激活核因子Ｅ２相关因子２信号通路减轻高糖诱导足细胞的凋亡

【目的】 探讨激活核因子Ｅ２相关因子２（Ｎｒｆ２）通路能否减轻高糖诱导足细胞的凋亡。【方法】体外培养小鼠足细胞,分为５组：对照组、高渗组、高糖组、高糖＋叔丁基对苯二酚（ ｔＢＨＱ）,高糖＋Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）。流式细胞仪检测细胞内活性氧和凋亡;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 及ｒｅａｌ ｔｉｍｅ－ ＰＣＲ检测Ｎｒｆ２、醌氧化还原酶１（ＮＱＯ１）,血红素加氧酶（ＨＯ－１）的表达;检测足细胞丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）及过氧化氢酶（ＣＡＴ）。【结果】 高糖组足细胞凋亡率、活性氧及细胞ＭＤＡ高于对照组（Ｐ ＜ ０．０５）,而该组足细胞ＳＯＤ、ＧＳＨ及ＣＡＴ低于对照组（Ｐ ＜ ０．０５）;高糖＋ＮＡＣ组的足细胞凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）;高糖＋ｔＢＨＱ组足细胞的总Ｎｒｆ２及核Ｎｒｆ２、 ＨＯ－１、ＮＱＯ１的表达高于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）,细胞内ＳＯＤ、ＧＳＨ及ＣＡＴ高于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）,高糖＋ｔＢＨＱ组足细胞的凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 激活 Ｎｒｆ２通路降低高糖诱导足细胞的氧化应激,减轻足细胞凋亡。     

小剂量G—CSF对化疗引起的粒细胞减少症的治疗作用

应用小剂量（２μｇ／ｋｇ）粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）于１８例肺癌患者化疗中，以观察预防发生中性粒细胞减少症的疗效。其中小细胞肺癌５例，非小细胞肺癌１３例，随机分成Ｇ－ＣＳＦ组及对照组各９例，化疗方案为ＣＥ（卡铂－ＶＰ１６）。结果Ｇ－ＣＳＦ组粒细胞绝对计数（ＡＮＣ）＜２．０×１０９／Ｌ，发生例数５例，持续天数为３．６±３．５天；对照组持续天数１６．８±７．１天，Ｐ＜０．０５。ＡＮＣ最低值至恢复正常（ＡＮＣ＞２．０×１０９／Ｌ）的天数Ｇ－ＣＳＦ组及对照组分别为２．６±１．３天，８．９±５．３天（Ｐ＜０．０５）。Ｇ－ＣＳＦ组化疗后的第２０天ＡＮＣ均已恢复正常，ＡＮＣ为（９．７±６．８）×１０９／Ｌ故可在第２２天顺利接受第二周期化疗。对照组ＡＮＣ（１．６６±０．８）×１０９／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。由此可见，小剂量Ｇ－ＣＳＦ能有效地防治肺癌化疗引起的粒细胞减少症     

乙型肝炎病毒DNA转染细胞的一种内参标准:真核细胞报告基因SEAP

目的 建立用真核细胞报告基因ＳＥＡＰ转染人肝癌细胞系及鸡肝癌细胞系（ＬＭＨ）的表达系统,供研究ＨＢＶ基因功能应用。方法 分别将带有分泌性碱性磷酸酶（ＳＥＡＰ）报告基因的ｐＢＣ１２／ＰＬ／ＳＥＡＰ及ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ转染Ｈｕｈ７、ＨｅｐＧ２及ＬＭＨ细胞,并用ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ与Ｓ基因区变异体的克隆ＨＢＶ ＤＮＡ共转染ＨｅｐＧ２细胞。培养后收取细胞培养液,用ＥＬ     

前列腺癌DNA倍体和AgNORS计数及PCNA表达的检测

目的探讨前列腺癌细胞核ＤＮＡ倍体、核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲＳ）计数及增殖细胞抗原（ＰＣＮＡ）阳性指数变化与癌分级及预后的关系。②方法应用计算机图像分析技术、银染色方法及免疫组化ＬＳＡＢ法，测定３０例前列腺癌病人ＤＮＡ倍体、ＡｇＮＯＲＳ计数和ＰＣＮＡ阳性指数的变化。③结果前列腺癌ＤＮＡ倍体、ＡｇＮＯＲＳ计数、ＰＣＮＡ阳性指数均明显高于前列腺增生症（ｔ＝７．２６７～７．５０２，Ｐ＜０．０１），并且随着前列腺癌细胞分化程度降低，逐渐增加（Ｈ＝４２．５３４，ｔ＝２．１５６～６．７５６，Ｐ＜０．０５，０．０１；Ｆ＝１９４．７７１，１０５．６０５，ｑ＝１３．２１４～１５．８１３，Ｐ＜０．０１）；２年内死亡者，其ＤＮＡ倍体、ＡｇＮＯＲＳ计数、ＰＣＮＡ阳性指数明显高于存活２年以上者（ｔ＝５．２５６～７．６０８，Ｐ＜０．００１）；前列腺癌病人ＤＮＡ倍体、ＡｇＮＯＲＳ计数、ＰＣＮＡ阳性指数间均存在正相关关系（ｒ＝０．９６０～０．９６６，Ｐ＜０．００１）。④结论前列腺癌ＤＮＡ倍体、ＡｇＮＯＲＳ计数、ＰＣＮＡ阳性指数与癌细胞分化程度有关，可作为前列腺癌的预后指标     

刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中作用的探讨

目的探讨大鼠实验性肝癌发病中刺五加对肌体免疫功能和抗氧化酶活性的影响。方法４６只ＳＤ雄性大鼠被随机分成对照组（喂普通饲料）、３－甲基４－双甲氨基偶氮苯（３－Ｍｅ－ＤＡＢ）组（喂含０．０６％３Ｍｅ－ＤＡＢ饲料 １０周）和刺五加组（饲喂同 ３－Ｍｅ－ＤＡＢ外、另加入刺五加 ４．５ｇ／ｋｇ饲料,用常规方法检测全血谷光甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）、血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量,用微量化学发光造检测吞噬细胞活性（ＰＭＮ－ＣＬ）。结果１．ＰＭＮ－ＣＬ检测峰值、积分值和吞噬细胞指数,３－ＭｅＤＡＢ组较正常组和刺五加组均有显著升高（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）２．全血ＧＳＨ－ＰＸ活性、ＳＯＤ活性,刺五加组较３－ＭｅＤＡＢ组均有显著升高（Ｐ＜０．０５）。ＭＤＡ含量刺五加组和３－ＭｅＤＡＢ组均较正常组升高（均Ｐ＜０．０５）。结论刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中有提高抗氧化酶活性和对抗致癌剂引起的机体中性粒细胞吞噬功能代偿性增高的作用。     

丹参对大鼠肝缺血后残肝再生促进作用的初步观察

采用大鼠部分肝缺血后肝部分切除模型，研究了术后第１、３、７天残肝肝再生度、肝细胞有丝分裂指数（ＭＩ）、血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）阳性率、血清谷丙转氨酶（ＳＧＰＴ）和白蛋白（ＡＬＢ）的变化，以及动物１０ｄ存活率。结果显示：丹参组ＳＧＰＴ和ＡＬＢ术后第７天恢复到正常水平，动物１０ｄ存活率为６６．７％（缺血组为２５．０％，Ｐ＜０．０５），术后第３天ＡＦＰ阳性率为８５．７％（缺血组为３３．３％，Ｐ＜０．０５），与缺血组比较，术后残肝再生度和肝细胞ＭＩ增加。结果表明，丹参对缺血残肝再生有明显促进作用。     

不均称型胎儿宫内生长迟缓动物模型的建立及其母鼠胎盘一氧化氮等含量的变化

为探索不均称型胎儿宫内生长迟缓动物模型的建立及探讨一氧化氮（ＮＯ）、内皮素（ＥＴ）在大鼠ＩＵ－ＧＲ发病中的作用,将ＳＤ系雌性大鼠分为３ 组。Ａ组：孕７ ｄ 起被动吸烟,饮酒;Ｂ组：孕７ ｄ 起被动吸烟,孕１５ ｄ起饮酒;Ｃ组（对照组）：并于孕２０ ｄ 检测３ 组孕鼠胎盘ＮＯ 及ＥＴ含量。结果：Ａ、Ｂ两组ＩＵＧＲ发生率较对照组明显增加（Ｐ＜ ０．０１）。Ｂ组胎死率低于Ａ 组（Ｐ＜ ０．０５）。且胎仔体重减轻以肝脏为主,同时Ａ、Ｂ两组ＮＯ含量明显低于正常对照组,而ＥＴ－１ 水平则远高于对照组（Ｐ＜ ０．０１）。ＥＴ与ＮＯ比值显著增大（Ｐ＜ ０．０１）。结论：孕早期被动吸烟、饮酒可产生混合型ＩＵＧＲ动物模型。孕晚期饮酒则产生不均称型ＩＵＧＲ动物模型。且ＩＵＧＲ的发病可能与ＮＯ合成、释放减少及ＥＴ－１ 合成、释放增加有关。     

移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

摘要：【目的】在大鼠肝脏缺血再灌注模型中,观察移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）的影响。【方法】全骨髓培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞学鉴定,慢病毒载体（ＬＶ３－ｓｈＴＳＧ－６）感染下调ＴＳＧ－６基因的表达;６０只ＳＤ雌性大鼠７０％肝脏缺血再灌注损伤模型的建立,随机分４组,ＰＢＳ组、ＢＭＳＣ组,ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组、ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组;各组大鼠分别于恢复灌注后３、６、２４ｈ取血检测血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量,恢复灌注后６ｈ取中叶肝脏组织,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＴＳＧ－６蛋白表达,切片ＨＥ染色后光镜观察肝组织显微结构。【结果】体外分离培养的ＢＭＳＣ状态稳定,增殖能力强,表达ＣＤ２９及ＣＤ４４,不表达ＣＤ３４及ＣＤ４５,慢病毒感染下调ＢＭＳＣ的ＴＳＧ－６基因表达效率达７３．９９％;大鼠肝脏７０％缺血再灌注损伤模型稳定,各时间点ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均高于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）;ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均低于ＰＢＳ组（Ｐ＜０．０５）;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝脏ＴＳＧ－６蛋白表达低于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）,ＰＢＳ组未见ＴＳＧ－６蛋白表达;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组重,与ＰＢＳ组无明显区别,ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＰＢＳ组明显减轻。【结论】移植ＢＭＳＣ能改善肝缺血再灌注损伤,移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞削弱了其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

铁蛋白对卵巢癌细胞生长和细胞周期动力学的影响

检测Ｈ铁蛋白及Ｌ铁蛋白对人上皮性卵巢癌细胞株ＡＯ及３ＡＯ的生长情况及细胞周期分布的影响。采用３Ｈ标记胸腺嘧啶校苷摄入细胞ＤＮＡ的放射测定法及流式细胞仪进行测定。结果：Ｈ及Ｌ铁蛋白均能抑制 ＡＯ及 ３ＡＯ细胞的生长，此作用在加入铁蛋白后的 ７２ ｈ较 ３６ ｈ显著，且随铁蛋白浓度的增加而增强０．０１＜Ｐ＜０．０５）。在７２时Ｈ铁蛋白的抑制作用较强，有显著差异（Ｐ＜０．０１）。同时发现，加入铁蛋白可使Ｇ１期细胞百分比增加，而Ｓ期细胞明显减少，也有显著差异（Ｐ＜０．０５）。结论：初步认为铁蛋白，特别是Ｈ铁蛋白可抑制卵巢癌细胞生长，并阻止其从 Ｇ０／ Ｇ１；期进入 Ｓ期。     

肾脏疾病患者血脂及载脂蛋白：AⅠB100CⅡ的测定及其临床意义探讨

对２８例肾病综合征（ＮＳ），２４例慢性肾炎，１９例慢性肾衰（ＣＲＦ）及５０例健康人血脂及载脂蛋白进行了测定，结果显示：ＮＳ组和慢性肾炎组病人甘油三脂（ＴＧ）明显高于正常组（Ｐ＜０．０１）健康者，尤以ＮＳ组为著（Ｐ＜０．０５），两组高ＴＧ血症发生率分别为７５．６％和６２．５％；ＮＳ组ａｐｏＡⅠ和ＣⅡ明显升高（Ｐ＜００５和＜００１），ａｐｏＢ１００无明显变化，ａｐｏＡⅠ／ａｐｏＢ比值升高；慢性肾炎组载脂蛋白无显著变化。ＣＲＦ组高ＴＧ血症发生率为４５．６％，但其含量与正常组比较无明显改变（Ｐ＞００５）；ａｐｏＡⅠ，ａｐｏＣⅡ含量明显降低（Ｐ＜００１和＜００５），ａｐｏＢ１００明显升高（Ｐ＜００１），ａｐｏＡⅠ／ａｐｏＢ１００比值明显下降。     

ｍｉＲ－１０３通过抑制ＦＢＷ７的表达促进肝癌细胞增殖

摘 要： 【目的】研究ｍｉＲ－１０３对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。【方法】Ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ＰＣＲ方法检测ｍｉＲ－１０３在肝癌组织和细胞中的表达。将ｍｉＲ－１０３ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ转染到肝癌细胞中,分为实验组（转染ｍｉＲ－１０３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）和对照组（转染Ｎｅｇａｔｉｖｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ）,通过ＭＴＴ实验检测肝癌细胞的增殖变化。Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测转染ｍｉＲ－１０３ ｍｉｍｉｃｓ后肝癌细胞中ＦＢＷ７ ｍＲＮＡ和蛋白的表达变化。通过重荧光素酶报告基因实验检测转染ｍｉＲ－１０３ｍｉｍｉｃｓ 或ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ后ＦＢＷ７－３’ＵＴＲ活性的变化。【结果】 Ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ＰＣＲ结果显示ｍｉＲ－１０３在肝癌组织和ＨｅｐＧ２ 细胞系中均高于癌旁组织和ＬＯ２肝细胞系（Ｐ＜ ０．０５）。ＭＴＴ实验结果显示,转染ｍｉＲ－１０３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ实验组肝癌细胞的存活细胞数低于对照组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。 Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ 和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ结果显示,转染ｍｉＲ－１０３ ｍｉｍｉｃｓ实验组肝癌细胞中ＦＢＷ７的ｍＲＮＡ和蛋白表达水平都低于对照组．重荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染ｍｉＲ－１０３ｍｉｍｉｃｓ的实验组中ＦＢＷ７－３’ＵＴＲ报告基因活性显著降低（Ｐ ＜ ０．０５）;与对照组相比,转染ｍｉＲ－１０３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ的实验组中ＦＢＷ７－３’ＵＴＲ活性显著升高（Ｐ＜ ０．０５）。进一步实验发现,转染ＦＢＷ７后能显著下调由ｍｉＲ－１０３ ｍｉｍｉｃｓ所引起的细胞增殖作用。【结论】ｍｉＲ－１０３可以通过抑制ＦＢＷ７的表达来促进肝癌细胞增殖。     

诱导型一氧化氮合酶选择性抑制剂对大鼠免疫性肝损伤的影响

目的探讨大鼠免疫性肝损伤模型中一氧化氮（ＮＯ）的作用及诱生规律,诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）选择性抑制剂的作用机制。方法采用原位ＰＣＲ法对免疫损伤性肝细胞ＮＯＳ基因表达进行原位检测,并观察细胞培养上清中ＮＯ生成量及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性的变化。结果用卡介苗（ＢＣＧ,１５、３０、５０ｍｇ／只静脉注射）单独投与或与炎性细胞因子配伍（ＣＭ,含白细胞介素１β,干扰素γ,肿瘤坏死因子α及细菌脂多糖）可引起培养上清ＮＯ浓度及ＬＤＨ活性明显升高（均Ｐ＜０．０５）,ＮＯ生成量与肝损伤程度成正比,而与ＢＣＧ剂量成反比;大鼠免疫损伤性肝实质细胞ＮＯＳ基因表达以可溶性胞浆型ｉＮＯＳ为主;ｉＮＯＳ选择性抑制剂氨基胍在明显抑制细胞培养上清中ＮＯ生成（８３．４％,Ｐ＜０．０５）的同时,减轻肝细胞损伤的程度（３６．０％,Ｐ＜０．０５）;而转录抑制剂放线菌素Ｄ则加重肝损伤（增加２５．５％,Ｐ＜０．０５）。结论在免疫刺激条件下诱导生成的ＮＯ主要参与肝损伤机制     

实验性淋巴滞留性脑病NO,氧自由基含量的变化

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）和氧自由基对淋巴滞留性脑病的影响。方法以Ｗｉｓｔａｒ大鼠为实验动物，通过结扎和摘除颈深淋巴结造成淋巴滞留性脑病的动物模型，测定脑淋巴引流阻断后１，３，５和７ｄ大脑皮层内ＮＯ，脂质过氧化物（ＭＤＡ）和自由基清除剂ＣｕＺｎ－ＳＯＤ含量的动态变化。结果脑淋巴引流阻断后１ｄＮＯ含量明显降低，３、５和７ｄ降低更显著。与对照组比较，１、３、５和７ｄ的ＭＤＡ含量显著增加（Ｐ＜０．０１）而ＣｎＺｎ－ＳＯＤ含量均显著减低（Ｐ＜０．０１）。ＭＤＡ与ＣｕＺｎ－ＳＯＤ有显著负相关（Ｐ＜０．０５）。结论ＮＯ、氧自由基在实验性淋巴滞留性脑病的病理过程中可能起重要作用。     

第７版阴茎癌病理Ｎ分期验证：单中心１１０例患者分析

【目的】 探讨第７版国际抗癌联盟—美国癌症联合委员会（ＵＩＣＣ—ＡＪＣＣ）阴茎癌病理Ｎ分期是否具有更好的预测预后价值。 【方法】 １９９９年到２０１２年共１１０例病理证实淋巴结转移阴茎鳞状细胞癌患者,按照第６ 版和７ 版 ＵＩＣＣ－ＡＪＣＣ 病理Ｎ分期系统分期。Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ法进行疾病特异性生存率 （ＤＳＳ） 分析并采用Ｌｏｇ－ｒａｎｋ 检验进行比较。Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析进行预测模型比较,概率比卡方检验（ＬＲ）、ＡＩＣ标准和ｃ－ｉｎｄｅｘ一致性系数作为预测模型的评估标准。 【结果】 中位随访时间３６个月,第６版分期ｐＮ１、ｐＮ２、ｐＮ３患者的３年ＤＳＳ分别为８９．６％、５５．２％和３２．５％,ｐＮ２与ｐＮ３患者之间生存差异无统计学意义（Ｐ ＝ ０．２７６）。按照第７版病理Ｎ分期标准,旧版ｐＮ２期患者中１６例升期为ｐＮ３,６例ｐＮ３期患者降期为ｐＮ２。第７版分期ｐＮ１,ｐＮ２,ｐＮ３患者的３年ＤＳＳ分别为８９．６％、６５．０％和３１．２％,各组之间的ＤＳＳ差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。淋巴结结外侵犯和结内转移患者,３年ＤＳＳ分别为７３．１％和２３．９％（Ｐ ＜ ０．００１）。模型评估结果显示第７版病理Ｎ分期系统具有更好的预测预后准确度。【结论】 ＵＩＣＣ－ＡＪＣＣ第７版病理Ｎ分期能更好地预测阴茎癌患者预后。     

大鼠小肠缺血／再灌注休克中一氧化氮,内皮素检测及意义

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）对大鼠小肠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）的作用及内皮素的改变。方法：复制内脏血管阻塞（ＳＡＯ）性休克模型,用左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）及硝基精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理动物模型后分别测定血浆中ＥＴｓ、ＭＤＡ、组织蛋白酶Ｄ（ＣＤ）、ＮＯ－２／ＮＯ－３含量。结果：Ｌ－Ａｒｇ减缓了大鼠Ｉ／Ｒ血压下降（Ｐ＜０．０１）,降低了血浆ＭＰＯ、ＬＤＨ、ＣＤ、ＭＤＡ的含量（Ｐ＜０．０１）及肠组织中伊文思蓝（ＥＢ）的含量（Ｐ＜０．０５）;Ｌ－ＮＡＭＥ与Ｌ－Ａｒｇ相反。ＭＰＯ与ＥＢ正相关（Ｐ＜０．０１）,ＮＯ－２／ＮＯ－３与ＥＴｓ负相关（Ｐ＜０．０５）。结论：ＮＯ对小肠Ｉ／Ｒ损伤有保护作用,ＥＴｓ参与ＳＡＯ休克过程。     

去甲斑蝥素用于单克隆抗体为载体的肿瘤导向治疗实验研究

用单抗３Ａ５制备与去甲斑蝥素（ＮＣＴＤ）的偶联物。ＥＬＩＳＡ检测结果表明：３Ａ５ ＮＣＴＤ偶联物保持对人肝癌ＢＥＬ ７４０２细胞的免疫反应性。克隆生成法测定结果显示：３Ａ５ ＮＣＴＤ具有比ＮＣＴＤ更强的细胞毒性,两者的ＩＣ５０分别为２．３ｍｇ／Ｌ和４．２ｍｇ／Ｌ。小鼠腹腔内移植Ｈ２２肝癌,腹膜内给药（ｉｐ）,３Ａ５ ＮＣＴＤ（３ｍｇ／ｋｇ）和ＮＣＴＤ（３ｍｇ／ｋｇ）的延长寿命值（ＩＬＳ）分别为１６８％和４２％。裸鼠移植人肝癌ＢＥＬ ７４０２细胞,静脉给药（ｉｖ）,ＮＣＴＤ的肿瘤抑制率为１５％（Ｐ＞０．０５）,３Ａ５ ＮＣＴＤ为６２％（Ｐ＜０．０１）;瘤结周围给药（ｐｔ）,ＮＣＴＤ的肿瘤抑制率为４７％（Ｐ＜０．０５）,３Ａ５ ＮＣＴＤ为７８％（Ｐ＜０．０１）。结果表明,与ＮＣＴＤ相比,３Ａ５ ＮＣＴＤ对裸鼠移植人肝癌和腹腔肿瘤具有更强的治疗作用。以上结果提示单抗与ＮＣＴＤ偶联物在肿瘤的导向治疗中有较好的疗效。     

电针及生物活性物质对大鼠多形核细胞杀菌功能的影响

用改良的四氮唑硝基蓝（ＮＢＴ）还原法观察了电针以及生物活性物质（ＢＡＳ）包括５－羟色胺（５－ＨＴ）、血管活性肠肽（ＶＩＰ）、生长抑素（ＳＯＭ）和Ｐ物质（ＳＰ）对大鼠多形核白细胞（ＰＭＮ）杀菌功能的影响。结果表明：电针及ＢＡＳ均能增强大鼠ＰＭＮ的杀菌功能（Ｐ＜０．０１）；ＢＡＳ对大鼠ＰＭＮ的杀菌功能具有双向调节效应。纳洛酮可阻抑电针对ＰＭＮ杀菌功能的提高（Ｐ＞０．０５）；可被ＢＡＳ所翻转。电针的镇痛效应和ＮＢＴ阳性细胞提高效应之间存在着明显的正相关（Ｐ＜０．０１）。     

非霍奇金淋巴瘤细胞增殖活性和组织学恶性程度及预后的关系

１３１例非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）按国际工作分类分低、中、高度恶性（ＬＧ、ＭＧ、ＨＧ）３组。对ＮＨＬ和１４例反应性增生淋巴组织（ＲＬＨ）作核分裂计数（ＭＦ），银染核仁组成区（ＡｇＮＯＲｓ）计数，并用ＭＢＣ法检测部分病例的增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和Ｋｉ＿６７抗原。ＭＦ、ＡｇＮＯＲｓ、ＰＣＮＡ及Ｋｉ＿６７检测结果有较好相关性（ｒ值０．６１２，Ｐ＜０．０１），均和ＮＨＬ恶性度呈正相关，ＬＧ、ＭＧ、ＨＧ及ＲＬＨ组间有显著性差异（Ｐ＜０．０１，但ＬＧ和ＲＬＨ组Ｐ＞０．０５），表明细胞增殖活性的检测有助于了解ＮＨＬ恶性度，但不能区分ＬＧ和ＲＬＨ。ＭＧ中弥漫小裂细胞型（ＤＳＣ）细胞增殖活性低于同组其它类型（Ｐ＜０．０５），但与ＬＧ无显著性差异（Ｐ＞０．０５），预后相对较好，拟属ＬＧ。ＭＦ、ＡｇＮＯＲｓ和ＰＣＮＡ值越高，生存期越短，表明细胞增殖活性有助于预测ＮＨＬ预后。ＭＦ和ＡｇＮＯＲｓ经济易行；Ｋｉ６７全面反映增殖细胞的数量，仅用于冰冻切片；ＰＣＮＡ可用于石蜡切片，便于回顾性研究。     

肝细胞生长因子／扩散因子、转化生长因子-β在结核性胸腔积液中的表达

目的：探讨肝细胞生长因子／扩散因子（ Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ）、转化生长因子β（ Ｔ Ｇ Ｆβ）在结核性胸腔积液（ Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ）中的表达,寻找诊断结核性胸膜炎的特异性标记。方法：用 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 药盒和生物法测定３２ 例胸腔积液中 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ和 Ｔ Ｇ Ｆβ水平,并对 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ组中１０ 例病人同时作血清 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ、 Ｔ Ｇ Ｆβ检测。结果： Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ在 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ中为７．５±７．３ ｎｇ／ｍ ｌ,高于非 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ的０．９８±０．８８ ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＜ ０．０５）。１０ 例 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ者的胸水和血清 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ含量分别是１０．９±６．６ ｎｇ／ｍ ｌ和１．９±１．７ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＜ ０．００２）。 Ｔ Ｇ Ｆβ在 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ中含量为２７．３±１１．１ ｎｇ／ｍ ｌ,高于其在血清中的含量３．９±３．３ ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＜ ０．００１）,也高于对照血清的１．８７±１．０５ ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＞ ０．０５）。结论：在 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ中存在高水平 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ、 Ｔ Ｇ Ｆβ。这可能与结核性肉芽肿形成有关,可能在促进胸膜纤维化及组织修复中有重要作用     

PCR-SSCP法检测小儿原发性肾病综合征载脂蛋白E基因多态性

目的探讨小儿原发性肾病综合征（ＮＳ）脂质代谢紊乱机制。方法测定了６８例小儿ＮＳ及 １２０例健康对照组 ７项血脂指标,采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ ＰＣＲ－ ＳＳＣＰ）技术检测其载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因多态性。并采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测ＮＳ组尿蛋白类型。结果所有７项指标在携不同 ＡｐｏＥ等位基因（Ａｐｏε２、Ａ ｐｏε３及 Ａｐｏε４）的患儿之间均无显著性差异（ Ｐ＞０． ０５）,而携Ａｐｏε３等位基因型的选择性蛋白尿（ＳＰＵ）组血总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）显著高于同型的非选择性蛋白尿组（ＮＳＰＵ）（ Ｐ＜ ０． ０５）。 ＮＳＰＵ组的 Ａｐｏε２等位基因频率显著高于健康儿童组（ １２．９６％ ｖｓ ５． ００％, Ｐ＜ ０． ０５）。结论小儿原发性 ＮＳ的脂质紊乱主要与其蛋白代谢异常有关而与ＡｐｏＥ基因多态性无明显关系。但携 Ａｐｏε２等位基因的 ＮＳＰＵ患儿有进行性肾脏损害的可能。