类风湿性关节炎疾病相关的特异性血清蛋白标志物

目的运用蛋白质指纹图谱技术筛选类风湿性关节炎(RA)患者血清中的特异性标志物,建立RA疾病相关的蛋白质组学诊断模型。方法采用弱阳离子纳米磁性微珠捕获血清蛋白,ProteinChip PBSII-C型蛋白质芯片阅读仪分别绘制性别年龄匹配的43例RA患者组及100例对照组(包括自身免疫性疾病对照组50例和正常对照组50例)的血清蛋白质指纹图谱,经Biomarker Wizard3.1软件分析蛋白峰后,再用Biomarker Patterns Software5.0软件筛查与RA疾病诊断密切相关的特异性血清蛋白标志物,建立RA诊断模型。结果在RA患者组中找到34个蛋白峰与对照组具有统计学差异(P<0.05),经Biomarker Patterns Software5.0软件识别,发现其中四个质荷比(m/z)分别为4966.89,5065.3,5636.97,7766.88的蛋白峰联合起来作为诊断模型,辨别RA患者及对照组的敏感性为86.36%,特异性为92.16%。对患者标本进行双盲验证,该诊断模型对RA的诊断敏感性为85.71%,特异性为87.76%。结论采用弱阳离子纳米磁性微珠与蛋白质芯片阅读仪联用的蛋白质指纹...     

运用蛋白指纹图谱技术筛选类风湿关节炎患者血清特异性标志物

目的: 用纳米磁珠与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测类风湿关节炎(RA)患者血清蛋白质组,筛选候选蛋白标志物并建立诊断模型,初步探讨所建立的诊断模型在RA早期诊断中的临床意义。方法: 采用弱阳离子(WCX)纳米磁性微球捕获60例RA患者、35例骨性关节炎(OA)患者和36名健康体检者血清中的蛋白质。所获蛋白经PBSⅡ-C蛋白质芯片阅读仪绘制蛋白指纹图谱。这些蛋白指纹图谱经Ciphergen ProteinChip和Biomarker Wizard软件分析之后,再用Biomarker Patterns 软件进行识别,最终筛选出RA的特异性蛋白标志物,并优化组合建立诊断模型。结果: 在RA患者和对照组之间共找到33个差异蛋白峰(P<0.05)。其中质荷比(m/z)为15 715.5D、7 771.4D、8 959.4D、8 469.8D和8 710.8D的蛋白峰用于建立RA诊断模型。经双盲实验验证,该模型对RA诊断的敏感性为86.7%,特异性为90.0%。结论: 采用WCX纳米磁性微球联用MALDI-TOF-MS技术可检出RA患者血清中的特异性蛋白标志物,并建立敏感性和特异性均较高的RA诊断模型。     

基于WCX纳米磁珠的血清蛋白指纹图谱模型在大肠癌诊断中的应用

目的: 探讨蛋白指纹图谱技术筛选大肠癌(CRC)患者血清中可用于诊断的特异性标志物。方法: 采用弱阳离子纳米磁性微球捕获血清中的蛋白,ProteinChip PBS II-C型蛋白质芯片阅读仪检测绘制成蛋白指纹图谱。所有蛋白指纹图谱采用Biomarker Wizard 3.1分析之后,用Biomarker Patterns 软件识别最终用于诊断的蛋白标志物,并优化组合建立诊断模型。结果: 在大肠癌患者和对照组之间找到68个差异蛋白峰(P<0.01),其中质荷比(m/z)为2 870.7、3 084.0、9 180.5和13 748.8的蛋白峰可用于建立大肠癌的诊断模型。该诊断模型能很好地把大肠癌患者从正常人群中区分出来,其敏感性为92.85%(91/98),特异性为91.25%(73/80)。经双盲实验验证,该模型对大肠癌诊断的敏感性为86.95%(40/46),特异性为85.00%(34/40)。结论: 采用纳米磁性微球与蛋白质芯片阅读仪联用的蛋白指纹图谱技术可以检测大肠癌患者血清中的特异性蛋白标志物,并建立敏感性和特异性均较高的大肠癌诊断模型。     

采用SELDI-TOF质谱技术分析胃癌患者血清蛋白质谱的变化

目的：利用蛋白质芯片和生物信息学方法从胃癌患者血清中筛选标志蛋白质。方法：采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）和Q10蛋白芯片对30例胃癌患者、30例胃炎患者、20例术后胃癌患者和40例健康者血清的蛋白质指纹图谱进行了检测,使用PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读机读取数据,获得的结果采用CIPHERGEN公司的Biomarker wizard和Biomarker Patterns System软件分析。结果：胃癌患者与健康者血清蛋白质指纹图谱相比有18个显著差异蛋白质,其中8个蛋白质在患者血清中高表达,10个蛋白质在患者血清中低表达。三个蛋白质（5907Da、5080Da、8691Da）组合构建诊断模型可鉴别胃癌与健康者。胃癌患者与胃炎患者血清蛋白质指纹图谱相比有13个显著差异蛋白质,其中7个蛋白质在胃癌患者血清中高表达,6个蛋白质在胃癌患者血清中低表达。二个蛋白质（5907Da、6436Da）组合构建诊断模型可鉴别胃癌与胃炎患者。结论：实验证明利用蛋白质组学和生物信息学方法可以从血清中筛选出胃癌相关的标志蛋白质,可见蛋白质芯片技术对于发现和筛选血清中的胃癌标志蛋白质及疗效判断是一种有效、快速的工具。     

应用蛋白质谱建立活动性肺结核病的血清诊断模型

目的 应用蛋白质谱技术研究活动性肺结核病患者的血清诊断标志物,建立诊断模型早期诊断活动性肺结核.方法 应用表面加强激光解吸-电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)和蛋白芯片技术检测264例活动性肺结核患者、其他呼吸疾病患者和正常人血清;应用Ciphergen蛋白芯片3.1.1软件比较、分析血清蛋白峰,找出差异蛋白;应用Biomarker Pattern 5.0软件建立活动性肺结核的诊断模型.结果 129例活动性肺结核血清和135例对照血清蛋白指纹图谱比较,有50个差异蛋白峰(P<0.01).以69例其他呼吸疾病血清和66例健康人血清为对照,选择5个蛋白峰(4360、3311、8160、5723、15173 m/z)建立诊断模型1,该模型诊断活动性肺结核的灵敏度为82.95%,特异性为89.63%,准确率为86.36%.以69例其他呼吸疾病血清为对照,选择3个蛋白峰(5643、4486、4360 m/z)建立诊断模型2,该模型诊断活动性肺结核的灵敏度为96.9%,特异性为97.8%,准确率为97.3%.结论 应用蛋白质谱技术分析肺结核病患者血清可能建立一种新的结核病早期诊断方法 .     

腰椎间盘突出症蛋白质组学变化与中医证型的相关性

背景：腰椎间盘突出症的中西医结合治疗效果较好。 目的：全面综述腰椎间盘突出症中医辨证分型与蛋白质组学相关的研究。 方法：检索万方、清华同方等中文数据库及Pubmed数据库2001-01/2010-12的相关文章,中文检索词为“中医证型、蛋白质组学、腰椎间盘突出症”,英文检索词为“syndrome types, traditional Chinese medicine, protcomics, lumbar intervertebral disk protrusion”。纳入腰椎间盘突出症血清蛋白质组学研究及蛋白质组学、中医分型与中医药3者关联的研究,排除重复研究及Meta分析类文章。 结果与结论：计算机检索得到361篇文献,中文79篇,英文282篇,阅读标题与摘要进行筛选,排除与此文无关的文献。对29个符合要求的研究进行综述。研究认为,部分疾病的中医分型与血清蛋白质组学有关,机体某些特异性标志蛋白表达可能与椎间盘退变相关。腰椎间盘突出症与中医血瘀证、湿热证、寒湿证等证型的关联性得到了部分实验及临床的验证,但缺乏蛋白质组学相关性研究。     

SELDI-TOF-MS技术筛选NSCLC血清肿瘤标志物

目的 分析非小细胞肺癌(NSCLC)血清蛋白表达谱的改变,筛选并建立NSCLC血清蛋白的差异表达谱。方法 应用表面增强激光解析电离化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS,简称SELDI-TOF或SELDI)技术,分析100例NSCLC患者和100例正常对照血清,获得蛋白表达图谱。用Biomarker Pattern(BPS)软件分析NSCLC差异蛋白并初步建立诊断模型。通过盲筛进一步验证诊断模型。结 果 发现NSCLC患者血清与正常人有16个显著差异的蛋白波峰,显著高表达8个（P<0.001）。显著低表达8个（P<0.001）。经BPS软件分析,建立分类树模型,其诊断的灵敏度为100％,特异度为100％。100例样本盲筛验证结果显示,其灵敏度为96.15％,特异度为95.83％。无吸烟史患者较有吸烟史患者血清中显著高表达蛋白质波峰有3个（P<0.05）。鳞癌患者较腺癌患者血清中显著高表达蛋白质波峰有2个（P<0.01）。不同病理分期患者之间未发现差异蛋白峰。结 论 SELDI-TOF-MS 技术可筛选出NSCLC差异性蛋白并建立NSCLC诊断的分类树模型,有望成为NSCLC早期诊断的辅助指标。     

蛋白质指纹图谱在乳腺癌诊断与随访中的应用研究

目的:应用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)和CM10蛋白质芯片检测乳腺癌患者血清蛋白质指纹图谱,筛选候选肿瘤标志物,建立、验证诊断模型并初步探讨其在术后随访监测中的价值。方法:SELDI-TOF-MS技术及CM10芯片检测63例乳腺癌和40例健康人的指纹图谱,ZJU-PDAS软件筛选标志物、建立模型,在另23例乳腺癌和20例健康人中盲法验证模型;并检测16份术后标本以探索其随访监测价值。结果:质荷比(m/z)为3.9kD和5.6kD的2个蛋白质峰(分别命名为BC1和BC2)构建的模型诊断乳腺癌灵敏度为87.30%(55/63)、特异度为95.00%(38/40);盲法验证灵敏度为95.65%(22/23)、特异度为85.00%(17/20);对不同病期患者具有相同诊断效力(P0.05)。BC1手术后表达升高;BC2手术后表达降低,且复发转移组表达高于无瘤生存组(P0.05)。结论:该方法在乳腺癌的诊断、术后随访及肿瘤标志物筛选等方面具有一定价值,值得进一步研究。     

冠心病血瘀证的血清差异蛋白质组学研究

目的:通过比较冠心病血瘀证患者与健康人血清蛋白质表达的差异,寻找与冠心病血瘀证发生发展相关的特异蛋白质。方法:采用蛋白质组学双向凝胶电泳联合质谱技术对冠心病血瘀证患者和健康人(各8例)血清进行蛋白质组学的比较研究。结果:通过鉴定得到了6种差异蛋白质:视黄醇结合蛋白4(RBP4)、载脂蛋白E(ApoE)、载脂蛋白A1(ApoA1)、CD5抗原样蛋白(CD5L)、结合珠蛋白(Hp)、血清白蛋白(ALB)。结论:这些差异蛋白质可能与冠心病血瘀证相关。     

SELDI-TOF-MS技术在口腔黏膜癌前病变和口腔鳞癌的唾液诊断模型中的应用

目的:分析唾液中蛋白质组对口腔鳞癌患者的动态变化的意义,对口腔鳞癌和癌前病变的相关诊断模型的建立进行初步探索。方法:按标准提取唾液标本,采用SELDI-TOF-MS技术,对17例口腔鳞癌患者、7例区域性转移患者、8例白斑患者和15例健康志愿者的唾液蛋白质指纹图谱进行比较,并采用整合性生物信息学方法建立诊断模型。结果:得到唾液诊断模型Ⅰ,为原发性口腔鳞癌患者与正常人的诊断模型:质荷比分别为5797、2902、3883和4951的4个蛋白质峰。其中5797、2902和3883在原发性口腔鳞癌患者唾液中低表达。4951在原发性口腔鳞癌患者唾液中高表达。敏感性为93.33%,特异性为88.24%,总准确率为90.63%。唾液诊断模型Ⅱ,为OSCC区域性转移患者与正常人的诊断模型:质荷比分别为5446、4934、4968、3296、4800和2901的6个蛋白质峰。其中5446、4934和3296在口腔鳞癌区域性转移患者唾液中高表达。4968、4800和2901在口腔鳞癌区域性转移患者唾液中低表达,敏感性为100.00%,特异性为85.71%,总准确率为95.45%。唾液诊断模型Ⅲ,为白斑患者与正常人的诊断模型:质荷比分别为9515、2230、2238、5694和2646的5个蛋白质峰。其中9515和5694在白斑患者唾液中高表达。2230、2238和2646在白斑患者唾液中低表达,敏感性为93.33%,特异性为85.71%,总准确率为86.96%。结论:结合SELDI-TOF-MS和生物信息学方法,唾液对肿瘤的诊断意义将进一步发挥其价值。本研究根据口腔粘膜上皮癌前病变、癌变、转移的唾液蛋白质组的变化,初步建立了3个早期诊断模型。     

老年血瘀证患者甲襞微循环的观察

本文从甲襞微循环角度，对老年血瘀证与中青年血瘀证进行了比较。结果表明．老年血瘀证组与中青年血瘀证组在红细胞聚集，微血流流态、综合判断方面异常发生率及程度均无显著性差异（P＞0.05）。说明血瘀证不论年龄大小，有其共性，从中也可透视出中医“辨证”的重要性。     

冠心病心绞痛患者血浆同型半胱氨酸水平与 中医证候要素痰、瘀的回归性研究

目的 研究冠心病心绞痛患者血浆同型半胱氨酸水平与中医证候要素痰、瘀的回归性。方法 收集冠心病心绞痛患者共227例,检测血浆同型半胱氨酸,采集四诊信息并按中医证候要素痰、瘀进行辨证积分分类,并对四组指标采用2×2析因分析及线性回归分析。结果 冠心病患者各证候要素组间Hcy水平依次为:痰瘀互结组＞血瘀组＞痰浊组＞无痰无瘀组;以Hcy为应变量,痰证积分（≥20部分）为自变量做一元线性回归可知,冠心病患者血浆Hcy水平与痰证积分≥20的部分呈线性相关;以Hcy为应变量,瘀证积分为自变量做一元线性回归可知,冠心病患者血浆Hcy水平与瘀证积分成线性相关,即瘀证积分越高,Hcy水平越高。结论 Hcy水平与中医证素“痰”“瘀”皆存在线性相关,Hcy可作为评估冠心病患者“痰”证严重程度的客观化指标,并可作为中医冠心病中医“瘀”证辨证的客观化指标。     

高血压病血瘀证相关miRNA的筛选

目的:筛选与高血压病血瘀证相关微小RNA(microRNA,miRNA),从基因组学探索高血压病血瘀证的发病机制。方法:运用高血压病气虚血瘀证、气滞血瘀证、寒凝血瘀证、热结血瘀证、非血瘀证患者和健康人的血清干预人脐静脉血管内皮细胞CRL-1730,建立高血压病血瘀证血管内皮细胞损伤模型;提取各组总RNA,采用Solexa高通量测序法和数字基因表达谱测序原理对各组样本进行测序分析,筛选各组间的差异表达miRNA和mRNA,使用靶基因miRWalk预测软件对2者进行相关性的整合,筛选与血瘀证相关miRNA,qRT-PCR定量分析验证miRNA的表达。结果:整合气虚血瘀组与非血瘀组、气滞血瘀组与非血瘀组、寒凝血瘀组与非血瘀组、热结血瘀组与非血瘀组相关数据后,在高表达的基因群中发现SAT1-Hsa-miR-199a-5p和ATF4-Hsa-miR-1283;qRT-PCR定量检测Hsa-miR-199a-5p和Hsa-miR-1283在高血压病血瘀证组和非血瘀证组中的上调与下调趋势与基因测序结果一致。结论:Hsa-miR-199a-5p和Hsa-miR-1283可能是高血压病血瘀证形成的特异性相关miRNA。     

类风湿关节炎患者外周血miR-146a、miR-16的表达水平及临床指标与中医证型的关系探讨

目的研究类风湿关节炎（RA）患者外周血miR-146a、miR-16的表达及ESR、CRP、RF、抗CCP抗体与中医证型的关系,为RA辨证分型提供客观依据。方法根据《中药新药临床研究指导原则》有关RA的中医证候诊断标准,主要分为两个证型：风湿夹瘀型（n=20）和肝肾亏损型（n=16）;16名健康体检者作为健康对照组。Real-timePCR检测RA患者及健康对照组miR-146a、miR-16的表达,记录ESR、CRP、RF、抗CCP抗体等临床指标。结果风湿夹瘀型miR-146a、miR-16的表达水平高于肝肾亏损型和对照组（P均〈0.05）,肝肾亏损型miR-146a、miR-16的表达水平与健康对照组相比差异无统计学意义（P均〉0.05）,风湿夹瘀型RA患者ESR及CRP高于肝肾亏损型（P〈0.01和P〈0.05）,RF低于肝肾亏损型（P〈0.05）,抗CCP抗体在两种证型之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 miR-146a、miR-16的表达水平和ESR、CRP、RF等临床指标可能为RA风湿夹瘀及肝肾亏损型的辨证分型提供参考。     

基于复杂系统熵聚堆算法的不稳定性心绞痛宏观与微观指标相关性研究

宏观的临床症状、体征如何与微观的指标相联系,是目前学术界亟待解决的一个难题,也是一个瓶颈问题.本研究采用数据挖掘的方法,对心绞痛血瘀证患者的血浆差异蛋白质组学指标与其宏观的临床症状、体征做相关性研究,基于搜集到的信息,得出了14种相关模式,并用支持向量机和10倍交叉验证方法 进行验证,结果发现分类的平均准确度高于90%,表明模式发现的结果是可信的.认为患者的临床症状、体征与蛋白表达变化存在着非常密切的联系,复杂系统熵聚堆可以用作联系宏观临床症状、体征与微观指标的一个桥梁.     

通脉饮对大鼠急性血瘀证血液流变性的影响

采用皮下注射大剂量肾上腺素加寒冷刺激的方法复制大鼠急性血瘀证模型，观察了通脉饮对该模型血液流变性的影响。结果表明：通脉饮对急性血瘀证血液流变性有明显改善作用。提示：通脉饮可能对预防冠心病及高粘血症有作用     

顽固性失眠从瘀论治浅析

笔者从肝郁血瘀,气虚血瘀、血虚血瘀,痰瘀互结,阴虚血瘀四个部分归纳总结郭闫葵教授从瘀论治顽固性失眠经验。举例临床有明显效果的医疗案例,进一步论证顽固性不寐“从瘀论治”理论;并提出血府逐瘀汤的理解及临床运用。最后提出“临床不可拘泥于古方以及成方,对顽固性失眠古方今用要辨证施治”,以及“久病不寐、瘀象不显者亦可从瘀论治”的观点。     

血液流变学检测在老年病主要疾病的防治价值

目的:为了探讨血液流变学在老年主要疾病的防治价值。方法:在血液流变学的检测中采用了全程质量控制方法,低切变率的实际测量法,对老年血瘀证血栓性疾病,如糖尿病、高血压病、心血管病和癌症四大顽症进行多疾病、多靶点的检测分析。结果:发现四大顽症的血液流变性的普遍异常。结论:对于祖国医学的血瘀证血栓性疾病异病同治提供了科学依据。     

强直性脊柱炎中医证候分布研究

目的 总结强直性脊柱炎（AS）的中医证候分布特点,为后续AS中医证候要素量表研制及临床治疗提供线索。方法 检索中国知网、维普和万方数据库中有关AS中医证候的文献,检索日期截至2018年12月31日,总结AS中医证候分布特点。结果共纳入文献89篇,最早发表于1988年,1998~2007年23篇（25.84%）,2008~2018年65篇（73.03%）,仅部分文献有患者性别、年龄、病程及发病季节分布。共纳入AS患者18541例,涉及中医证候29种,排名前4位的证候依次为肝肾不足证、湿热痹阻证、瘀血痹阻证和寒湿痹阻证,其中肝肾不足证为AS的主要证候（46.64%）。结论 AS中医证候主要包括肝肾不足证、湿热痹阻证、瘀血痹阻证和寒湿痹阻证,肝肾不足证为AS的主要证候。