控制性卵巢刺激对多囊卵巢综合征患者和正常排卵妇女卵源性因子表达的差异

【目的】 研究控制性卵巢刺激对多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）患者和正常排卵妇女卵母细胞和颗粒细胞中卵源性因子（生长分化因子ＧＤＦ９和骨形成蛋白ＢＭＰ１５）表达的影响及两组妇女之间的表达差异。【方法】 收集ＰＣＯＳ患者和正常排卵的不孕妇女共９７例,分为４组：２２例未经历卵巢刺激（未刺激－ＰＣＯＳ组）和１８例经历卵巢刺激（刺激－ＰＣＯＳ组）的ＰＣＯＳ患者,２８例未经历卵巢刺激（未刺激－对照组）和２９例经历卵巢刺激（刺激－对照组）的正常排卵妇女。收集４组患者的卵母细胞和颗粒细胞,采用巢式实时定量ＰＣＲ的方法检测两种细胞中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平。【结果】 在正常排卵妇女的卵母细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为２４．７９ （２．９６－１０９．７３）和０．９３ （０．０５－３．６５）,在卵巢刺激组分别为１４９．９４ （５５．３８－３８７．９３）和４１．６５ （６．５０－９６．１１）,两种因子在卵巢刺激组的表达水平均显著高于未刺激组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。在正常排卵妇女的颗粒细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为０．０２ （０．００９－０．２１）和０．００８（０．００１－０．１６）,在卵巢刺激组分别为０．１０ （０．０６, ０．１８）和０．０２（０．０１－０．０３）,两种因子在卵巢刺激组的表达水平均显著高于未刺激组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。在ＰＣＯＳ患者的卵母细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为２３．８３ （２．２９－６５．７２）和０．０９ （０．０５－２９．３２）,在卵巢刺激组分别为４４．８１ （５．９３－４８９．１９）和０．１０ （０．０５－１１．４４）,两种因子的表达在未刺激组和卵巢刺激组均没有差异（Ｐ ＞ ０．０５）。在ＰＣＯＳ患者的颗粒细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为０．１１ （０．０６, ０．１６）和０．０００ ００５（０．０００ ００４ ８－０．０００ ００９）,在卵巢刺激组分别为０．０５ （０．０３, ０．０９）和０．０２（０．００７－０．０３）, ＧＤＦ９ ｍＲＮＡ的表达在卵巢刺激组显著低于未刺激组,而ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达在卵巢刺激组显著高于未刺激组,差异均有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 控制性卵巢刺激可以促进正常排卵妇女卵母细胞和颗粒细胞中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５的表达,但是对ＰＣＯＳ患者卵母细胞中两种因子的表达没有促进作用,提示ＰＣＯＳ患者卵母细胞中卵源性因子的表达对卵巢刺激的反应性受到抑制,可能影响卵泡发育和卵母细胞成熟,从而导致卵母细胞质量低下。     

ＮＡＮＯＧ基因在侧群表型干细胞样肝癌细胞中的表达及意义

摘要：【目的】基于侧群（ＳＰ）细胞分选方法,从肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中分选ＳＰ表型干细胞样肝癌细胞,观察干细胞标记物ＮＡＮＯＧ基因在该ＳＰ表型肝癌细胞中的表达。【方法】采用流式细胞术检测和分选肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中的ＳＰ细胞和非侧群（ＮＳＰ）细胞,细胞生长曲线法检测ＳＰ和ＮＳＰ细胞的增殖能力,Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭实验检测ＳＰ和ＮＳＰ细胞的侵袭能力,ＭＴＴ法检测ＳＰ和ＮＳＰ细胞对５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）和阿霉素（ＤＯＸ）的药物敏感性;Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ和ＷＢ检测ＳＰ与ＮＳＰ细胞中ＮＡＮＯＧ基因的表达。【结果】肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中分选的ＳＰ细胞比例分别为（５．３±０．８）％和（１３．４９±１．０）％。生长曲线表明Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ的ＳＰ细胞的增殖速度快于ＮＳＰ细胞（Ｐ＜０．０５）,体外侵袭实验结果显示Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ的ＳＰ细胞体外侵袭能力高于ＮＳＰ细胞（Ｐ＜０．０５）,ＭＴＴ结果显示Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３ＢＳＰ细胞对５－ＦＵ和ＤＯＸ有耐药性,高于ＮＳＰ细胞（Ｐ＜０．０５）。Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３ＢＳＰ细胞ＮＡＮＯＧｍＲＮＡ平均表达水平分别是ＮＳＰ细胞的４．１７和５．５１倍（Ｐ＜０．０５）,ＮＡＮＯＧ蛋白平均表达水平分别是ＮＳＰ细胞的３．７８和５．０１倍（Ｐ＜０．０５）。【结论】肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中分选的ＳＰ细胞符合肿瘤干细胞的部分生物学特征,ＮＡＮＯＧ基因在ＳＰ表型干细胞样肝癌细胞中高表达。     

促卵泡生成素、黄体生成素和胰岛素对多囊卵巢病人颗粒细胞甾体激素分泌的影响

目的研究在促卵泡生成素（ＦＳＨ）、促黄体生成素（ＬＨ）和胰岛素（ＩＮＳ）刺激作用下多囊卵巢综合症（ＰＣＯＳ）病人与正常卵巢的颗粒细胞甾体激素产生的异同。方法对１８例月经周期正常妇女卵泡期的３３个卵泡和８例ＰＣＯＳ的１００个卵泡的颗粒细胞行体外培养，利用放射免疫法测定培养液中的甾体激素水平，比较了两组颗粒细胞在ＦＳＨ、ＬＨ和ＩＮＳ刺激作用下雌二醇（Ｅ２）和孕酮（Ｐ）的产生。结果ＰＣＯＳ病人的颗粒细胞在基础状态下，ＦＳＨ和ＩＮＳ刺激作用下Ｅ２产生量明显高于对照组（Ｐ＜００５～００１），在ＦＳＨ、ＬＨ和ＩＮＳ刺激作用下ＰＣＯＳ组产生的Ｐ量明显高于对照组（Ｐ＜００５～００１）；ＩＮＳ能明显的增强ＦＳＨ和ＬＨ对颗粒细胞的刺激作用；外周胰岛素拮抗的ＰＣＯＳ病人的颗粒细胞对ＩＮＳ刺激仍然敏感。结论ＰＣＯＳ病人的颗粒细胞甾体激素合成酶在体内时可能已被活化，ＰＣＯＳ病人的高ＩＮＳ和高ＬＨ血症可能起关键作用     

外周血硫酸脱氢表雄酮水平对ＩＶＦ－ＥＴ中卵巢低反应与妊娠结局的预测价值

摘 要： 【目的】 评估月经早期外周血硫酸脱氢表雄酮（ＤＨＥＡＳ）水平对ＩＶＦ－ＥＴ助孕中卵巢低反应（ＰＯＲ）和妊娠结局的预测价值。【方法】 单中心回顾性队列研究。共纳入１２０８例行第一周期ＩＶＦ／ＩＣＳＩ助孕的病人,年龄２０～ ４４岁,排除ＰＣＯＳ患者。采用低剂量长效ＧｎＲＨ激动剂长方案。主要指标为 ①ＩＶＦ治疗周期前３个月内月经周期第１ ～ ３天外周血ＦＳＨ、ＬＨ、雌二醇（Ｅ２）、总睾酮（Ｔ）和ＤＨＥＡＳ水平;经阴道Ｂ超检测ＡＦＣ和平均卵巢容积（ＭＯＶ）;②ＩＶＦ－ＥＴ中的卵巢刺激指标和妊娠结局。【结果】不孕女性中ＤＨＥＡＳ水平有随年龄增加而逐渐下降的趋势,但在各年龄层间无显著差异。年龄＜３５岁的女性中,ＤＨＥＡＳ水平与基础ＦＳＨ、基础ＦＳＨ／ＬＨ、基础Ｅ２、ＡＦＣ、ＭＯＶ、ＣＯＨ后卵巢反应性及妊娠结局均无关。３５≤年龄＜４０岁的女性中,ＤＨＥＡＳ水平与基础ＦＳＨ显著负相关（ｒ＝ －０．２８;Ｐ ＝ ０．０１１）;ＰＯＲ组ＤＨＥＡＳ水平显著低于非ＰＯＲ组;妊娠组ＤＨＥＡＳ水平显著高于未妊娠组。对于３５≤年龄≤４４岁的女性, ＤＨＥＡＳ是预测其卵巢低反应较可靠的指标（ＲＯＣ－ＡＵＣ：０．８３８）,界值２．５８ μｍｏｌ／Ｌ的灵敏度为８５．７％,特异度为８５％（ＯＲ ０．９９８; ９５％ＣＩ ０．９９６－０．９９９; ｐ＝０．０２３）;但不能可靠预测妊娠结局（ＲＯＣ－ＡＵＣ：０．６６２,Ｐ ＝ ０．０４）。 【结论】 本研究认为外周血ＤＨＥＡＳ水平是３５≤年龄≤４４岁病人中卵巢反应的保护因素,作为单一指标时对该人群卵巢低反应发生有适中的预测价值,但是对不妊娠结局的预测不可靠。未来研究需要进一步确认这组病人中伴随低水平ＤＨＥＡＳ的低反应患者进行ＤＨＥＡ预处理后是否能够获益。     

肺癌患者肺泡巨噬细胞一氧化氮活性研究

用镀铜镉还原－Ｇｒｉｅｓｓ法检测肺癌患者ＢＡＬＦ及肺泡巨噬细胞（ＡＭ）培养上清液中ＮＯ水平；ＲＴ－ＰＣＲ检测ＡＭｉＮＯＳｍＲＮＡ表达。结果显示，肺癌组ＢＡＬＦ及ＡＭ培养上清液中ＮＯ水平均明显低于对照组。两组ＡＭｉＮＯＳｍＲＮＡ表达阳性率分别为６９％和９１％（Ｐ＞０．０５），但表达强度肺癌组明显弱于对照组（Ｐ＜０．０１）。经ＧＭ－ＣＳＦ刺激后，ＡＭｉＮＯＳ表达强度及培养上清液中ＮＯ水平均显著提高。提示肺癌局部ＡＭ抗肿瘤功能可能存在某些缺陷；ＧＭ－ＣＳＦ可刺激ＡＭ使其功能增强     

多发性硬化的免疫功能

目的通过检测脑脊液及血清碱性髓鞘蛋白（ＭＢＰ）抗体水平，及观察外周血单个核细胞的白细胞介素（ＩＬ）－２、转化生长因子（ＴＧＦ）－β的ｍＲＮＡ表达，探讨多发性硬化（ＭＳ）免疫机理以及其临床应用的价值。方法病人组为临床确诊的ＭＳ４２例，其他神经系统疾病（ＯＮＤ）组２５例，对照组为健康成人或腰麻手术病人２０名。对上述对象皆收集其血清标本。对ＭＳ组中的３１例、ＯＮＤ组中的２５例及对照组中的１４名采取脑脊液。采用ＥＬＩＳＡ方法检测ＭＢＰ抗体的水平。分别以对照组脑脊液和血清ＭＢＰ抗体水平的ｘ－＋２ｓ为阳性标准，计算其余两组的阳性与阴性数目。采用逆转录－ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测２４例ＭＳ病人及１５名对照组外周血单个核细胞中ＩＬ－２、ＴＧＦ－β的ｍＲＮＡ表达。其中ＭＳ组病人活动期１５例，稳定期９例。结果ＭＳ组脑脊液和血清的ＭＢＰ抗体水平均比对照组增高，统计学处理示差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。ＭＳ组的脑脊液和血清ＭＢＰ抗体水平较ＯＮＤ组为高，二者经统计学检验差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。在ＭＳ组中，脑脊液标本ＭＢＰ抗体的阳性率虽高于血清（分别为８０．７％和６４．３％），但差异无统计学意义。在ＯＮＤ组，脑脊液和     

激活核因子Ｅ２相关因子２信号通路减轻高糖诱导足细胞的凋亡

【目的】 探讨激活核因子Ｅ２相关因子２（Ｎｒｆ２）通路能否减轻高糖诱导足细胞的凋亡。【方法】体外培养小鼠足细胞,分为５组：对照组、高渗组、高糖组、高糖＋叔丁基对苯二酚（ ｔＢＨＱ）,高糖＋Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）。流式细胞仪检测细胞内活性氧和凋亡;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 及ｒｅａｌ ｔｉｍｅ－ ＰＣＲ检测Ｎｒｆ２、醌氧化还原酶１（ＮＱＯ１）,血红素加氧酶（ＨＯ－１）的表达;检测足细胞丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）及过氧化氢酶（ＣＡＴ）。【结果】 高糖组足细胞凋亡率、活性氧及细胞ＭＤＡ高于对照组（Ｐ ＜ ０．０５）,而该组足细胞ＳＯＤ、ＧＳＨ及ＣＡＴ低于对照组（Ｐ ＜ ０．０５）;高糖＋ＮＡＣ组的足细胞凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）;高糖＋ｔＢＨＱ组足细胞的总Ｎｒｆ２及核Ｎｒｆ２、 ＨＯ－１、ＮＱＯ１的表达高于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）,细胞内ＳＯＤ、ＧＳＨ及ＣＡＴ高于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）,高糖＋ｔＢＨＱ组足细胞的凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 激活 Ｎｒｆ２通路降低高糖诱导足细胞的氧化应激,减轻足细胞凋亡。     

胰岛素与类胰岛素生长因子 1 对多囊卵巢综合征患者雄激素产生的作用

目的研究胰岛素（ＩＮＳ）及胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）在多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）中对卵巢雄激素产生的促进作用。方法根据体重指数将４８例ＰＣＯＳ患者分为肥胖组和非肥胖组；正常对照组１０例。测定上述对象的血促卵泡生成素（ＦＳＨ）、促黄体生成素（ＬＨ）及睾酮（Ｔ）。对４８例ＰＣＯＳ患者中的４０例动态观察口服糖耐量实验后ＩＮＳ、ＩＧＦ－１及雄稀二酮（Ａ）的水平。并对１０例ＰＣＯＳ患者及５例对照者在高ＩＮＳ条件下做卵巢间质组织培养，测定培养液中ＩＧＦ－１及Ａ。结果ＰＣＯＳ患者均存在高胰岛素血症及高雄激素血症；ＰＣＯＳ非肥胖组较肥胖组血ＩＧＦ－１衡定增高（Ｐ＜０．０１）。高浓度ＩＮＳ能明显提高卵巢间质培养液中的ＩＧＦ－１浓度及Ａ浓度（均Ｐ＜０．０５），两者呈正相关（Ｐ＜０．０５）。结论ＰＣＯＳ患者均存在高胰岛素血症，ＩＮＳ在卵巢局部参与调节ＩＧＦ－１系统，在高雄激素血症形成中起重要作用。     

强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞亲环素Ａ的表达及意义

【目的】 探讨强直性脊柱炎（ＡＳ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）亲环素Ａ（ＣｙＰＡ）表达水平及其与病情活动性指标的联系。【方法】 纳入年龄与性别相匹配的新诊断ＡＳ患者及健康志愿者（ＨＶ）各３０例,于空腹状态采集血样,并记录患者的毕氏ＡＳ疾病活动指数（ＢＡＳＤＡＩ）、毕氏ＡＳ功能指数（ＢＡＳＦＩ）、红细胞沉降率（ＥＳＲ）及Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及半定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白及ｍＲＮＡ表达,Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析了解ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白水平与病情活动性指标的相关性。【结果】ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白及ｍＲＮＡ半定量值分别为０．９８ ± ０．２８及０．７７ ± ０．１０,均显著高于ＨＶ的０．３０ ± ０．２１及０．１７ ± ０．１１（Ｐ＜ ０．０５）。Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析则提示ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白与ＥＳＲ （ｒ ＝ ０．５２１,Ｐ ＜ ０．０５）及ＣＲＰ （ｒ ＝ ０．３９４, Ｐ＜ ０．０５）均呈正相关。【结论】 ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ表达较ＨＶ上调,且与ＥＳＲ及ＣＲＰ密切关联,提示ＣｙＰＡ可能在ＡＳ发病及炎症活动过程中起调节作用。     

移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

摘要：【目的】在大鼠肝脏缺血再灌注模型中,观察移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）的影响。【方法】全骨髓培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞学鉴定,慢病毒载体（ＬＶ３－ｓｈＴＳＧ－６）感染下调ＴＳＧ－６基因的表达;６０只ＳＤ雌性大鼠７０％肝脏缺血再灌注损伤模型的建立,随机分４组,ＰＢＳ组、ＢＭＳＣ组,ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组、ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组;各组大鼠分别于恢复灌注后３、６、２４ｈ取血检测血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量,恢复灌注后６ｈ取中叶肝脏组织,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＴＳＧ－６蛋白表达,切片ＨＥ染色后光镜观察肝组织显微结构。【结果】体外分离培养的ＢＭＳＣ状态稳定,增殖能力强,表达ＣＤ２９及ＣＤ４４,不表达ＣＤ３４及ＣＤ４５,慢病毒感染下调ＢＭＳＣ的ＴＳＧ－６基因表达效率达７３．９９％;大鼠肝脏７０％缺血再灌注损伤模型稳定,各时间点ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均高于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）;ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均低于ＰＢＳ组（Ｐ＜０．０５）;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝脏ＴＳＧ－６蛋白表达低于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）,ＰＢＳ组未见ＴＳＧ－６蛋白表达;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组重,与ＰＢＳ组无明显区别,ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＰＢＳ组明显减轻。【结论】移植ＢＭＳＣ能改善肝缺血再灌注损伤,移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞削弱了其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

肺癌患者肺泡巨噬细胞一氧化氮活性研究

用镀铜镉还原－Ｃｒｉｅｓｓ法检测肺癌患者ＢＡＬＦ及肺泡巨噬细胞（ＡＭ）培养上清液中ＮＯ水平；ＲＴ－ＰＣＲ检测ＡＭ ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ表达。结果显示，肺癌组ＢＡＬＦ及ＡＭ培养上清液中ＮＯ水平均明显低于对照组。两组ＡＭ ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ表达阳性率分别为６９％和９１％（Ｐ〉０．０５），但表达强度肺癌组明显弱于对照组（Ｐ〈０．０１）。经ＧＭ－ＣＳＦ刺激后，ＡＭ ｉＮＯＳ表达强度及培养上清液中ＮＯ水平均显     

扶正保真汤对荷瘤鼠化疗增效实验研究

对荷人肺腺瘤（ＳＰＣ－Ａ），肉瘤（Ｓ１８０）ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠采用扶正保真汤加环磷酰胺化疗合并治疗，与单用化疗组相比较。结果表明；扶正保真汤加化疗组抑瘤率较高（Ｐ〈０．０１）；且能升高瘤组织内ｃＡＭＰ水平，提高ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ值（Ｐ〈０．０５），增加Ｇ０＋Ｇ１期细胞，减少Ｓ期细胞（Ｐ〈０．０５）；降低血清ＴＮＦ－α水平及ＭＤＡ含量（Ｐ〈０．０１），提高Ｔ－ＳＯＤ活力（Ｐ〈０．０１）。提示扶正保真汤     

大鼠多囊卵巢中IGF—Ⅰ mRNA的表达

应用原位杂交法,观察了大鼠多囊卵巢中ＩＧＦ－Ⅰ ｍＲＮＡ在卵巢中的分布情况。结果表明,在大鼠ＰＣＯ中ＩＧＦ－Ⅰ ｍＲＮＡ主要在卵泡膜细胞中表达,颗粒细胞未见表达。结果提示ＰＣＯ中ＩＧＦ－Ⅰ不是主要来源于颗粒细胞合成,卵巢局部内环境可能存在某种调节因子控制ＩＧＦ－Ⅰ对颗粒细胞的刺激作用。     

多囊卵巢综合征的高胰岛素血症与神经肽

对多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）患者２０例及已婚经产健康妇女１０名行口服葡萄糖耐量试验（ＯＧＴＴ），以观察有关内分泌变化。结果ＰＣＯＳ组①ＯＧＴＴ后无糖耐量损害，但有显著高血糖反应；②空腹胰岛素（ＩＮＳ）与空腹β－内啡肽（β－ＥＰ）浓度及ＯＧＴＴ后ＩＮＳ净增量与β－ＥＰ净增量呈正相关（ｒ＝０．４９，Ｐ＜０．０５；ｒ＝０．３７，Ｐ＜０．０５）；③ＯＧＴＴ后ＩＮＳ净增量与强啡肽（ＤｙｎＡ）净增量亦呈正相关（ｒ＝０．５８，Ｐ＜０．０１）；④患者组空腹生长抑素（ＳＳ）显著低于对照组，但ＯＧＴＴ后两组ＳＳ浓度相似。表明ＰＣＯＳ患者空腹高ＩＮＳ与ＳＳ抑制程度不足有关，而ＯＧＴＴ后高ＩＮＳ与β－ＥＰ，ＤｙｎＡ刺激程度过强有关。     

脱氢表雄酮诱导多囊卵巢综合征动物模型的研究

目的：研究脱氢表雄酮（ＤＨＥＡ）诱导ＳＤ幼年雌性大鼠多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）动物模型的卵巢形态学及性激素变化,同时探讨其与胰岛素抵抗方面的关系。方法：以ＤＨＥＡ皮下注射２３日龄ＳＤⅡ级雌性大鼠,分别观察卵巢体重、光镜（ＨＥ染色）及透视电镜改变,测定糖耐量、血清胰岛素、Ｅ２、Ｔ、Ｐ、ＰＲＬ、ＦＳＨ、ＬＨ水平以及卵巢颗粒细胞在体外不同刺激状态下（空白、ＦＳＨ、ＩＧＦ－１及ＦＳＨ＋ＩＧＦ－１）培养液中     

多囊卵巢综合征的生殖内分泌特征、卵巢形态学改变与克罗米酚疗效间的关系

目的 探讨多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）妇女用克罗米酚（ＣＣ）促排卵治疗无效的原因,以预测其疗效。方法 ４１例ＰＣＯＳ患者均计算ＢＭＩ,行Ｆ－Ｇ毛发评分,服ＣＣ前后测血清生殖激素水平,Ｂ超了解卵巢形态并监测排卵,结果 与ＣＣ治疗有反应组相比,无反应组的Ｆ－Ｇ毛发评分、基础Ａ、ｆＴ增高,卵泡数增多,卵巢体积及髓质面积增大,卵泡晚期ＦＳＨ、ＬＨ、Ｅ２降低（Ｐ均〈０．０５）;相关回归显示平均卵泡数与Ｔ、Ａ,平均髓质面积一正相关。结论 多毛患者对ＣＣ治疗的反应性降低,Ｈ－Ｐ－Ｏ轴功能状态可影响ＣＣ疗效;一定的激素水平和卵巢超声表现提示ＣＣ抵抗;卵巢超声形态与Ｔ、Ａ间存在正相关。     

多囊卵巢综合征中胰岛素抵抗与高雄激素血症

目的：探讨多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）者胰岛素抵抗与高雄激素血症的关系。方法：测定４０例ＰＣＯＳ患者和２０ 例排卵正常、不孕妇女的血清雄激素、性激素结合球蛋白（ＳＨＢＧ）含量,并观察口服葡萄糖耐量试验（ＯＧＴＴ）时血糖、胰岛素变化。结果：ＰＣＯＳ组雄激素水平显著升高（Ｐ＜０．０５）,ＳＨＢＧ显著降低（Ｐ＜ ０．００１）,胰岛素敏感性显著降低（Ｐ＜ ０．０１）;且胰岛素与雄激素呈正相关,而与ＳＨＢＧ呈负相关。结论：高胰岛素血症和高雄激素血症可能是ＰＣＯＳ无排卵机制之一。     

扶正保真汤对荷瘤鼠化疗增效实验研究

对荷人肺腺癌（ＳＰＣ－Ａ－１）、肉瘤（Ｓ１８０）ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠采用扶正保真汤加环磷酰胺化疗合并治疗，与单用化疗组相比较。结果表明：扶正保真汤加化疗组抑瘤率较高（Ｐ＜０．０１）；且能升高瘤组织内ｃＡＭＰ水平，提高ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ值（Ｐ＜０．０５）；增加Ｇ０＋Ｇ１期细胞，减少Ｓ期细胞（Ｐ＜０．０５）；降低血清ＴＮＦ－α水平及ＭＤＡ含量（Ｐ＜０．０１）；提高Ｔ－ＳＯＤ活力（Ｐ＜０．０１）。提示扶正保真汤能增加化疗疗效     

人卵巢颗粒细胞雌激素β型受体cDNA的克隆和序列分析

目的 测定和分析人卵巢颗粒细胞中雌激素β型受体（ＥＲβ）ｃＤＮＡ的核苷酸序列结构。方法 采用ＤＭＥＭ培养基、以ＰＥＲＣＯＬＬ方法从人体外受精卵泡液中制备颗粒细胞。根据ＴＲｌｚｏｌ Ｒｅａｇｅｎｔ试剂盒方法抽提ＲＮＡ,并在Ｄｉｓｐｏｃｏｌｕｍｎ柱中用寡聚（ｄＴ）纯化ｍＲＮＡ。用ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐ＾ＴＭⅡＲＴ试剂盒反转录ＰＣＲ合成ｃＤＮＡ。扩增产物与ｐＧＥＭ－Ｔ载体连接,并转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕ     

基于ＤＥＮＶ－ｐｒＭ／Ｅ基因构建ＤＥＮＶ－ＶＬＰ及其免疫学特性

摘 要：【目的】 构建和表达登革病毒４型病毒样颗粒,初步研究其免疫学特性。【方法】 用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增ＤＥＮＶ４－ｐｒＭ／Ｅ基因,构建重组质粒ｐＧＡＰＺ－ｓｐｒＭ／Ｅ－Ｄ４,转化Ｘ３３酵母菌株,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ鉴定目的蛋白表达。切片电镜检测病毒样颗粒,蔗糖密度梯度离心纯化。免疫三组Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠,每组１５只。采用间接ＥＬＩＳＡ检测抗原特异性抗体,间接免疫荧光法检测免疫血清与天然病毒粒子的结合,流式细胞术分析小鼠脾淋巴细胞表型,酶联免疫斑点法（ＥＬＩＳＰＯＴ）检测脾分泌ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α和ＩＬ－１０的细胞。【结果】重组质粒在酵母中以病毒样颗粒形式表达,为直径２０ ～ ３０ ｎｍ的球形颗粒,ＶＬＰ免疫组刺激小鼠产生抗体与灭活病毒组相似,流式及ＥＬＩＳＰＯＴ结果提示ＤＥＮＶ４－ＶＬＰ与灭活病毒组相似,用登革病毒抗原刺激后,分泌ＩＦＮ－γ,ＴＮＦ－α的细胞数目明显增加,各组分泌ＩＬ－１０细胞数目的整体水平均不高。【结论】应用毕赤酵母表达系统成功表达获得了ＤＥＮＶ４－ＶＬＰ,具有良好的免疫原性,可诱导Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠产生有效的体液免疫应答,并能诱导Ｔｈ１型免疫应答而诱导Ｔｈ２型免疫应答较弱。