男性不育症15例睾丸精液超微结构对比分析

目的探讨性功能正常男性不育者睾丸和精液的超微病变，寻找可能致病的因素。方法制作患者睾丸、精液超薄切片，透射电镜下观察分析，结果①睾丸病变为生精细胞成熟障碍（3例）和精子形成异常（12例），后者主要病变在于顶体形成异常和核发育畸变。②精液中异常发现主要为大量末成熟和畸形精子释人精液中。畸形精子头部畸变类同睾丸超薄切片中所见，尾部缺陷在轴丝复合体异常及中段线粒体鞘解体。结论本组男性不有可能因素为遗传、幼年疾病（隐睾、腮腺炎等）、长期服用抗生育药物、棉籽油及生殖道传染。     

超薄切片玻璃刀应用中的体会

超薄切片玻璃刀应用中的体会段玮北京市海军总医院电镜室，１０００３７关键词电子显微镜；标本；切片刀；玻璃刀下面就超薄切片中玻璃刀应用谈一些体会。１方法切片刀的制备是超薄切片成败的关键之一。玻璃刀制作简便，且价格低廉。制作得法也可得到很锐利的刀刃。制刀的...     

非生物标本的电镜样品制备及超切技术的探讨

目的：探讨非生物标本的电镜样品制备及超薄切片技术。方法：选择无色透明纤维，黑色纤维及无色透明薄膜等材料，进行脱水，环氧树脂包埋，超薄切片。结果：切出满意切片，并在电镜下拍摄出高质量的照片。结论：根据非生物标本的特性成功地进行了电镜样品制备及超薄切片，使材料科学的超微结构研究成为可能。     

小鼠早期胚胎细胞超薄切片制备法

目的 探讨小鼠早期胚胎细胞超薄切片的制备方法，观察不同时期小鼠早期胚胎细胞的超微结构变化。方法 在体视显微镜下固定，清洗小鼠早期胚胎细胞，3％－4％琼脂预包埋，常规脱水，渗透，包埋，超薄切片后，透射电镜下观察。结果 准确性高，只需几个胚胎细胞即能做出超薄切片。结论 电镜下胚胎细胞超微结构保存良好。     

电镜半薄切片染色液的改良及应用

电镜是观察组织细胞超微结构的一种手段。但由于切片太小，有时难于观察到目标结构，为此需大量制备样品造成工作量大且消耗多。为使超薄切片能精确地切到目标部位，在行超薄切片前要做半薄切片进行定位。一般是在超薄切片机上切取数张1—2μm厚的切片进行染色观察。半薄切片的染色常规方法有：甲苯胺兰染色法、天青Ⅱ美兰染色法、H-E染色法和Giemsa染色法等，无论哪种方法都需预先做脱树脂处理，     

人精子冷冻复苏后活动力和超微结构变化

应用超薄切片电镜技术结合精子活动轨迹摄片法研究了十二种甘油-蔗糖不同配伍的冷冻保护剂冻存精子的超微结构及活动力。结果发现:①冷冻复苏主要影响精子的膜相结构,且不同部位的生物膜对损伤的敏感性不同;②精子的活动能力明显降低;③以5％甘油、50mmol/L蔗糖配伍的保护剂效果较好。     

电镜半薄切片制备方法的改进

透射电子显微镜生物标本制备中，半薄切片(厚度0．6～0．8μm)的制备是一种常用制样手段。半薄切片图像的清晰度、分辨率远优于石蜡切片，视野大于超薄切片，有利于获得高质量的光镜图像，同时也是电镜超薄切片技术中一种有效的定位方法。半薄切片制备中的一些关键技术如切片、捞片、脱脂、     

培养细胞的超薄切片技术探讨

目的：探讨培养细胞的电镜良好制样和超薄切片方法。方法：乳腺癌细胞系MB-231培养后分成3组：消化离心组、刮除离心组和原位包埋组，比较培养细胞的超微结构特征。结果：原位包埋方法的超薄切片可以清楚地显现细胞为多角形梭形，细胞连接保持良好。其余两组细胞呈圆形、椭圆形，大部分细胞细胞间连接被破坏，分散分布。结论：原位包埋和单层细胞超薄切片方法是电镜下观察培养细胞的最值得推荐的方法。     

Duchenne型肌营养不良症opaque纤维的电镜特征

目的 应用超薄切片电子显微镜技术观察Duchenne型肌营养不良症(DMD)患者病变肌肉超微病理特征，在亚细胞水平上探讨该病病因和发病机理。方法 对临床确诊的7例DMD患者，通过肌肉活检超薄切片透射电镜观察其超微结构变化。结果 超薄切片电镜观察显示：DMD／BDM病变组织存在“Z”线模糊不清，间距变窄，肌原纤维过收缩，肌原纤维明带增宽，肌浆网侵入肌原纤维间。结论 DMD时，肌细脑膜结构缺陷可导致肌纤维变性、坏死。     

防污染的良超薄切片电子染色法

防污染的良超薄切片电子染色法吴洪娟（病理解剖学教研室２６１０４２）理想的超薄切片应具备薄而均匀，无刀痕，无皱褶，无震颤，反差好，无污染等特点。但在枸橼酸铅染色时，由于空气中二氧化碳的介入，切片被碳酸铅沉淀污染，严重时切片无法观察，使前功尽弃。为此，广...     

Evaluation on the Morphology and Membrane Integrity of Immotile Human Sperm

Absolute immotile sperm in the ejaculate is a severe cause of male infertility[1-4]. In recent years, with the development of intracytoplasmic sperm injection (ICSI), this assisted reproductive technique has made it possible to achieve fertilization and p…     

磁场对精子影响的实验研究

目的：探讨磁场对精子结构和功能的影响及其作用机理。方法：采用３种精子活力测定方法,研究不同磁场作用下精子的存活率、活动力和爬升力的变化,并运用透射电镜观察其超微结构改变。结果：受磁场作用,各实验组精子存活率、活动力和爬升力均明显低于无磁对照组;电镜显示实验组精子及其线粒体肿胀,精子细胞膜破裂。结论：在体外实验条件下,一定强度的磁场可给精子的结构和功能带来影响     

胰岛素依赖型糖尿病血小板的大小和外形变化

利用透射电镜和形态计量学技术,观察了10例胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)患者血小板的大小和外形变化:IDDM患者血小板平均直径和体和增大,大截面,大直径血小板增多。提示IDDM患者血小板平均体积增大是由于代谢紊乱造成骨髓释放大体积血小板增多所致。     

中药蛇床子对人类精子超微结构影响的研究

本文应用扫描及透射电镜对经蛇床子作用后的人类精子结构的变化进行了研究，其结果表明，蛇床子对人类精子的表面形态和超微结构均有明显的破坏和损伤。     

Effects of Cryopreservation on the Ultrastructure of Human Testicular Sperm

Objective To investigate effects of cryopreservation on changes of the ultrastructure of human testicular sperm and evaluate the efficacy of cryopreserving testicular tissue as a source of sperm for assisted reproduction. Methods Testicular biopsy tissues were obtained from infertile patients （n=12） with obstructive azoospermia and cryopreserved. Testicular sperm motility was observed after in vitro culture procedure. The ultrastructure of testicular sperm （n=6） was examined by transmission electron microscope. Results After cryopreservation, 10 biopsy tissues frozen revealed motile sperm, and 2 samples showed non-motile sperm. Some testicular sperm in frozen-thawed group had normal morphology in fine structures. Sperm head in frozen-thawed tissue showed a proportion of nuclei with more electron-dense granules of chromatin. In a few frozen-thawed sperm heads, formation of vesicles and degeneration were observed. The frozen-thawed testicular sperm frequently showed swollen or/and ruptured of the plasma membrane and acrosome membranes. Conclusion Cryopreservation of testicular tissue is simple and efficacious for testicular sperm extraction. And the freezing-thawing procedure of testicular tissue causes damage to ultrastructural morphology of human testicular sperm.     

环磷酰胺对小鼠精子发生的影响

观察雄性小鼠经腹腔注射环磷酰胺后,在不同时期其精子及睾丸组织学的变化。结果;第３４,３６ｄ,精子计数下降,畸形率增高;第２１,２８,３４,３６ｄ,生精细胞数均减少;睾丸超微结构的变化主要表现为各级生精细胞核膜的溶解,核的破坏及精子细胞顶体囊泡的异常,但紧密连接不受影响。提示ＣＹ通过对精原细胞及细线前期初级精母细胞产生毒害作用而影响精子发生。     

胞浆内形态学筛选精子注射(IMSI)技术与精子优选

多种研究表明严重头部形态异常精子与受精率、着床率和妊娠率低紧密相关.选择形态优良精子用于辅助生殖治疗是提高其临床结局的有效方式.经低放大倍率光学显微镜(×200)所选出的正常精子会包含一些细微结构缺陷,其用于卵胞浆单精子注射 (Intracytoplasmic sperm injection,ICSI),有时会导致受精失败或胚胎发育停滞.胞浆内形态学筛选精子注射 (Intracytoplasmic morphologically selected sperm injection,IMSI)技术是ICSI与运动精子细胞器形态学检查(Motile sperm organelles morphology examination,MSOME)技术的完美结合,IMSI配备了微分干涉相差显微观测与数位成像技术,使其可在高放大倍率下(×6 600)对运动的活体精子进行形态质量评价,选择头部无/少空泡精子用于显微注射,从而提高受精率、着床率和妊娠率以及降低流产率.本文主要综述了IMSI技术的发展及其在精子优选方面的应用并对IMSI临床结局进行分析,为其应用拓展及进一步功能开发提供理论指导.     

经输精管向附睾内注射甲酸棉酚的抗生育研究

对72只Wistar大鼠经输精管向附睾内注射甲酸棉酚,观察附睾中精子数量、形态、移动距离和附睾、睾丸的组织学改变。结果:注射12h后精子移动距离缩短,24h后精子计数下降,组织学观察见附睾管呈无精状态,睾丸曲细精管各级生精细胞出现变性等损伤性改变,精母细胞脱落入曲细精管管腔,注射甲酸棉酚后2～40d内交配的雌鼠全部不孕。     

一种快速稳定的人精子核双色荧光原位杂交技术的建立

目的:建立快速稳定的人精子核双色荧光原位杂交的实验方法。方法:采用双色荧光原位杂交(fluores cence in situ hybridization, FISH )方法取精子标本用EDTA/PBS液处理,再用二硫苏糖醇(DTT)使精子去凝集,甲醇/冰醋酸固定后制片,变性后与双色荧光直接标记(CEP X、Y)探针杂交。结果:在荧光显微镜下可见标本背景清晰,精子头部染成蓝色,边界清楚,头部有1个绿色荧光信号的精子为 X精子,有 1 个红色荧光信号的精子为 Y精子。精子头部有2个或2个以上信号的精子为染色体数目异常精子。结论:本方法具有快速、稳定、荧光信号强、易分辨等优点,可用于人性染色体非整倍体率的分析研究。     

游离细胞甘露糖受体的亲和细胞化学电镜观察

目的 对小鼠腹腔巨噬细腻及人精子的甘露糖受体（ＭＲ）进行超微结构定位。方法 采用甘露糖基化牛血清白蛋白（ＤＭＡ）结合１０ｎｍ胶体金制备探针ＤＭＡ－Ｇ１０,以此探针标记小腹腔巨噬细胞和获能前后的人精子,并用疼爱 射电子显微民制备的ＤＭＡ－Ｇ１０具有基露糖基结合特性。小鼠腹腔巨噬细胞可分为明、暗中类型。“暗细胞”不含ＭＲ,“明细胞”细胞膜表面含ＭＲ,该受体与ＤＭＡ－Ｇ１０结合后内化入细胞内。人 子发生