挥发性麻醉剂后处理对SH-SY5Y神经细胞缺血再灌注损伤的影响

目的 观察挥发性麻醉剂后处理对SH-SY5Y神经细胞缺血再灌注损伤的影响.方法 对SH-SY5Y神经细胞行1h的氧糖剥夺和20h的再灌注.在再灌注之初立即给予不同浓度的异氟烷、七氟烷或地氟烷进行后处理1h.观察相应挥发性麻醉剂不同浓度组、氧糖剥夺组及对照组中乳酸脱氢酶(LDH)释放水平.结果 氧糖剥夺可以损伤SH-SY5Y神经细胞,在再灌注开始1h内给予挥发性麻醉剂后处理,可显著降低氧糖剥夺和再灌注导致的LDH释放.结论 异氟烷、七氟烷和地氟烷3种常用的挥发性麻醉剂在SH-SY5Y神经细胞缺血再灌注损伤中具有后处理的保护作用.     

环状RNA_has_circ_0067923促进氧糖剥夺所致SH-SY5Y细胞凋亡的作用机制研究

目的 探讨环状RNA has_circ_0067923在糖氧剥夺(OGD)导致SH-SY5Y细胞凋亡的作用机制.方法 培养SH-SY5Y细胞,构建OGD模型,将细胞分成Control组、OGD (2 h)组、OGD (4 h)组、OGD (6 h)组,除Control组外,其他组OGD处理不同时间后,利用CCK-8评价...     

七氟烷后处理对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的：研究七氟烷后处理对肾脏缺血再灌注损伤的影响,探讨其保护机制是否与抗炎抗氧化有关。方法：雄性C57BL/6小鼠随机分成4组：假手术组（Sham组）、假手术+七氟烷后处理组（Sham+Sevo组）、肾脏缺血再灌注损伤组（IR 组）和肾脏缺血再灌注损伤+七氟烷后处理组（Sevo?Post C组）。摘除右肾后夹闭左肾蒂30 min建立肾脏缺血再灌注损伤模型,Sevo?Post C组于再灌注起吸入2%七氟烷1 h。再灌注24 h后检测肾功能参数、血清炎症因子及肾组织氧化应激指标。Western blot方法检测磷酸化蛋白激酶B（p?Akt）、磷酸化糖原合成酶激酶3β（p?GSK3β）、Akt及GSK3β表达水平。结果：与假手术组比较,缺血再灌注组血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、TNF?α、IL?6及丙二醛（MDA）的水平均升高（P＜0.05）;给予七氟烷后处理可以使Scr、BUN、TNF?α、IL?6、MDA的水平及肾损伤评分明显降低（P＜0.05）。在肾脏缺血再灌注损伤后p?Akt及p?GSK3β水平均有所升高,但与IR组比较,七氟烷后处理可以显著增加Akt及GSK3β的磷酸化水平（P＜0.05）。结论：七氟烷后处理对小鼠肾脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与Akt/GSK3β通路调控的抗炎抗氧化有关。     

体外诱导SH-SY5Y细胞凋亡的氧糖剥离再灌注模型的建立及评价

目的：通过体外模拟缺血-再灌注损伤（I/R）诱导细胞凋亡的氧糖剥离再灌注(OGD/R)模型的建立与评价,探讨成功诱导神经元凋亡发生的可靠时间窗,为进一步阐明神经元凋亡机制奠定基础。方法：选用人神经母细胞瘤系SH-SY5Y细胞分为对照组和实验组,实验组给予不同的OGD/R时间,通过MTT法计算细胞存活率,选定再灌注24 h存活率接近50％的OGD10h/R组和对照组细胞,通过光镜、荧光显微镜及电镜观察细胞形态学改变,采用试剂盒检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）水平、胞浆内丙二醛（MDA）含量及细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果：MTT法结果显示,细胞存活率随OGD时间延长显著降低,OGD10h/R24h组为对照组的（44.91±1.21）%,不同OGD/R时间组间细胞存活率比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。倒置显微镜及HE染色显示,OGD10h/R组细胞密度减低,形态多样性,核固缩;AO/EB荧光染色可见凋亡小体形成,电镜显示核内异染色质凝集、趋边等凋亡的改变。实验组培养液内LDH水平及胞浆内MDA含量随再灌注时间延长而增加,LDH水平于再灌注24 h达峰值,MDA含量于再灌注24 h接近平台期,胞浆内SOD活性随再灌注时间延长呈现先降低后回升的趋势,与相同时间对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。流式细胞术检测细胞周期显示,随再灌注时间延长,OGD10h/R组G0/G1期细胞比例逐渐增加,24 h达峰值（74.09±2.62）%,其后有所降低,G2/M期细胞比例再灌注0 h时最高达（26.85±1.35）%,此后逐渐降低,24 h前均显著高于同时间对照组细胞,S期细胞比例逐渐降低,24 h最低达（19.2±1.58）%,此后逐渐升高,与同时间对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论：体外模拟I/R模型的OGD10h/R组能够成功诱导SH-SY5
Y细胞凋亡的发生,可进一步应用于凋亡机制的研究。     

氧糖剥夺/再灌注损伤小胶质细胞通过上调胸腺素β4影响PI3K/AKT信号通路

探究小胶质细胞表达的胸腺素β4（Tβ4）与脑缺血/再灌注损伤（I/R）后PI3K/AKT通路的关系。方法 拟采用局灶脑I/R的模型［21只成年雄性SPF级SD大鼠分为假手术组（Sham组,6只）和模型组（I/R组,15只）］和使用BV2细胞建立氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)模型（分为对照组、OGD/R组、shRNA Tβ4+Control组、shRNA Tβ4+OGD/R组、Control shRNA+Control组、Control shRNA+OGD/R组）,配合基因干扰技术,使用免疫组化、免疫荧光等方法检测大脑皮层及BV2细胞Tβ4表达水平,蛋白质印迹检测PI3K/AKT通路蛋白水平的变化。结果 与Sham组相比,大鼠局灶脑I/R损伤后,大脑皮层Tβ4蛋白表达显著升高,尤其是I 2 h/R 48 h组（P＜0.0001）。体外实验证实,与Control组相比,OGD/R损伤后Tβ4的在BV2细胞表达明显升高,尤其OGD 6 h/R 48 h组升高最明显（P＜0.0001）, p-PI3K/PIK和p-AKT/AKT比值也升高(P＜0.001),而当Tβ4基因被干扰时,p-PI3K/PIK(P＜0.05)和p-AKT/AKT（P＜0.01）也受到抑制。结论 局灶性脑I/R损伤后,Tβ4在大脑皮质小胶质细胞高表达,并且小胶质细胞高表达的Tβ4可能通过影响PI3K/AKT通路影响大脑缺血/再灌注损伤后的修复。     

银杏二萜内酯葡胺注射液通过下调calpain信号通路抑制脑缺血神经细胞凋亡

研究银杏二萜内酯葡胺注射液(diterpene ginkgolides meglumine injection,DGMI)对缺氧缺糖/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡的抑制作用及其机制。采用试剂盒、Fluo-3 AM法、Western blot检测SH-SY5Y细胞氧糖剥离损伤4 h后,与药物一起复氧1 h细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量、caspase-3/7酶活力、细胞质中核小体含量、胞浆游离钙离子浓度以及calpain、cleaved caspase-12蛋白量的变化。结果显示DGMI能极显著降低OGD/R损伤的SH-SY5Y细胞LDH的漏出量,抑制caspase-3/7酶活性,减少细胞核核小体的释放量,下调细胞内游离钙离子浓度、calpain和cleaved caspase-12蛋白量,抑制calpain凋亡信号通路保护神经细胞。DGMI对OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有显著的抑制作用,其作用机制可能与抑制细胞内Ca²⁺/calpain/caspase-12/capase-3信号通路有关。     

氧糖剥夺条件下p75神经营养素受体在人神经母细胞瘤细胞中的表达和作用

目的 探讨氧糖剥夺（OGD）条件下p75神经营养素受体（p75NTR）在人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）中的表达变化和作用。方法 SH-SY5Y细胞OGD模型的建立采用三气培养箱无糖无血清培养方法。模型成功建立后设立3组：无血清常规培养组（对照组）、OGD组和OGD+p75NTR竞争性阻断剂LM11A-31处理组（OGD+LM11A-31组）。在细胞培养12 h时用利用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测3组细胞存活率,乳酸脱氢酶（LDH）活力检测试剂盒测定LDH释放活力,流式细胞术检测凋亡细胞比例,蛋白质印迹法检测p75NTR的蛋白表达。结果 成功构建SH-SY5Y细胞OGD模型。细胞培养12 h时,对照组、OGD组和OGD+LM11A-31组细胞存活率分别为（94.80±4.06）%、（50.34±5.55）%、（64.68±4.59）%,LDH释放活力分别为（46.93±5.49）U/L、（353.09±30.67）U/L和（282.20±25.60）U/L,凋亡细胞比例分别为（1.82±0.45）%、（14.98±2.59）%和（7.36±1.98）%,p75NTR蛋白相对表达量分别为0.06±0.01、0.41±0.02和0.19±0.03,差异均有统计学意义（F=67.94、142.10、36.28、221.20,P均<0.05）。多重比较显示,OGD组细胞存活率低于对照组,LDH释放活力高于对照组,凋亡细胞比例高于对照组,p75NTR蛋白表达高于对照组,差异均有统计学意义（Bonferroni法,P''均<0.05）;而LM11A-31处理后OGD+LM11A-31组细胞存活率高于OGD组,LDH释放活力低于OGD组,凋亡细胞比例低于OGD组,p75NTR蛋白表达低于OGD组,差异均有统计学意义（Bonferroni法,P''均<0.05）。结论 OGD条件下p75NTR在人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中表达增加,可能促进了神经损伤和凋亡。     

消栓通络有效成分组对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺损伤的影响

目的研究消栓通络有效成分组(XECG)对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺(OGD)损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,将细胞随机分为正常组、氧糖剥夺模型组和XECG组(1、3、10mg·L-1),建立体外OGD/R细胞模型。倒置显微镜观察细胞形态;MTT法测定细胞存活率;酶标法试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果与模型组相比,XECG能明显改善OGD/R引起的SH-SY5Y细胞的损伤,提高细胞存活率(P<0.05),减少LDH的释放量(P<0.05),能提高缺糖缺氧神经元Bcl-2/Bax比值。结论 XECG对OGD/R引起的SH-SY5Y细胞损伤有保护作用,其机制可能与影响凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达有关。     

七氟醚后处理对氧糖剥夺/复氧复糖诱导HT22细胞DNA损伤及SIRT1表达的影响

目的 探讨七氟醚后处理对HT22细胞氧糖剥夺/复氧复糖后DNA损伤及沉默信息调节因子1(SIRT1)表达的影响.方法 随机将对数生长期的HT22细胞分为7组:空白对照组(CON),氧糖剥夺/复氧复糖4 h组(OGD/R 4 h),氧糖剥夺/复氧复糖4 h+1％七氟醚后处理组(OGD/R 4 h+1％SEVO),氧糖剥夺...     

吸入麻醉药后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤影响的比较

目的 探讨七氟醚和异氟醚后处理在成年大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中的心肌保护作用.方法 将成年雄性SD大鼠24只,采用随机数字表法分为对照组(C组)、缺血再灌注组(R组)、七氟醚后处理组(S组)和异氟醚后处理组(I组),每组6只.建立Langendorff离体心脏灌注模型.于平衡灌注末及再灌注30、90 min时记录心率(HR)、左心室舒张末压(LV-EDP)、左心室发展压(LVDP)、左心室压力上升最大速率(LV+ dp/dtmax)和左心室压力下降最大速率(LV-dp/dtmax);灌注结束后,取心尖部心肌组织1 mm3,电镜下观察线粒体结构并评分,剩余心脏组织采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定心肌梗死面积(MIS).结果 与R组比较,S组和I组心肌再灌注后的心功能指标改善,MIS减小,线粒体损伤减轻(P＜0.05);与S组比较,I组心肌再灌注后的心功能变差,MIS增大,线粒体损伤程度加重(P＜0.05).结论 七氟醚和异氟醚后处理在成年大鼠MIRI中均有保护作用,但七氟醚后处理的心肌保护作用优于异氟醚后处理.     

H2S 在缺血再灌注损伤中神经细胞自噬发生机制中的作用研究

目的：利用siRNA 干扰技术干扰H2S 生成的关键酶胱硫醚β- 合成酶（cystathionine β-synthase,CBS）基因并构建细胞氧糖剥夺再灌注（oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）模型,探讨OGD/R 和CBS 基因干扰后SH-SY5Y 细胞自噬和凋亡情况及相关信号通路变化。方法：构建OGD/R 模型,体外模拟缺血再灌注过程,根据氧糖剥夺和再灌注时间不同共设9 组,利用透射电镜观察各组细胞OGD/R 后细胞内自噬小体形成情况,根据透射电镜结果选取氧糖剥夺
4 h/ 再灌注24 h 作为后续实验的OGD/R 模型;脂质体转染法将针对CBS 基因的siRNA 转入SH-SY5Y 细胞内,同时构建OGD/R 模型,将细胞分为3 个组,分别为CBS 干扰组,OGD /R 组和CBS 干扰+OGD/R 组,各组均设相应对照。Real time PCR 和蛋白印迹法鉴定CBS 基因干扰效率,并检测各组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1 和信号通路中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的蛋白表达水平,以及凋亡信号通路中NF-κBp65、COX-2 蛋白表达水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平。结果：透射电镜观察细胞内自噬小体：除正常对照组和氧糖剥夺4 h/ 再灌注12 h 组未观察到自噬小体外,其余各组均在胞质内观察到了较多自噬小体。CBS 基因干扰效率达80%。CBS 干扰组自噬相关蛋白及相关信号通路蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,Beclin-1,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR 蛋白表达水平与阴性对照组比较均无统计学差异;OGD/R 组与正常对照组比较,OGD/R 组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ 明显高于正常对照组, p-Akt/Akt 和p-mTOR/mTOR 均明显降低,NF-κBp65、COX-2 蛋白表达水平均高于正常对照组;CBS干扰+OGD/R 组与对照组比较,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,Beclin-1,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR 均无显著差异。CBS 干扰组细胞凋亡率与阴性对照组比较无统计学差异;与正常对照组比较OGD/R 组细胞凋亡率明显高于正常对照组;CBS 干扰+OGD/R 组与阴性对照组比较,细胞凋亡率无显著差异。结论：OGD/R 能够明显诱导SH-SY5Y细胞发生自噬和凋亡,且可能与Akt/mTOR 及 NF-κBp65/COX-2 信号通路相关;CBS 基因干扰后对细胞自噬和凋亡均无明显影响。     

电针对异氟醚诱导的阿尔茨海默病小鼠行为学改变的作用及机制

【目的】探讨电针对异氟醚引起的阿尔茨海默病(AD)APPswe/PS1d E9双转基因小鼠(AD小鼠)行为学改变、皮质β淀粉样前体蛋白(APP)和β淀粉样蛋白(Aβ)的表达以及皮质神经细胞凋亡的影响。【方法】选用6月龄AD小鼠及同龄野生型小鼠,随机分为野生对照组、AD组、异氟醚组和电针组(N=8)。电针组在异氟醚处理前进行连续3 d的电针处理,取百会、涌泉穴,15 min/d。异氟醚处理:电针组和异氟醚组吸入体积分数1.2%异氟醚4 h。采用Morris水迷宫测试小鼠的学习记忆能力,Western blot法检测皮质APP-C83、APP-C99及Aβ的表达,TUNEL法检测皮质细胞凋亡情况。【结果】(1)逃避潜伏期:AD组显著长于野生对照组,异氟醚组长于AD组,电针组短于异氟醚组(均P0.05)。(2)目标象限停留时间百分比及穿越平台次数:异氟醚组均低于AD组(P0.05),电针组高于异氟醚组(P0.05)。(3)皮质APP-C83的表达:异氟醚组显著低于AD组(P0.05),电针组高于异氟醚组(P0.05)。(4)皮质APP-C99的表达:异氟醚组显著高于AD组(P0.05),电针组低于异氟醚组(P0.05)。(5)皮质凋亡指数:异氟醚组显著高于AD组(P0.05),电针组低于异氟醚组(P0.05)。(6)AD组、异氟醚组、电针组小鼠皮质Aβ的表达水平显著高于野生对照组(P0.05)。【结论】电针可减轻异氟醚诱导的AD样病神经毒性,减轻异氟醚诱使的AD小鼠学习记忆能力的下降,可能与其抑制APP-C99的过量表达,减少Aβ的生成和积聚,进而减少神经细胞的凋亡有关。     

异氟醚对未成熟兔缺血再灌注心肌细胞间黏附分子-1、核因子-κB表达的影响

目的:探讨异氟醚对幼兔缺血再灌注心肌细胞间黏附分子-1,NF-κB的影响及其对心肌缺血再灌注保护的作用机制。方法:取32只日本大耳白幼兔随机分为4组,假手术组只穿线不结扎;缺血再灌注组:结扎30 min,再灌注2h;异氟醚预处理组:缺血前吸入1.1%异氟醚30min,洗脱15min后处理同缺血再灌注组;格列苯脲组:异氟醚吸入前于耳缘静脉注射格列苯脲0.5m g/kg后处理同异氟醚预处理组。观察心肌细胞凋亡和细胞间黏附分子-1,NF-κB蛋白表达情况,电镜观察超微结构。结果:异氟醚预处理组细胞凋亡较缺血再灌注组和格列苯脲组明显减少(P<0.05),异氟醚预处理组细胞间黏附分子-1,NF-κB的表达明显较缺血再灌注组和格列苯脲组低(P<0.05),电镜显示异氟醚预处理组细胞损伤程度小于缺血再灌注组和格列苯脲组。结论:异氟醚预处理对幼兔缺血再灌注心肌损伤有明显的保护作用,其机制通过下调细胞间黏附分子-1,NF-κB蛋白表达并与促K+ATP通道开放有关。     

异氟醚对幼兔缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响

目的 探讨异氟醚对幼兔缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响.方法 取32只日本大耳白幼兔随机分为4组,假手术组:冠状动脉(冠脉)只穿线不结扎;缺血再灌注组:结扎冠脉30min,再灌注2 h;异氟醚预处理组:缺血前吸入1.1%异氟醚30 min,洗脱15 min后处理同缺血再灌注组;格列苯脲组:异氟醚吸入前于耳缘静脉注射格列苯脲0.5mg/kg后处理同异氟醚预处理组.观察心肌细胞凋亡和Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达情况,电镜观察超微结构.结果 异氟醚预处理组细胞凋亡较缺血再灌注组和格列苯脲组明显减少(P<0.05),异氟醚预处理组Bcl-2表达高于缺血再灌注组和格列苯脲组(P<0.05),而Bax和Caspase-3表达少于缺血再灌注组和格列苯脲组(P<0.05),电镜显示异氟醚预处理组细胞损伤程度小于缺血再灌注组和格列苯脲组.结论 异氟醚预处理对幼兔缺血再灌注心肌损伤有明显的保护作用,其机制与促K-ATP通道开放有关.     

GSK-3β介导七氟醚对脓毒症相关性脑病大鼠的脑保护作用

目的探讨糖原合成激酶3β(GSK-3β)介导七氟醚对脓毒症相关性脑病大鼠的脑保护作用。方法健康雄性SD大鼠48只,随机分为假手术(Sham)组、脓毒症相关性脑病(SAE)组、SAE+七氟醚后处理组和SAE+七氟醚后处理+GSK-3β抑制剂组四组,每组各12只。用腹腔注射脂多糖(LPS)建立SAE模型。建模后连续吸入2.5%的七氟醚30 min,利用Morris水迷宫实验评估大鼠认知功能,七氟醚处理后1 d检测大鼠海马区细胞凋亡率、IL-6浓度、GSK-3β表达。结果与Sham组相比,SAE组、SAE+七氟醚后处理组和SAE+七氟醚后处理+GSK-3β抑制剂组大鼠逃避潜伏期均延长,穿越平台次数均减少,原平台所在象限停留时间均缩短,海马区细胞凋亡率增加,IL-6浓度升高,GSK-3β表达减少;与SAE组相比,SAE+七氟醚后处理组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,原平台所在象限停留时间延长,海马区细胞凋亡率降低,IL-6浓度降低,GSK-3β表达增加;与SAE+七氟醚后处理组相比,SAE+七氟醚后处理+GSK-3β抑制剂组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,原平台所在象限停留时间缩短...     

异氟醚对幼兔缺血再灌注心肌细胞凋亡及Fas/Fasl表达的影响*

目的 探讨异氟醚对幼兔缺血再灌注心肌细胞凋亡及Fas,Fasl表达的影响。方法 取32只日本大耳白幼兔随机分为4组：假手术组只穿线不结扎;缺血再灌注组：结扎 30 min, 再灌注2 h;异氟醚预处理组：缺血前吸入1%异氟醚30 min, 洗脱15 min后处理同缺血再灌注组;格列苯脲组：异氟醚吸入前于耳缘静脉注射格列苯脲0.5 mg∕kg后处理同异氟醚预处理组。观察心肌细胞凋亡和Fas,Fasl蛋白表达情况,电镜观察细胞超微结构。结果 异氟醚预处理细胞凋亡明显较处理缺血再灌注组和格列苯脲组少（P<0.05）,异氟醚预处理组Fas,Fasl表达低于缺血再灌注组和格列苯脲组（P<0.05）,电镜显示异氟醚预处理组细胞损伤程度小于缺血再灌注组和格列苯脲组。结论 异氟醚能明显降低幼兔缺血再灌注心肌细胞的凋亡,其心肌保护作用与促进K-ATP通道开放有关。     

环孢素对七氟醚后处理诱导脑保护作用的影响

目的:脑缺血损伤是围术期常见并发症,缺血后处理以及非缺血后处理如吸入麻醉药后处理可减轻脑缺血损伤.文中观察环孢素(CsA)对七氟醚后处理诱导脑保护作用的影响. 方法:清洁级雄性SD大鼠50只,随机分为对照组,七氟醚后处理组,七氟醚+CsA组,七氟醚+溶剂组和CsA组,每组10只大鼠.采用大脑中动脉线栓法阻闭(MCAO)120 min后再灌注72 h,制备局灶性脑缺血模型.再灌注即刻的前20 min和后10 min给予七氟醚吸入.七氟醚后处理前给予侧脑室注射CsA.再灌注后的24、48和72 h行神经功能障碍评分(NDS),并于最后1次评分后测定脑梗死容积比. 结果:缺血-再灌注72 h后,脑梗死容积比在七氟醚后处理组(0.31±0.04)、七氟醚+CsA组(0.25±0.04)、CsA组(0.30±0.03)和七氟醚+溶剂组(0.33±0.05)均明显小于对照组(0.55±0.05);七氟醚+CsA组(0.25±0.04)明显小于七氟醚后处理组和CsA组.七氟醚后处理组、七氟醚+溶剂组、七氟醚+CsA组和CsA组在NDS的各时间点明显优于对照组(P<0.05);七氟醚+CsA组明显优于七氟醚后处理组(P<0.05). 结论:mPTP关闭剂具有脑保护作用,并协同增强七氟醚后处理的脑保护作用. 脑梗死容积比在七氟醚后处理组(0.31±0.04)、七氟醚+CsA组(0.25±0.04)、CsA组(0.30±0.03)和七氟醚+溶剂组(0.33±0.05)均明显小于对照组(0.55±0.05);七氟醚+CsA组(0.25±0.04)明显小于七氟醚后处理组和CsA组.七氟醚后处理组、七氟醚+溶剂组、七氟醚+CsA组和CsA组在NDS的各时间点明显优于对照组(P<0.05);七氟醚+CsA组明显优于七氟醚后处理组(P<0. 5). 结论:mPTP关闭剂具有脑保护作用,并协同增强七氟醚后处理的脑保护作用. 脑梗死容积比在七氟醚后处理组(0.31±0.04)、七氟醚+CsA组(0.25±0.04)、CsA组(0.30±0.03)和七氟醚+溶剂组(0.33±0.05)均明显小于对照 (0.55±0.05);七氟醚+CsA组(0.25±0.04)明显小于七氟醚后处理组和CsA组.七氟醚后处理组、七氟醚+溶剂组、七氟醚+CsA组和CsA组在NDS的各时间点明显优于对照组(P<0.05);七氟醚+CsA组明显优于七氟醚后处理组(P<0. 5). 结论:mPTP关闭剂具有脑保护作用,并协同增强七氟醚后处理的脑保护作用.     

七氟醚后处理通过调节FTO/KCNJ2对缺氧/复氧所致心肌细胞损伤的保护作用

目的 探讨七氟醚后处理对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及机制。方法 从基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus, GEO)获取心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI)相关数据集GSE160516,将差异表达基因KCNJ2纳入本研究。采用qRT-PCR检测KCNJ2在H/R和七氟醚处理的心肌细胞中的表达。RIP实验验证KCNJ2和FTO的结合关系。分别采用MTT法和流式细胞术检测细胞活力和凋亡率,使用乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒测定细胞的LDH释放量。结果 七氟醚后处理可抑制H/R诱导的心肌细胞损伤。相对于Control组,H/R心肌细胞中KNCJ2表达下调,而七氟醚可提高H/R心肌细胞中KCNJ2的表达(均P<0.01)。相对于H/R组,七氟醚组细胞增殖活力提高、LDH释放水平和凋亡率下降,但七氟醚对H/R心肌细胞的保护作用能够被敲减KCNJ2部分逆转(均P<0.05)。FTO能够通过抑制KCNJ2的m6A修饰进而增强...     

新生期小鼠七氟醚暴露对其青春期学习记忆及海马组织髓鞘损伤的影响

目的 探究新生期小鼠七氟醚暴露对其青春期学习记忆的影响及其相关机制.方法 6日龄C57BL/6小鼠随机分为对照组(CON组)、七氟醚组(SEVO组)、对照+氯化锂组(LiCl组)、七氟醚+氯化锂组(SEVO+ LiCl组).SEVO组为3％七氟醚连续暴露3d(第6～8天),每天1次,每次2 h,CON组为60％氧气对照,LiCl组为60％氧气暴露前30 min腹腔注射GSK3β抑制剂氯化锂(100 mg/kg),SEVO+LiCl组为七氟醚暴露前30 min腹腔注射氯化锂(100 mg/kg).新物体识别实验和Y迷宫实验检测小鼠第30～32天学习记忆功能;Western blot检测小鼠海马组织髓鞘碱性蛋白(MBP)、β-catenin蛋白表达及pGSK3β/GSK3β比值变化.结果 行为学实验结果显示,SEVO组小鼠识别指数和新臂探索次数百分比均低于CON组(P＜0.05).氯化锂预处理后,SEVO+ LiCl组小鼠识别指数和新臂探索次数百分比较SEVO组升高(P＜0.05),学习记忆功能改善.Western blot结果显示,SEVO组小鼠海马组织MBP蛋白、β-catenin蛋白表达及pGSK3β/GSK3β比值均低于CON组(P＜0.05),氯化锂预处理后,与SEVO组比较,SEVO+ LiCl组小鼠海马组织MBP蛋白、β-catenin蛋白表达增加,pGSK3β/GSK3β比值升高(P＜0.05).结论 新生期小鼠七氟醚暴露致青春期学习记忆功能受损,可能与抑制GSK3β/β-catenin信号通路中GSK3β(Ser9)磷酸化导致的海马组织髓鞘损伤有关.     

七氟醚预处理与后处理对大鼠肾下腹主动脉缺血再灌注致心肌损伤的保护作用

目的 本次试验目的 旨在在SD大鼠肾下腹主动脉缺血再灌注模型上,研究七氟醚预处理与后处理对肾下腹主动脉缺血再灌注致心肌损伤的保护作用.方法 健康SD大鼠40只,随机分为四组,每组10只.第一组为空白组(Sham),第二组为缺血再灌注组(I/R),阻断肾下腹主动脉2h,再灌注3h,第三组为七氟醚预处理组(I/R+Pre),阻断肾下腹主动脉之前吸入2%的七氟醚30min,第四组为七氟醚后处理组(I/R+Post),再灌注期间吸入2%的七氟醚.所有试验SD大鼠均用2%戊巴比妥钠麻醉,固定在加热毯上以保持体温恒定.实验结束后分别测定心腔内血清LDH的含量;心脏组织中SOD的活性、MDA的含量;光镜下观察各组病理形态学变化.结果 SOD活性:I/R+Pre组和I/R+Post组与Sham组或I/R组相比明显升高,I/R+Post组与I/R+Pre组相比明显升高;MDA含量:I/R+Pre组和I/ R+Post组与I/R组相比明显降低,I/R+Post组与I/R+Pre组相比明显降低,I/R组与Sham组相比明显升高;LDH含量:I/R组、I/R+Pre组、I/R+Post组与Sham组相比明显升高,但I/R+Pre组、I/R+Post组与I/R组相比明显降低;I/R+Post组与I/R+Pre组相比明显降低.光镜下观察,Sham组形态基本正常,I/R组损伤最重,I/R+Post组较I/R+Pre组减轻.结论 大鼠肾下腹主动脉缺血再灌注可导致心肌细胞损伤;七氟醚预处理和后处理对大鼠肾下腹主动脉缺血再灌注致心肌细胞损伤具有保护作用,后处理比预处理保护效应相对来说更好.可能涉及的机制:抑制脂质过氧反应及增强机体抗氧化能力,维持心肌细胞超微结构的相对稳定性.