胰岛素瘤抑癌基因p27的表达及其与CpG岛甲基化表型的关系

目的 探讨胰岛素瘤抑癌基因p27的表达及其与CpG岛甲基化表型(CpG island methylation phenotype,CIMP)间的关系.方法 用免疫组化方法检测27例胰岛素瘤组织及11例瘤旁正常胰腺组织中p27的表达.用甲基化特异性PCR (MSP)方法检测这些组织中p16、MLH1、RAR-β、MGMT、THBS1基因的甲基化状态.分析p27表达、CIMP与临床病理参数间的相关性.结果 胰岛素瘤组织p27蛋白表达阳性率较瘤旁胰腺组织显著降低(48％比91％,P=0.008).胰岛素瘤组织的高CIMP发生率为33％(9/27),瘤旁正常胰腺组织的高CIMP发生率为18％(2/11),肿瘤组织为正常胰腺组织的2倍,但差异无统计学意义(P =0.350).胰岛素瘤的MGMT甲基化与p16的甲基化呈显著负相关(P=0.004),胰岛素瘤的p27表达与高CIMP呈负相关的趋势,但差异无统计学意义(P =0.420);p27的表达和CIMP的发生与胰岛素瘤的临床病理参数均无显著相关性.结论 胰岛素瘤p27表达下调,并存在高CIMP,提示p27的失活和多基因的表观遗传学异常在该肿瘤的发生过程中可能起一定作用.     

结直肠癌CpG岛甲基化表型的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是常见的恶性肿瘤之一,是由遗传学和表观遗传学改变逐渐积累导致的.随着一类被称为CpG岛甲基化表型(CpG island methylator phenotype,CIMP)的CRC被发现,表观遗传学修饰在CRC发病中的作用就受到了越来越多的重视.CIMP是一类基因组中有高比例的基因启动子区发生了DNA高甲基化的CRC.目前研究显示CIMP具有多个分子水平的特征,而且CIMP与多个临床特征显著相关,但是还不清楚CIMP的具体致病原因和发病机制.CIMP在治疗上的预后和反应与其他CRC存在很大差异,但是目前没有被广泛认可的鉴定CIMP的生物标记,从而阻止了CIMP用于指导临床上CRC的个体化治疗.     

人胃癌Runx3基因CpG岛甲基化的关键位点和演进

目的:研究人胃癌Runx3基因CpG岛甲基化的关键位点和演进.方法:应用MSP法和Western blot法分别检测26例人胃癌和相应的癌旁正常组织标本Runx3基因CpG岛从5'区向转录起始点方向连续6个位点的甲基化状态和Runx3蛋白的表达.结果:根据MSP的结果计算出上述连续6个位点的甲基化阳性率,结果随着向转录起始点方向的演进,各位点甲基化的阳性率逐渐降低,胃癌组和癌旁组从第3位点开始出现差异,至第5和第6位点差异显著(P＜0.05);按照胃癌分化程度分组,低分化组与高分化组在3-6位点差异显著(P＜0.05).胃癌组与癌旁组Runx3蛋白表达水平(0.499±0.106 vs 0.721±0.080)以及低分化组与高分化组(0.437±0.053 vs 0.617±0.073)Runx3蛋白表达水平均存在显著差异(P＜0.01).结论:人胃癌Runx3基因CpG岛的甲基化从5'区向转录起始点方向演进,甲基化的演进与肿瘤的分化程度有关;转录起始点部位可能为Runx3基因甲基化的关键位点.     

胃癌患者TIMP3基因启动子区CpG岛甲基化状态及蛋白表达

目的探讨胃癌组织中TIMP3基因启动子区CpG岛甲基化及蛋白的表达与胃癌生物学行为的关系,并分析TIMP3基因启动子区CpG岛甲基化与其蛋白表达的相关性。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)技术和免疫组织化学SP法检测45例患者的胃癌组织、正常胃黏膜组织中TIMP3基因启动子区CpG岛甲基化情况及蛋白的表达。结果 TIMP3基因启动子区CpG岛在胃癌及正常组织中的甲基化阳性率分别为31.1%和0(P<0.05);TIMP3蛋白在胃癌及正常组织中的阳性表达率分别为46.7%和90.5%(P<0.05);TIMP3基因启动子区CpG岛甲基化及蛋白的表达分别与胃癌的分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。TIMP3基因启动子甲基化与蛋白表达呈明显的负相关(P<0.05)。结论 TIMP3基因启动子区CpG岛的异常甲基化是引起蛋白表达缺失的主要原因,TIMP3基因启动子区CpG岛的异常甲基化与胃癌的发生发展有关。     

肝癌细胞p15基因CpG岛甲基化研究

目的通过检测肝癌细胞株HepG2的抑癌基因p15基因启动子区CpG岛的甲基化状态,探讨其与肿瘤发生的可能相关性。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)技术,对人肝癌细胞株HepG2的p15基因启动子区域CpG岛的甲基化状态进行检测,以人淋巴瘤细胞株Raji为阳性对照,以正常人外周血单核细胞(PBMC)和肝细胞为阴性对照。结果肝癌细胞HepG2中p15基因启动子区域CpG岛甲基化和非甲基化检测均呈阳性,正常人外周血单核细胞和肝细胞甲基化检测阴性。结论肝癌细胞株HepG2抑癌基因p15基因CpG岛存在高度甲基化,可能与肝癌的发生相关。     

抑癌基因的甲基化水平与胃癌的关系

胃癌是一种严重威胁人类健康的恶性肿瘤，国内外大量资料显示，胃癌的发生与其他恶性肿瘤一样是多基因多阶段变异累积形成的病理过程，这些基因主要是促进肿瘤发生的癌基因和抑制肿瘤发生的抑癌基因，以及维持基因组稳定的DNA错配修复基因等。抑癌基因功能的丢失可通过多种途径，除基因突变和杂合性丢失以外还与其启动子发生甲基化修饰有关。     

胃癌中抑癌基因PTEN甲基化状态的检测

胃癌发生涉及多种抑癌基因、癌基因的异常表达。PTEN作为一种广泛的抑癌基因，在多种肿瘤中存在失活现象。其失活原因除突变、缺失外，DNA异常甲基化可能是其失活的第三条途径。本研究采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测胃癌细胞和组织中PTEN基因甲基化状态，探讨其甲基化改变特点与临床病理特征的关系，为胃癌的发生机制提供分子生物学依据。     

肺癌细胞株抑癌基因启动子CpG岛甲基化与转录的关系

基因特别是抑癌基因肩动子区CpG岛甲基化与非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展关系的研究正受到越来越多的重视。本研究用甲基化特异性的PCR(MSP)测NSCLC细胞株中12个肿瘤相关基因的甲基化发生情况，并观察甲基化与mRNA转录之间的关系，以进一步阐明抑癌基因甲基化在NSCLC中的作用。     

胰腺癌组织SPARC基因CpG岛甲基化状态及临床意义

目的 检测胰腺癌SPARC基因CpG岛的甲基化状态及其与临床病理参数的关系.方法 收集17例胰腺癌及相应癌旁组织、6例CP和6例正常胰腺组织以及6例健康成人外周血液标本,抽提DNA,进行亚硫酸氢盐修饰,然后行甲基化特异性PCR,检测SPARC基因第一外显子区CpG岛的甲基化状态,并分析与肿瘤病理参数的关系.结果 健康人外周血白细胞DNA中SPARC基因第一外显子区CpG位点均无甲基化.正常胰腺、CP、胰腺癌及相应癌旁组织SPARC基因第2、3、4、5、6、7 CpG位点的甲基化率分别为61.6%、47.1%、37.5%、24.7%;第1,8、9、10、11、12 CpG位点的甲基化率分别为52.0%、28.7%、16.7%和0.胰腺癌SPARC基因甲基化率与正常胰腺、CP比较均差别非常显著(P＜0.001),与相应癌旁组织比较差别不显著.胰腺癌SPARC基因CpG岛甲基化与患者性别、年龄、危险诱因(如长期吸烟或饮酒、CP)、肿瘤大小、分化程度、TNM分期、淋巴结转移等均无显著差异.结论 胰腺癌SPARC基因第一外显子区CpG岛为高甲基化状态,可能为胰腺癌发生、发展的早期事件.     

基因CpG岛甲基化异常在胰腺癌诊断中的研究进展

基因诊断是胰腺癌早期诊断的重要手段.近年的大量研究表明[1-2],遗传学中基因启动子区甲基化程度对疾病的发生发展起重要作用,抑癌基因启动子区CpG岛甲基化使抑癌基因静默失活,从而促进肿瘤的发生发展.有些基因的甲基化改变发生在肿瘤早期组织形态学改变之前.因而有可能成为早期癌变的检测指标.本文就近年来在胰腺肿瘤研究中发现的甲基化异常基因做一综述.     

胃癌RASSF1A基因启动子CpG岛甲基化与DNMT1表达的意义

目的探讨RAS相关区域家族1A（RASSF1A）基因启动子CpG岛甲基化和DNA甲基转移酶1（DN-MT1）的表达与胃癌发生的关系。方法运用甲基化特异性聚合酶链反应和免疫组织化学方法检测胃癌癌旁正常组织和癌组织RASSF1A基因启动子CpG岛甲基化发生率及DNMT1的表达情况。结果癌旁正常组织中RASSF1A基因启动子CpG岛甲基化发生率、DNMT1阳性表达率显著低于相应癌组织（P均〈0.01）。RASSF1A启动子CpG岛甲基化患者DNMT1阳性表达率与非甲基化患者比较无统计学差异（P〉0.05）。结论RASSF1A基因启动子区CpG岛甲基化和DNMT1的高表达可能与胃癌发生有一定关系。     

胃癌Runx3基因的甲基化

目的:探讨Runx3基因甲基化与胃癌的关系方法:采用MSP法检测38例配对胃癌组织、癌旁正常组织和转移淋巴结中Runx3基因甲基化的情况.结果:73.7%的胃癌组织中存在Runx3基因异常甲基化,而相应的癌旁正常组织和转移淋巴结中该基因的甲基化率分别为21.1%和65.8%.癌组织和转移淋巴结中Runx3基因甲基化的发生率显著高于癌旁正常组织(P<0.05).胃癌组织中,该基因甲基化与肿瘤大小显著相关(P =0.021),但与肿瘤大体类型、分化程度、浸润深度及生长方式等临床病理特征无关.结论:Runx3基因异常甲基化是胃癌发生、发展过程中的频繁事件,通过检测胃黏膜组织及淋巴结中该基因的甲基化情况,可能会对胃癌的早期诊断及判断淋巴结的微转移提供一定的参考价值.     

胃癌中抑癌基因PTEN研究进展

本文综述了抑癌基因PTEN在胃癌中的最新研究进展。阐述了其与抑癌功能相关的主要结构特点,胃癌中PTFN的基因改变和蛋白异常表达情况及胃癌中PTEN基因的启动子异常甲基化情况。     

胃癌中抑癌基因PTEN研究进展

本综述了抑癌基因PTEN在胃癌中的最新研究进展。阐述了其与抑癌功能相关的主要结构特点，胃癌中PTEN的基因改变和蛋白异常表达情况及胃癌中PTEN基因的启动子异常甲基化情况。     

DNA甲基化与RUNX3抑癌基因在肿瘤中的研究进展

人RUNT相关转录因子3(RUNX3)是近年来发现的一个新的抑癌基因,因其低表达或不表达在多种人类肿瘤的发生发展过程中起着重要作用。启动子区过度甲基化是基因失活的重要原因。此文现对RUNX3的甲基化与肿瘤的相关性研究进展予以综述。     

食管鳞癌细胞株金属硫蛋白3基因CpG岛超甲基化的临床意义

目的 探讨金属硫蛋白3(MT-3)基因CpG岛超甲基化与食管鳞状细胞癌的关系.方法选取TE-1、TE-13、TTN和ECA-109四种食管鳞癌细胞株,用甲基化特异性聚合酶链反应和逆转录聚合酶链反应技术,在5-氮2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后,对各细胞株的MT3基因CpG岛超甲基化及mRNA表达进行比较.结果 四种食管鳞状细胞癌细胞株的MT3基因均存在不同程度的CpG岛超甲基化.5-aza-CdR处理后超甲基化状态解除,mRNA表达明显提高(P均<0.05).结论 食管鳞状细胞癌细胞株中MT3基因CpG岛超甲基化可抑制其mR-NA表达:超甲基化解除后MT3基因的mRNA表达相应升高.     

胃癌中环氧合酶-2基因5′CpG岛去甲基化与蛋白表达的关系

抑癌基因CpG岛甲基化可导致基因转录沉默 (transcrip tionsilencing) ,同时CpG岛去甲基化往往伴随癌基因的转录活化[1,2 ] 。环氧合酶 2 (COX 2 )基因是诱导型基因 ,在正常组织中无表达 ,在肿瘤中过度表达 ;COX 2基因 5′端存在CpG岛 ,内有多个转录因子结合位点。Song等[3 ] 发现在胃癌细胞株中 ,5′CpG岛甲基化可抑制COX 2转录。因此 ,我们通过研究胃癌组织中COX 2基因转录起始点上下游CpG岛甲基化状态与COX 2蛋白表达的关系 ,揭示 5′CpG岛去甲基化在COX 2蛋白表达中的作用。　　一、材料与方法1.组织标本 :所有标本均为我…     

胰液中人Hedgehog相互作用蛋白基因CpG岛甲基化状态及意义

结果 胰腺癌、CP及对照组患者胰液中HHIP基因CpG岛甲基化阳性率分别为54.8%(17/31)、2.8%(1/36)和6.7%(1/15),胰腺癌组的甲基化阳性率显著高于其他两组(P＜0.01).测序结果显示胰腺癌的HHIP基因有8个CpG位点发生甲基化,而CP及对照组的HHIP基因CpG位点未发生甲基化.结论 胰腺癌患者胰液中的HHIP基因CpG岛发生高甲基化,检测胰液中HHIP基因甲基化状态可能作为胰腺癌诊断的靶点.