共表达基因疫苗MAGE-1/IL-18的抗肿瘤免疫治疗作用

目的观察已构建的共表达基因疫苗pcIL-18-MAGE诱导特异性免疫应答的能力和抗肿瘤免疫治疗作用。方法共表达疫苗肌注小鼠,间隔十天加强免疫一次,共免疫三次,以pcMAGE-1、 pcIL-18、pcDNA3和PBS为对照,检测小鼠脾细胞上清液IL-12和IFN-γ的浓度、脾细胞CTL杀伤活性及小鼠T细胞亚群情况;观察基因疫苗免疫MAGE (+)小鼠的成瘤时间和生存时间。结果pcIL-18-MAGE质粒免疫的小鼠,其脾细胞对SMMC-7721的杀伤率最高,与各对照组相比,差异有统计学意义;脾细胞CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ T细胞和上清液中细胞因子IL-12和IFN-γ均明显升高。共表达疫苗免疫MAGE (+)小鼠后,小鼠成瘤时间明显延迟,生存时间明显延长。结论共表达基因疫苗pcIL-18-MAGE在实验动物体内有显著的诱导特异性抗肿瘤免疫作用,且对肿瘤的生成有一定的抑制作用。     

载脂蛋白C3 转基因小鼠脾脏免疫细胞表型及其活性分析

目的：分析载脂蛋白C3（Apo C3）转基因小鼠脾脏免疫细胞的表型及活性。方法：以12只ICR背景Apo C3转基因小鼠为研究模型,选取鼠龄/性别匹配的野生型小鼠作为对照,采集小鼠球后静脉丛血液,以酶反应显色比色法联合酶标仪测定血浆甘油三酯水平,选取血浆甘油三酯含量≥ 1 000 mg/dL （11.3 mmol/L）的小鼠用于后续实验。取小鼠脾脏制备成单细胞悬液,采用细胞膜表面分子、胞内分子及核内分子染色法,通过流式细胞术检测转基因小鼠和野生型小鼠脾脏免疫细胞频率和表型。再将转基因小鼠或野生型小鼠脾脏细胞与结肠癌细胞MC38分别以1：1、1：3、3：1效靶比共培养72 h后,通过流式细胞术检测CD8⁺ T细胞CD107a的表达。结果：Apo C3转基因小鼠血浆甘油三酯含量较野生型小鼠显著升高（P<0.01）,而体质量差异无统计学意义（P>0.05）。与野生型小鼠相比,Apo C3转基因小鼠脾脏CD3⁺CD8⁺、CD3⁺CD8⁺NKG2D⁺细胞频率明显增多,髓系抑制性Gr-1⁺CD11B⁺细胞频率增加,脾脏NK1.1⁺NK、NK1.1⁺NKG2D⁺细胞的频率明显减少（P均>0.05）;脾脏CD3⁺CD4⁺NKG2D⁺、CD3⁺CD4⁺IL-17⁺细胞频率以及调节性T细胞,NKT细胞,γδT细胞,B细胞和巨噬细胞频率均无明显变化（P均>0.05）。Apo C3转基因小鼠CD8⁺CD62L^-CD44⁺、CD8⁺CD44⁺KLGR1⁺频率升高,以效应性T细胞为主,且CD8⁺ T细胞分泌IFN-γ活性增强;转基因小鼠中CD8⁺ T淋巴细胞CD107a的表达增加差异均具有统计学意义（P均<0.05）。结论：Apo C3转基因小鼠呈现高水平血浆甘油三酯,其免疫细胞表型及活性具有显著变化,其中CD8⁺ T细胞频率及生物活性上调,髓系抑制性细胞频率升高,NK细胞频率降低;并且转基因小鼠中CD8⁺T淋巴细胞对靶细胞杀伤能力增强。     

表皮生长因子受体通路底物8疫苗对乳腺癌细胞的抑制效应及其可能机制

目的：探索表皮生长因子受体通路底物8（epidermal growth factor receptor substrate 8,EPS8）疫苗对乳腺癌细胞的抑制效应及其可能的机制。方法:Western blotting检测EPS8蛋白在小鼠乳腺癌4T1细胞株中的表达。通过基因重组、表达和纯化等技术制备特异性的小鼠源性EPS8,以EPS8蛋白为靶点制备抗肿瘤疫苗并免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定免疫前后不同时间小鼠血清内抗EPS8抗体效价;流式细胞术检测免疫前后的脾T淋巴细胞亚群比例。建立乳腺癌4T1细胞荷瘤小鼠模型并接种EPS8疫苗,接种佐剂作为对照,比较2组荷瘤小鼠的生存期、肿瘤体积、肿瘤重量,计算EPS8疫苗抑瘤率;流式细胞术检测荷瘤小鼠脾T淋巴细胞亚群比例,LDH法检测其细胞毒性T细胞（CTL）杀伤率。结果：EPS8蛋白在乳腺癌4T1细胞株中高表达。成功构建的EPS8蛋白疫苗免疫小鼠后产生抗EPS8抗体,且随着免疫次数的增加,小鼠体内抗EPS8抗体滴度呈上升趋势。乳腺癌4T1细胞接种于经EPS8疫苗或佐剂免疫后的小鼠后,与佐剂对照组相比,EPS8疫苗组小鼠生存期显著升高\[中位生存时间：44(38~50) vs 37 (34~40) d; t=2.477, P=0043\],肿瘤质量显著降低\[（2.21±0.35）vs（331±0.88）g;t=3.574,P=0.009\],EPS8疫苗的抑瘤率为33.23%。EPS8疫苗组小鼠脾CD4+T比例和CD4+/CD8+比值均显著高于佐剂对照组（P<0.001）,EPS8疫苗组CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞的比值显著低于佐剂对照组（P<0.001）。效靶比为20〖DK〗∶1时,EPS8疫苗组CTL对靶细胞的杀伤活性即显著高于佐剂对照组\[(19.05±4.41)% vs (13.36±3.10)%;t=2263,P=0.040\] 。结论：EPS8疫苗不仅具有诱导小鼠产生体液免疫应答的功能,还能够降低荷瘤小鼠体内Treg细胞比例,激活机体内T细胞免疫功能;EPS8疫苗可抑制肿瘤的生长、有效延长荷瘤小鼠的生存期。     

fat-1基因对乳腺癌细胞的增殖抑制作用

目的: 以胃癌特异性多肽抗原MG7为靶点研制胃癌特异性纳米疫苗,并观察其对小鼠的免疫效能.方法: 人工合成胃癌MG7-Ag的模拟表位多肽,用磁力超声法将其包封于纳米乳剂中,通过透析纯化,HPLC检测其包封效率.用包封有MG7抗原肽的纳米疫苗免疫健康Balb/c小鼠,以空白纳米疫苗和PBS作为对照,测定其免疫活性,通过ELISA测定血清中抗MG7抗体的效价;ELISPOT测定小鼠脾CTL活性.同时,用表达MG7-Ag的小鼠艾氏腹水瘤细胞进行肿瘤攻击2周,观察疫苗对小鼠的保护作用.结果: 成功制备了胃癌MG7-Ag的纳米疫苗,并具有较好的包封率和较好的稳定性,小鼠产生MG7抗体, ELISPOT检测包封组与对照组相比分泌IFN-γ的活性淋巴细胞数量明显增高.疫苗免疫组8只小鼠中有2只未见肿瘤形成, 而对照组8只小鼠则全部成瘤.结论: 胃癌MG7-Ag表位纳米疫苗具有免疫原性,可以诱导小鼠产生抗肿瘤免疫.     

表位多肽在肿瘤治疗中的现状

人们对肿瘤免疫应答机制的研究越来越深入,由此认识到启动CD8+T细胞免疫应答的是与MHC分子结合的氨基酸短肽,而不是整个氨基酸序列,这个短肽就是CTL（细胞毒性T淋巴细胞）表位。随着肿瘤免疫治疗的研究进展,以各种肿瘤的抗原表位为基础所开展的疫苗研究取得了很大的进步。尤其是CTL表位多肽疫苗是新一代抗肿瘤疫苗研究的热点,它主要是以肿瘤相关抗原或肿瘤特异性抗原为基础设计的,可采用人工合成而且制备过程简单方便、获得的纯度高、抗肿瘤作用安全性好而且特异性高。国内外学者已经预测和筛选了很多新的肿瘤抗原表位,有的已经进入了临床试验,本文就CTL表位多肽疫苗在抗肿瘤治疗中的最新研究进展及存在的问题的研究现状进行综述。     

Fms样酪氨酸激酶3配体联合CpG和肿瘤抗原治疗肿瘤的研究

背景与目的:Fms样酪氨酸激酶3配体(fms-like tyrosine kinase 3 ligand,FLT3-L)、CpG虽可作为免疫调节剂发挥抗肿瘤作用,但单独用于治疗肿瘤效果不佳.本研究旨在探讨FLT3-L+肿瘤抗原+CpG联合应用对肝癌小鼠的治疗效果及机制,并探讨FLT3-L与GM-CSF在肿瘤治疗效果方面的差异.方法:选择小鼠H22肝癌模型为研究对象,分为FLT3-L+CpG组、GM-CSF+CpG组和PBS组.皮下注射给药后,用流式细胞术检测各组小鼠体内免疫细胞激活情况,免疫组化法检测肿瘤组织及局部细胞浸润情况,ELISA法检测小鼠体液免疫激活情况,同时观察各组小鼠生存期的差异,评价各组药物的抗肿瘤效果及可能的作用机制.结果:(1)FLT3-L+CpG组小鼠肿瘤生长明显被抑制,小鼠生存期显著延长,同GM-CSF+CpG组和PBS组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).(2)脾脏淋巴细胞亚群分析显示,FLT3-L+CpG组CD3+T细胞比例显著上升,CD4+、CD8+亚群比例较PBS组与GM-CSF+CpG组均明显上升,CD4+CD25+Treg细胞比例明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)肿瘤组织形态学分析显示,FLT3-L+CpG组可见大片的组织坏死和显著的淋巴细胞浸润.(4)肿瘤局部浸润淋巴细胞表型分析显示,FLT3-L+CpG组肿瘤局部NK细胞、DC细胞、CD8+T细胞明显增加,较各治疗组均有明显变化,与PBS相比差异有统计学意义(P＜0.05).(5)FLT3-L+CpG组与GM-CSF+CpG组小鼠体内细胞因子IFN-y、TNF-α、IL-2、IL-12均明显升高(P＜0.05).结论:FLT3-L+肿瘤抗原+CpG联合应用可发挥明显的抗肿瘤作用.此方案可能通过打破肿瘤免疫耐受,激活和增加循环中T细胞,并趋化NK细胞、DC细胞、CD8+T细胞到肿瘤局部,发挥杀伤肿瘤细胞的作用;同时可活化免疫因子网络,通过细胞免疫和体液免疫共同发挥抗肿瘤作用.     

含IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗对肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞功能的影响

目的:研究含有小鼠IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗对肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的功能影响。方法:构建含有小鼠IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗,免疫小鼠后,分离脾脏淋巴细胞,分析CTL的表面分子,分泌细胞因子能力,细胞毒功能和抗凋亡能力。结果:含有小鼠IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗能上调CTL的CD8和CD44分子表达,促进IFN-γ分泌,增强细胞毒功能,提高抗凋亡能力。结论:IL-15能发挥很好的佐剂效应,增强CTL的功能,有望在抗肿瘤研究中得到很好的应用。     

结直肠癌及腺瘤患者CD4+、CD8+和CD28+T淋巴细胞的亚群变化及临床意义

背景与目的：结直肠癌（colorectal cancer,CRC）严重影响患者生存。探讨肿瘤微环境（tumor microenvironment,TME）T细胞亚群在CRC和腺瘤中的表达及意义。方法：用免疫组织化学法和流式细胞术对51例健康人（对照组）、46例结直肠腺瘤（腺瘤组）、100例CRC（癌症组）和15例CRC术后（癌术后组）患者进行T细胞亚群检测。结果：① 对照组、腺瘤组及癌症组3组中CD4⁺T细胞的阳性率分别是90.00%、43.75%及32.65%,CD8⁺T淋巴细胞的阳性率分别是30.00%、56.25%及75.51%,CD28⁺T淋巴细胞的阳性率分别是42.86%、30.00%及20.00%。② 对照组、腺瘤组及癌症组3组中CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、CD28⁺、CD8⁺CD28⁺和CD8^－CD28⁺逐渐降低,CD8⁺、CD8⁺CD28^－逐渐增加（P＜0.05）;癌术前术后T细胞亚群差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：① CRC微环境T细胞亚群中CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、CD28⁺、CD8⁺CD28⁺和CD8^－CD28⁺呈递减趋势,CD8⁺、CD8⁺CD28^－呈递增趋势,且在癌前病变腺瘤中已逐步出现上述趋势变化。② CRC患者行肿瘤切除术后,其T细胞亚群有所恢复,故在一定程度上,CRC中T细胞亚群的变化可以早期预测结直肠疾病的发展。     

含IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗对肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞功能

目的：研究含有小鼠IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗对肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的功能影响。方法：构建含有小鼠IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗，免疫小鼠后，分离脾脏淋巴细胞，分析CTL的表面分子，分泌细胞因子能力，细胞毒功能和抗凋亡能力。结果：含有小鼠IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗能上调CTL的CD8和CD44分子表达，促进IFN-1分泌，增强细胞毒功能，提高抗凋亡能力。结论：IL-15能发挥很好的佐剂效应，增强CTL的功能，有望在抗肿瘤研究中得到很好的应用。     

高强度聚焦超声对前列腺癌小鼠的疗效及T细胞亚群的影响

目的探讨高强度聚焦超声（high intensity focused ultrasound, HIFU）对前列腺癌荷瘤小鼠的疗效及T细胞亚群的影响。方法RM-1细胞接种于C57BL6小鼠建立小鼠前列腺癌皮下移植瘤模型,随机分为肿瘤对照组、HIFU组、放疗组和HIFU联合放疗组。观察治疗后各组的肿瘤生长曲线,计算肿瘤体积倍增时间（DT）。2周后,通过流式细胞仪检测正常小鼠和荷瘤小鼠外周血CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺ 细胞占白细胞总数的百分比。结果与肿瘤对照组相比,HIFU组、放疗组肿瘤生长延缓,DT显著延长。HIFU组小鼠的CD3⁺(%)、CD4⁺(%)显著高于肿瘤对照组,而放疗组与肿瘤对照组差异无统计学意义。HIFU联合放疗组的DT较HIFU组显著延长,小鼠的CD3⁺(%)、CD4⁺(%)显著高于HIFU组,且CD4⁺(%)显著高于正常小鼠。结论HIFU治疗前列腺癌不仅能局部抑制肿瘤生长,而且能通过对T细胞亚群的影响提高机体的细胞免疫水平。HIFU联合放疗能进一步提高疗效。     

胆固醇代谢调控CD8+T细胞抗肿瘤作用的研究进展

CD8+T细胞又名细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL),具有直接杀死病原体感染细胞和癌细胞的作用.然而,CD8+T细胞常常丧失其效应功能,继而限制肿瘤微环境中的抗肿瘤免疫,因此,如何重新激活CD8+T细胞的抗肿瘤效力是目前需要解决的问题.最近研究发现,胆固醇代谢在肿瘤中发挥重要作用...     

Raw264.7细胞蛋白和PD-L1抗体在小鼠黑色素瘤(B16)中的抑瘤效果评价

目的探讨小鼠来源白血病毒诱导的肿瘤细胞(Raw264.7)蛋白和程序性死亡-配体(PD-L1)在C57BL/6小鼠黑色素瘤(B16)中的抑瘤效果。方法采用6~8周龄清洁级C57BL/6小鼠30只(雌雄各半),平均分为3组。各组小鼠分别于皮下接种B16细胞(2×10⁵个/只),待小鼠肿瘤平均体积达到100 mm³时,给予治疗。group A:腹腔注射Raw264.7细胞蛋白(50μg/只),每周1次,共2次。group B:腹腔注射PD-L1抗体(600μg/只,本课题组生产纯化),每3天1次,共4次。group C:相同时间点给予等体积生理盐水对照。各组小鼠给药后,测量肿瘤大小,末次测量后,各组小鼠无菌取脾脏,应用流式细胞术分析CD3/4/8⁺T细胞群比例。结果各组荷瘤小鼠给予相应治疗后,组C小鼠肿瘤体积增长迅速,末次测量平均体积达到4004 mm³;组B小鼠增长次之,末次平均体积达到1637 mm³;组A小鼠体积增长最慢,末次平均体积仅为882 mm³(P<0.01)。对小鼠脾脏免疫细胞分析显示,组B小鼠中CD3⁺CD8⁺T cell比例明显上调,平均达到77.65%,而CD3⁺CD4⁺T比例明显下调,仅为11.86%(P<0.01);而组A和组C两组小鼠CD3⁺CD4⁺T和CD3⁺CD8⁺T没有明显区别(P>0.05)。结论制备的RAW264.7细胞灭活蛋白和PD-L1抗体对于B16荷瘤小鼠均有抑瘤作用,且前者效果更为明显。     

非酒精性脂肪肝对免疫检查点抑制剂治疗肝细胞癌疗效的影响及机制研究进展

近年来,非酒精性脂肪肝合并肝细胞癌的患者数量逐渐上升,免疫治疗在晚期肝细胞癌的治疗中扮演着越来越重要的角色。既往研究发现非酒精性脂肪肝可以影响肝细胞癌免疫治疗的疗效,但机制不清,可能与这些因素相关：非酒精性脂肪肝中CD8⁺PD-1⁺T细胞增多导致肝脏细胞增殖能力缺陷;锌指蛋白64激活CSF1抑制抗肿瘤免疫;PCSK9下调LDLR水平抑制肿瘤微环境中CD8⁺T细胞免疫应答;免疫应答的缺失导致肝损伤等。研究发现联合使用仑伐替尼、PKCa抑制剂、PCSK9蛋白的抑制、铁死亡诱导剂、HIF2a小分子抑制剂可以改善非酒精性脂肪肝相关肝细胞癌免疫检查点抑制剂的疗效。本文就非酒精性脂肪肝对肝脏免疫微环境和肝细胞癌免疫检查点抑制剂疗效的影响和机制,以及如何改善非酒精性脂肪肝相关肝细胞癌免疫检查点抑制剂疗效的研究进行综述。     

聚肌胞对活化早期T细胞PD-1表达的诱导及对黑色素瘤生长的抑制作用

 目的 探讨活化早期阶段（脾组织内，未向靶器官迁移的）T细胞程序性死亡受体1（PD-1）表达情况。方法 6~8周龄C57BL/6小鼠随机分组后，以Poly I:C肽疫苗免疫，7天后获取小鼠脾细胞，观察Poly I:C对非特异性及特异性T细胞活化的影响，并检测特异性CD8⁺T细胞表面PD-1表达。同时，通过敲除CD8细胞观察Poly I:C的抗肿瘤效应是否与CD8⁺T细胞相关。结果 小鼠经Poly I:C免疫后，脾组织内非特异性及特异性T细胞活化均显著增强；活化的特异性CD8⁺T细胞虽高表达PD-1，但仍可合成T细胞功能性分子IFN-γ。此外，Poly I:C能显著抑制荷瘤小鼠黑色素瘤生长（P=0.0243），且该效应与CD8+T细胞有关。结论 Poly I:C可以促进T细胞活化；活化早期的（脾组织内）T细胞虽高表达PD-1，但仍具有功能。     

AGR2、CD3在卵巢交界性肿瘤鉴别诊断中的价值分析

目的:检测卵巢交界性肿瘤患者血清中前梯度蛋白2（AGR2）、CD3+T细胞水平,并探讨血清中两者水平对卵巢交界性肿瘤鉴别诊断的价值。方法:选取2017年07月至2019年12月本院收治并明确诊断的49例卵巢交界性肿瘤患者为研究对象（卵巢交界性肿瘤组）;同期选取68例良性上皮性肿瘤患者为对照（良性上皮性肿瘤组）,最终诊断由病理结果作为依据。两组患者一般资料分析。采用酶联免疫吸附法（ELISA）法检测患者血清中AGR2水平,流式细胞仪检测患者血清中T细胞亚群CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞水平;分析影响卵巢交界性肿瘤发生的因素;采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析AGR2、CD3+T细胞水平对卵巢交界性肿瘤的诊断价值。结果:两组患者年龄、孕次、产次、临床表现比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。卵巢交界性肿瘤组患者AGR2水平显著高于良性上皮性肿瘤组,CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞水平显著低于良性上皮性肿瘤组（P＜0.05）;患者AGR2水平是发生卵巢交界性肿瘤的危险因素,CD3+T细胞水平是发生卵巢交界性肿瘤的保护因素（P＜0.05）,血清AGR2、CD3+T细胞水平诊断卵巢交界性肿瘤的曲线下面积（AUC）分别为0.833（95%CI:0.750~0.925）、0.800（95%CI:0.721~0.879）,特异性分别为98.5%、79.4%,敏感度分别为65.3%、67.3%;二者联合诊断卵巢交界性肿瘤的AUC为0.892（95%CI:0.828~0.956）,特异性为94.1%,敏感度为73.5%。结论:血清中AGR2、CD3+T细胞水平参与了卵巢交界性肿瘤病情的发生、发展,对卵巢交界性肿瘤的诊断有一定的潜在应用价值。     

异体淋巴细胞和自体淋巴细胞序贯局部注射对小鼠肝癌移植瘤的治疗作用

目的 探讨用异体淋巴细胞(Heterogeneic lymphocyte, HL)和自体淋巴细胞(Autogeneic lymphocyte, AL)序贯注射的抗肿瘤作用。方法 用CC3HF1小鼠作供鼠, 制备异体淋巴细胞(HL);用CB6F1小鼠作受鼠, 在受鼠腹股沟皮下组织内接种Hepa1-6细胞。用冻融法从小鼠血浆提取冷沉淀, 制成纤维蛋白胶(Fibrin glue, FG);用FG与HL或AL组合为FG-HL或FG-AL。实验治疗分两个阶段。前阶段(共15 d):用FG-HL注射到受鼠荷瘤组织表面(实验组);用FG-磷酸盐缓冲液(FG-PBS)同法注射受鼠作对照组。而后检测两组受鼠的脾淋巴细胞杀瘤细胞率和脾淋巴细胞、CD8⁺T、NK细胞数量等免疫学指标。后阶段(共10 d):从实验组、对照组中随机选出部分受鼠, 取淋巴细胞(AL)组成FG-AL分别注射到本组其余受鼠的荷瘤组织表面;治疗后剥出受鼠体内肿瘤, 比较两组的瘤体积和抑瘤率。结果 前阶段治疗后, 实验组受鼠AL的杀瘤细胞率(26.70±7.22)%明显高于对照组AL的相应值(5.70±2.68)(P＜0.01);实验组受鼠脾淋巴细胞、CD8⁺T细胞和NK细胞数量均明显高于对照组的相应值(P＜0.05)。两阶段治疗结束后, 实验组受鼠的瘤平均体积(1.20±0.33)cm³明显小于对照组的瘤平均体积(2.05±0.37)cm³(P＜0.01);实验组的抑瘤率为41.5%。结论 肿瘤局部注射FG-HL, 再注射FG-AL可明显抑制小鼠移植瘤生长, 有望成为一种抗肿瘤生物疗法。     

趋化因子CXCL5调控NF-κB与Wnt/β-catenin信号通路抑制肿瘤免疫促进胃癌的机制研究CSCD

目的探讨CXC趋化因子配体-5(CXCL5)促进胃癌的作用及其潜在分子机制。方法纳入胃癌患者83例,另选取健康者40例作为对照。比较两者的血清CXCL5水平;比较癌组织及癌旁正常组织中CXCL5与CXCR2的表达。检测CXCL5对胃癌细胞ERK/MAPK、PI3K/AKT、NF-κB及Wnt/β-catenin信号通路的影响。用对照与过表达CXCL5的MFC细胞建立胃癌移植瘤模型,记录肿瘤生长和小鼠生存曲线;检测各组小鼠移植瘤中CXCL5、p-NF-κB与p-β-catenin的表达及CD4^+T、CD8^+T与CD56^+CD16^+NK细胞数量。结果胃癌患者的血清CXCL5水平较健康者显著升高(P<0.05)。癌组织中CXCL5与CXCR2的表达较癌旁正常组织显著升高(P<0.05)。CXCL5能显著增加SNU216与MFC细胞p-NF-κB与p-β-catenin的表达(均P<0.05)。与对照组小鼠相比,过表达CXCL5组小鼠的肿瘤体积显著增高(P<0.05),生存期显著降低(P<0.05),癌组织中CXCL5、p-NF-κB与p-β-catenin的表达显著升高(P<0.05),癌组织中CD4^+T、CD8^+T与CD56^+CD16^+NK细胞数量均显著降低(均P<0.05)。结论 CXCL5可能通过调控NF-κB与Wnt/β-catenin信号通路抑制肿瘤免疫从而发挥促进胃癌的作用。     

125I粒子植入联合抗PD-1治疗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用研究

目的:研究125I粒子植入对免疫微环境的影响,以及125I粒子植入联合抗程序性死亡受体-1(programmed cell death receptor-1,PD-1)治疗的抗肿瘤疗效.方法:在小鼠右后肢皮下注射Lewis肺癌(LLC)细胞构建肿瘤模型,利用流式细胞术分析125I粒子植入后PD-1、程序性死亡配体1(p...     

肺癌患者淋巴结内培养CIK细胞的抑瘤实验和临床前期研究

背景与目的：细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)兼具T淋巴细胞强大的杀瘤活性与自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)杀瘤的非MHC限制性。CIK细胞可直接杀伤肿瘤细胞,调节并增强免疫功能,同时不损害机体免疫环境,其在治疗恶性肿瘤中的作用已得到广泛认可。本研究旨在观察肺癌手术患者淋巴结培养获得的CIK细胞的杀瘤活性及其临床应用的安全性。方法：获取上海市胸科医院6例经手术治疗的非小细胞肺癌患者的淋巴结及外周血,体外培养分别获得CIK细胞。通过倒置显微镜观察两组CIK细胞的形态,检测淋巴结组及外周血组CIK细胞表型,应用CCK8显色法检测两组CIK细胞对A549细胞株的抗增殖作用,观察回输后血液中癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)的变化及其临床应用中的不良反应。结果：淋巴结组和外周血组CIK细胞CD3⁺CD56⁺T细胞的比例均＞30%。不同效靶比淋巴结组CIK细胞对A549细胞的抑制率均高于外周血组(P<0.05)。回输淋巴结内CIK细胞后肺癌患者有不同程度CEA下降。不良反应轻微,主要表现为皮疹和发热。结论：肺癌手术患者的淋巴结可用于培养CIK细胞,其活性优于外周血来源的CIK细胞,临床前期实验证实安全性高。