86例儿童急性淋巴细胞白血病三色流式细胞术免疫分型研究

目的 探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）三色流式细胞术免疫分型的特点。方法 采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果 CD45/SSC双参数散点图设门方法与FSC/SSC双参数散点图设门方法比较能将骨髓中的原始细胞与正常淋巴细胞、单核细胞及粒细胞明显分开，所得原始细胞经例与形态学分类接近，原始细胞免疫表型假阳性发生率低。86例儿童ALL标本中，B-ALL占95.3%，T-ALL占2.3%。Common-ALL和Pro-B-ALL分别占B-ALL的76.8%和6.1%。57.0%和34.9%的儿童ALL表达CD34和髓系抗原，其中以Pro-B-ALL分别占B-ALL的76.8%和6.1%。57.0%和34.9%的儿童ALL表达CD13和CD33的表达差异无显著性。结论 CD45/SSC双参数散点图设门方法排除了骨髓中正常细胞的干扰，免疫分型结果更可靠。儿童ALL有较高的CD34和髓系抗原表达。     

流式细胞术用于急性白血病免疫分型现状

流式细胞术针对细胞内外的特异性抗原,对急性白血病细胞的来源和分化阶段进行精细检测和分型.并利用急性白血病细胞免疫表型标志对其进行分型,提高了急性白血病诊断准确性,弥补了传统形态学分型的不足,有利于患者的进行个体化治疗及预后的判断.     

180例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析

为了探讨急性白血病的免疫表型特征与诊断价值，采用流式细胞术三色免疫荧光直接标记技术检测白血病患者，根据抗体积分系统进行分型。结果显示，三染色标记法检测180例白血病患者中，急性淋巴细胞白血病(ALL)患者除均表达淋系抗原外，同时有49．4％伴髓系抗原(CD13，CD33)的表达；急性髓细胞白血病(AML)患者除均表达髓系抗原外，同时有43．2％伴淋系抗原(CD4，CD7)表达。结论：流式细胞仪三色免疫荧光直接标记法进行白血病免疫分型能确诊一些特殊类型的白血病．对于急性白血病的诊断治疗和预后判断均有很大帮助。     

急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义

目的探讨急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义。方法 100例急性白血病,采用流式细胞术进行急性白血病免疫表型检测。结果①用特异性抗体将急性淋巴系白血病分为T细胞系列急性淋巴细胞白血病(T-ALL)和B细胞系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)。②用特异性抗体使急性髓细胞白血病(AML)的分型更明确。③发现急性淋巴细胞白血病(ALL)中伴髓系抗原表达(My-ALL)、AML中伴淋系抗原表达(Ly AML)和混合型白血病。结论免疫学分型能反映白血病细胞的特征,提高了诊断的准确性。     

45例儿童急性淋巴细胞性白血病流式细胞术免疫分型的研究

目的研究儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)免疫表型的特点。方法采用流式细胞仪对45例初治儿童急性淋巴细胞性白血病进行免疫表型分析。结果①45例ALL中T淋巴细胞性ALL(T-ALL)5例(11.1%),B淋巴细胞性ALL(B-ALL)36例(79.9%);ALL1型(L1)9例(20%),ALL2型(L2)27例(60%),ALL3型(L3)5例(11.1%);②45例ALL中4例符合急性混合性白血病(HAL)的诊断标准(8.9%),25例(55.6%)为髓系抗原阳性的ALL(My+ALL),其中CD13阳性率最多,为44.4%(20例),CD33为22.2%(10例),CD15为22.2%(10例)。B-ALL中My阳性率为55.6%,T-ALL中My阳性率为20%,有明显差异;L1中My阳性率为22.2%(2/9),L2中My阳性率为70.4%(19/27),L3中My阳性率为40%(2/5),L2中My阳性率明显高于L1和L3(P<0.05)。结论结合免疫表型分析与细胞形态学检验能为儿童急性淋巴细胞性白血病的诊断提供更可靠和更有价值的分型依据。     

87例成人急性白血病三色流式细胞术免疫分型

目的探讨成人急性白血病( AL)免疫分型标准及其意义,了解成人 AL抗原表达规律和免疫亚型分布情况.方法细胞膜抗原采用单克隆抗体三色直接免疫荧光标记法,胞浆内抗原采用双色直标法用流式细胞术测定.分型标准试用抗体积分系统.结果 (1)未分化型 2.3%;单纯型 54.0%,其中急性髓系白血病( AML) 43.6%,淋系 10.3%;变异型 37.9%,其中髓系 28.7%,淋系 9.1%;混合型 5.7%. (2)AL患者 CD34、 CD38 HLA- DR均阳性约 70%, M3患者 HLA- DR与 CD34均阴性, CD38强阳性; AML变异型伴 CD7、 CD19 阳性最常见,其次为 CD2、 CD4、 CD56 ; B- ALL变异型依次为 CD33、 CD13阳性. CD117对髓系特异性强.结论本方法直接准确地反映成人 AL免疫分型特点.     

流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床意义

目的探讨流式细胞术(FCM)在急性白血病免疫分型中的临床意义。方法利用CD45/SSC设门的四色荧光FCM检测42例急性白血病病人骨髓细胞表面标记。结果分别以cCD3c、CD79a、cMPO作为T-ALL、B-ALL、AML的系列特异性标记。30例AML中cMPO阳性率为90.0%;12例B-ALL中cCD79a阳性率为91.7%.42例患者中有交叉免疫标记的占40.5%,其中髓系白血病中常见交叉表达淋系抗原CD56、CD7、CD19、CD10;淋巴细胞白血病中常见交叉表达髓系抗原CD13、CD33等。M2出现交叉表达现象最多见,阳性率为76.9%,常见表达CD56。伴CD56、CD7交叉表达的AML预后差。结论利用流式细胞术进行免疫表型分析对急性白血病的诊断及预后判断具有重要临床意义。     

201例成人急性白血病免疫分型特点

目的探讨成人急性白血病(AL)三色流式细胞术免疫分型的特点。方法采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果156例急性髓细胞系白血病(AML)主要表达CD117(90.38%)、CD13(87.18%)、CD33(71.79%)、CD34(67.74%)、HLA DR(60.90%)。33.98%的AML患者伴有淋系抗原表达,最常见为CD7(24.36%)。B细胞系急性淋巴细胞白血病(ALL)35例(17.4%),主要表达CD19(100.00%)、HLA DR(100.00%)、CD10(74.29%)、CD34(60.00%)、CD20(31.40%)。T细胞系ALL10例(4.98%),主要表达CD7(80.00%)、CD2(60.00%)。24.5%的ALL表达髓系相关抗原,主要是CD13(17.80%)及CD33(11.10%)。结论流式细胞仪三色荧光标记法进行AL免疫分型,对白血病的准确诊断和分型有重要的指导意义。     

201例成人急性白血病免疫分型特点

目的 探讨成人急性白血病(AL)三色流式细胞术免疫分型的特点。方法 采用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果 156例急性髓细胞系白血病(AML)主要表达CD117(90．38％)、CD13(87．18％)、CD33(71．79％)、CD34(67．74％)、HLA-DR(60．90％)。33．98％的AML患者伴有淋系抗原表达,最常见为CD7(24．36％)。B细胞系急性淋巴细胞白血病(ALL)35例(17．4％),主要表达CD19(100．00％)、HLA-DR(100．00％)、CD10(74．29％)、CD34(60．00％)、CD20(31．40％)。T细胞系ALL 10例(4．98％),主要表达CD7(80．00％)、CD2(60．00％)。24．5％的ALL表达髓系相关抗原,主要是CD13(17．80％)及CD33(11．10％)。结论 流式细胞仪三色荧光标记法进行AL免疫分型,对白血病的准确诊断和分型有重要的指导意义。     

115例急性髓细胞白血病多参数流式细胞术免疫表型分析

免疫表型检测已成为白血病诊断和分类的重要手段。为了解急性髓细胞白血病(AML)免疫表型特征，利用三色流式细胞术CIM5／SSC参数散点图设门方法，对115例AML患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析：结合FAB分类，比较AML不同亚型中抗原表达的差异，并对其诊断价值加以探讨。结果显示：在AML患者中，CD33、CD38和CDl3的表达最常见，分别达94．8％、91．3％、89．6％。在淋系抗原中，CD7的表达最为常见(20．2％)，其次是CD19(16．5％)和CD2(15％)，某些免疫表型特征与FAB分类具有相关性，包括M3中缺乏表达HLA—DR、CD34和CD56，但CD2的表达增加；M2中CD19，M5中CD14和CD56的表达增加，而M0中未见MPO的表达，结论：多参数流式细胞术是诊断AML的一项可靠技术，AML某些免疫表型特征与FAB分类具有明显相关性．     

四色流式细胞术分析B细胞型急性淋巴细胞白血病免疫表型

为了研究国人B细胞型急性淋巴细胞白血病(B-ALL)免疫表型特点，使用了四色流式细胞术CD45／SSC 设门分析181例B-ALL的免疫表型。研究结果发现，所有检测病例CDl9阳性率100％，HLA-DR阳性率98．9％，CD38，CD10和CD34阳性率分别为88．5％，76．8％和76．8％，CD117与T系抗原CD2和CD7在B-ALL中很少表达。儿童组(≤14岁)CD10比例较高，青少年(15-18岁)和成人组(≥19岁)髓系相关抗原CD13和(或)CD33表达较高。各年龄组CD10 ／CD34 型比例最高，随年龄增长CD10 /CD34 型比例升高。CD10-CD34 型伴殖系抗原表达率明显高于其它亚型。与CD45 病例相比，CD45-或CD45 /-病例常伴有较高的CD10表达。43例标本RT-PCR检测bcr／abl结果显示：bcr／abl 组和bcr／abl-组伴殖系抗原表达率无显性差弄，m-bcr／abl 主要见于CD10／CD34 型。结论：典型的B-ALL细胞表达CD19和HLA-DR，不表达CD117。不同发育阶段CD34，CD10和CD45表达不一。青少年组免疫表型与成人组相似。CD45 多见于CD10-B-ALL。儿童组殖系抗原表达率较低。m-bcr／abl 多见于CD10／C1)34 型B-ALL。     

三色流式细胞术分析急性淋巴细胞白血病免疫分型

本研究探讨急性淋巴细胞白血病（ALL）各亚型免疫分型的特点及其临床意义。利用CD45／SSC双参数散点图设门方法,对40例ALL进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果显示：采用CD45／SSC双参数散点图设门法能清楚地区分骨髓或外周血中的淋巴细胞、单核细胞、粒细胞、有核红细胞和原始细胞群。40例ALL中B—ALL26例,T-ALL11例,HAL3例。26例B—ALL中CD19全部（100％）阳性表达,而11例T-ALL中CD7表达的阳性率最高（100％）。伴髓系抗原表达的ALL（My＋ALL）比较常见,本实验中共有12例,约达到30．0％,经常累及B淋巴系统（占My＋ALL的75．0％）;在髓系抗原中以CD13表达阳性率最高;有3例患者为急性杂合性白血病（HAL）,发病率为7．5％,且全部为髓系、B系共同表达,其中有2例患者CD34阳性表达,占66．67％。结论：在流式细胞仪上采用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术分析,能排除正常细胞的干扰,使免疫分型的结果更为准确、可靠。     

急性早幼粒细胞白血病143例免疫表型研究

为了探讨急性早幼粒细胞白血病（APL）免疫表型特征,以CD45／SSC设门,对143例APL进行多参数流式细胞术免疫分型,比较初发和复发时免疫表型变化。随机选择同期42例HLA—DR阴性的非APL的急性髓系白血病（AML）患者作为对照,其中31例CD34也为阴性,探讨其与初发APL的免疫表型的差异。结果表明：①初发APL中91．9％表现为cD34和HLA—DR共阴性,复发时CD34和HLA—DR阳性率增高（37．5％vs3．0％,37．5％vs3．9％）。初发APL组CD34阳性率低于DR^-AML组（3．0％vs23．4％）,初发APL组CD34即使阳性,其表达水平也较低（P〈0．05）。②初发APL组CD33阳性率高于各对照组（97．0％vs75．0％,83．3％,83．9％）,其表达水平亦高于各对照组（P〈0．05）。③初发APL组淋系抗原中仅见CD2的表达,未见CD7的表达,而DR—AML组、CD34^-／DR—AML组CD7阳性率分别为12．0％,6．5％,高于初发APL组（P〈0．05）。结论：免疫表型检测可以为APL的快速诊断提供依据,对HLA—DR^-的AML可以从CD34的表达与否、CD33的表达水平、淋系抗原表达情况以及SSC特征等方面与APL进行鉴别。     

282例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析

目的探讨急性白血病免疫表型特征及诊断价值。方法采用流式细胞术三色荧光直接标记技术检测282例AL患者,根据抗体积分系统进行分型。结果①按免疫表型的特征可将急性白血病分为4类:单表型急性白血病(82.27％),表达某一系列抗原为主的急性白血病(9.22％),急性杂合性白血病(HAL)(7.09％),未分化型急性白血病(AUL)(1.42％);②80％以上急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者主要表达MPO(96.38％)、CD13(89.86％)、CD33(69.57％),90％以上急性淋巴细胞白血病(ALL)主要表达cCD79a(100％)、CD19(93.67％)或cCD3(100％)、CD2(100％),表达某一系列抗原为主的AL以急性B淋巴细胞白血病伴随系表达(My B-ALL)为主(62.50％),HAL以B-ALL及MAL为主。结论流式细胞仪三色免疫荧光直接标记法进行AL免疫分型,cCD3、cCD79a、MPO为系列特异性标志,CD117为早期髓细胞的标志,对AL的诊断及一些特殊类型的白血病的确诊、治疗和预后均有重要意义。     

流式细胞术在159例急性白血病免疫分型中的应用

目的探讨急性白血病免疫分型的特点及其临床意义。方法利用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果（1）在119例AML患者中髓系相关抗原CD13（91．59％）、CD117（86．97％）和CD33（84．03％）阳性表达率最高,还有14．28％的AML患者伴有淋系抗原的表达,主要为CD7（14．28％）和CD19（1．68％）。29例出ALL患者,CD19和HLA-DR全部阳性（100％）,其次为cD34（92．03％）、CD22（62．07％）。11例T-ALL患者,CD7表达的阳性率最高（100％）,CD3（72．73％）和032（63．64％）次之。（2）AML患者中,除大多数AML-M3患者CD34和HLA-DR为阴性表达外,其他亚型患者CD13、CD117、CD33、CD34和HIA-DR均为高表达。结论在流式细胞仪上采用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术分析,使得免疫分型的结果更为可靠。     

用流式细胞术结合单克隆抗体CD71,Ki-67和PCNA研究儿童急性淋巴细胞白血病的细胞增殖(英文)

为研究儿童急性淋巴细胞白血病的细胞增殖动力学,我们用流式细胞术结合单克隆抗体CD71,Ki-67和增殖性细胞核抗原(PCNA)检测了21例初诊急性淋巴细胞白血病(ALL)儿童骨髓细胞的增殖性抗原表达情况。结果表明:白血病细胞的CD71标记指数(LI)与正常细胞相比无显著差异,且个体间异质性较大;白血病细胞的Ki-67和PCNA的LI明显高于正常细胞,每例标本的PCNA LI均高于Ki-67LI,两者间有明显相关关系。本实验结果提示白血病细胞的增殖活力明显高于正常细胞,单克隆抗体Ki-67和PCNA是检测白血病细胞增殖活力的有效生物学指标,且PCNA的敏感性高于Ki-67。     

Flow Cytometry Immunophenotyping Evaluation in Acute Lymphoblastic Leukemia: Correlation to Factors Affecting Clinic Outcome

The authors conducted a flow cytometry immunophenotyping study in patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) from Natal, Rio Grande do Norte, Brazil. The patients (n = 126) were newly diagnosed using a panel of monoclonal antibodies: CD1a, CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CD10, CD13, CD33, CD14, CD19, CD22, CD79a, CD117, CD34, anti‐IgM, anti‐TdT, anti‐HLA‐Dr, and anti‐human kappa and lambda light chains. Additional data, such as patients' age and gender, clinical and laboratory findings such as presence of tumor masses, lymphadenopathy, hepatomegaly, splenomegaly, leukemic infiltration in the central nervous system (CNS) were also investigated. Results showed that 56.7% of the cases were B‐lineage ALL and 55% were T‐cell ALL. Also, we found that males were more affected by the disease, regardless of immunological classification. The correlation between age and immunological subtypes showed that the B‐lineage ALL occurred more frequently in patients aged under 15while the T‐cell ALL subtype was more frequent in adults. Immunophenotypic profiles and morphological subtypes showed a direct correlation between L3 subtype and B‐lineage ALL, while L1 and L2 subtypes correlated more often with B‐cell lineage and T‐cell ALL, respectively. Correlation analysis between immunophenotypic and clinical profiles showed that T‐cell ALL was more associated with a higher incidence of lymphadenopathy, hepatomegaly, splenomegaly and CNS leukemic infiltration, also showing a greater blast cell count in peripheral blood than the other subgroups. The presented data suggest that immunophenotyping is an important method in the diagnosis, monitoring and prognostic assessment in determining the pathological mechanisms of evolution of ALL.