前列腺组织雄激素受体的测定方法

建立雄激素受体测定的放射配基结合分析法测得人前列腺组织中胞浆胞核雄激素受体均可被约5×10^-9mol/L的双氢睾酮饱和，其最大结合容量(Bmax)及平衡解离常数(Kd)分别为；胞浆129．4×10^-15mol/mg，0．88×10^-9mol／L胞核176．2×10^-15mol／mg，3．2×10^-9mol／L。人前列腺癌胞浆、胞核雄澈素受体均高于正常前列腺(n=3)及前列腺肥大(n=32)。用融裱法放射自显影证实雄激素受体主要分布在前列腺组织的腺区，尤其是在腺上皮细胞核内。     

良性增生前列腺组织上皮和间质细胞雄激素受体测定

用~3H-Mibolerone为放射性配体,分别测定了正常人(n=8)及良性增生(n=20)前列腺上皮、间质细胞雄激素受体(AR),结果表明,AR含量以fmol/mgDNA表示时,正常前列腺组织上皮、间质部分分别为352.3±150.9和728.7±369.4;良性前列腺增生(BPH)组织上皮、间质部分分别为358.0±161.8和471.9±254.0,经统计学处理,AR在BPH及正常前列腺组织上皮、间质部分之间差异无显著性,表明AR在前列腺组织中的分布和含量与BPH的发病无直接关系。     

前列腺雌,雄激素受体的研究

本文对正常人、增生无症状和前列腺增生症的前列腺雌、雄激素受体进行了测定。雌激素受体(ER)分布在间质和上皮细胞中,雄激素受体(AR)分布在上皮细胞中(P<0.005),内外区无区别(P>0.05)。ER在增生无症状组最高(66.6%),正常组最低(25%);AR正常组高于其它两组,随年龄的增加而递减。     

人前列腺组织中雄激素受体亚型表达与基因克隆

目的：研究人前列腺组织中雄激素受体（AR）亚型的表达及其基因学基础。方法：应用聚丙烯酰胺凝胶等电泳和分子生物学基因克隆技术,对1例前列腺增生症（BPH）患者手术切除的前列腺组织中的AR亚型蛋白表达与AR亚型基因进行了研究。结果：在该例患者增生良性前列腺组织中,发现有3个AR亚型蛋白表达,并克隆出了1条有1913个核苷酸组成的AR亚型cDNA,命名为PHAR－1。GenBank登记号为：BankIT372205 324243.PHAR－1与GenBank中已登记的AR序列比较,有3段序列共961个核苷酸相同,有952个核苷酸组成的序列不同,显示了这条新的AR cDNA的同源性和特异性。结论：同一组织标本的3个AR亚型蛋白表达并克隆1条ARcDNA基因的结果,提示AR亚型蛋白可能源于一基因的不同起始密码子的转录作用。AR亚 型cDNA的克隆为研究活AR亚型基因的药物,探讨治疗前列腺癌的新策略奠定了基础。     

雄激素受体在前列腺增生和前列腺癌组织中的表达

目的探讨雄激素受体(AR)在前列腺特异性抗原高的良性前列腺增生(BPH)组织和前列腺癌(PCa)组织中表达的意义。 方法采用免疫组化和RT-PCR法研究AR在32例前列腺特异性抗原(PSA)≥10ng／mL的BPH(简称高PSA组)、40例PCa组织中表达的情况;32例PSA<10ng／mL的BPH(简称低PSA组)组织为对照组。 结果低PSA组、高PSA组、PCa组AR表达的阳性率分别为84.38％、93.75％、65.00％,相互比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。AR在高PSA组上皮、间质组织中的表达高于低PSA组和PCa组织(P<0.05)。高分化癌、中分化癌、低分化癌的AR表达的阳性率分别为66.67％、55.56％、30.00％,高、中分化癌的AR表达的阳性率比低分化癌高(P<0.05)。早期前列腺癌的AR表达阳性率(68.75％)比晚期前列腺癌(41.67％)高(P<0.05)。早期前列腺癌的AR mRNA表达量比晚期前列腺癌高(P<0.05);高、中分化癌的AR mRNA表达量比低分化癌高(P<0.05)。 结论AR在高PSA组前列腺增生组织中表达增高,提示其在前列腺增生中的过表达可能是PSA增高的又一因素。AR的表达与肿瘤分级、分期相关。     

雄激素对大鼠前列腺不同分叶雄激素受体及其mRNA表达的影响

目的 探讨雄激素对大鼠前列腺腹叶及侧叶1(Lateral lobe part1，LP1)、侧叶2(Lateral lobe part2，LP2)、雄激素(Androgen receptor，AR)及AR mRNA表达的影响。方法 选用健康成年雄性Wistar大鼠，随机分成以下3组：正常对照组(N组)；雄激素去势组(C组，共56只)：经阴囊手术切除双侧睾丸，制成雄激素去势动物模型，再分成去势后1d(C1)、3d(C3)、7d(C7)及14d(C14)四个时相点；雄激素替代组(T组，共28只)：双侧睾丸切除后14d，丙酸睾丸酮0．5ml(2．5mg/只)皮下注射，1次／d，分成雄激素替代后1d(T1，14只)，7d(T7，14只)两个时相点。应用免疫组织化学及半定量PCR方法分别检测大鼠前列腺121及LP2 AR、AR mRNA的表达。结果鼠前列腺腹叶、LP1及LP2对雄激素调节的敏感性不同，在腹叶及LP1，雄激素与AR表达呈正相调节关系，雄激素去势后，AR表达下调，AR mRNA呈一过性上调；而在LP2，情形与前者明显不同，雄激素去势后，AR mRNA表达持续上调，而对AR表达无明显影响。结论 鼠前列腺不同分叶对雄激素调节敏感性与其AR表达的调节方式不同有关。     

雄激素受体在前列腺增生和前列腺癌组织中的表达

目的：研究雄激素受体（AR）在良性前列腺增生（BPH）和前列腺癌（PCa）组织的表达，探讨雄激素受体与良性前列腺增生和前列腺癌的关系。方法：BPH，PCa和正常对照组各20例，AR采用免疫组织化学SP法检测，用半定量方法计算结果。结果：BPH组腺上皮和间质中AR表达阳性率显著高于对照组（P＝0．0012，P＝0．0276），同时腺上皮中AR强阳性率亦高于对照组（P＝0．008），BPH组中AR在腺上皮中的表达比间质中强（P＝0．0001）。PCa组AR表达明显低于正常前列腺对照组（P＝0．027）。阳性染色颗粒主要分布在前列腺腺上皮的细胞核中，结论：AR在BPH组织中的阳性表达率高于正常前列腺组织，而在PCa组织中的阳性表达率低于正常前列腺组织，AR主要在前列腺腺上皮的细胞核中表达。     

前列腺癌中雄激素受体基因突变的研究

应用受体的放射配基结合分析（ＲＢＡ）和多聚酶链反应单链构象多态分析（ＰＣＲＳＳＣＰ）技术对未经治疗的１６例前列腺癌和２３例前列腺增生症组织中雄激素受体的表达水平和雄激素受体基因第８外显子突变情况作检测。结果显示，前列腺癌中雄激素受体的平均水平明显高于前列腺增生症，在２例前列腺癌和１例前列腺增生症标本中检出雄激素受体基因第８外显子突变，前列腺癌中雄激素受体的表达水平与雄素受体基因突变和前列腺癌临床分期具有相关性。结果表明，在前列腺癌中雄激素受体有过量表达，有必要对雄激素受体基因突变与前列腺癌和前列腺增生症的关系做进一步研究。     

输精管结扎与吻合术后前列腺胞核雄激素受体的变化

日本大耳白雄兔28只,其中7只做为假手术对照组(SOG),7只做为输精管结扎组(VG),14只为输精管吻合组(VAG)。16个月后,检测前列腺胞核雄激素受体的变化。结果是SOG、VG、VAG胞核雄激素受体的Kd值分别为4.81nmol/L,9.36nmol/L,5.67nmol/L;最大结合容量(fmol/mg DNA)为203.66,440.89,232.11,VG胞核雄激素受体Kd值及最大结合容量虽有升高,但VAG与SOG则呈一致的变化。单点分析三组的受体水平无显著差异(P>0.05)。说明,输精管结扎及吻合对前列腺胞核雄激素受体的水平无明显影响。     

乳腺癌组织核基质雌激素受体测定

采用放射配基结合分析法显示人乳腺癌组织核基质中存在与H~3-雌二醇(~3H-E_2)特异结合的雌激素受体,其~3H-E_2饱和浓度为16～20nmoI/L;平衡解离常数为6.05nmol/L;结合反应的时间、温度及非标记配基的浓度对特异性结合均有较大影响,乳腺癌组织核基质中蛋白及DNA含量分别占全核的8.3％、5.68％,与正常乳腺组织无差异,而核基质雌激素受体(EmR)含量有明显改变。     

自制抗人雄激素受体单克隆抗体检测肝癌标本中AR的表达

目的：探讨原发性肝癌病人雄激素受体表达，进一步评价自行研制抗人雄激素受体(androgen receptor,AR)单克隆抗体(McAb)。方法：采用免疫组化法检测35例原发性肝癌病人雄激素受体。结果：原发性肝癌病人雄激素受体71％为阳性，癌组织与癌周围组织相比，AR表达有显著差异(P＜0．01)。自制AR McAb与进口AR多抗存在正相关r＝0．87，P＜0．001。结论：原发性肝癌病人雄激素受体表达与肿瘤大小及分化程度存在相关性，可为原发性肝癌激素治疗提供初步资料；自制抗AR McAb可代替进口AR多杭应用于临床及科研工作。     

人乳腺癌组织雌二醇受体测定两种分析法的比较

用单一饱和剂量分析法(下称单点法)检测了42例人乳腺癌组织雌二醇受体(ER)的容量,每例肿瘤组织同时用葡聚糖包裹炭末法(下称多点法)作对照检查。单点法阳性检出率为59.5％,多点法45.24％,两者无显著差异(P>0。1)。在单点法阳性的25例中有16例、阴性的17例中有14例与多点法检出结果一致,总符合率为71·4％。受体平均结合容量分别为38.22±18和27.91±28fmol/mg蛋白,两者无显著差异(P>0·3),两种分析法的定量有非常显著相关(r=0.6981,P相似文献   

雄激素及其拮抗剂对MCF-7乳腺癌细胞株雄激素受体表达的影响

研究药理浓度的睾丸酮对ＭＣＦ－７乳腺癌细胞株雄激素受体表达的作用，以及雄激素拮抗剂氟他胺和羟基氟他胺对该作用的影响。方法应用荧光激活细胞分离器（ＦＡＣＳ）检测雄激素受体阳性的细胞。结果１０－９～１０－６ｍｏｌ／Ｌ的睾丸酮使ＭＣＦ－７乳腺癌细胞雄激素受体表达下调；１０－６ｍｏｌ／Ｌ的氟他胺能显著拮抗睾丸酮下调雄激素受体表达的作用（Ｐ＜０．０１）；羟基氟他胺更显著拮抗睾丸酮的作用，使雄激素受体表达显著增多，并呈剂量相关性（１０－８ｍｏｌ／Ｌ时Ｐ＜０．０５；１０－６ｍｏｌ／Ｌ时Ｐ＜０．００１）。结论ＭＣＦ－７乳腺癌细胞株中雄激素受体存在自动调节，氟他胺和羟基氟他胺上调雄激素受体的表达。     

人良性增生前列腺中的雄激素受体测定

以~3H-R1881为放射配体,测定良性增生与正常人前列腺中雄激素受体(AR)的含量,胞浆中AR含量分别为9.11±1.77(n=19)和9.01±1.24(n=4)fmol/mg蛋白,胞核提取液中AR含量分别为22.39±2.54(n=12)和24.04±2.08(n=6)fmol/mg蛋白。结果显示人良性增生前列腺胞浆和胞核提取液中AR含量与正常相比均无明显差异(P>0.05)。     

人肝细胞癌和癌旁组织中雄激素受体的定量检测

①目的了解肝癌病人癌与癌旁组织中雄激素受体（ＡＲ）的改变。②方法用葡聚糖包裹活性炭饱和吸附法（ＤＣＣ法）检测２１例肝细胞癌（ＨＣＣ）癌组织和癌旁组织中ＡＲ，并与７例男性肝硬变病人肝组织中的ＡＲ进行了比较。③结果癌组织中ＡＲ的含量显著高于癌旁组织（ｔ＝２．７９３，Ｐ＜０．０１）及硬变肝组织（ｔ＝２．３２３，Ｐ＜０．０５）。④结论ＡＲ的增加与肝细胞的恶变有关，从而为ＨＣＣ的内分泌治疗提供分子生物学依据。     

DHCC受体检测方法的研究

本文采用葡聚糖包裹的活性炭石(DCC)法、羟基磷灰石(HAP)法及等电聚焦电泳(IEF)法,在各种条件下检测了1.25(OH)_2D_3(DHCC)受体的含量。这3种方法得到的表现解离常数(Kd)分别等于4.2×10~(-9)mol/L、2.3×10~(-9)mol/L和6.4×10~(-9)mol/L;该受体蛋白分别在10nmol/L、8nmol/L和30nmol/L浓度的〔~3H〕DHCC处被饱和。该受体对D_3类似物的结合能力依次为1,25(OH)_2D_3>>25(OH)D_3>D_3≈E_2。我们所测佝偻病鸡3种组织中该受体含量依次为肠>输卵管壳腺>>肝。用DCC法,在4℃孵育2～5h,结合最稳定。用KTED缓冲液测得的胞液DHCC受体含量比用TED缓冲液高(P<0.05)。