过继回输腺病毒介导的白细胞介素10基因转染CTL对机体抗肿瘤免疫功能的增强效应

本研究探讨了白细胞介紊10(IL-10)对小鼠体内抗肿瘤免疫功能的影响。鉴于C26结肠癌细胞转染了IL-10基因后在体内的致瘤性明显下降，本研究构建了一株对C26结肠癌细胞具有杀伤括性的CD8^ CTL并观察了IL-10基因转染的该细胞株对肿瘤的治疗作用。携带IL-10基因的重组腺病毒能有效介导小鼠琳巴细胞的基因转染并使之分泌较高水平的IL-10。IL-10基因转染的CTL过继回输荷瘤小鼠体内能明显增强荷瘤小鼠的体内抗肿瘤免疫功能，使实验性肺转移小鼠肺部转移结节数明显减少．这表明，IL-10对于过继回输的肿瘤特异性CTL的免疫功能具有明显的增强作用。     

Klotho 蛋白通过TGF-β1/Foxp3/RORγt 通路抑制Treg 和Th7 细胞介导的宫颈癌细胞的免疫逃逸

目的: 研究抗衰老蛋白Klotho 对荷宫颈癌小鼠体内调节性T细胞（Treg 细胞）和辅助性T细胞17（Th7）细胞介导宫颈癌细胞免疫逃逸的影响及其作用机制。方法: 建立宫颈癌U14 细胞移植瘤小鼠模型,并设Control 组（正常小鼠组）、Model 组（荷宫颈癌小鼠模型组）、Klotho 处理组（荷宫颈癌小鼠经Klotho 蛋白处理组,200 ng/d)。分别在处理7、14 d 时称取各组小鼠体内宫颈癌移植瘤质量,以流式细胞术检测各组小鼠脾淋巴细胞功能、Treg和Th7细胞比例变化,qPCR检测各组小鼠Treg和Th7细胞关键转录因子Foxp3、RORγt的表达情况,ELISA方法检测各组小鼠脾淋巴细胞培养液中IL-17、IL-6、IL-10、TGF-β、IL-23 等因子的含量变化,WB检测各组小鼠脾淋巴细胞中Klotho、TGF-β1、Foxp3、RORγt 蛋白表达的变化。结果: 14 d 时,Klotho 组宫颈癌荷瘤小鼠肿瘤抑瘤率显著高于Model 组[(52.16±8.25)% vs (23.33±6.29)%,P<0.05]。Model 组与Control 组相比,荷瘤小鼠脾淋巴细胞中Treg、Th7 细胞比例均显著升高（均P<0.05）,总T淋巴细胞（CD3+）、辅助/诱导T淋巴细胞（CD3+CD4+）比例及免疫指数（CD3+CD4+/CD3+CD8+）显著下降（均P<0.05）,Foxp3、RORγt 基因mRNA表达显著增加（均P<0.05）,IL-17、IL-6、IL-10、TGF-β、IL-23 等因子分泌显著增加（均P<0.05）,Klotho 蛋白水平明显下降（P<0.05）,TGF-β1、Foxp3、RORγt 蛋白表达均明显升高（均P<0.05）;而Klotho 处理组与Model 组相比,上述指标均出现了相反的变化（均P<0.05）,但与Control 组无显著差异（均P>0.05）。结论: Klotho 蛋白可能通过调控TGF-β1/Foxp3/RORγt信号通路抑制宫颈癌荷瘤小鼠体内Treg和Th7 细胞介导的免疫逃逸,从而发挥抗肿瘤作用。     

肿瘤细胞裂解物联合IL-2预防黑色素瘤发生并抑制肿瘤生长的免疫机制

目的 探讨肿瘤细胞裂解物（TCL）联合IL-2对黑色素瘤的预防和抑制作用及其免疫机制。方法 超声破碎仪制备B16F10黑色素瘤细胞TCL。24只C57BL/6小鼠随机分为四组,分别予PBS、IL-2、TCL及TCL+IL-2预防性免疫3周,第4周对侧植瘤。观察小鼠出瘤时间及肿瘤大小,连续采集外周血行流式细胞术动态监测CD4+T及CD8+T细胞。流式细胞术及免疫组织化学检测小鼠脾脏及肿瘤组织CD4+T及CD8+T细胞。结果 TCL+IL-2组预防性免疫后明显延迟了小鼠的出瘤时间（P=0.034）,且肿瘤体积（P=0.023）及瘤重（P=0.0015）也明显小于对照组。流式细胞术动态监测结果提示TCL+IL-2组及单纯TCL组外周血中CD8+T细胞较对照组均有明显上升（P=0.0016, P=0.012）。TCL+IL-2组的CD4+T细胞在植瘤后较对照组有所下降（P=0.0089）。脾脏及肿瘤组织中CD4+T细胞及CD8+T细胞的结果与外周血中的表达趋势相同。结论 TCL联合IL-2的肿瘤疫苗通过激活CD8+T细胞途径,预防小鼠黑色素瘤的发生并抑制肿瘤生长。     

Th17细胞过继免疫治疗对荷弥漫大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的 探讨Th17细胞过继免疫治疗对荷弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)小鼠肿瘤生长的影响.方法 采用Mini MACS免疫磁珠分离纯化BALB/c小鼠脾来源的CD4+ CD62L+初始T细胞,采用"转化生长因子(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ抗体(anti-IFN-γ)、白细胞介素4抗体(anti-IL-4)、白细胞介素23(IL-23)"因子组合体外诱导小鼠Th17细胞分化,采用ELISA法测定Th17细胞产生IL-17水平;采用DLBCL细胞株SUDHL-4接种SCID小鼠建立DLBCL荷瘤小鼠模型;选择0、8、18d(3组,5只小鼠/每组)对荷瘤小鼠进行Th17细胞过继免疫治疗,计算肿瘤体积,观察荷瘤小鼠生存期.结果 小鼠在接种SUDHL-4细胞8d左右均形成瘤结节,成瘤率为100％.与对照组小鼠相比,3个过继免疫治疗组小鼠肿瘤体积均明显缩小(P＜0.05),荷瘤小鼠生存期均显著延长(P＜0.05).结论 Th17细胞过继免疫治疗对DLBCL荷瘤小鼠具有抗肿瘤作用.     

RPL8基因修饰的树突状细胞对胶质瘤的免疫治疗作用

目的 探讨RPL8基因修饰的树突状细胞（DC）对胶质瘤生长的抑制作用。方法 通过重组腺病毒将RPL8基因导入树突状细胞,荧光显微镜观察细胞内绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR分析细胞内RPL8mRNA表达,RPL8基因修饰的DC与T细胞混合培养,MTT法检测活化T细胞对胶质瘤细胞的杀伤效应。DC注入荷瘤小鼠体内,观察肿瘤体积变化及小鼠生存时间。结果 重组病毒转染DC后,细胞内可见绿色荧光,RT-PCR分析细胞内有RPL8mRNA表达;Ad-RPL8组、Ad组及PBS组激活T细胞对GL261细胞的杀伤率分别为78%、49%和43%,Ad-RPL8组较Ad组及PBS组明显增高（P<0.05）,RPL8基因修饰的DC注入小鼠后,与Ad组及PBS组比,小鼠生存期明显延长（P<0.05）,肿瘤体积变小（P<0.05）,肿瘤细胞坏死增多。结论 RPL8基因修饰的DC对胶质瘤具有生长抑制作用,为胶质瘤免疫治疗开辟新途径。     

肿瘤抗原多肽诱导的CD8~+CTL的体内外抗瘤效应

利用海绵移植模型,将Friend小鼠白血病病毒gag编码的二个多肽CCLCLTVFL(gPr80 gag 85-93)和RSPTNLAKV(Pr65 gag P30 131-139)分别注入正常或经FBL-3肿瘤细胞免疫过的C57BL/6小鼠皮下的植入海绵中,10天后,收集海绵中浸润淋巴细胞,在体外用免疫肽周期性刺激培养扩增。实验结果表明:用多肽体内免疫正常或经FBL-3免疫的B6小鼠均能诱导出对免疫多肽特异的CD8~ CTL。其中,P85-93多肽诱导的CD8~ CTL除能杀伤该多肽致敏的同系靶细胞外,还能特异性杀伤FBL-3瘤细胞.抗原多肽诱导的CD8~ CTL在体外经用免疫多肽致敏的同系小鼠脾细胞作周期性刺激并在低浓度IL-2的条件下培养,可长期生长并大量扩增。用体外培养扩增的P85-93多肽特异性CD8~ CTL过继转输治疗FBL-3荷瘤小鼠,能有效治愈FBL-3白血病荷瘤小鼠。上述结果表明,用肿瘤抗原多肽替代肿瘤细胞体内免疫动物可诱导特异性抗瘤效应的CD8~ CTL,并可在体外扩增用于肿瘤过继性免疫治疗。     

GnRH/M2与mGM-CSF/βhCG融合蛋白致敏树突状细胞疫苗抗小鼠前列腺癌的作用

目的 探讨分别负载GnRH/M₂融合蛋白和m G M - C S F / β h C G融合蛋白的树突状细胞（dendritic cells, DCs）及与多西他赛（DTX）联合应用治疗小鼠前列腺癌的效果,及其抗肿瘤作用机制。方法 用GnRH/M₂融合蛋白与mGM-CSF/βhCG融合蛋白分别致敏DC,获得DC疫苗,流式细胞仪检测DC成熟度。测量各组小鼠肿瘤生长体积和重量、检测免疫小鼠脏器指数和脾细胞增殖,脾细胞对癌细胞特异性杀伤活性及小鼠外周血内细胞因子IFN-γ浓度,观察各组对荷瘤小鼠的抑瘤效果。结果 与0.9%氯化钠溶液对照组比较,单独用药对荷瘤小鼠肿瘤均具有抑制作用,差异有统计学意义（P<0.05）,联合应用组抗肿瘤效果均优于DC疫苗单独应用组（P<0.01）。结论 两种DC疫苗均能与多西他赛发挥协同抗前列腺癌作用,抑瘤效果显著增强。且联合应用也能有效抑制前列腺癌细胞RM-1荷瘤小鼠肿瘤的生长。     

腺病毒介导IL-2基因转染的瘤苗体内抗肿瘤作用

目的 :探讨重组腺病毒介导的 IL- 2基因转染的瘤苗的体内抗肿瘤作用及其免疫学机制。方法 :应用腺病毒介导的鼠 IL- 2基因转染 CT2 6小鼠结肠癌细胞 ,灭活后用作瘤苗治疗荷瘤小鼠 ,观察皮下肿瘤生长及其存活期。采用乳酸脱氢酶释放法检测荷瘤小鼠脾细胞 CTL、L AK、NK细胞的杀伤活性。结果 :鼠 IL- 2基因转染瘤苗治疗能显著抑制荷瘤小鼠皮下肿瘤生长并明显延长其存活期 (P<0 .0 1)。体内免疫功能检测表明 ,鼠 IL- 2基因转染疫苗治疗组小鼠脾细胞 CTL 活性、L AK活性和 NK活性显著高于对照组 (P<0 .0 1)。结论 :腺病毒介导鼠 IL- 2基因转染的瘤苗体内具有较强的抗肿瘤效应 ,其机制可能是提高了荷瘤小鼠特异性和非特异性抗肿瘤免疫反应     

IL-27基因修饰树突状细胞活化的特异性CTL对人食管癌裸鼠移植瘤生长增殖的影响

研究IL-27基因转染树突状细胞（DC）体内诱导免疫杀伤食管癌细胞的效能及其机制。方法:基因转染的方法建立表达IL-27基因的树突状细胞（DC/IL-27）;构建人食管癌细胞裸鼠移植瘤模型,皮下注射食管癌细胞抗原致敏、IL-27基因修饰DC（DC/IL-27-Ag）活化的特异性CTL后观察荷瘤裸鼠抑瘤率;TUNEL法检测荷瘤裸鼠肿瘤细胞的原位凋亡;流式细胞术检测移植瘤细胞的细胞周期、凋亡率。结果:RT-PCR显示DC/IL-27细胞中有IL-27 p28和EBI3亚基基因表达提示转染成功;免疫接种DC/IL-27-Ag活化的CTL组的抑瘤率为58.28%,明显高于其他组,差异有统计学意义（P<0.01）。TUNEL法检测显示,DC/IL-27-Ag活化的CTL组凋亡率明显高于其他组（P<0.01）,流式细胞术（FCM）显示肿瘤组织内细胞增殖指数为（23.92±1.60）%,显著低于其他组,差异有统计学意义（P<0.01）;细胞凋亡率为（32.78±0.83）%,显著高于其他组,差异有统计学意义（P<0.01）。结论:DC/IL-27-Ag可活化特异性CTL,在裸鼠体内产生了抑制肿瘤生长的作用,显著抑制食管癌细胞增殖、促进其凋亡,为DC应用于食管癌的免疫治疗提供了理论和动物实验依据。      

白介素6在雌激素促进小鼠肺腺癌进展中的作用及其机制

目的 探讨白介素6（interleukin 6, IL-6）在雌激素（estrogen, E2）促进小鼠肺腺癌进展中的作用及其可能的机制。方法 采用乌拉坦诱导雌性昆明小鼠建立肺腺癌模型,进行如下分组处理（每组9只）：空白对照组、E2组、雌激素抑制剂（E2 inhibitor, E2I）组、E2+E2I组、IL-6组、E2+IL-6组。小鼠饲养16周后处死检测小鼠体重变化、成瘤情况、肿瘤分级、肺脏器指数等指标,酶联免疫法（ELISA）检测对照组血清标本中E2/IL-6的含量,实时荧光定量PCR（Real-Time PCR, RT-PCR）检测对照组肿瘤标本中ERβ/IL-6的mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测各组ERβ、Akt、MAPK,p-ERβ、p-Akt、p-MAPK表达水平。结果 肺部出现结节的昆明小鼠占小鼠总数的比例（即称为成瘤率）为87.04%（47/54）,小鼠肺部结节做病理切片后证实为肺腺癌的小鼠数目占小鼠总数的比例（即成癌率）为70.37%（38/54）,肺结节数、肿瘤指数、肺脏器指数等统计指标在E2组显著高于E2+E2I组、E2I组、E2+IL-6组、IL-6组及空白对照组（P均<0.05）;对照组小鼠血清中E2与IL-6呈高度相关性（P均<0.05）,各组小鼠肺癌组织中Akt、MAPK、ERβ、p-AKt、p-MAPK、p-ERβ的表达水平及ERβ的mRNA表达水平与肿瘤统计指标表达的趋势相一致（P均<0.05）。结论 在E2促进小鼠肺腺癌进展过程中IL-6具有下调ERβ信号通路作用,提示IL-6可能抑制E2促进肺腺癌进展。     

白细胞介素-33对急性髓系白血病细胞株HL-60、NB4凋亡和周期的调控作用及机制研究

目的  探讨白细胞介素-33（interleukin-33,IL-33）对急性髓系白血病细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法 急性髓系白血病细胞株HL-60、NB4经外源性IL-33以及p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK）特异抑制剂（SB203580）处理72 h后,采用Annexin V/DAPI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞周期检测试剂盒检测细胞周期,Western blot 检测细胞周期蛋白依赖性激酶1（cyclin-dependent kinases 1,CDK1）蛋白表达以及p38 MAPK的磷酸化水平。结果 与对照组相比,IL-33组的HL-60和NB4细胞经IL-33作用后,细胞凋亡水平降低（P<0.05）,细胞周期中S期比例升高（P<0.001）;而SB+IL-33组细胞经SB203580和IL-33联合处理后,细胞凋亡水平高于IL-33组（P<0.05）,S期细胞的百分比低于IL-33组（P<0.05）;Western blot检测结果表明,与对照组相比,IL-33组细胞的p38 MAPK磷酸化（p-p38 MAPK） 水平和CDK1蛋白表达水平均显著增高（均P<0.05）,而SB+IL-33组的p-p38 MAPK水平以及CDK1水平较IL-33组显著下降（均P<0.05）。 结论 IL-33可通过激活p38 MAPK,抑制急性髓系白血病细胞株HL-60、NB4细胞的凋亡,抑制细胞周期停滞。     

CD44v6和EGFR表达对Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌新辅助化疗敏感度的预测价值

目的 探讨CD44v6和EGFR的表达对Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌新辅助化疗（NACT）疗效的预测价值。方法 选择经病理确诊的Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌患者53例,所有患者均行2周期紫杉醇+铂类的NACT,收集NACT前的宫颈肿瘤病理组织标本,免疫组织化学SP法检测CD44v6和EGFR的表达,并分析其与Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌NACT疗效的相关性。结果 53例患者中NACT敏感组（CR+PR）38例 ,NACT不敏感组（SD+PD）15例,不敏感组CD44v6的表达显著高于敏感组（P<0.05）;CD44v6的表达在疗效为CR、PR、SD的患者中具有明显差异（P<0.05）。CD44v6对Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌NACT疗效的AUC为0.74,P<0.05;与CD44v6低表达组患者相比,高表达组NACT疗效更差（P<0.05）。Pearson检验发现CD44v6和EGFR表达具有相关性（R=0.34, P<0.05）。结论 CD44v6和EGFR表达呈正相关。CD44v6高表达可能会降低Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌NACT的疗效,CD44v6表达对宫颈癌紫杉醇+铂类NACT疗效有一定预测价值和临床意义。     

槐定碱对骨癌痛小鼠的影响及其作用机制

目的 探讨槐定碱在骨癌痛小鼠中的影响及其作用机制。方法 将24只C57BL/6小鼠随机分成假手术组（Sham 组）、骨癌痛组（BCP 组）、骨癌痛+生理盐水组（BCP+NS组）、骨癌痛+槐定碱组（BCP+Sophoridine组,25 mg/kg）。分别于癌细胞接种前1 d以及接种后3 d、5 d、7 d、10 d和14 d时检测机械缩足阈值和热痛阈值;Western blot法检测脊髓L4⁃L5段背根神经节和大脑皮层组织中DAP12/Trem2/TLR4轴相关蛋白的表达水平。结果 与Sham组相比,在术后5 d、7 d、10 d、14 d,BCP组机械缩足阈值及热痛阈值均明显降低（均P<0.05）。与BCP组相比,在术后5 d、7 d、10 d、14 d,BCP+Sophoridine组的热痛阈值均明显升高（均P<0.05）;术后10 d、14 d,BCP+Sophoridine组机械缩足阈值均明显升高（均P<0.05）。Western blot实验结果显示,与BCP组相比,BCP+Sophoridine组小鼠背根神经节和大脑皮层组织中的TLR4蛋白表达水平均显著减少（均P<0.05）,DAP12、Trem2蛋白表达水平均显著升高（均P<0.05）。结论 槐定碱可减轻骨癌痛小鼠癌痛行为,其机制可能与调控DAP12/Trem2/TLR4轴有关。     

过继性免疫治疗对非小细胞肺癌患者外周血T细胞亚群的影响

目的 研究细胞因子诱导的杀伤（cytokine-induced killer,CIK）细胞治疗对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者外周血T细胞亚群及一般情况的影响。方法 采集非小细胞肺癌患者外周血,常规方法体外扩增CIK细胞,分三次回输患者体内,流式细胞仪检测非小细胞肺癌患者治疗前与治疗3次后T细胞亚群的变化,分析其与健康对照组相比外周血T细胞亚群的差异,并观察CIK细胞治疗前后患者一般情况变化。结果 与对照组相比,NSCLC患者外周血中CD3⁺ T 细胞比例、CD3⁺CD4⁺T细胞比例、CD4⁺/CD8⁺ 比值显著下降（P<0.05）,CD3⁺CD8⁺ T细胞比例显著升高（P<0.05）。CIK细胞治疗后与治疗前,CD3⁺ T 细胞比例、CD3⁺CD4⁺ T细胞比例、CD4⁺/CD8⁺ T细胞比值显著升高（P<0.05）,CD3⁺CD8⁺ T细胞比例显著降低（P<0.05）。CIK细胞治疗后与对照组相比,CD3⁺ T 细胞比例、CD4⁺/CD8⁺T细胞比值显著下降（P<0.05）。CD3⁺CD4⁺ T细胞比例、CD3⁺CD8⁺ T细胞比例升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。CIK细胞治疗前Tregs较对照组显著升高（P<0.05）。CIK细胞治疗后与治疗前相比,Tregs比例显著下降（P<0.05）。结论 CIK细胞输注治疗可以增强NSCLC患者的免疫功能,并改善患者的一般情况,提高生活质量,且未见明显不良反应。     

Therapeutic effects of adoptive splenocyte transfer following in situ AdIL-12 gene therapy in a mouse prostate cancer model

We developed a preclinical prostate cancer model to study the feasibility of adoptive immunotherapy for residual tumor following neo-adjuvant in situ adenoviral-vector-mediated interleukin 12 (AdIL-12) gene therapy. Splenocytes were obtained from mice with orthotopic 178-2 BMA metastatic mouse prostate cancers treated previously with AdIL-12, or a vector with the IL-12 genes plus the costimulatory gene B7-1 (AdIL-12/B7), or a control gene (Adbetagal). The splenocytes were subsequently injected intravenously into syngeneic mice bearing orthotopic 178-2 BMA tumors generated 3 days previously. Significant orthotopic tumor growth suppression was achieved with splenocytes derived from mice whose tumors had been injected with AdIL-12 compared to splenocytes from control Adbetagal mice (P = 0.0005) and splenocytes from AdIL-12/B7-treated mice significantly suppressed spontaneous lung metastases compared to splenocytes from control mice (P = 0.0356). Adoptive transfer of splenocytes from either AdIL-12 (P = 0.004) or AdIL-12/B7 (P = 0.009)-treated mice significantly prolonged survival relative to controls. Transfer of NK and tumor-specific CTL activities was detected and depletion of CD4+ and CD8+ T cells by in vitro antibody-mediated complement lysis of the splenocytes prior to injection abrogated the effects. Systemic IL-12 administration delivered by intramuscular AdIL-12 injection enhanced the antitumor effects of adoptive splenocyte transfer and boosted the CTL response. Our data provide evidence that this form of adoptive immunotherapy can enhance the effectiveness of neo-adjuvant in situ IL-12 gene therapy in cases of persistent malignancy.     

口腔鳞癌患者外周血及癌组织中IL-17和Foxp3的表达及意义

目的 探讨口腔鳞癌患者外周血及癌组织中IL-17和Foxp3的表达及意义。方法 选取40例原发初诊经病理证实的口腔鳞状细胞癌患者为实验对象,术前流式细胞术测定外周血中IL-17与Foxp3所占比例及CD3、CD4、CD8、CD56的表达。组织标本为术中立即取材,SP法测定IL-17及Foxp3表达。选取20例良性肿瘤患者瘤旁正常口腔黏膜作组织对照。实验分为A（Ⅰ、Ⅱ期鳞癌患者）、B（Ⅲ、Ⅳ期鳞癌患者）、C（健康者）三组进行组间比较。 结果 A、B组外周血CD4+IL-17+ 细胞、CD4+Foxp3+细胞所占比例均显著高于C组, IL-17+、Foxp3+的表达水平呈正相关（r=0.772,P<0.05）,其中B组CD4+IL-17+、CD4+Foxp3+细胞所占比例高于A组（P<0.05）。与C组相比,A、B组外周血中CD3+和CD4+细胞的百分率、CD4+/CD8+的比值降低,CD8+细胞的百分率升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。 IL-17、Foxp3在A、B组中阳性率均明显高于C组,在A组中阳性表达率低于B组,差异均有统计学意义（P<0.05）,且A、B组癌组织中IL-17与Foxp3的表达水平呈正相关（r=0.386,P<0.05）。结论 IL-17及Foxp3在口腔鳞癌的发生发展中起着一定的促进作用,这种作用可能与机体免疫状态有关。     

Interleukin-12 enhances the antitumor activity of cytotoxic T lymphocytes against lung adenocarcinoma engrafted in severe combined immunodeficient mice

Background. Through a number of biologic activities, interleukin 12 (IL-12) has proven to be a potential antitumor cytokine in mice bearing a variety of malignancies. However, in clinical trials in humans, the eradication of solid tumors remains difficult. Methods. A lung cancer cell line (PC-9)-specific cytotoxic T lymphocytes (CTL) were generated by multiple stimulations, with irradiated PC-9 cells, of regional lymph node lymphocytes obtained from patients with lung cancer whose cells expressed the same HLA-A locus haplotype as PC-9 (HLA-A24). Severe combined immunodeficient (SCID) mice bearing a subcutaneous graft of PC-9 were then intravenously injected with anti-PC-9-specific CTLs. Under these conditions, the in-vivo effect of recombinant human (rh) IL-2 and rh IL-12 was evaluated, based on tumor growth. Results. Mice that received either rh IL-2 or rh IL-12 exhibited no inhibitory effect on tumor growth. However, mice that received adoptive immunotherapy (AIT) alone exhibited a significant inhibition of tumor growth in the PC-9 graft in comparison to untreated mice. When mice were treated with AIT combined with rh IL-2 + rh IL-12 administration, tumor growth was significantly suppressed. A significant difference was observed in the growth of the PC-9 graft between AIT + IL-2 + IL-12 treatment and AIT + IL-2 treatment. Four of eight mice in the AIT + IL-2 + IL-12-treated group showed complete tumor regression. Conclusion. IL-12 showed a synergistic effect with adoptive immunotherapy, using CTL in a tumor-engrafted SCID model. These results are therefore considered to provide a sufficient rationale for IL-2 + IL-12-based immunotherapy using CTL transfer for patients with lung cancer. Received: June 30, 1999 / Accepted: May 10, 2000     

术前超声引导下单次腰方肌阻滞对胃癌根治术患者早期康复及T细胞免疫功能的影响

目的 探讨术前超声引导下单次腰方肌阻滞对胃癌根治术患者早期康复及T细胞免疫功能的影响。方法 选取2017年3月至2018年6月于我院行胃癌根治手术的68例患者作为研究对象,采用随机数字表法分为观察组（n=34）和对照组（n=34）,观察组在麻醉诱导后经彩超引导下行双侧腰方肌阻滞（注射盐酸罗哌卡因）,对照组单纯注射生理盐水,比较两组患者术后镇痛指标、视觉模拟评分（visual analogue score,VAS）、血清CD4⁺CD25⁺ T细胞水平及不良反应。结果 观察组的舒芬太尼用量、镇痛泵按压次数和补救性镇痛比例均低于对照组（P＜0.05）,但镇痛满意度评分高于对照组（P＜0.05）;观察组术后2 h、6 h、12 h和24 h静息状态和运动状态的VAS评分均低于对照组（P＜0.05）;观察组手术前后CD4⁺CD25⁺　T细胞含量差值高于对照组（2.0±0.8 vs 1.1±0.6,t=5.248,P<0.001）;观察组麻醉后发生恶心呕吐比例（5.9% vs 26.5%）、眩晕比例（2.9% vs 20.6%）均低于对照组（P＜0.05）。结论 术前超声引导下单次腰方肌阻滞可减少胃癌根治术患者镇痛药物的使用量,提高术中和术后镇痛效果及术后疼痛满意度,且T细胞免疫功能恢复更快,不良反应较少,有利于早期康复。