心脑健制剂用茶叶提取物提取工艺初探

目的 对《中华人民共和国药典》（2020年版）（简称“《中国药典》”）心脑健片项下茶叶提取物的提取工艺进行小试研究,并比较相关产品的差异,初步了解产品现状,为其药品质量控制和用药安全提供参考。方法 按照《中国药典》工艺要求对8批不同来源的茶叶通过加水煎煮等步骤进行小试提取,计算提取率。建立包括没食子酸,表没食子儿茶素,儿茶素,咖啡因,表儿茶素,表没食子儿茶素没食子酸酯,没食子儿茶素没食子酸酯,表儿茶素没食子酸酯,儿茶素没食子酸酯等在内的9个指标成分的指纹图谱,并对茶叶原料、实验室制备对应茶叶提取物,从市面上收集的茶叶提取物及企业提供的茶叶提取物和心脑健胶囊进行可视化分析,比较差异。结果 实验室按照《中国药典》方法制备的茶叶提取物提取率为0.3%～0.5%,据调研企业生产的茶叶提取物提取率约为5%,而从市场上购买的茶叶提取物提取率可高达20%～30%。指纹图谱结果显示,不同来源的茶叶提取物指纹图谱不同,尤其市场上购置的提取物指纹图谱差异较大。结论 本研究初步探讨了茶叶提取物的提取工艺,指出现有方法和产品可能存在的问题,为完善茶叶提取物提取工艺、保障产品质量和安全提供了借鉴。     

HPLC指纹图谱结合化学计量学分析不同企业心脑健胶囊(片)的差异

目的 建立心脑健胶囊(片)质量评价方法,比较不同企业心脑健胶囊(片)的质量差异。方法 将中国药典2020年版一部心脑健胶囊项下特征图谱转化为指纹图谱,并进行方法学考察。与对照品进行比较,确定特征峰成分。测定3个厂家的21批产品,通过相似度分析其指纹图谱的异同,进一步使用聚类分析和主成分分析进行模式识别。结果 3家企业之间心脑健胶囊(片)指纹图谱存在差异,聚类分析和主成分分析结果基本一致,样品按厂家各自聚为一类,其中峰10(表没食子儿茶素没食子酸酯),13(没食子酸儿茶素没食子酸酯)、16(表儿茶素没食子酸酯)等特征峰对指纹图谱影响较大。在企业H样品中表没食子儿茶素没食子酸酯含量较低,仅为企业N样品中相应成分含量的60.08%,而没食子酸儿茶素没食子酸酯含量较高。在企业S样品中没食子酸儿茶素没食子酸酯含量较低,为企业N样品中相应成分含量的42.47%,而表儿茶素没食子酸酯含量相对较高。另外,各企业样品所含主要成分的比例均不相同。结论 化学计量学辅助的HPLC指纹图谱具有简便、客观、可数字化的优点,可直观地区别不同企业心脑健胶囊(片)成分及其比例的差异。     

白芍的高效液相色谱指纹图谱研究

利用HPLC-DAD方法，研究白芍的高效液相色谱指纹图谱，为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。测定了28批白芍药材样品，并应用LC-MS，MS/MS技术指认指纹图谱共有模式中共有峰的归属。结果表明，28批白芍样品得到的色谱指纹图谱有11个共有峰，并指认了9个峰，分别为(+)-儿茶素，没食子酸甲酯，芍药内酯苷，芍药苷，四没食子酰葡萄糖，没食子酰芍药苷，五没食子酰葡萄糖，牡丹皮苷I和苯甲酰芍药苷。可见，白芍的指纹图谱特征性及专属性强，可结合含量测定用于全面控制白芍的质量。     

白芍饮片的HPLC指纹图谱建立及聚类分析、主成分分析

目的:建立白芍饮片的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析。方法:采用HPLC法。色谱柱为SunFire~?C18,流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为230 nm,柱温为30℃,采集时间为70min,进样量为15μL。以芍药苷为参照,建立26批不同产地白芍饮片及30批不同炮制方法白芍饮片的HPLC指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行相似度评价,确定共有峰;采用SPSS 20.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果:26批不同产地白芍饮片共有9个共有峰,相似度均大于0.880;共指认了6个峰,分别为没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷;聚类分析结果显示,当余弦距离为15时26批样品可聚为2类,S1～S21聚为一类,S22～S26聚为一类;经主成分分析,前2个主成分的累积方差贡献率为81.124%。30批不同炮制方法白芍饮片共有10个共有峰,相似度均大于0.970;共指认了7个峰,分别为没食子酸、儿茶素、丹皮酚新苷、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷;聚类分析结果显示,当余弦距离为25时,30批样品可聚为2类,B1～B10聚为一类,C1～C10、J1～J10聚为一类;经主成分分析,前4个主成分的累积方差贡献率为86.887%。结论:所建HPLC指纹图谱及聚类分析和主成分分析结果可为不同白芍饮片的质量控制提供参考。     

款冬花药材的HPLC化学成分指纹图谱研究

建立款冬花药材的高效液相色谱（HPLC）化学成分指纹图谱,为科学评价其质量提供可靠方法。建立了不同产地和/或商品药材款冬花的HPLC指纹图谱;测定了10批款冬花样品,指纹图谱有25个共有色谱峰,并指认了16个。对各产地药材指纹图谱进行聚类分析,根据聚类分析结果将款冬花样品分为2类,选定第2类6批样品建立共有模式,并应用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004B版）”对各产地药材进行了评价。所建立款冬花的指纹图谱特征性和专属性强,方法简便、可靠,可定性用于全面控制款冬花的质量。

     

用HPLC指纹图谱宏观全定性全定量评价天麻质量

目的采用双定性双定量相似度为评价指标,建立宏观全定性全定量控制天麻质量的方法。方法采用反相HPLC法．以色谱指纹图谱指数F为目标函数优化选择指纹图谱条件．测定12批不同产地天麻HPLC指纹图谱,以双定性相似度（SF与SF’）和双定量相似度（C与P）评价不同产地天麻质量。结果以天麻素峰为参照物峰。确定26个指纹峰．通过聚类分析确定用8批天麻生成对照指纹图谱（RFP）,以此评价12个产地的天麻药材质量。结论所建立指纹图谱具有较好的精密度和重现性,可作为天麻药材质量控制和真伪鉴别的有效方法。     

指纹图谱结合一测多评模式在鹿茸质量评价中的应用

目的：建立指纹图谱与一测多评（QAMS）结合的考察模式,验证该方法在中药质量评价中的准确性和可行性。方法：以鹿茸为研究对象,建立鹿茸核酸类成分的HPLC指纹图谱,以次黄嘌呤为参照物计算该成分与尿嘧啶、腺嘌呤、尿苷、肌苷、尿苷的相对校正因子,并计算含量,实现QAMS。同时对QAMS的计算值与外标法实测值进行比较,以确认QAMS法的可行性和科学性。结果：建立了鹿茸核酸类成分HPLC特征指纹图谱共有模式,标定了12个共有峰,指认了其中6个共有峰,15批鹿茸的相似度均大于0.95。15批鹿茸样品中6个主要成分的计算值与实测值无显著差异。结论：QAMS结合指纹图谱的质量控制模式在鹿茸中得到验证,该方法快速准确灵敏,可为鹿茸定量测定和指纹图谱质量控制提供参考。     

绿茶成分心血管保护机制研究进展

绿茶的成分很多，但大多报道都集中在对儿茶素的研究。绿茶至少含有四种儿茶素：表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、表没食子儿茶素（EGC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）和表儿茶素（EC）。EGCG作为绿茶的主要成分，且具有最强的抗氧化性，因此成为近年来疾病预防研究的重要对象。     

基于HPLC指纹图谱结合化学计量学的巴东独活药材质量研究

摘要：目的:建立巴东独活的HPLC指纹图谱并结合化学计量学方法进行聚类分析（HCA）、主成分分析（PCA）,为提升该药材质量控制水平提供理论依据。方法:收集11批独活样品,采用HPLC法,流动相甲醇-水梯度洗脱,流速1.0 ml·min-1,检测波长330 nm,柱温30℃,建立指纹图谱。利用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2.0版）”、SPSS 24.0、SIMCA 14.1等方法进行指纹图谱分析并进行方法验证。结果:建立了独活HPLC指纹图谱,相似度>0.92,标定了11个共有峰,共有峰的相对保留时间RSD为0.17%～0.57%;方法精密度、稳定性和重复性良好;聚类分析（HCA）将样品分为4类,其中产地为重庆与宜昌的两个批次单独聚为一类。聚类分析结果与主成分分析（PCA）结果基本一致。结论:所建立的HPLC指纹图谱较全面地反映巴东独活药材中化学成分的信息,指纹图谱及建立方法具有一定的代表性,为巴东独活药材的质量控制提供了参考依据。     

白芷质量的HPLC指纹图谱评价方法

目的建立白芷质量的高效液相色谱指纹图谱评价方法。方法以白芷药材为研究对象，应用RP-HPLC法，色谱柱为Kromasil C₁₈(250 mm×4.6 mm，5 μm)，乙腈-水二元梯度洗脱模式，流速为1.0 mL·min^-1，检测波长为254 nm，建立了21批不同产地白芷样品的HPLC指纹图谱。结果对各产地药材指纹图谱进行聚类分析，根据聚类分析结果将白芷样品分为4类，选定其中11批优质样品建立共有模式，并应用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对各产地药材进行了质量评价。结论该方法简便、可靠，可用于白芷的真伪鉴别和质量评价。     

一测多评法测定华佗豆4种生物碱

目的 建立一测多评法检测华佗豆药材中4种生物碱的量。方法 以华佗豆碱乙为内标,建立华佗豆碱甲、碱丙、碱丁的相对校正因子,在考察相对校正因子的重现性后,进一步采用外标法与一测多评法所计算出的成分含量进行比较。结果 6批华佗豆药材中,各成分采用相对因子计算的量与采用外标法计算的结果无显著差异。结论 一测多评法操作简单、结果准确、可靠,可用于华佗豆4种生物碱的测定。     

一测多评法测定毛郁金中5种成分

目的 建立毛郁金药材中不同成分同时测定的一测多评法。方法 以毛郁金中莪术二酮为指标,建立莪术二醇、ocathydro-1,4-dihydroxy-1,4-dimethyl-7-（propan-2-ylidene）azulen-5（1H）-one、原莪术醇和姜黄素的相对校正因子,在考察相对校正因子的重现性后,进一步采用外标法对一测多评法所计算出的成分含量进行验证。结果 10批毛郁金药材中,各成分采用相对因子计算的含量与采用外标法计算的结果无显著差异。结论 以莪术二酮为参照物,采用一测多评测定和计算其他4种成分含量的方法是可行的,结果较为准确。     

壮药毛冬青配方颗粒一测多评的定量研究

目的 建立一测多评法同时测定毛冬青配方颗粒中6种酚酸类成分的含量。方法 以绿原酸为内参物,分别建立其与隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的相对校正因子,并利用该相对校正因子计算含量;同时利用外标法测定该6种酚酸的含量,比较2种测定方法的差异,验证一测多评法的准确性和可行性。结果 相对校正因子的重现性良好,8批毛冬青配方颗粒的计算值与实测值无显著性差异。结论 该方法可用于毛冬青配方颗粒中多指标成分质量评价。     

HPLC指纹图谱和多成分定量结合化学模式识别法评价黔钩藤质量

目的 基于HPLC指纹图谱、多成分定量结合化学模式识别法评价黔钩藤质量。方法 从贵州中药材市场随机购买了18批钩藤饮片,采用HPLC法建立了18批钩藤饮片的指纹图谱;通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012年版）进行相似度评价,对其中5种生物碱进行了指认,并采用外标法和一测多评法进行了含量测定;采用SPSS 26.0统计软件进行聚类分析和主成分分析。结果 在钩藤饮片指纹图谱中,确定了共有峰28个,采用对照品指认了5个生物碱成分,分别为异去氢钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、钩藤碱和去氢毛钩藤碱,18批钩藤的相似度评价表明市场上钩藤的质量差异较大;聚类分析将18批钩藤饮片样品聚为3大类;主成分分析用5个主成分进行综合评价,其中8批钩藤饮片的综合得分大于1;采用一测多评法和外标法计算18批钩藤饮片中5种生物碱的含量,经GraphPad差异性分析表明,2种方法无显著性差异。结论 市场上钩藤质量差异较大,建立了检测5个生物碱成分的一测多评法和外标法,为完善钩藤质量评价提供参考。     

指纹图谱结合模式识别、一测多评的连翘质量评价

目的建立连翘药材的指纹图谱并结合模式识别、一测多评技术对其进行系统、全面的质量评价。方法采用HPLC测定10批次连翘样品的指纹图谱,建立指纹图谱共有模式,通过相似度分析,结合聚类分析、主成分分析等模式识别技术对其进行定性评价。以连翘苷为内参物,建立连翘酯苷A、(+)松脂醇-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘酯素与内参物的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评的定量评价;同时采用外标法测定10批连翘中4个成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证一测多评法的准确性。结果建立的指纹图谱共标定13个共有峰,并对其中4个进行了归属,分别是连翘酯苷A、(+)松脂醇-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘酯素,10批次连翘样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.98,通过聚类分析及主成分分析将其分为3类。建立的相对校正因子重现性良好,采用校正因子计算的含量值与实测值之间相关系数均>0.99,相对误差均<3%。结论本研究建立的分析方法直观、准确、简便、可行。指纹图谱结合模式识别、一测多评技术进行定性定量分析可以为连翘的质量控制提供科学依据。     

鸡血藤饮片质量控制研究

目的：进一步提高完善鸡血藤饮片的质量控制方法,为其综合质量评价提供科学依据。方法：在现行标准质量控制项目的基础上,进一步优化薄层鉴别方法,同时采用HPLC法对本品所含化学成分进行指纹图谱研究,并对其主要成分儿茶素和表儿茶素进行含量测定研究。结果：15批鸡血藤饮片标准检测结果显示水分为6.62%~12.51%,总灰分为2.10%~3.25%,醇溶性浸出物为8.08%~10.02%。TLC优化方法显示样品斑点清晰,分离良好,且能够区分正伪品。15批样品HPLC（UV 260 nm）指纹图谱相似度计算结果为0.84~0.99,并经对照品比对确认10个共有峰（没食子酸、原儿茶酸、原儿茶醛、儿茶素、表儿茶素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素和芒柄花素）;同时所建立指纹图谱能够鉴别伪品。HPLC（UV 202 nm）含量测定结果显示,15批样品中儿茶素与表儿茶素含量分别为0.039%~0.068%、0.12%~0.23%,以表儿茶素含量整体较高,可作为含量测定指标。结论：建立的方法能够用于鸡血藤饮片的整体质量控制与评价。     

基于指纹图谱、多指标定量及网络药理学的大黄质量标志物预测分析

目的 建立大黄HPLC指纹图谱及多指标定量分析方法,结合网络药理学预测大黄潜在质量标志物。方法 采用HPLC对20批掌叶大黄样品中的没食子酸、儿茶素、表儿茶素等13种指标性成分进行含量测定,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行相似度分析,以13种指标成分含量进行主成分分析、正交偏最小二乘判别分析,采用网络药理学预测大黄相关成分的作用靶点和通路,构建成分-靶点-通路网络图并对核心靶点进行器官定位分析以预测大黄的潜在质量标志物。结果 指纹图谱相似度在0.882～0.998,共确定了15个共有峰,大黄素甲醚、儿茶素、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷是差异化合物,可用于鉴别和区分大黄质量。经筛选得到15个化合物,8个核心靶点,包括AKT1、TP53、JUN、HSP90AA1、CASP3、EGF、TNF、IL-6,涉及对氧化应激的反应、对脂多糖的反应、内肽酶活性,涉及脂质和动脉硬化、MAPK信号传导途径、AGE-RAGE信号通路在糖尿病并发症中的作用、非酒精性脂肪性肝病等通路,并构建成分-靶点-通路图,预测没食子酸、儿茶素、芦荟大黄素、大黄酸...     

一测多评法测定弯管列当中4种苯乙醇苷类成分

目的 建立弯管列当中4个苯乙醇苷类成分毛蕊花糖苷、crenatoside、2’-乙酰毛蕊花糖苷、isocrenatoside的一测多评法,验证该方法在弯管列当含量测定中应用的可行性及技术适应性。方法 以毛蕊花糖苷为内标,建立crenatoside、2’-乙酰毛蕊花糖苷、isocrenatoside的相对校正因子,利用相对校正因子计算3个成分的含量,实现一测多评;同时采用外标法测定这4个成分的含量,将2种方法进行分析比较。结果 24批弯管列当药材中4个苯乙醇苷成分按一测多评方法进行测定,其计算值与外标法实测值间无明显差异。结论 以毛蕊花糖苷为内参物同时测定crenatoside、2’-乙酰毛蕊花糖苷、isocrenatoside的一测多评法用于弯管列当的定量分析是可行的、准确的。     

Effect of emulsification on the skin permeation and UV protection of catechin

Abstract

An anti-aging effect may be obtained by skin application of tea catechins (Camellia sinensis) since they have high ultraviolet (UV)-protection activity. In this study, the skin permeation of catechin (C), epicatechin (EC), epigallocatechin (EGC), epicatechin gallate (ECg) and epigallocatechin gallate (EGCg) was determined and compared, and the effect of emulsification on the skin permeation of C was measured. The UV-protective effect of C was also determined. The in vitro skin permeability of each catechin derivative was determined using side-by-side diffusion of cells. The UV-protective effect of C was determined by applying different concentrations of C to the solution or emulsion on a three-dimensional cultured human skin model or normal human epidermal keratinocytes with UV-irradiation. ECg and EGCg with gallate groups showed lower skin permeability than C, EC and EGC without gallate groups, suggesting that the skin permeability of catechin derivatives may be dependent on the existence of a gallate group. Interestingly, the skin permeation of C was increased by an o/w emulsification. In addition, the C emulsion showed a significantly higher UV-protective effect by C than that with its aqueous solution. These results suggest that the o/w emulsion of catechin derivatives is probably useful as a cosmetic formulation with anti-aging efficacy.     

指纹图谱结合一测多评模式在贞蓉丹合剂质量评价中的应用

目的 采用指纹图谱与一测多评（QAMS）结合的方法对贞蓉丹合剂进行质量评价。方法 以松果菊苷为参照物建立贞蓉丹合剂HPLC指纹图谱,计算该成分与阿魏酸、丹酚酸B、淫羊藿苷的相对校正因子,并计算其含量。同时对QAMS的计算值与外标法实测值进行比较,以确证QAMS法的可行性和科学性。结果 研究建立了贞蓉丹合剂HPLC特征指纹图谱共有模式,标定了13个共有峰,占总体峰面积的91%,指认了其中4个共有峰,5批次贞蓉丹合剂的相似度均>0.99。5批次贞蓉丹合剂中4个主要成分QAMS法和外标法测定结果间无显著差异。结论 QAMS结合指纹图谱可为贞蓉丹合剂的定量测定和质量控制提供参考。