大鼠外侧膝状体背侧核中间神经元数量百分比研究—HRP—TMB—ST法

在大鼠视皮质广泛注射 HRP 以标记外侧膝状体背核(DLG)的中继神经元,对未标记的中间神经元进行计数研究.结果表明,中间神经元在 DLG 内所占神经元的数量百分比平均为16.75%,在 DLG 的嘴、中、尾部分,其百分比分别为17.61%、17.15%和15.54%,DLG 嘴2/3部分中间神经元比例高于尾1/3部分.这些结果与以往的形态学及电生理学研究中认为此核团有嘴2/3和尾1/3之分的报道相一致.     

大鼠外侧膝状体背核的主要突触构筑

外侧膝状体背核(DLG)的突触构成成份主要来自视网膜、视皮质、丘脑网状核的轴突终末和DLG内神经元的突起。视网膜和视皮质来的轴突终末对DLG投射神经元和中间神经元的树突形成非对称性突触,丘脑网状核的轴突终末则对这两类神经元构成对称性突触,而中间神经元树突具有轴突样作用,对投射神经元树突形成对称性突触。这些结果有助于我们了解视觉信息在DLG内的加工处理过程。     

猫丘脑腹后外侧核内皮质投射神经元超微结构及其突触联系——HRP法电镜研究

本文应用HRP逆行追踪法在电镜水平上对猫丘脑腹后外侧核内皮质投射神经元的超微结构及其突触联系进行了研究。该核内投射神经元超微结构特点为胞核较大,核仁清晰,核膜常有凹陷,常染色质较多,异染色质较少,胞浆丰富,含有大量的游离核糖体、粗面内质网及线粒体。标记的皮质投射神经元胞体和树突与非标记轴突形成轴-体突触和轴-树突触;标记树突还可以和突触前树突形成树-树突触,并做为中央树突参与形成汇聚型突触复合体。此外在标记的胞体与非标记的树突之间,标记的树突与非标记的树突之间,两标记的树突之间还存在着非突触丝状连接。     

金黄地鼠外侧膝状体背侧核细胞形态学及其投射神经元的确定

用快速 Golgi 法研究了金黄地鼠外侧膝状体背侧核(LGd),观察了核内三种不同形态特征的神经元。第Ⅰ和Ⅲ型神经元分布在 LGd 各部分,第Ⅱ型则常见于 LGd 中份内侧。第Ⅰ型为多极神经元,胞体大,初级树突平滑但分支多,分支上布满了棘状和短柄的圆形树突突起。第Ⅱ型胞体较小,呈梨形。树突常从一主干分出,在树突分叉处分布有丛状树突突起。第Ⅲ型胞体最小。树突数目和分支也较少,但树突突起形态多样,包括如串珠样的树突突起。第Ⅰ和Ⅱ型神经元有轴突,大部分第Ⅲ型细胞则未发现有轴突。用逆行 HRP 法研究了 LGd 的三型神经元与视皮质的联系。视皮质注入 HRP,标记了第Ⅰ和Ⅱ型细胞,而第Ⅲ型神经元则不被标记,说明第Ⅰ和Ⅱ型为投射性神经元。第Ⅲ型为非投射性细胞,推论其可能为局部回路神经元。     

猫外侧膝状体神经元HRP示踪结合Calbindin的免疫组织化学研究

目的 HRP示踪结合Calbindin双标猫外侧膝状体核(LGN)至视皮质的中继神经元.方法 在猫视皮质的17区多点微量注射30%HRP,逆行标记LGN至视皮质的中继神经元,先以金标抗HRP-抗孵育切片,用免疫金银法将HRP颗粒转化黑色银颗粒.然后用ABC法作Calbindin(CB)的免疫组化,试图双标记LGN的中继神经元.结果 HRP标记细胞与CB免疫阳性细胞清晰可辨,HRP标记细胞内为银染黑色颗粒,而CB免疫阳性细胞为染色均匀的棕色.猫LGN的A、A_1和C板层均有CB免疫阳性神经元的分布;HRP标记细胞分布于A和A_1板层.LGN内未见HRP和CB的双标记神经元.结论 LGN内含CB神经元可能不参与视觉信息的传导,而是与局部视觉信息的整合有关.     

HRP—TMB反应中醋酸缓冲液的pH值与反应敏感性、组织超微结构保存的关系

为了探索HRP—TMB电镜技术中既能保持TMB反应敏感性高的优点又可较好地保存组织超微结构象,本文将WGA—HRP注入大白鼠红核及其周围,通过用不同pH值的醋缓配的反应液(pH3.3,4.0,4.2,4.4,4.6,4.8,5.2,5.6)后,在光镜及电镜下观察了下橄榄核区标记终末的密度及组织超微结构像。生现醋缓pH为4.0及3.3时,标记终末密度相似,或4.0时多于3.3,但4.0的组织像较3.3者有明显的改善。当pH值进一步提高时,尽管电镜下组织像逐渐改善,但标记的密度却逐步下降,至5.6时,几无阳性标记。另外,pH4.0的材料中,TMB反应产物变小,其跨膜现象也较3.3者少见。故作者认为,选用pH值为4.0的醋缓液较为合适。     

猫外侧膝状体神经 HRP示踪结合Calbindin的免疫组织化学研究

目的 ＨＲＰ示踪结合Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ双标猫外侧膝状体核（ＬＧＮ）至视皮 中继神经元。方法 在猫视皮 １７区多点微量注射３０％ＨＲＰ,逆行标记ＬＧＮ至视皮持的中继神经元,先以金标抗ＨＲＰ－抗孵育切片,用免疫金银法将ＨＲＰ颗粒转化黑色银颗粒。然后用ＡＢＣ法作Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ（ＣＢ）的免疫组化,试图双标记ＬＧＮ的中继神经元。结果 ＨＲＰ标记细胞与ＣＢ免疫阳性细胞清晰可辨,ＨＲＰ标记细胞内为银染黑色     

猫上丘表层和外膝体中的一氧化氮合酶阳性神经成分的生后发育

为了探讨一氧化氮与上丘、外膝体视觉功能成熟的关系,用ＮＡＤＰＨ 黄递酶组织化学技术观察了生后不同年龄段（０．５、１、３、５、８、１０、１５ 周和成年）猫上丘中的一氧化氮合酶阳性神经元的数量及形态变化和外膝体中一氧化氮合酶阳性神经纤维网的形成过程。结果显示：（１）上丘表层中的一氧化氮合酶阳性神经元在生后０．５ 周时已少量出现,胞体相对较小,树突分支少而短;１ 周时ＮＯＳ阳性神经元数量达到最高峰;随后的三周内,此神经元数量维持在较高水平,且在生后的１～５ 周中,胞体面积逐渐增大,树突分支复杂化、长度增长,直至第５ 周达到峰值。生后８ 周后,一氧化氮合酶阳性神经元数量、胞体面积、树突分支长度逐渐减少,１０ 周后接近成年动物水平。（２）在生后发育的各个年龄段,外膝体中均未见到一氧化氮合酶阳性神经元。生后３ 周时,开始出现阳性神经纤维,在随后的发育中,阳性纤维更加浓密,１０ 周时已与成年动物者类似。本研究结果提示：上丘表层中ＮＯＳ阳性神经元的数量、形态变化以及外膝体中的ＮＯＳ阳性纤维的形成与生后发育中的这两个皮层下视觉中枢的功能成熟有关。     

大鼠脊髓背角向丘脑和外侧臂旁核的神经降压素能投射

本研究应用荧光金(FG)逆行追踪结合神经降压素(NT)免疫荧光组织化学染色的双标记技术,观察了大鼠脊髓背角向丘脑(TH)和外侧臂旁核(LPb)的NT能投射。将FG注入一侧TH或LPb后,FG逆标神经元主要见于脊髓背角的I层;NT阳性神经元主要分布于脊髓背角的I层、II层外侧部及II层内侧部与III层交界处;脊髓背角I层内可观察到FG逆标记并呈NT阳性的双标记神经元。上述结果表明脊髓背角I层的NT阳性神经元向TH和LPb投射,提示脊髓背角I层内的NT阳性神经元可能向TH和LPb传递伤害性信息。     

大白鼠外侧隔核的传入性神经纤维联系—HRP、荧光素法研究

本文应用HRP和荧光素标记法对大白鼠外侧隔核的传入性神经纤维联系进行了研究。实验结果表明,外侧隔核的传入神经纤维来源于端脑海马的CA_(1-4)区、杏仁皮质核、内嗅区皮质、斜角带核、视前内侧核、视前外侧核;丘脑的室周核和带旁核;底丘脑的Forel's H_2区和未定带;下丘脑的前核、外侧核、后核以及乳头体上核;中脑的腹侧被盖区。     

5-羟色胺在大鼠腰骶髓后连合核和中间带外侧核参与盆腔内脏炎性痛调控的形态学研究

本研究运用荧光金(FG)逆行束路追踪与5-HT1A受体免疫荧光组织化学染色技术相结合,观察了大鼠腰骶髓后连合核(DCN)和中间带外侧核(IML)内感受盆腔内脏伤害性信息并向外侧臂旁核(LPB)发出投射的神经元呈5-HT1A受体免疫反应阳性。将FG注入一侧LPB后,可在腰骶节段(L6-S2)观察到大量的FG逆标神经元,这些FG逆标神经元主要集中于DCN和IML内,以同侧为主;5%福尔马林注入大鼠结肠后,Fos蛋白阳性神经元主要分布于腰骶髓DCN和IML,以同侧为主,在同侧脊髓背角I层、II层和深层也有少量的分布。另外,在腰骶髓DCN和IML内,还可观察到大量5-HT1A受体阳性的神经元胞体、纤维和终末,同时有部分Fos蛋白阳性的FG逆标神经元呈5-HT1A受体阳性。上述结果提示,大鼠腰骶髓DCN和IML内的5-HT能终末可能对盆腔内脏伤害性信息的传递发挥调控作用。     

大鼠丘脑束旁核和外侧缰核向中脑导水管周围灰质和中缝大核的分枝投射──荧光素双标记法研究

将ＦａｓｔＢｌｕｅ（ＦＢ）和ＤｉａｍｉｄｉｎｏＹｅｌｌｏｗ（ＤＹ）分别定向注入中脑导水管周围灰质和中缝大核，在丘脑束旁核和外侧缰核内侧部见到ＦＢ单标、ＤＹ单标及ＦＢ／ＤＹ双标神经元．在丘脑束旁核，双标神经元占该核三种标记神经元总数的１３．１％；在外侧缰核内侧部，双标神经元占三种标记神经元总数的１８．６％．双标记神经元呈梭形、三角形和椭圆形，胞体的直径约为１５～３０μｍ．     

大鼠红核酪氨酸羟化酶、生长抑素和亮啡吠能神经元至延髓外侧网状核的研究

用HRP逆行追踪和免疫细胞化学ABC法相结合研究了红核内酪氨酸羟化酶、生长抑素和亮啡呔免疫活性神经元至延髓外侧网状核的投射.结果表明,红核内HRP标记细胞为对侧性,主要分布于其尾侧2/3,同时,还可见酪氨酸羟化酶、生长抑素、亮啡呔单标细胞及HRP/酪氨酸羟化酶、HRP/生长抑素、HRP/亮啡呔双标细胞,其中HRP/酪氨酸羟化酶双标细胞约占HRP单标细胞25.2%,HRP/生长抑素双标细胞约占21.3%,HRP/亮啡呔双标细胞约占15.4%.红核参与镇痛和心血管活动的调节可能与上述神经递质有关.     

猫颈外侧核内颈丘脑投射神经元的超微结构及其突触联系

猫颈外侧核接受来自同侧脊髓后角的脊颈束 ,其传出纤维投射至对侧的丘脑腹后外侧核。该通路与传导皮肤的伤害性信息有关。本文采用 HRP逆行追踪技术 ,在电镜水平研究了猫颈外侧核内颈丘脑投射神经元的超微结构及其突触联系。将 HRP注入猫左侧丘脑腹后外侧核 ,经颈总动脉灌流固定 ,TMB法呈色反应。选取右侧颈外侧核内有 HRP标记的细胞制备电镜标本 ,透射电镜观察。结果发现 ,颈外侧核内出现大、中型 HRP标记神经元 ,细胞核为卵圆形 ,可见核仁 ,胞浆丰富 ,含有多量的线粒体等细胞内器 ,HRP反应产物散在于其中。在颈丘脑投射神经元胞体的周围见有 HRP标记的树突以及非标记的轴突、神经元胞体及树突。 HRP标记的颈丘脑投射神经元作为突触后成分与其他成分形成轴 -树突触 ,轴 -体突触 ,轴 -轴 -体突触及轴 -树突触复合体。这些结果提示 :颈丘脑投射神经元接受广泛的传入联系