κBp65和CD44v6呈正相关(r=0.356,P=0.005)和Kiss-1呈负相关(r=-0.527,P=0.000);CD44v6和Kiss-1呈负相关(r=-0.346,P=0.007).结论 NF-κBp65、CD44v6的高表达和Kiss-1的低表达可能在胎盘部位滋养细胞肿瘤的浸润转移中起重要作用.     

LRRFIP1基因干扰对脂多糖诱导的支气管上皮细胞炎症、氧化应激和细胞凋亡的影响

目的探讨富亮氨酸重复序列相互作用蛋白1(LRRFIP1)基因对脂多糖(LPS)诱导的支气管上皮细胞炎症、氧化应激和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法使用LPS处理人支气管上皮细胞株16HBE,并利用Lipofectamine 2000试剂将siLRRFIP1转染到16HBE细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LRRFIP1 mRNA表达;免疫印迹试验(Western blot)检测LRRFIP1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、p65、磷酸化p65(p-p65)、IκBα和IκBα和磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白表达;噻唑蓝(MTT)检测细胞活力;试剂盒检测细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)水平和炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌;流式细胞术检测细胞凋亡。结果LPS诱导的16HBE细胞中L...     

子痫前期胎盘低氧诱导因子1α的表达及其与血清胎盘生长因子的相关性

目的检测正常晚期妊娠和子痫前期患者胎盘低氧诱导因子1α(H IF-1α)和血清胎盘生长因子(P lGF)的水平,探讨它们的相关性及与子痫前期发病的关系。方法免疫组织化学SP法检测40例子痫前期患者及20例正常晚期妊娠胎盘H IF-1α表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清P lGF的水平。结果轻度子痫前期组与重度子痫前期组胎盘H IF-1α表达高于正常晚期妊娠组,两组血清P lGF低于正常晚期妊娠组,差异均有显著性意义(P<0.05)。胎盘H IF-1α的表达与血清P lGF水平呈负相关关系。结论子痫前期患者血清P lGF水平依赖于胎盘H IF-1α表达,两者可能与子痫前期的发病有一定关系。     

大鼠脑出血后的细胞凋亡及其与NF-κB和I-κBα蛋白表达的关系

目的:探讨大鼠脑出血(ICH)后细胞凋亡及其与NF-κB和I-κBα蛋白表达的关系和演变规律,本实验用Ⅶ胶原酶联合肝素注入大鼠右侧脑纹状体制备脑出血模型。方法:TUNEL染色(末端脱氧核糖核苷转移酶介导的dUTP缺口末端标记法)观察细胞凋亡的变化;免疫组化SABC法检测NF-κB和I-κBα蛋白的表达;Western Blot技术检测NF-κB和I-κBα蛋白相对光密度值。结果:(1)ICH组TUNEL阳性细胞于出血后12h可检测到,3d达高峰,7d仍有较高表达(P0.01);(2)ICH组I-κBα和NF-κB蛋白免疫阳性细胞分别于出血12h、3d达高峰,7d仍高于假手术组和正常对照组(P0.01);(3)Western Blot结果显示NF-κB相对光密度比值在ICH3d出血侧达高峰,I-κBα蛋白相对光密度比值在ICH组ICH侧12h达高峰,7d时仍明显高于正常对照组(P0.05)。结论:ICH后存在细胞凋亡;NF-κB和I-κBα参与了ICH所致的细胞凋亡。     

氟伐他汀单用及与安体舒通联用对兔相关炎症因子及基质金属蛋白酶-9的影响

目的探讨他汀类药物单用及联用醛固酮拮抗剂安体舒通对兔颈动脉组织ICAM-1、VCAM-1及MMP-9表达的影响。方法高脂饲养兔建立动物模型。96只新西兰兔分为对照组、高脂饮食组、氟伐他汀处理组（氟伐他汀组）以及氟伐他汀与安体舒通联合处理组（联合处理组）,每组24只。用免疫组织化学法检测ICAM-1、VCAM-1、MMP-9表达量。结果氟伐他汀组和联合处理组ICAM-1、VCAM-1及MMP-9的表达随时间的增加而逐渐降低（P〈0.05）,且在治疗8周和12周时降低较为显著（P〈0.05）。结论随着高脂饲养时间的延长,动脉组织中ICAM-1、VCAM-1及MMP-9表达量增加;他汀类药物可降低ICAM-1、VCAM-1及MMP-9表达量,延缓动脉粥样硬化形成及易损组织产生,联合醛固酮拮抗剂时此作用增强。     

Expression of Intercellular Adhesion Molecule-1 (ICAM-1) on Cultured Human Endometrial Stromal Cells and Its Role in the Interaction With Natural Killers

PROBLEM: Recent evidence emphasizes the role of natural killer cells (NKs) as potential effectors of peritoneal immune surveillance directed against the outgrowth of endometrial cells, refluxed with menstrual debris, in ectopic sites. This NK-mediated cytotoxicity toward autologous endometrial antigens seems to be significantly decreased in endometriosis patients. METHOD: We set up experiments to clarify which molecules are involved in NK-endome-trial cell interaction. In particular, we evaluated the surface expression and functional activity of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), a cell surface glycoprotein that has been identified as one of the ligands for lymphocyte function-associated antigen-1 (LFA-1), present on almost all leucocyte cell types. Immunofluorescence flow cytometry was used to assess ICAM-1 expression on resting and IL 1β-activated endometrial stromal cells in culture. Dermal fibroblasts were used as control cells. Cytotoxicity and binding assays by ⁵¹Cr release in presence and absence of a specific monoclonal antibody (mAb) against ICAM-1 were then performed in order to determine the effect of this molecule on NK-mediated cytotoxic and binding activity toward endometrial stromal cells. RESULTS: The results of this study indicated that ICAM-1 expression on endometrial stromal cells seems to be constitutively higher than on dermal fibroblasts and can be up-regulated upon exposure to IL 1β. Furthermore, a mAb against ICAM-1 strongly inhibits the binding but not the cytotoxicity of NKs toward endometrial cells. No difference in the expression of this molecule was observed throughout the cycle. CONCLUSIONS: The presence of ICAM-1 on human endometrium might relate to the action of the immunocompetent cells in human specific reproductive events.     

Adhesion molecules (E-selectin, intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1)) in sera from patients with Staphylococcus aureus bacteraemia with or without endocarditis

The aim of this prospective study was to evaluate if patients with endocarditis display a more extensive endothelial activation than those with bacteraemia but without endocarditis. Sixty-five patients with blood culture-verified Staphylococcus aureus bacteraemia were included and serum samples collected on admission were analysed by enzyme immunoassays. Elevated serum concentrations of adhesion molecules were found in most of the patients with S. aureus bacteraemia. Patients with endocarditis (n = 15) showed significantly higher serum E-selectin (median 156 ng/ml) and VCAM-1 (median 1745 ng/ml) concentrations compared with those with S. aureus bacteraemia but without endocarditis (80 ng/ml and 1172 ng/ml, respectively; P = 0.01 and P = 0.003). No significant difference was found between the groups concerning ICAM-1 (median 451 ng/ml versus 522 ng/ml). In addition, serum tumour necrosis factor-alpha (TNF-alpha) concentrations were significantly correlated (P < 0.002) to serum levels of E-selectin, ICAM-1 and VCAM-1.     

细胞因子调节人肝癌细胞ICAM-1分子的表达及其对CD3AK杀伤功能的影响

应用基因重组人干扰素α（IFN-α）、干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子（TNF）体外处理人肝癌细胞系H-7402,ABC-CELISA法检测各处理组和对照组细胞表面细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的表达水平,用 LDH释放法观察CD3单克隆抗体活化的杀伤细胞（CD3AK）对各处理条件下H-7402细胞的杀伤活性。结果表明:经TNF,IFN-α处理的肿瘤细胞ICAM-1表达水平较对照组显著增高,同时对CD3AK细胞的杀伤敏感性亦显著增强,IFN-γ虽能够提高靶细胞ICAM-1分子的表达,但CD3AK的杀伤活性并未因此增强。抗ICAM-1和抗白细胞功能相关抗原LFA-1单抗能够有效地降低CD3AK对靶细胞的杀伤作用,并且能够阻断IFN-α、TNF对CD3AK细胞杀伤效应的促进作用。提示ICAM-1/LFA-1参与了CD3AK粘附杀伤肿瘤细胞过程,TNF、IFN-α的促杀伤效应与肿瘤细胞表面ICAM-1分子的表达水平升高有关。     

手足口病合并脑炎患儿病情进展危险因素的分析及患儿血清、脑脊液中 VEGF和 VCAM-1的水平测定

目的研究血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor ,VEGF）和血管细胞间黏附分子-1（vascular intercellular adhesion molecule-1,VCAM-1）在手足口病（hand foot and mouth dis-ease,HFMD）合并脑炎患儿血清与脑脊液中的水平及变化规律,探讨VEGF和VCAM-1在手足口病合并脑炎中的意义及患儿手足口病合并脑炎疾病进展的危险因素。方法以92例手足口病患儿为研究对象,并将其分为A（手足口病无合并脑炎普通组）、B（手足口病合并脑炎重型组）、C（手足口病合并脑炎危重组）、D（手足口病合并脑炎恢复组）4组。采用双抗体夹心ELISA法检测血清及脑脊液VEGF与VCAM-1水平。采用多因素logistic回归对手足口病普通型与重型、重型与危重型之间具有统计学意义的项目进行手足口病合并脑炎病情进展危险因素分析。结果以SPSS16．0统计软件进行统计学处理,比较结果以P＜0．05为差异有统计学意义。结果血清与脑脊液VEGF、VCAM-1水平在A、B、C、D4组间相比较差异均有统计学意义,且 A组与B组、A组与C组、B组与D组、C组与D组之间血清与脑脊液VEGF、VCAM-1水平差异亦均有统计学意义,而A组与D组、B组与C组之间血清、脑脊液VEGF、VCAM-1比较差别均无统计学意义。此外手足口病普通型与重型之间具有统计学意义的项目还有热程、肢体抖动、脑脊液白细胞（ WBC）计数、脑脊液蛋白、EV71型IgM。重型与危重型之间具有统计学意义的项目有呼吸次数、心率、脑脊液WBC计数。经多因素logistic回归分析显示,手足口病无合并脑炎向合并脑炎重型进展的危险因素是肢体抖动、脑脊液蛋白、血清VEGF及VCAM-1,P值分别是0．071、0．019、0．020、0．025,OR值分别为147．629、26．572、5．958、6．345;手足口病合并脑炎重型向危重型进展危险因素是心率加快,P值是0．001,OR值为2．69。结论（1）手足口病合并脑炎患儿血清、脑脊液VEGF、VCAM-1均呈高浓度表达,可为手足口病是否合并脑炎的鉴别诊断的辅助指标,且两者均一定程度上反映了疾病的严重程度及预后;（2）肢体抖动、脑脊液蛋白、血清VEGF及VCAM-1有助于早期识别重型患儿,而心率加快则有助于早期识别危重患儿,早期及时治疗,防止病情恶化。     

丁苯酞对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化及主动脉壁VCAM-1表达的影响

目的:观察丁苯酞对ApoE~(-/-)小鼠主动脉粥样斑块形成及血管细胞黏附分子(VCAM)-1表达影响,以探讨其抗动脉粥样硬化的可能机制,为其临床应用提供理论依据和指导意义。方法:90只6周龄雄性Apo~(E-/-)小鼠随机分为3组,高脂饲喂建立动脉粥样硬化模型,同时灌胃给予丁苯酞100及200 mg·kg~(-1)·d~(-1)进行干预,模型组给予等量生理盐水灌胃。30只同龄雄性野生型C57BL/6J小鼠给予普通饲料喂养作为正常对照组。各组在18周龄及30周龄时分别处死15只动物。实验过程中记录各组小鼠体重变化及进食进水量。采用全自动生化仪检测18周龄及30周龄各组小鼠血脂水平;ELISA法检测血清ox-LDL、CRP、TNF-α及IL-6含量;取主动脉根部石蜡包埋切片行HE染色进行病理学检查,计算斑块相对面积;取胸主动脉进行real-time PCR检测VCAM-1的mRNA含量,同时用Western blot法检测VCAM-1的蛋白水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠18周龄及30周龄时体重、血脂及炎症因子均显著升高,且均发生动脉粥样硬化斑块,且VCAM-1的mRNA及蛋白表达显著增加;丁苯酞对模型小鼠体重及进食进水量无影响;但丁苯酞100和200 mg·kg~(-1)·d~(-1)剂量组血脂水平显著降低;血清ox-LDL、CRP、TNF-α及IL-6含量亦显著减少;主动脉根部粥样斑块面积显著减小;胸主动脉VCAM-1的mRNA水平及蛋白表达均显著下调。结论:丁苯酞可延缓高脂饮食诱导的Apo~(E-/-)小鼠动脉粥样硬化的发生,其机制与其同时降低血脂及抑制炎症的发生,进而降低主动脉VCAM-1有关。     

乙型肝炎患者血清sICAM-1、sVCAM-1含量的检测及其意义

目的：通过观察乙型肝炎患者血清中sICAM-1和sVCAM-1的水平及其与ALT、AST相关性，探讨Ⅰ型超敏反应与乙型肝炎发病机制的关系。方法：应用酶联免疫吸附实验，检测45例乙型肝炎患者及15例对照组血清sICAM-1和sVCAM-1水平；应用全自动生化分析仪检测患者血清ALT和AST水平，并观察与sICAM-1和sVCAM-1的相关性。结果：①7例急性肝炎患者血清中sICAM-1和sVCAM-1含量明显高于正常对照组；②38例慢性肝炎患者血清中sICAM-1和sVCAM-1含量也明显高于正常对照组；③13例中度慢性肝炎患者的sICAM-1和sVCAM-1含量显著高于16例轻度慢性肝炎患者；④9例重度慢性肝炎患者的sICAM-1和sVCAM-1含量也明显高于轻度组和中度组：⑤sICAM．1水平与血清内ALT、AST含量呈显著正相关；⑥sVCAM-1水平与血清ALT、AST含量也呈显著正相关。总之，在以上几组中，急性乙型肝炎组的sICAM-1和sVCAM-1的升高最显著，并依次为慢性肝炎重度组、中度组和轻度组。结论：①急、慢性乙型肝炎患者血清中sICAM-1和sVCAM-1水平可反映肝损害程度；②检测急、慢性乙型肝炎患者血清sICAM-1和sVCAM-1水平，对判断患者的病情和预后有一定的参考价值；③作为Ⅰ型超敏反应性炎症的重要指标，sICAM-1和sVCAM-1可能参与了，乙型肝炎的发病和肝细胞的免疫损伤过程。     

血清MCP-1、sTREM-1、sICAM-1在肺炎患儿表达水平及其与病情严重程度的相关性分析

目的探讨血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、可溶性髓细胞触发体-1(sTREM-1)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)在肺炎患儿表达水平及其与病情严重程度的相关性。方法将我院接诊的108例肺炎患儿纳入肺炎组,分为重症肺炎的重症组(47例)和轻中度肺炎的轻中度组(61例);根据急性生理和慢性健康状况评分(APACHEⅡ),分为高危组(≥20分,32例)、中危组(10~19分,45例)、低危组(<10分,31例),并选取65例健康儿童为对照组,比较各组血清MCP-1、sTREM-1、sICAM-1水平,并分析其与APACHEⅡ评分的相关性。结果在血清MCP-1、sTREM-1、sICAM-1水平比较中,重症组和轻中度组明显高于对照组(P<0.05),重症组明显高于轻中度组(P<0.05),高、中危组明显高于低危组(P<0.05),高危组明显高于中危组(P<0.05),细菌性肺炎组、支原体肺炎组明显高于病毒性肺炎组(P<0.05),细菌性肺炎组明显高于支原体肺炎组(P<0.05);ROC曲线分析显示,sTREM-1的AUC最大,MCP-1的AUC最小;血清MCP-1、sTREM-1、sICAM-1水平与APACHEⅡ评分均呈正相关(P<0.05)。结论血清MCP-1、sTREM-1、sICAM-1水平可反映肺炎患儿的病情严重程度,可作为病情评估的重要指标。     

人细胞间黏附分子-1的真核细胞表达与鉴定

目的 构建人细胞间黏附分子-1(ICAM-1)真核表达载体PcDNA3.1(-)-ICAM-1,并在真核细胞COS-7中表达.方法 设计特异性引物,用PCR方法扩增ICAM-1全编码区基因片段,将其连接人真核表达载体pcDNA3.1(-),并通过酶切进行鉴定.用脂质体转染法将真核表达载体pcDNA3.1(-)-ICAM-1转染COS-7细胞,通过免疫荧光和Western印迹分析人ICAM-1蛋白在COS-7细胞中的表达情况.结果 PCR扩增得到人ICAM-1的cDNA片段大小为1800 bp,重组质粒经酶切鉴定和DNA序列分析确定得到真核表达载体peDNA3.1(-)-ICAM-1.荧光显微镜下可见转染重组质粒的COS-7细胞膜上存在荧光分布,而转染空质粒的细胞未见荧光分布.Western印迹检测发现转染重组质粒的细胞存在外源性的人ICAM-1表达,而转染空质粒的则未见ICAM-1表达.结论 成功构建了人ICAM-1真核表达载体,ICAM-1高效表达在转染的真核细胞COS-7表面,为进一步建立稳定表达ICAM-1的COS-7细胞株以及研究ICAM-1及其受体的生物学功能提供了条件.