低氧诱导因子-1的生物功能及其在骨发育中的调节作用

氧对生物体生长发育是必须的,而在骨发育过程中,组织和细胞缺氧是经常存在的。体内生长板软骨增殖区氧浓度2％-5％,在肥大区氧浓度是0．5％-1％。HIF-1α是氧内环境稳定的主要的调节器,它是一种核转录因子,在维持生长发育过程中对维持氧的动态平衡至关重要。对低氧诱导因子在骨发育中的作用,也是近年来渐渐的得以认识。     

低氧促进神经干细胞增殖分化过程中低氧诱导因子-1α表达的变化

目的:观察小鼠胎脑皮质神经干细胞(NSCs)在体外低氧条件下细胞增殖与分化以及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况,分析HIF-1α对NSCs增殖与分化的作用。方法:体外低氧条件下(3%O2)培养扩增胚鼠皮质来源的细胞,实验分低氧1、2、3、4d组,常氧组为对照。免疫细胞化学染色法鉴定神经干细胞及其子代细胞,RT-PCR检测实验组细胞HIF-1α mRNA的表达。结果:低氧4d组细胞呈HIF-1α阳性,其余HIF-1α为阴性。实验组神经元特异性烯醇酶(NSE)平均灰度值进行性增加。各实验组HIF-1α mRNA与对照组相比具有显著性差异。结论:在低氧能促进NSCs的增殖与分化过程中,HIF-1α表达变化可能在其中发挥了重要作用。     

慢性低氧时小鼠肺组织低氧诱导因子-1α的表达

目的：研究低氧时小鼠肺组织中低氧诱导因子-1α(HIF-k)表达的变化。方法：实验用雄性小鼠,低氧仓浓度分别为10％、7％、5％。用免疫荧光组织化学技术及共聚焦显微术,检测小鼠在低氧条件下肺组织中HIF-1α表达的变化。结果：正常组小鼠肺组织HIF-1α无表达,低氧组HIF-1α表达增加,且随低氧时间的延长及低氧强度的增加而增强。结论：低氧可诱导小鼠肺组织中HIF-1α的表达增强,(HIF-k)可能参与肺组织细胞凋亡的发生。     

低氧诱导因子1研究进展

机体或细胞在低氧环境中可产生低氧诱导因子１（ＨＩＦ１）及多种类分子,通过转录水平参与对低氧反应性基因的调控,从而使机体或细胞进一步对低氧刺激作出复杂的病理生理性反应。其详细的生物学功能及具体的调节机制等问题还尚待研究     

低氧诱导因子-1研究进展

低氧诱导因子 1(HIF 1)是在低氧及模拟低氧条件下细胞产生的一种蛋白转录调控因子 ,由α和 β两种亚基组成 ,HIF 1α的磷酸化和非磷酸化状态作用不同。HIF 1涉及的信号转导通路复杂 ,广泛参与哺乳动物细胞低氧诱导性应答 ,在低氧诱导的基因表达调节中起着关键作用。本文就HIF 1的结构、作用、活性调节及在低氧信号转导中的作用等方面的研究进展作一综述     

低氧诱导因子-1α参与低氧预处理诱导的心肌血管生成

目的：研究低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在低氧预处理（HPC）诱导心肌血管生成中的作用,并探讨其细胞信号转导的机制。方法：雄性SD大鼠随机分为对照组和HPC组。动物置于低氧仓内，持续通入10% O2和90% N2 4 h复制低氧预处理模型。用Ⅷ因子免疫组化染色检测HPC后7 d和21 d心肌组织微血管密度。制备心肌组织蛋白提取物，分别以磷酸化的细胞外信号调节激酶（ERK1/2）抗体和HIF-1α抗体检测HPC后1 d、7 d和21 d p-ERK1/2活性及HIF-1α表达。结果：HPC后7 d和21 d心肌组织微血管密度分别较对照组高36.99%和37.76%（均P<0.01）；p-ERK1/2活性在HPC后1d 较对照组高18.67%；HPC诱导HIF-1α的表达，其表达高峰出现在HPC后1 d。结论：HPC可以促进心肌微血管生成，其机制涉及ERKs活化和HIF-1α表达上调。     

低氧诱导因子-1与恶性血液病的研究进展

低氧诱导因子-1作为调控生物体内氧平衡重要的转录因子,已引起人们的广泛重视,近年来较多研究开始探讨其与恶性血液病之间的关系。最近研究发现H IF-1通过作用于粒细胞趋化因子C/EBPalpha诱导急性髓系白血病细胞分化,具有重要的临床意义,为急性髓系白血病的治疗提供了新途径。     

低氧诱导因子-1α和内皮素-1基因在大鼠低氧性肺动脉高压中的表达

目的　探讨低氧诱导因子 1(HIF 1α)和内皮素 1(ET 1)基因表达在低氧性肺动脉高压发病过程中的变化和作用。方法　复制低氧性肺动脉高压大鼠模型 ,测定平均肺动脉压 ,弹力纤维染色显示腺泡内肺动脉 ,用放射免疫法测ET含量 ,原位杂交方法进行检测HIF 1αmRNA。结果　HIF 1αmRNA在低氧各组腺泡内肺动脉有表达 ,低氧 14d组 (0 2 5 6 9± 0 0 46 8)和低氧 2 8d组 (0 2 2 5 8±0 0 45 3)染色强于低氧 5d组 (0 145 5± 0 0 2 72 )和正常组 (0 110 9± 0 0 2 2 4) ;ET 1mRNA在低氧各组腺泡内肺动脉有表达 ,低氧 14d组 (0 412 2± 0 0 783)和低氧 2 8d组 (0 36 84± 0 0 72 9)染色强于低氧5d组 (0 2 0 17± 0 0 34 9)和正常组 (0 185 5± 0 0 36 1) ,HIF 1α和ET 1基因表达在H14d组和H2 8d组明显增加 (P <0 0 5 )。肺动脉血中ET 1含量在H14d组 [(15 8 78± 2 5 14)pg/ml]和H2 8d组 [(142 93± 2 3 38)pg/ml]明显高于H5d组 [(79 6 8± 12 5 4)pg/ml]和正常组 [(6 5 37± 10 82 )pg/ml](P <0 0 5 ) ;H14d组 [(34 0± 5 8)mmHg]和H2 8d组 [(2 9 0± 4 7)mmHg]的mPAP也明显高于H5d组[(19 0± 3 5 )mmHg]和正常组 [(17 0± 2 8)mmHg](P <0 .0 5 ) ,并且与肺动脉血中ET 1含量呈正比(rs=0     

缺氧诱导因子-1α在高原低氧脑损伤中的研究进展

缺氧诱导因子-1(HIF-1)是一种调节人体对缺氧反应的关键因子.HIF-1α是HIF-1的活性亚基,为细胞缺氧信号转导通路中的核心因子.缺氧条件下HIF-1α显著增高,调控细胞增殖、凋亡、红细胞及血管生成等重要过程.低压、低氧是高原环境的主要特点,近年来越来越多的平原居民前往高海拔地区工作、旅游,急进高原暴露有发展成...     

低氧诱导因子-1α在CIA模型中的表达及其意义

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在胶原诱导性关节炎(CIA)模型中的表达及其在类风湿性关节炎(RA)发病中的作用.方法 建立CIA模型,取CIA模型踝关节进行HE染色及HIF-1α免疫组化染色,观察HIF-1α在RA组织中表达的情况.结果 CIA大鼠关节滑膜层和滑膜下层均表达HIF-1α,第21天阳性表达量最高,随病程进展,表达逐渐下降,与滑膜病理学评分、滑膜增生评分及血管生成评分呈显著正相关,与炎症浸润评分无明显相关.结论 HIF-1α在RA组织中的表达与炎症严重程度呈正相关,HIF-1α与RA的发生发展有一定相关性.     

RAM7,一种新的核蛋白分子在小鼠中枢神经系统的表达

Notch信号途径参与动物多种组织和器官尤其是神经系统的发育调节。 RBP-Jκ是 Notch信号途径中的关键分子 ,RAM7是近年通过酵母双杂交技术发现的与 RBP-Jκ相互作用的蛋白。本实验表达 RAM7C-末端 60 k D的多肽片段 ,并制备特异性的多克隆抗体 ,检测 RAM7在小鼠中枢神经系统的分布。结果显示 :RAM7主要呈细胞核染色 ,在中枢神经系统中广泛分布 ;尾壳核、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、室周核等核团内没有 RAM7阳性神经元 ,但存在着一定数量的 RAM7阳性神经纤维 ;另有相当多 RAM7胞浆染色的细胞和神经元以及一些胶质细胞 ,局限在脑室和脑室周围的神经组织中。RAM7分子的分布对其可能的生理功能有一定的提示作用     

低氧诱导因子-1α基因促进大鼠局灶性脑缺血后神经干细胞的增殖和分化

目的观察低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因对大鼠局灶性脑缺血后内源性神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响,并探讨HIF-1α对内源性NSCs增殖分化的作用机制。方法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,分为假手术组(sham)、生理盐水组(NS)、腺病毒空载体组(AD)及携带HIF-1α基因的重组腺病毒组(Ad-HIF-1α)。分别将NS、AD和Ad-HIF-lα注射到模型鼠缺血侧侧脑室,观察4组大鼠神经功能缺失评分;免疫组织化学法观察4组大鼠局灶性脑缺血后缺血灶周围促红细胞生成素(EPO)的表达;免疫荧光法计数再灌注不同时间点室管膜下区(SVZ)BrdU阳性细胞(3d、7d、14d、21d、28d)和皮层BrdU/NF200、BrdU/GFAP(28d)阳性双标细胞。结果Ad-HIF-lα组神经功能缺失评分与AD组和NS组比较,结果有统计学差异;EPO表达增强;Ad-HIF-lα组BrdU标记细胞数明显增加;新生细胞分化结果显示,28d时Ad-HIF-lα组BrdU/NF200(47.74±13.52)%、BrdU/GFAP(67.83±20.75)%,与其他组相比均有显著性差异(P<0.05)。结论低氧诱导因子-1α基因可促进大鼠局灶性脑缺血后内源性NSCs的增殖与分化,从而促进神经功能的恢复。     

小鼠肾发育中层黏连蛋白表达的实验研究

目的观察层黏连蛋白（LN）在小鼠肾发育过程中的表达规律及层黏连蛋白与细胞极性的关系。方法用免疫组织化学链霉菌素亲和生物素一过氧化物酶连接法测定不同胚龄和日龄小鼠肾层黏连蛋白的表达。结果层黏连蛋白在肾组织中的表达随着胚龄增大和肾成熟程度而增加。在生后肾组织中的单个细胞、多个细胞无腔形成和多个细胞有腔形成时均有表达。在肾发育过程中层黏连蛋白表达于输尿管芽周围、肾小体基膜、肾小管基膜、肾小囊基膜和肾间质,且肾小管基膜着色早于肾小体基膜。结论在肾发生和成熟过程中,层黏连蛋白参与细胞极性的形成,层黏连蛋白的分布具有一定的时空顺序,对基膜的发生、成熟起重要作用。     

神经营养素受体在幼年大鼠神经系统表达的特点

为了研究神经营养素受体 ( Trks)在幼年大鼠神经系统的表达模式及分布规律。本研究应用免疫组织化学技术对幼年大鼠大脑皮质、小脑、脊髓、背根神经节中 Trks的表达及分布进行了形态学观察及定位。结果证明 ,神经营养素受体 Trk A,Trk B,Trk C在大脑皮质、脊髓、背根神经节中均有表达 ,Trk B呈强阳性且分布广 ,Trk A次之 ,Trk C为弱阳性 ;在小脑 Purkinje细胞Trk C表达阳性 ,Trk A弱阳性 ,Trk B阴性。结论 :幼年大鼠神经系统中 Trks表达存在差异 ,提示神经系统不同部位发育所需的神经营养素不同 ;Trks的分布部位与已报道的神经营养素的分布部位不完全重叠 ,可能与神经营养素作用模式多样性有关     

大鼠FEZ1基因的克隆及其在中枢神经系统的表达

轴突成束和延伸蛋白ζ-1(fasciculationandelongationproteinzeta-1,FEZ1),是线虫UNC-76蛋白在哺乳动物中的一种同系物,与轴突向外生长、成束、延伸相关。为了克隆该蛋白的基因并观察其在中枢神经系统(CNS)的表达情况,本研究通过FEZ1的特异引物从SD大鼠脑组织中经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得FEZ1基因;通过RT-PCR法分析FEZ1在生后7d的SD大鼠CNS的不同部位(大脑皮层、嗅球、脊髓)的表达情况。成功获得FEZ1的基因克隆,并观察到生后7d的SD大鼠的大脑皮层、嗅球、脊髓内均有FEZ1表达,且脊髓的表达水平较高。本研究结果为进一步研究大鼠FEZ1基因的生物学活性及在神经系统内的表达和应用奠定了基础。     

钙通道激动剂诱发小鼠中枢神经系统c─fos表达的研究

本实验用免疫组织化学方法观察了Ｌ型钙通道激动剂ＢａｙＫ８６４４皮下注射后小鼠中枢神经系统原癌基因ｃ－ｆｏｓ的表达特点。结果表明，给ＢａｙＫ８６４４后１／２ｈｃ－ｆｏｓ的表达产物Ｆｏｓ蛋白在前嗅核、嗅结节、梨状皮质、齿状回、感觉运动皮质、丘脑室旁核、大脑视皮质纹状区、颞叶听区、中缝核群等区域出现，给药后２～４ｈ表达达高峰，之后进行性消退，１６ｈ恢复正常水平。使用钙通道拮抗剂ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ对ＢａｙＫ８６４４所致的Ｆｏｓ表达有拮抗作用。结果提示ＢａｙＫ８６４４诱导的Ｆｏｓ表达与Ｌ型钙通道在脑内的分布较为一致。对Ｆｏｓ和ＣａＢＰ进行双标记显示，在被观察的脑区Ｆｏｓ／ＣａＢＰ双标细胞在ＣａＢＰ免疫反应细胞中的比例约占６０．４２％～７２．８８％，ｃ－ｆｏｓ和ＣａＢＰ的共存是否提示这种细胞同时含有Ｌ型钙通道     

缺氧预适应小鼠中一氧化氮合酶与缺氧诱导因子-1的表达

目的　探讨缺氧预适应小鼠海马组织中内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)和缺氧诱导因子 1α的表达。　方法　HeLa细胞分为 :不缺氧 (H0 组 )、缺氧 1h(H1 组 )和缺氧 4h组 (H4组 ) ;小鼠分为 3组 :不缺氧 (M0 组 )、急性缺氧 1次 (M1 组 )和重复缺氧 4次组 (M4组 ) ,SDS PAGE和Western印迹法检测HIF 1α和eNOS的表达。　结果　H0 组HeLa细胞中未见HIF 1α ,H1 组出现少量HIF 1α ,H4组HIF 1α有所增加。M0 组小鼠海马中几乎检测不到HIF 1α ,可见eNOS ;M1 组可检测到较少的HIF 1α,eNOS无明显变化 ;M4组HIF 1α和eNOS水平均增高。　结论　慢性缺氧HeLa细胞中出现HIF 1α ,可作为检测HIF 1α的阳性对照 ;随着小鼠缺氧次数的增加 ,HIF 1α和eNOS的水平均升高 ,提示它们可能参与预适应的保护作用     

DOUBLESEX GENE EXPRESSION IN THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM OF DROSOPHILA MELANOGASTER

Despite several behavior-genetic studies that have suggested roles played by doublesex ( dsx ) in neural tissues, it has not been demonstrated that the products of this gene are actually present in the central nervous system (CNS). In this report, we describe the cellular, spatial, and temporal expression patterns of dsx gene products in the developing and adult CNS by applying RT-PCR and immunohistochemical procedures. dsx gene products were detected in the CNS of 3rd-instar larvae, pupae, and adults. DSX-immunoreactive signals were observed within the brain and in both the thoracic plus abdominal ganglia of the ventral nerve cord. Most, but not all, cells inferred to contain DSX proteins (by the results of genetic controls for antibody specificity) were further determined to be neurons (by coexpression of a protein that marks such CNS cell types). Temporally varying expression of DSX was most prominently observed in the rapidly metamorphosing early and mid-pupal stages, suggesting that this gene contributes to establishment of sexually dimorphic neuronal structures which subserve adult sexual behaviors. Elements of the spatial and temporal patterns of DSX immunoreactivity also imply that sexually dimorphic dsx expression in certain neuronal clusters within the adult CNS could participate in ongoing operations of the mature nervous system with respect to the courtship behaviors that are affected by dsx mutations.     

小鼠肺发育中细胞增殖与凋亡及相关调控基因的表达

目的 探讨小鼠肺发育过程细胞增殖与凋亡的变化规律及凋亡相关基因ｐ５３、ｂｃｌ－２ｄ在肺发育中的表达意义。方法 不同发育天数的小鼠肺组织,采用免疫组织化学及ＴＵＮＥＬ法,观察细胞增殖与凋亡及相关基因ｐ５３、ｂｃｌ－２的表达。结果 １．胎１４和１６ｄ肺ＰＣＮＡ阳性细胞数达到高峰;之后ＰＣＮＡ阳性率逐渐下降;生后４到１４ｄ,又恢复低水平的细胞增殖,２．小鼠肺发育过程中出现两个细胞凋亡高峰：即胎１４至１６