ST11型KPC-2和NDM-1联产肺炎克雷伯菌流行病学特征分析*

摘要:目的了解联产KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的流行病学特征,为临床使用抗菌药物提供参考依据。方法收集徐州医科大学附属医院2021 年6月至12月分离的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),采用微量肉汤稀释法进行 抗菌药物最低抑菌浓度( MIC)测定,使用K-B法检测头孢他啶/阿维巴坦抑菌圈直径,采用PCR扩增法检测碳青霉烯酶基因(blakpc、blaNM、blavm、blaymp 、blax.)和超广谱β-内酰胺酶基因(blacnx.M、blasv、blareu),采用多位点序列分型(MIST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法检测其同源性。结果2021 年下半年分离出239例CRKP ,其中发现3株KPC-2和NDM-1联产的CRKP ,且均为ST11型。3株联产碳青霉烯酶的CRKP菌株对头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类和头孢他啶/阿 维巴坦100%耐药,对多黏菌素均敏感,其中1株对替加环素中介耐药。同源性分析显示,其中2株高度同源。结论3 株KPC-2和NDM-1联产CRKP菌株对多种抗菌药物均呈现高水平耐药,为中国主要的碳青霉烯类耐药流行株ST11型,应当加强对此类碳青霉烯酶联产茵株的检测,控制此类细茵在医疗机构内的流行。     

ST11型KPC-2和NDM-1联产肺炎克雷伯菌流行病学特征分析

目的 了解联产KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的流行病学特征，为临床使用抗菌药物提供参考依据。方法 收集徐州医科大学附属医院2021年6月至12月分离的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),采用微量肉汤稀释法进行抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)测定，使用K-B法检测头孢他啶/阿维巴坦抑菌圈直径，采用PCR扩增法检测碳青霉烯酶基因(bla_KPC、bla_NDM、bla_VIM、bla_IMP、bla_OXA-48)和超广谱β-内酰胺酶基因(bla_CTX-M、bla_SHV、bla_TEM),采用多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法检测其同源性。结果 2021年下半年分离出239例CRKP,其中发现3株KPC-2和NDM-1联产的CRKP,且均为ST11型。3株联产碳青霉烯酶的CRKP菌株对头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类和头孢他啶/阿维巴坦100%耐药，对多黏菌素均敏感，其中1株对...     

肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦的耐药性分析

目的 探讨肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦的耐药性.方法 选取2018年1月至2020年6月该院检出的1785株肺炎克雷伯菌为研究对象,对其进行药敏试验.采用改良碳青霉烯类灭活法(mCIM)和乙二胺四乙酸碳青霉烯类灭活法(eCIM)检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的碳青霉烯酶和金属β-内酰胺酶;采用碳青霉烯酶抑制增强试验检测CRKP的丝氨酸酶和金属β-内酰胺酶.对19株CRKP进行碳青霉烯酶耐药基因检测.结果 1785株肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦的敏感率为95.49％,121株CRKP对头孢他啶/阿维巴坦的敏感率为80.17％.101株CRKP mCIM阳性(83.5％),其中22株eCIM阳性(21.8％);碳青霉烯酶抑制增强试验检测出78株产丝氨酸酶,22株产金属β-内酰胺酶,1株同时产丝氨酸酶和金属β-内酰胺酶.19株进行碳青霉烯酶耐药基因检测的CRKP中,15株检测出blaKPC-2,3株检测出blaNDM-1,1株同时检测出blaNDM-1和blaKPC-2.结论 头孢他啶/阿维巴坦是治疗临床肺炎克雷伯菌感染,尤其是CRKP感染的有效药物,碳青霉烯酶耐药基因鉴定具有临床指导意义.     

耐碳青霉烯类肠杆菌属细菌的抗菌药物耐药性及氨曲南联合阿维巴坦体外杀菌试验研究

目的 调查耐碳青霉烯类肠杆菌属细菌（carbapenem-resistant Enterobacter spp., CREn）的耐药情况以及氨曲南联合阿维巴坦对其的杀菌作用。方法 对四川大学华西医院2016年-2021年自临床分离到的CREn菌株通过gyrB基因扩增测序鉴定菌种。汇总这些菌株的药物敏感性结果、标本类型和相关患者科室分布。选择多黏菌素耐药和中介菌株进行多黏菌素E和氨曲南联合阿维巴坦的杀菌试验。结果 共纳入110株CREn临床菌株，最多的菌种为香坊肠杆菌（91株），占比最高的科室为重症监护病房（27.27%），呼吸道来源的标本占比超过40%。药物敏感性结果显示，所有CREn均对碳青霉烯类耐药，对多黏菌素的耐药率为23.64%，对氨曲南联合阿维巴坦的耐药率为0；其他抗菌药物中仅阿米卡星和替加环素的耐药率低于10%。时间-杀菌曲线显示，对于多黏菌素中介菌株，多黏菌素相比氨曲南联合阿维巴坦能在更短时间内达到杀菌效果；但无论菌株是否对多黏菌素耐药，2μg/mL的氨曲南联合阿维巴坦在24 h的杀菌率均能超过99%。结论 CREn对临床常用的绝大多数抗菌药物耐药，但对氨曲南联合阿维巴坦...     

耐碳青霉烯类的肺炎克雷伯菌的感染特点及耐药基因分析

目的了解该院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的感染特点、药物敏感性和碳青霉烯酶基因携带情况。方法收集该院2018年1月至2019年2月临床标本中分离的非重复耐碳青霉烯类的肺炎克雷伯菌,采用VITEK 2Compact全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏检测,改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)检测碳青霉烯酶表型、聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶常见基因型。结果共收集95株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,细菌对多种临床常用抗菌药物均显著耐药。改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)91株阳性,EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)3株阳性。PCR结果显示92株携带碳青霉烯酶基因,未检测出耐药基因有3株,其中有86株携带KPC基因(93.4%),3株携带NDM基因,3株既携带KPC基因又携带NDM基因。结论耐碳青霉烯类的肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物耐药,对四环素、多西环素、替加环素相对敏感,而产KPC型碳青霉烯酶是该院肺炎克雷伯菌碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要原因。因此临床应根据药物敏感性结果合理选用抗菌药物,做好院感监测及防护,以防止耐药菌株的传播和流行。     

2015—2020年某院CRE分布、耐药性及碳青霉烯酶基因检测结果分析

目的 了解碳青霉烯耐药肠杆菌(CRE)的临床分布、耐药性及碳青霉烯酶基因型,为CRE感染的治疗及医院感染防控提供依据。方法 收集2015年1月1日至2020年12月31日福建医科大学附属第二医院临床分离的CRE菌株,采用microflex LRF MALDI-TOF型质谱微生物鉴定仪进行菌种鉴定;采用微量肉汤稀释法或琼脂稀释法检测多黏菌素B、替加环素、头孢他啶/阿维巴坦和磷霉素等16种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。采用聚合酶链反应检测常见碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48)及黏菌素耐药基因mcr-1并测序确认;采用多位点序列分型(MLST)法确定肺炎克雷伯菌的序列分型(ST)。结果 38株CRE中,肺炎克雷伯菌15株,大肠埃希菌13株,其他肠杆菌目细菌10株;主要分离自痰液、血液及尿液标本;来自普内科的分离率占比最高(23.69%);38株CRE对替加环素、多黏菌素B呈现较低耐药率(5.26%、13.16%),对阿米卡星、磷霉素、米诺环素和氨曲南的耐药率均<53%,对其他药物的耐药率均>71%。最常见的碳青霉烯酶基...     

氨曲南联合头孢他啶/阿维巴坦对产新德里金属β-内酰胺酶大肠埃希菌的体外抗菌活性评估

摘要:目的评估氨曲 南联合头孢他啶/阿维巴坦对产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)大肠埃希菌的体外抗菌活性。方法收集2018- -2020 年临床分离的碳青霉烯耐药大肠埃希菌30株,采用微量肉汤稀释法检测常规药物的敏感性,采用E-test 试验检测菌株对氨曲南和头孢他啶/阿维巴坦的最低抑菌浓度(MIC),双E-test纸条法检测氨曲南与头孢他啶/阿维巴坦之间的协同作用;酶抑制剂增强试验检测碳青霉烯酶表型;PCR扩增和测序技术检测碳青霉烯酶基因和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因;多位点序列分型(MLST)对菌株进行分子分型。结果碳青霉烯酶表 型检测结果显示,30株大肠埃希菌均为金属酶表型,基因检测结果显示携带NDM-5基因26株,携带NDM-7基因2株,携带NDM-1和NDM-9基因各1株。另外,15株携带TEM-I基因,22株携带CTX-M-I组基因( 10株携带CTX-M-I5,12株携带CTX-M-55) ,9株携带CTX-M-9组基因(均为CTX-M-27)。MLST将30株菌分为8个不同的ST型,以ST167(40% , 12/30)、ST405 (20% ,6/30)和ST410( 20% , 6/30)为主。30 株细菌仅对替加环素和多黏菌素敏感,对阿米卡星耐药率为46.7%。27 株对氨曲南耐药的菌株,在联合头孢他啶/阿维巴坦后25株细茵由耐药变为敏感,氨曲南MIC3g和MIC。分别下降至2 μg/mL和4 μg/mL。结论氨曲南联合 头孢他啶/阿维巴坦对产NDM金属酶大肠埃希菌有较强的体外协同作用，可成为一种治疗产金属酶大肠埃希菌感染的潜在药物组合。     

碳青霉烯耐药非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的敏感性及分子特点分析

目的分析碳青霉烯耐药非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae without producing carbapenemase,CRKPPC)的抗菌药物敏感性、β-内酰胺酶基因和外排泵基因的分布及外排泵抑制剂的抑制作用。方法收集2012—2014年我院碳青霉烯不敏感肺炎克雷伯菌108株,用Mastdiscs combi Carba plus纸片系统检测碳青霉烯酶表型。用微量肉汤稀释法测定CRKPPC菌株对抗菌药物的敏感性;用PCR和DNA测序技术检测β-内酰胺酶耐药基因,包括超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamase,ESBL)和质粒介导的头孢菌素酶(Amp C)编码基因及外排泵基因acr AB-tolC、kex D、kde A、kpn EF和kpn GH;外排泵抑制剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)和利血平抑制试验分析外排泵在碳青霉烯耐药中的作用;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析细菌外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36的表达。结果碳青霉烯不敏感肺炎克雷伯菌菌株中有26株细菌为CRKPPC;这26株细菌对β-内酰胺类药物高度耐药,对阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率均较高,但对替加环素、多黏菌素、头孢他啶/阿维巴坦和氨曲南/阿维巴坦等有很好的敏感性; blaCTX-M和blaSHV检出率依次为76.9%和57.7%;外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36均有不同程度的缺失,缺失率分别为57.7%和19.2%;80%以上的细菌中存在acr AB-tolC、kex D、kde A、kpn EF和kpn GH基因; CCCP对碳青霉烯类药物具有显著的抑制作用,而利血平没有明显的抑制作用。结论替加环素、多黏菌素可以作为CRKPPC联合用药的基础药物。CRKPPC菌株中存在Amp C、ESBLs及不同程度的外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36缺失,但外排泵对碳青霉烯类药物的外排作用是CRKPPC对碳青霉烯耐药的主要机制,外排泵抑制剂可能在这种细菌引起的感染治疗中有重要价值。     

重症监护病房耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的耐药特征

摘要：目的 了解重症监护病房耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌（ＣＲＥ）的耐药特征。 方法 收集 ２０１９ 年 １ 月至 ２０２０ 年 １０ 月北 京友谊医院分离的 ９８ 株非重复 ＣＲＥ，采用纸片扩散法、Ｅ?ｔｅｓｔ 法和肉汤微量稀释法进行药敏试验，ＰＣＲ 方法检测碳青霉烯酶 基因（ｂｌａＫＰＣ 、ｂｌａＮＤＭ 、ｂｌａＶＩＭ 、ｂｌａＩＭＰ 、ｂｌａＯＸＡ?４８ ），多重 ＰＣＲ 方法检测质粒介导的黏菌素耐药基因（ｍｃｒ?１、２、３、４ 和 ５），多位点序列 分型（ＭＬＳＴ）分析菌株间的同源性。 结果 半数以上 ＣＲＥ 菌株来自痰液（３２．７％）和血液（２４．５％），以耐碳青霉烯类肺炎克雷 伯菌（ＣＲ?ＫＰＮ）占优势（８７．８％）。 所有 ＣＲＥ 菌株呈多重耐药性，对头孢他啶／ 阿维巴坦和黏菌素的耐药率分别为 ４．１％和 ７．１％。 ８４．７％的 ＣＲＥ 菌株携带碳青霉烯酶基因，ＣＲ?ＫＰＮ 菌株中 ｂｌａＫＰＣ?２检出率最高，耐碳青霉烯类大肠埃希菌（ＣＲ?ＥＣＯ）和 耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌（ＣＲ?ＥＣＬ）中以携带 ｂｌａＮＤＭ?１为主。 ＳＴ１１ 为 ＣＲ?ＫＰＮ 主要克隆株，占 ８３．７％。 ７ 株黏菌素耐药的 ＣＲＥ 菌株仅 １ 株携带 ｍｃｒ?１。 结论 重症监护病房分离的 ＣＲＥ 菌株呈多重耐药，已出现头孢他啶／ 阿维巴坦和黏菌素的耐药株，需 要谨慎选择抗菌药物，加强感染控制措施，避免耐药菌株进一步传播。     

碳青霉烯耐药非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的药物敏感性及分子特征分析

目的分析碳青霉烯耐药非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae without producing carbapenemase,CRKPPC)的抗菌药物敏感性、β-内酰胺酶基因和外排泵基因的分布及外排泵抑制剂的抑制作用。方法收集2012—2014年我院碳青霉烯不敏感肺炎克雷伯菌108株,用Mastdiscs combi Carba plus纸片系统检测碳青霉烯酶表型。用微量肉汤稀释法测定CRKPPC菌株对抗菌药物的敏感性;用PCR和DNA测序技术检测β-内酰胺酶耐药基因,包括超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamase,ESBL)和质粒介导的头孢菌素酶(Amp C)编码基因及外排泵基因acr AB-tolC、kex D、kde A、kpn EF和kpn GH;外排泵抑制剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)和利血平抑制试验分析外排泵在碳青霉烯耐药中的作用;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析细菌外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36的表达。结果碳青霉烯不敏感肺炎克雷伯菌菌株中有26株细菌为CRKPPC;这26株细菌对β-内酰胺类药物高度耐药,对阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率均较高,但对替加环素、多黏菌素、头孢他啶/阿维巴坦和氨曲南/阿维巴坦等有很好的敏感性; blaCTX-M和blaSHV检出率依次为76.9%和57.7%;外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36均有不同程度的缺失,缺失率分别为57.7%和19.2%;80%以上的细菌中存在acr AB-tolC、kex D、kde A、kpn EF和kpn GH基因; CCCP对碳青霉烯类药物具有显著的抑制作用,而利血平没有明显的抑制作用。结论替加环素、多黏菌素可以作为CRKPPC联合用药的基础药物。CRKPPC菌株中存在Amp C、ESBLs及不同程度的外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36缺失,但外排泵对碳青霉烯类药物的外排作用是CRKPPC对碳青霉烯耐药的主要机制,外排泵抑制剂可能在这种细菌引起的感染治疗中有重要价值。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析

目的研究山西大医院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)分离株的临床分布,主要耐药表型和耐药基因,评估CRKP菌株在改良碳青霉烯类灭活实验(mCIM)中的诊断能力。方法以41株CRKP菌株为研究对象,采用VITEK-2全自动微生物分析仪进行鉴定和药敏试验。使用mCIM进行产酶菌株筛选。使用PCR方法检测KPC、NDM等基因。结果41株临床分离株主要来自重症医学科,占24.39%。标本类型主要为痰标本,占31.71%。41株对90%以上的常用药物具有耐药性,其中40株携带KPC基因,1株携带KPC和NDM基因,1株携带NDM基因。mCIM可以准确的检测出碳青霉烯酶。结论KPC型碳青霉烯酶是临床分离的CRKP株中的主要酶,通过使用mCIM可以有效地发现产生耐碳青霉烯酶的菌株。     

临床分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌株的血清荚膜分型及耐药机制

目的分析碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的荚膜血清型和携带毒力基因的情况,以探究其耐药机制。方法采用Vitek-2Compact全自动微生物鉴定仪对分离菌株进行体外药物敏感试验;利用黏液丝试验筛选高黏液阳性菌株;使用改良Hodge试验及碳青霉烯酶抑制试验(CIM)对碳青霉烯酶表型进行检测;利用PCR法检测常见荚膜基因型、碳青霉烯酶耐药基因、β-内酰胺酶基因、膜孔蛋白基因、毒力基因。结果本研究共分离出CRKP 126株[39.87%(126/316)],CRKP菌株中对头孢菌素类、酶抑制剂类、碳青霉烯类、单环类药物耐药率最高,且耐药率显著高于non-CRKP菌株(P<0.05),替加环素类耐药率最低,与non-CRKP菌株差异无统计学意义(P>0.05);改良Hodge试验阳性106株,CIM试验阳性117株;检测出A类碳青霉烯酶KPC基因最多,共117株;β-内酰胺酶基因TEM基因53株,SHV基因100株,CTX-M基因112株,膜孔蛋白Ompk35基因缺失50株,Ompk36基因缺失94株;126株CRKP中携带4种不同耐药基因的菌株数目最多。结论本研究分离获得的CRKP大部分荚膜血清分型尚不清楚,其主要耐药机制为产生碳青霉烯酶,部分菌株合并有膜孔蛋白基因缺失。     

产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌ST2237与ST11的分子流行特征分析

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP) ST2237型与ST11型的分子流行特征。方法收集河南科技大学第一附属医院2018年1月至12月63株非重复CRKP,采用琼脂稀释法和微量肉汤稀释法检测菌株最低抑菌浓度(MIC);用PCR及测序方法检测毒力基因(iucA、rmpA2、rmpA、iroN)及耐药基因(bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(CTX-M)、bla_(TEM)、bla_(SHV)、bla_(DHA)、bla_(cmy)和mcr-1);用多位点序列分型(MLST)和goe BURST软件对菌株进行同源性分析;用SPSS 22软件统计分析不同ST型菌株间耐药性、毒力基因检出和耐药基因检出的差异。结果 63株CRKP对阿米卡星、磷霉素、氯霉素、米诺环素、黏菌素、替加环素和头孢他啶/阿维巴坦耐药率分别为97%、94%、78%、43%、1.6%、1.6%和0。63株菌株均携带bla_(KPC-2)、bla_(SHV)和bla_(TEM),54株菌株携带blaCTX-M,6株菌株携带bla_(DHA)。49株(77.8%)携带毒力基因。MLST分型显示,院内有ST11 55株(占87.3%)和ST2237 7株(占11.1%)。美罗培南、厄他培南、替加环素、头孢他啶/阿维巴坦、头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松、米诺环素和氯霉素对CRKP ST2237型的MIC值低于ST11型(Z分别为-4.146、-4.535、-2.893、-4.635、-7.803、-6.699、-7.797、-2.223、-3.395,P0.05)。27.3%(15/55) ST11株携带iucA、rmpA2、rmpA、iroN4种毒力基因,85.7%(6/7) ST2237株携带iut A和rmp A2 2种毒力基因。ST2237型bla_(DHA)携带率(85.7%,6/7)高于ST11型(0,0/55)(Fisher's精确检验,P=0); ST2237型bla_(CTX-M)携带率(0,0/7)低于ST11型(98.2%,54/55)(Fisher's精确检验,P=0)。结论 ST2237 CRKP菌株在药物敏感性、耐药基因及毒力基因携带方面与ST11不同,需加强监测。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药性分析及分子分型

目的 分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）的耐药性及分子分型。方法 选取我院2021年3月—2022年3月临床分离的CRKP菌株，进行碳青霉烯酶表型鉴定、药物敏感性试验、耐药基因检测及多位点序列分型（MLST）。结果 70株CRKP主要来自痰液、血液和引流液。改良Hodge试验显示63株为阳性，改良碳青霉烯灭活试验显示66例为阳性。CRKP对大多数常规抗菌药物耐药率为90%以上，对替加环素最敏感，耐药率为4.3%。70株CRKP中携带blaKPC-2基因为64株，携带blaNDM基因为8株。MLST可分为6个ST型，其中ST11型为56株，占比最高（80%）。结论 临床分离的CRKP MLST仍以ST11型为主，对碳青霉烯类抗菌药物的主要耐药机制为产KPC-2酶，可选择替加环素治疗CRKP感染，但仍要规范使用抗菌药物，防止耐药性进一步产生。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌药物敏感性及bla_(KPC)基因检出率

目的了解复旦大学附属华山医院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)对常用抗菌药物的敏感性及bla_(KPC)基因的检出率。方法收集2014年1-12月临床分离的CRKP,微量肉汤稀释法测定CRKP对常用抗菌药物的敏感性;聚合酶链反应(PCR)扩增bla_(KPC)基因。结果共收集CRKP 205株,主要分离自呼吸道标本(76.1%,156/205)和尿标本(18.5%,38/205)。药敏试验结果显示,CRKP对大多数抗菌药物高度耐药,除对多黏菌素E、替加环素、甲氧苄啶-磺胺甲唑和阿米卡星的耐药率分别为1.5%、0.5%、51.0%和74.9%外,对其他抗菌药物的耐药率在85%~100%;87.8%(180/205)菌株为blaKPC基因阳性株。结论 CRKP对多黏菌素和替加环素之外的多数临床常用抗菌药物呈高度耐药;产KPC型碳青霉烯酶是CRKP对碳青霉烯类耐药最主要的耐药机制。     

多黏菌素与美罗培南联合应用对碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌多黏菌素异质性耐药的体外抗菌活性分析

目的 评价多黏菌素与美罗培南的联合使用对碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌多黏菌素异质性耐药的体外抗菌活性。方法 收集2021年1月至12月首都医科大学附属北京友谊医院临床分离碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)381株。采用微量肉汤稀释法检测多黏菌素及美罗培南的最低抑菌浓度(MIC)。采用群体谱分析方法(PAPs)分析敏感菌株对多黏菌素的异质性，通过PCR扩增筛选耐药基因，根据结果分析部分菌株的时间-杀菌曲线，评价联合用药抑菌效果。结果 381株肺炎克雷伯菌经过微量肉汤稀释法检测，未见多黏菌素耐药菌株，全部菌株对美罗培南均耐药。PAPs分析显示对多黏菌素异质性耐药的菌株比例为95%(38/40)。根据CRKP耐药基因的检测筛选3株携带不同耐药基因菌株进行的时间-杀菌曲线分析结果显示，与单独用药相比，低浓度联合用药即可在短时间内起到杀菌作用。结论 碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌对多黏菌素的异质性耐药率较高。多黏菌素与美罗培南的联合应用在体外可以对异质性耐药CRKP表现出很好的杀菌活性。     

耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌耐药基因研究

目的了解对碳青霉烯类药物耐药的肺炎克雷伯菌(CRKP)碳青霉烯酶基因的携带情况。方法收集本院2013年1月至2016年6月临床标本中分离的630株肺炎克雷伯菌,采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定和药敏检测以及改良Hodge试验筛选CRKP,采用聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因,采用多位点序列分型(MLST)技术对CRPK进行分子遗传学分析。结果 630株肺炎克雷伯菌中,61株对亚胺培南耐药,为CRKP,占9.7%,CRKP对多种临床常用抗菌药物均显著耐药,对替加环素具有良好的敏感性。PCR结果显示59株CRKP携带碳青霉烯酶基因,其中53株携带bla KPC-2型基因(89.8%),4株携带bla NDM-1型基因(6.8%),2株携带bla OXA-48型基因(3.4%)。MLST分型主要以ST11为主(49株,80.3%)。结论我院CRKP基因型主要为KPC-2型,另外有散在NDM-1和OXA-48型,MLST分型主要为ST11型。     

耐碳青霉烯类大肠埃希菌临床分布、耐药特征及携带mcr 基因分析

目的　分析临床耐碳青霉烯类大肠埃希菌（carbapenem-resistance Escherichia coli , CREC）分布及耐药特征,检测其碳青霉烯酶合成基因及质粒介导的多黏菌素耐药（mobile colistin resistance, mcr）基因携带情况,为多重耐药菌防控提供参考。方法　收集2020 年7 月～ 2021 年6 月期间安徽医科大学第二附属医院住院患者送检的各类临床标本分离非重复CREC 菌株,微量肉汤稀释法进行药敏试验。聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）扩增及测序技术检测碳青霉烯酶基因及mcr 系列基因。多黏菌素诱导试验检测mcr-9 阳性菌株的诱导耐药特征,脉冲凝胶电泳（pulsedfieldgel electrophoresis, PFGE）分析其同源性。结果　共收集CREC 菌株33 株,主要分离自尿液标本（30.3%）、痰液标本（24.2%）、脓液/ 分泌物标本（18.2%）及血液标本（15.2%）,菌株呈现多重耐药表型。PCR 检测结果显示,23 株CREC（69.7%）携带blaNDM 基因,8 株CREC（24.2%）携带blaKPC 基因。有3 株（9.1%）blaNDM 阳性CREC 菌株同时携带mcr-9 基因,PFGE 分析显示3 株细菌间无同源性。上述mcr-9 阳性菌株经过1/2 倍最低抑菌浓度（minimuminhibitory concentration, MIC）多黏菌素B 药物诱导6h 后,对多黏菌素B 的MIC 值均升高。结论　临床CREC 呈现多重耐药,主要碳青霉烯酶基因为blaNDM 及blaKPC。部分菌株同时携带blaNDM 及mcr-9 基因,且呈现多黏菌素诱导耐药特征。实验室应加强监测,防控其流行播散。     

常熟地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学调查研究

：目的 研究分析常熟地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（Carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP) 的分子流行特征。方法 收集2017年1月至2017年12月常熟地区分离的34株CRKP菌株,分析菌株对抗菌药物的敏感性,并通过聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）筛选碳青霉烯酶基因,利用质粒结合转移实验验证耐药质粒的可转移性,脉冲场凝胶电泳（Pulsed field gel electrophoresis, PFGE）分析菌株同源性。结果 34株CRKP对亚胺培南、美罗培南的耐药率均为100％,其中30株携带KPC基因（88.2％）、4株携带NDM基因（11.8％）、1株携带IMP基因,并有2株同时携带KPC和NDM基因。质粒结合试验成功获得25株KPC阳性质粒。同源性分析显示共有11种型别,其中A型15株,B型9株,其余各型各1株。结论 目前常熟地区的CRKP以携带KPC质粒为主,菌株克隆以A型和B型为主,存在小范围的克隆性传播。     

临床来源碳青霉烯耐药大肠埃希菌药物敏感性及分子流行病学特征分析

目的 探讨临床分离的碳青霉烯耐药大肠埃希菌药物敏感性特征及分子流行病学特征,为院内感染控制及临床治疗提供基础数据。方法 收集某医院临床分离的21株对碳青霉烯类药物耐药的大肠埃希菌,采用琼脂稀释法测定菌株对11种临床常用药物的最低抑菌浓度（MIC）;Carba NP试验检测菌株产碳青霉烯酶情况;采用PCR扩增及序列比对检测耐药基因（包括blaNDM、blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaOXA）携带状况;采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和多位点序列分型（MLST）对菌株进行分子分型。结果 21株碳青霉烯耐药大肠埃希菌中,对哌拉西林、头孢吡肟、头孢曲松、头孢他啶等-内酰胺类药物和左氧氟沙星耐药率为100.00%;对甲氧苄啶-磺胺甲恶唑的耐药率也高达76.19%;对米诺环素、阿米卡星和磷霉素的耐药率相对较低,分别为23.81%、23.81%和19.05%。Carba NP试验阳性菌株17株,均携带blaNDM-1基因,其余4种基因检测均为阴性。MLST显示21株菌株共有9种ST型别,其中携带blaNDM-1基因的大肠埃希菌主要为ST167型和ST540型。PFGE显示来自泌尿外科的3株菌株电泳图谱完全相同,另外来自不同病房的2株菌株电泳图谱也完全相同,提示医院内存在同一克隆菌株传播的可能。结论 该医院碳青霉烯耐药大肠埃希菌基因型分布呈现多态性;对碳青霉烯类药物耐药的机制主要是携带blaNDM-1基因;携带该基因的大肠埃希菌对临床常用抗菌药物往往呈现多重耐药,给临床治疗带来了困难。加强对碳青霉烯耐药菌株基因型和耐药基因的检测,将对减缓或阻断耐药菌的传播具有重要意义。