Ⅰ型胶原与氧化性低密度脂蛋白相互作用的机制研究

目的：阐明胶原与血清低密度脂蛋白（ＬＤＬ）之间的关系。方法：在体外制备了Ⅰ型胶原凝胶,观察可能影响氧化ＬＤＬ（ｏｘ－ＬＤＬ）与胶原结合的几种因素。结果：随着ＬＤＬ氧化程度增加,其与胶原的结合量也增加。结论：这种增加可能主要源于脂蛋白的负电性增加,ＬＤＬ聚集度增大则可降低ＬＤＬ与胶原的结合能力。另外,载脂蛋白Ｂ中赖、精、组、酪氨酸残基的化学修饰,可能在ｏｘ－ＬＤＬ与胶原的结合中起重要作用     

氧化修饰的低密度脂蛋白与动脉粥样硬化

ＡＳ的发生机制一直是一个热门课题，而氧化修饰的低密度脂蛋白在ＡＳ硬化的形成过程中扮演着一个非常重要的角色。本文从免疫学、病理学等最新的角度对ＡＳ的形成及氧化修饰的低密度脂蛋白在其中的作用作一简述。     

氧化修饰低密度脂蛋白与动脉粥样硬化

本文阐述了低密度脂蛋白氧化修饰的过程，在体内存在的证据以及在细胞、分子水平上致动脉粥样硬化几种可能的机理，分析了影响低密度脂蛋白氧化修饰的因素，提出了临床上可能的预防及治疗措施。     

氧化低密度脂蛋白在动脉粥样硬化病变发展中的定位与定量研究

为了解氧化低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的关系，通过对３５例尸检（死后１２小时内）的主动脉观察，以抗Ｃｕ２＋－ｏｘ－ＬＤＬ及４－ＨＮＥ－ＭＤＡ－ＬＤＬ、抗ａｐｏＢ、ＣＤ６８和ａｃｔｉｎ抗体的免疫组织化学和图像分析方法，对人体动脉粥样硬化（Ａｓ）不同时期细胞内外ＬＤＬ和ｏｘ－ＬＤＬ进行定位、定量研究，结果显示：ｏｘ－ＬＤＬ与ＬＤＬ在病灶内共存分布；ｏｘ－ＬＤＬ在Ａｓ早期主要在巨噬细胞源性泡沫细胞内，在Ａｓ晚期，主要位于平滑肌细胞内和细胞外基质中；ＬＤＬ在动脉粥样硬化斑块期含量高于脂纹期，而纤维斑块期与粥样斑块期则无差别；ｏｘ－ＬＤＬ含量在粥样斑块期高于纤维斑块期，而后者又高于脂纹期；脂纹期ｏｘ－ＬＤＬ含量低于ＬＤＬ，而在纤维斑块期及粥样斑块期ｏｘ－ＬＤＬ含量大于ＬＤＬ。     

载脂蛋白(a)多态表型与低密度脂蛋白受体基因表达水平的相关性研究

选择载脂蛋白（ａ）的高和低分子量表型各１０例（均为男性，年龄２４～２５岁），应用ＲＴ－ＰＣＲ技术，检测外周血单个核细胞低密度脂蛋白受体基因表达水平，发现低分子量表型者的脂蛋白（ａ）水平与低密度脂蛋白受体ｍＲＮＡ水平呈明显负相关（ｒ＝－０．７８，Ｐ＜０．０１）；高分子量表型者则无此相关性。而高和低分子量表型的低密度脂蛋白受体ｍＲＮＡ与低密度脂蛋白胆固醇水平均呈负相关（ｒ＝－０．８１和－０．７２，Ｐ均＜０．０１），提示低密度脂蛋白受体可能是低分子量表型脂蛋白（ａ）的一个重要代谢途径。     

人胚肝低密度脂蛋白受体活性与血清胆固醇水平的关系

用卵磷脂/丙酮沉淀法测定经部分纯化的人胚肝LDL受体活性,结果发现,随着胎龄增加,肝脏LDL受体活性明显增高。与此同时,血清总胆固醇(TC)和LDL-胆固醇(LDL-C)水平进行性下降。胎龄与血清TC和LDL-C的相关系数分别为-0.80和-0.77,有显著意义(P<0.001)。进而发现,在胚肝LDL受体活性与血清TC和LDL-C之间也存在着明显的负相关,相关系数分别为-0.96和-0.95(P<0.001)。这一结果提示,在胎儿发育过程中,肝脏LDL受体对血胆固醇水平调节起着关键的作用。     

冠心病患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白与血清铁蛋白关系的研究

对５３例冠心病患者及３０例正常人血浆氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）与血清铁蛋白（ＳＦ）进行了测定，结果显示：冠心病患者血浆ＯＸ－ＬＤＬ和ＳＦ水平平均显著高于正常对照组（Ｐ〈０．００１和Ｐ〈０．０５），且两者呈显著正相关（ｒ＝０．４８５，Ｐ〈０．００１），冠心病患者血浆ＯＸ－ＬＤＬ水平升高可能与体内铁贮存增加有关。     

低密度脂蛋白的氧化修饰及其理化,生物学性质的改变

本文叙述了在体外对低密度脂蛋白（ＬＤＬ）进行氧化修饰的方式方法及修饰后ＬＤＬ的分子结构、理化性质和生物学性质的改变以及氧化修饰的ＬＤＬ在体内存在的证据等，说明ＬＤＬ的氧化修饰在动脉粥样硬化的发生发展中具有重要的病理生理意义。     

载脂蛋白（a）多态表型与低密度脂蛋白受体基因表达水平的？…

选择载脂蛋白（ａ）的高和低分子量表型各１０例（均为男性，年龄２４～２５岁）应用ＲＴ－ＰＣＲ技术，检测外周血单个核细胞低密度脂蛋白受体基因表达水平，发现低分子量表型者的脂蛋白（ａ）水平与低密度脂蛋白受体ｍＲＮＡ水平呈明显负相关（ｒ＝－０．７８，Ｐ〈０．０１）；高分子是表型者则无此相关性，而高和低分子量表型的低密度脂蛋白受体ｍＲＮＡ与低密度脂蛋白胆固醇水平均呈负相关（ｒ＝－０．８１和－０．７２，Ｐ〈０     

内皮素与PGI2及NO的相互作用

ＥＴ１、ＰＧＩ＿２、ＮＯ在合成和生物学效应间相互关系，研究结果表明，ＥＴ１增加ＰＧＩ＿２、ＮＯ的合成，而ＰＧＩ＿２、ＮＯ则抑制ＥＴ１合成。ＰＧＩ＿２、ＮＯ通过ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ松驰血管平滑肌，抑制细胞增殖以拮抗ＥＴ１的缩血管作用。ＥＴ１和ＰＧＩ＿２、ＮＯ在生物学效应间存在着拮抗作用。     

卡托普利对氧化型低密度脂蛋白致血管内皮细胞形态和功能改变的影响

目的：探讨氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）致血管内皮细胞形态和功能的改变及卡托普利（CPT）的作用。方法：将融合成单层的牛胸主动脉内皮细胞（BAEC）:① 用含ox-LDL的培养液常规培养，加或不加CPT预孵，在倒置显微镜及扫描电镜下比较细胞形态;② 分别用不同浓度CPT预孵及ox-LDL处理，测定不同时点培养液ET-1、6-keto-PGF1α和TXB2的含量。结果：① 光镜下各组细胞形态无明显变化，扫描电镜下可见ox-LDL组细胞有较多脱落、局部缺损，细胞分散，表面微绒毛明显减少；CPT预孵后有所改善，表面微绒毛明显增多。② ox-LDL组ET-1、6-keto-PGF1α和TXB2 含量显著高于对照组。CPT低浓度抑制ET-1分泌，较高浓度则刺激ET-1分泌；CPT使6-keto-PGF1α含量增加，对TXB2的含量无影响。结论：ox-LDL对内皮细胞形态和功能的影响至少部分是通过血管紧张素系统实现。     

氧化修饰的低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白对单核细胞MCP-1表达的影响

为了研究氧化修饰的低密度脂蛋白（ＯＸ┐ＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ┐ＶＬＤＬ）对单核细胞的单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ┐１）ｍＲＮＡ和蛋白表达的影响。在单核细胞的培养基中分别加入２５μｇ／ｍｌ的ＬＤＬ、ＯＸ┐ＬＤＬ、ＶＬＤＬ和ＯＸ┐ＶＬＤＬ，培养２４小时后分别收集单核细胞及其条件培养基。参照异硫氰酸胍法提取单核细胞总ＲＮＡ，并用γ３２Ｐ末端标记ＭＣＰ┐１寡核苷酸探针，进行ｓｌｏｔｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析。同时用夹心ＥＬＩＳＡ检测其条件培养基中ＭＣＰ┐１蛋白含量。结果显示单核细胞能表达ＭＣＰ┐１，ＯＸ┐ＬＤＬ和ＯＸ┐ＶＬＤＬ能明显增强单核细胞表达ＭＣＰ┐１。而ＬＤＬ和ＶＬＤＬ的作用却很轻微。说明单核细胞能通过表达ＭＣＰ┐１，从而进一步招引其它的单核细胞迁入内皮下间隙，而ＯＸ┐ＬＤＬ和ＯＸ┐ＶＬＤＬ能加强这种作用。     

氧化低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞 connexin43表达的影响

目的: 研究氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对体外培养的人脐静脉内皮细胞缝隙连接蛋白connexin43表达的影响。方法: 体外培养的内皮细胞分为4组:对照组,50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L ox-LDL干预组,干预24 h后通过RT-PCR方法检测各组connexin43 mRNA的表达有无差别;通过免疫细胞化学方法检测对照组和100 mg/L ox-LDL干预组之间connexin43蛋白的表达水平有无差别。结果: 不同浓度(50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L)的ox-LDL干预24 h能引起内皮细胞connexin43 mRNA的表达增加(P<0.01);100 mg/L的ox-LDL干预24 h内皮细胞connexin43蛋白表达增加(P<0.01)。结论: Ox-LDL短期干预可引起人脐静脉内皮细胞connexin43 mRNA和蛋白表达水平增加。     

氧化低密度脂蛋白对人血管内皮细胞ECV-304促增殖及诱导凋亡的作用

目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对血管内皮细胞损伤作用的多样性。方法: 通过细胞形态学、台盼蓝活细胞计数、细胞毒四唑盐(MTT)比色试验、乳酸脱氢酶(LDH)、流式细胞凋亡和细胞凋亡小分子量DNA片段凝胶电泳测定法, 观察(0.1、1、10、100、150和200)mg/L的ox-LDL的条件培养液对人血管脐静脉内皮细胞ECV-304的影响。结果:(0.1-10)mg/L的ox-LDL对ECV-304细胞具有促增殖作用, 而增加浓度达100mg/L及以上时, 其表现则主要是对ECV-304的细胞毒性;而且, 这种细胞毒性以当ox-LDL的浓度达到150和200mg/L时, 在12h开始诱导ECV-304细胞出现凋亡, 分别达15.86%和21.89%。而当ox-LDL作用ECV-304细胞18h后, 则出现伴随凋亡的细胞坏死。结论:ox-LDL具有很强的细胞毒性, 其对内皮细胞的细胞毒性经历了促细胞增殖、凋亡前期、细胞凋亡和凋亡后的坏死等过程。     

低密度及氧化低密度脂蛋白对内皮细胞表达血栓调节蛋白的影响

目的观察低密度及氧化低密度脂蛋白对细胞表达血栓调节蛋白的影响.方法用低密度和氧化低密度脂蛋白处理培养的ECV-304细胞,24h后分别收集培养液及细胞,用ELISA方法检测上层培养液中的可溶性血栓调节蛋白(sTM)及细胞总TM含量.结果两者均呈剂量依赖方式促进TM的表达和sTM的分泌,氧化低密度脂蛋白的作用明显强于低密度脂蛋白,而氧化低密度脂蛋白对低密度脂蛋白有氧化修饰作用.结论 TM表达及sTM分泌增加可能是脂蛋白损伤细胞的结果,但具体作用有待于进一步研究.     

氧化修饰和乙酰修饰低密度脂蛋白在A型清道夫受体基因敲除小鼠的清除

目的：阐明清道夫ＡＩ／Ｉ受体（ＳＲ－ＡＩ／Ｉ）在体内ＯＸ－ＬＤＬ和ＡＣ－ＬＤＬ清除中的作用和重要性。方法：观察同位素标记化学修饰ＬＤＬ在ＳＲ－ＡＩ／Ｉ基因敲除和正常小鼠血浆的清除率和同位素标记的ＬＤＬ在体内主要器官的分布。结果：ＯＸ－ＬＤＬ在正常小鼠血浆清除是非常快的,在５ｍｉｎ内,注入量的９０％即被清除。在ＳＲ－ＡＩ／Ｉ基因敲除小鼠,ＯＸ－ＬＤＬ在血浆的清除速率和正常小鼠相同。ＡＣ－ＬＤＬ的清除在对照组和ＳＲ－ＡＩ／Ｉ受体敲除小鼠也相似。同位素标记的ＡＣ－ＬＤＬ在血浆的清除能够完全被５０倍高剂量未标记的ＡＣ－ＬＤＬ阻断,但同样剂量的未标记的ＡＣ－ＬＤＬ仅能抑制ＯＸ－ＬＤＬ在血浆清除的５％。ＯＸ－ＬＤＬ和ＡＣ－ＬＤＬ主要被肝脏清除。组织器官放射性标记的ＯＸ－ＬＤＬ和ＡＣ－ＬＤＬ的分布在正常小鼠和ＳＲ－ＡＩ／Ｉ基因敲除小鼠没有差异。结论：ＳＲ－ＡＩ／Ｉ受体在体内ＯＸ－ＬＤＬ清除过程中不起主要作用。     

氧化低密度脂蛋白自身抗体与冠心病的关系

目的:探讨氧化低密度脂蛋白自身抗体(ox-LDL Ab)与冠心病及低密度脂蛋白(LDL)的关系。方法:提取血清,用ELISA方法测定ox-LDL Ab滴度。结果:冠心病患者ox-LDL Ab滴度明显高于正常对照组(P<0 05);ox-LDL Ab与LDL直线相关(r=0.3338,P<0.05)。结论:ox-LDL Ab与冠心病有明显相关性,自身免疫反应可能参与动脉粥样硬化的形成。     

氧化型低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞凋亡及Fas抗原表达

目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)对血管内皮细胞凋亡的影响及其可能的调控机制。方法:以0.1 μg/L和0.3 μg/L的OX-LDL作用培养的人脐静脉血管内皮细胞(EC)4 h,采用流式细胞仪碘化丙啶染色法检测细胞凋亡;提取细胞DNA,采用琼脂糖凝胶电泳,观察凋亡细胞DNA梯形带;提取细胞RNA,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测Fas抗原基因表达。结果:OX-LDL处理能诱导EC凋亡,并存在一定的剂量效应关系,DNA电泳亦显示高剂量OX-LDL处理能产生的DNA片断比低剂量时更明显,而对照组无明显DNA梯形带出现。基础状态下FEC表达Fas抗原基因甚微,OX-LDL处理诱导其表达,并存在剂量依赖关系。结论:OX-LDL诱导EC凋亡,Fas抗原基因表达上调可能是调控机制之一。     

神经肽PACAP拮抗低密度脂蛋白对内皮细胞的损伤

以体外培养的内皮细胞（ＥＣ）为模型，观察神经肽ＰＡＣＡＰ对ＥＣ受低密度脂蛋白（ＬＤＬ）损伤的影响，结果表明，单纯加入ＬＤＬ至培养液时，ＥＣ出现胞体收缩，细胞膜破坏等明显的损伤性改变，在条件培养液中组织型溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）的含量显著降低，脂质过氧化物（ＭＤＡ）的产生显著增加（Ｐ〈０．０１）；而在培养液中同时加有ＰＡＣＡＰ（１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ）的ＥＣ，形态损伤不明显，培养液中ｔ－ＰＡ的含量升高