UHPLC-MS/MS同时测定参桂鹿茸丸中5种人参皂苷的含量

目的 建立同时测定参桂鹿茸丸中5种人参皂苷含量的UHPLC-MS/MS方法。方法 选用Agilent C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),柱温25 ℃,以甲醇-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^–1,ESI离子源,采用正离子多反应监测(MRM)监测模式。结果 人参皂苷Re、Rg₁、Rf、Rb₁以及拟人参皂苷F₁₁浓度范围内线性良好,r²均>0.999 6,加样回收率为96.3%~104.9%,RSD(n=9)均<3.0%,仪器精密度、稳定性以及重复性的RSD均<3.0%。结论 该方法简单,准确,重复性好,可用于参桂鹿茸丸的质量控制和评价。     

基于红参掺伪检查的大活络丸质量控制研究

目的：建立大活络丸中红参掺伪西洋参检查方法,以期更好地监测大活络丸的质量。方法：采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法,以西洋参特征成分拟人参皂苷F11为检测指标,采用C18（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）色谱柱,以乙腈-10 mmol·L^-1甲酸铵溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,柱温40 ℃;电喷雾负离子扫描,多反应监测模式。结果：制剂基质效应不明显;拟人参皂苷F11在0.0117~1.167 μg·mL^-1范围内线性关系良好（R²＞0.9990）,并与不同掺伪比例呈线性相关;平均回收率为95.2%,RSD=1.73%（n=6）。96批样品中,37批检出拟人参皂苷F11,5批超过拟定限度,涉及1家企业,不合格率5.2%。结论：本研究较全面地开展了大活络丸中红参掺伪西洋参检查方法的研制工作,且方法灵敏、准确,适用于大活络丸的质量监测。     

HPLC-DAD法测定参桂鹿茸丸中7个成分的含量和转移率研究

目的 建立同时测定参桂鹿茸丸中马钱苷、黄芩苷、莫诺苷、橙皮苷、川续断皂苷Ⅵ、芍药苷、龙胆苦苷含量的方法,并考察各成分在药材至制剂过程中的转移率。方法 以高效液相色谱法,色谱柱为Ultimate XB-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相：乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B),梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,切换波长测定。结果 7个成分分离度良好,马钱苷、黄芩苷、莫诺苷、橙皮苷、川续断皂苷Ⅵ、芍药苷、龙胆苦苷进样量分别在0.0612～0.4896μg(r=0.9995);0.2839～2.2709μg(r=0.9996);0.0434～0.3469μg(r=0.9993);0.6254～5.0034μg(r=0.9997);0.0558～0.4466μg(r=0.9992);0.1208～0.9665μg(r=0.9993);0.0690～0.5519μg(r=0.9998)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)为96.93%～101.1%(RSD<2%)。从药材至制剂中,马钱苷、黄芩苷、莫诺苷、橙皮苷、...     

参桂鹿茸丸质量标准的拟定与提高

目的:建立参桂鹿茸丸质量标准。方法:采用显微特征法对杜仲、茯苓、酸枣仁、红花、香附、黄芩、砂仁等进行鉴别;采用薄层色谱法鉴别地黄;用HPLC法测定芍药苷的含量,色谱柱为Hypersil C18(BDS)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(11∶89),流速为0.9 ml.min-1,检测波长为230 nm,柱温为30℃。结果:显微特征明显;薄层色谱斑点清晰;芍药苷在0.049～9.712μg范围内具有良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为97.73%,RSD=2.2%(n=9)。结论:本法简便、可靠、准确,可用于该制剂的质量控制。     

基于HPLC-MS/MS法的脑灵素制剂中人参掺伪检查研究

目的 建立脑灵素制剂中人参掺伪检测方法。方法 高效液相色谱法-串联电喷雾三重四级杆质谱法（HPLC-MS/MS）,采用Aglient ZORBAX EclipsePlus C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 µm）,以乙腈-水为流动相,流速为0.35 mL·min^-1;柱温为40 ℃,进样量为5 µL,多反应监测（MRM）模式。结果 66批脑灵素制剂样品中,有36批样品检出拟人参皂苷F11成分,检出率为54.5%。结论 脑灵素制剂中存在人参掺伪使用的现象,本方法准确可靠,可为脑灵素制剂中人参质量控制提供参考。     

应用HPLC／ELSD法测定西洋参中拟人参皂苷F11的含量

目的：测定西洋参中拟人参皂苷Ｆ１１的含量。方法：应用高效液相色谱法－蒸发光散射检测器（ＨＰＬＣ／ＥＬＳＤ）,ＰｌａｔｉｎｕｍＣ１８色谱柱,乙腈－水（３０∶７０）为流动相,并优化选择了蒸发光散射检测器参数,测定了西洋参中拟人参皂苷Ｆ１１的含量。结果：拟人参皂苷Ｆ１１在２１９２～１０９６μｇ范围内呈良好线性（ｒ＝０９９９２,ｎ＝５）,回收率为（１０２６±４１）％。结论：本方法精密度、重现性良好,适用于人参皂苷类成分的分析测定。     

薄层扫描法测定参贝咳喘丸中人参皂苷Rg_1的含量

目的　采用薄层扫描法测定参贝咳喘丸中人参皂苷 Rg1 含量。方法　样品经适当提取、净化后点于硅胶 G薄层板上 ,以氯仿 -甲醇 -水 (1 3∶ 7∶ 2 ) 1 0℃以下放置的下层溶液为展开剂 ,1 0℃以下展开 ;喷以1 0 0 g· L-1 硫酸乙醇溶液 ,于 1 0 5℃烘至斑点清晰 ,检测波长为 λS=5 40 nm,λR=70 0 nm。结果　平均回收率为 99.2 % ,RSD =1 .4 %。结论　此方法重现性好、准确 ,可用于该制剂质量控制的指标之一     

基于液相色谱-串联质谱法研究男宝胶囊中人参投料掺伪

目的：采用液质联用法测定男宝胶囊中拟人参皂苷F11和人参皂苷Rf的含量,其中拟人参皂苷F11是西洋参的特征成分,人参皂苷Rf是人参的特征成分,探究该制剂人参投料的概况,建立人参掺伪检测方法。方法：采用高效液相串联三重四级杆质谱仪,色谱柱为Agilent Poroshell 120 SB C18（2.1 mm × 100 mm,2.7 μm）,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速0.35 mL·min-1,柱温40℃,进样量5 μL,利用电喷雾离子源（ESI）、负离子采集模式、多反应检测模式（MRM）进行含量测定。通过模拟掺伪制备不同比例的西洋参阳性样品,从而制定合理的检测限度。结果：拟人参皂苷 F11和人参皂苷Rf在线性范围内关系均良好（r ≥ 0.998 9）,平均回收率分别为90.35%（RSD 2.34%）和94.96%（RSD 3.50%）,检测限分别为0.035 μg·g-1和0.028 μg·g-1。72批次男宝胶囊样品有1批次未检出拟人参皂苷F11,其余71批次含量范围为0.072 ~ 43.260 μg·g-1,人参皂苷Rf 5批次未检出,67批次含量范围为1.070 ~ 34.788 μg·g-1。22批次样品拟人参皂苷F11含量大于拟定限度8.3 μg·g-1。结论：建立的检测方法简便、准确,可有效鉴别男宝胶囊中西洋参掺人参投料的问题,为此药的质量控制和市场监管提供参考。     

RP-HPLC法同时测定西洋参含片中4种成分

目的建立同时测定西洋参含片中人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1及拟人参皂苷F11含量的RP-HPLC方法。方法色谱柱为Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.5 mL·L~(-1)磷酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱;流速:1.0mL·min~(-1);检测波长:203nm;柱温:30℃。结果人参皂苷Rg_1和人参皂苷Re及人参皂苷Rb_1在2.5~500μg·mL~(-1)、拟人参皂苷F11在5.0~1 000μg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 4);平均加样回收率均大于95.0%。结论该方法简便、准确,重复性好,可作为西洋参含片的质量控制方法。     

HPLC测定妇康颗粒中拟人参皂苷F11的含量

目的 建立妇康颗粒中拟人参皂苷F11的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法,以Xterra RP18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱为固定相,乙腈-水(32:68)为流动相;柱温为25 ℃;流速为1.0 ml/min,检测波长为203 nm.结果 拟人参皂苷F11的测定在2.3～57.5 μg范围内线性关系良好,平均回收率为99.97%,RSD为0.64%(n=6).结论 方法简便、准确,重复性好,可用于妇康颗粒的质量控制.     

感冒清热颗粒中藏柴胡检查方法的研究

目的：建立感冒清热颗粒中藏柴胡的检查方法,考察柴胡的掺伪情况。方法：采用液相色谱-串联质谱法,选择Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈(100 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温35℃,进样量5μL;采用电喷雾离子源(ESI),选择m/z 943.5→797.5、m/z 943.5→781.2和m/z 943.5→635.5为尼泊尔柴胡皂苷K检测离子对,以多反应监测(MRM)模式进行测定。结果：尼泊尔柴胡皂苷K质量浓度在0.049～4.866μg·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.9999),精密度、重复性良好(RSD分别为1.42%、2.24%)。以0.8μg·mL^-1为掺伪判定浓度,220批感冒清热颗粒中有17批样品溶液尼泊尔柴胡皂苷K的浓度为1.2～3.5μg·mL^-1,判定为检出藏柴胡,不合格率7.7%。结论：建立的方法准确、可靠,可用于感冒清热颗粒中柴胡的掺伪检查...     

UPLC-MS/MS检测乌鸡白凤丸中非法添加西洋参

目的建立UPLC-MS/MS测定乌鸡白凤丸中非法添加的西洋参。方法使用Waters ACQUITY BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈和水为流动相,梯度洗脱,流速为0.35 mL·min^-1,柱温40℃,电喷雾电离源(ESI-),多反应离子监测(MRM)扫描方式进行检测。结果拟人参皂苷F11在0.113 0~451.9 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.999),重复性的相对标准偏差为3.5%,拟人参皂苷F11平均加样回收率(n=9)为96.9%,检出限为0.1ng·mL^-1,定量限为0.4 ng·mL^-1。结论所建立的方法快速准确、灵敏度高,可用于乌鸡白凤丸中非法添加西洋参的筛选和检测。     

新型Topo I抑制剂CPUY013对胃腺癌细胞BGC823的体内外作用

探讨CPUY013在体内外对人胃腺癌BGC823细胞的抗肿瘤活性及其机制。采用MTT法、克隆原形成法检测CPUY013对BGC823细胞增殖的抑制作用；体外实验以pBR322 DNA为底物，依据质粒的松弛和超螺旋形式在琼脂糖电泳上泳动度对药物抑制解旋的作用进行定性分析。用AO/EB荧光染色技术、DNA凝胶电泳及JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞凋亡。口服给药CPUY013后观察其对裸鼠移植瘤的生长抑制作用；用流式细胞术观察CPUY013对BGC823细胞周期的影响；采用Western blotting分别检测CPUY013处理后的BGC823细胞中Topo I及凋亡相关蛋白表达的改变。结果表明，CPUY013呈明显的剂量依赖性抑制BGC823细胞的增殖。随着剂量的增加，CPUY013对Topo I松弛活性的抑制趋势增强。100 μmol·L^-1 CPUY013 和拓扑替康(TPT)对Topo I松弛活性的抑制呈现相似的变化趋势。CPUY013可使大部分BGC823细胞阻滞在S期，并诱导细胞凋亡；出现DNA片段化，亚G1峰显著增加，线粒体膜电位降低，荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。同时，CPUY013能明显抑制BGC823裸鼠移植瘤的生长，150 mg·kg^-1剂量组的瘤重抑制率为62.1%。CPUY013使BGC823细胞内Topo I和bcl-2蛋白表达均有所下调， p53和bax蛋白表达有明显上调趋势， bcl-2/bax比值明显降低， caspase-3蛋白表达增高。新型Topo I抑制剂CPUY013在体内明显抑制移植瘤的生长， 体外可诱导细胞凋亡从而抑制BGC823细胞增殖， 其机制可能与抑制Topo I， 从而下调bcl-2，上调bax和p53蛋白的表达有关。     

重症监护病房铜绿假单胞菌耐药性分析及对策

目的:分析ICU感染的铜绿假单胞菌耐药情况.方法:收集2007.7～2008.12入住ICU患者的基本资料及各类标本,标本进行细菌培养及药敏试验,对患者耐药情况进行分析.结果:共分离出199株铜绿假单胞菌菌株,美洛培南敏感率为96.2%、阿米卡星敏感率为69.6%、头孢哌酮/舒巴坦敏感率为65.4%、哌拉西林/他唑巴坦敏感率为61.6%、亚胺培南敏感率为57.2%、头孢吡肟敏感率为32.4%、头孢他啶敏感率为28.3%;通过分析发现,住院时间长、使用抗菌药物、侵入治疗、呼吸衰竭、手术等均为铜绿假单胞菌耐药的危险因素.结论:ICU铜绿假单胞菌耐药现象已十分突出,对多重耐药菌株的感染应以预防为主,建立耐药监控体系,控制耐药的发展及扩散.     

人参细胞培养物中水溶性多糖的研究

人参细胞培养物中水溶性多糖经提取后,用果胶酶和Sevag法除去其中蛋白,用Sephadex G-100柱进行分离、纯化得到DPSCG1和DPSCG2两个洗脱峰。经醋酸纤维素薄膜电泳和琼脂糖凝胶电泳,证明DPSCG1和DPSCG2均为均一性多糖,两者经水解和薄层层析结果均由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸等组成,经Sephadex G-200柱层析并与标准分子量对比,DPSCG1和DPSCG2的分子量分别为1.22×10⁵D和2.79×10⁴D。     

近红外技术应用于药厂丹参药材质量检测

目的 利用近红外光谱技术,快速测定丹参药材中丹参酮ⅡA的含量。方法 运用偏最小二乘法(PLS)建立丹参药材中丹参酮ⅡA含量与其近红外光谱之间的校正模型,并对未知的丹参样品进行丹参酮ⅡA含量预测。结果 校正集内部交叉验证决定系数R²为0.996 94,交互验证均方根偏差RMSECV为0.011 8,11份样品的外部预测均方根偏差RMSEP为0.023 7。预测值的平均相对误差为1.712 9%。结论 近红外光谱技术测定丹参药材中丹参酮ⅡA的含量是可行的,该方法快速准确、简单无损,可应用于大批量样品的快速分析。     

60Co辐照对乌金丸中益母草碱的影响

目的 考察不同剂量60 Co辐照(0、2、6和10 kGy)对乌金丸有效成分益母草碱含量的影响.方法 采用梯度高效液相色谱(HPLC)法检测益母草碱的含量,应用SPSS软件对试验结果进行统计分析.结果 益母草碱在0、2、6和10 kGy的辐照处理后含量分别为0.138、0.135、0.139和0.137 mg·g-1.统计学分析发现,经不同剂量辐照灭菌后乌金丸中益母草碱的含量与无辐照相比无显著性差异(P>0.05).结论 60 Co辐照灭菌对乌金丸中益母草碱的含量无影响.