前列腺癌中雄激素受体及血清PSA、FPSAR表达水平的临床意义

目的探究雄激素受体(AR)及血清前列腺特异抗原(PSA)、游离前列腺特异抗原百分率(FPSAR)在前列腺癌中的表达及其与病理特征、预后的关系。方法选择2017年7月至2019年9月崇州市人民医院收治的152例前列腺癌患者纳入前列腺癌组,另择同期行手术治疗的100例前列腺增生患者作为增生组。采用免疫组化及放射免疫法分别测定前列腺组织AR的表达及血清PSA水平,计算FPSAR值。结果前列腺癌组患者组织AR表达阳性率显著低于增生组(x~2=17.934,P0.05),血清PSA显著高于增生组(t=26.919,P0.05),FPSAR水平显著低于增生组(t=7.327,P0.05),差异均有统计学意义。组织中AR的表达、血清PSA水平与前列腺癌患者分化程度、临床分期、Gleason评分、骨转移相关,差异均有统计学意义(P0.05),血清FPSAR水平与临床分期、Gleason评分、骨转移相关,差异均有统计学意义(P0.05)。单因素分析显示,Gleason评分、临床分期、骨转移、血清PSA水平、FPSAR水平、组织AR表达情况是影响前列腺癌患者生存时间的因素(P0.05)。多因素分析显示,骨转移、血清PSA水平及组织AR表达是影响前列腺癌患者预后的独立影响因素(P0.05)。结论前列腺癌组织AR表达及血清FPSAR水平降低,血清PSA水平升高,且与肿瘤侵袭性及预后存在一定关系。     

HSP27在前列腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究热休克蛋白27（HSP27）与前列腺癌恶性程度的相关性。方法采用免疫组化检测75例前列腺癌和30例前列腺增生组织中HSP27的表达,分析HSP27表达与前列腺癌的Gleason评分（分化程度）、转移、临床分期和前列腺癌患者血清中PSA水平之间的关系;Western blot检测HSP27在不同转移潜能前列腺癌细胞中的表达水平;siRNA降低前列腺癌细胞中HSP27的表达,Transwell检测HSP27表达下调后前列腺癌细胞侵袭转移能力的变化。结果30例良性前列腺增生组织中HSP27阳性表达率为23.3%,75例前列腺癌组织中HSP27阳性表达率为65.3%,两者之间有显著性差异（P<0.05）;在Gleason分数分别为2～4分、5～7分和8～10分的三组不同分化程度的前列腺癌组织中,HSP27表达阳性率分别为40.0%、68.8%和94.4%,三者之间HSP27表达有显著性差异（P<0.05）;在血清PSA水平分别为＜10 ng/mL、10～20 ng/mL和＞20 ng/mL的三组前列腺癌患者中,HSP27阳性表达率分别为25.0%、59.5%和92.3%,三个不同PSA水平的组别之间HSP27阳性表达率有显著性差异（P<0.05）;HSP27表达水平与前列腺癌TNM分期有关 (P＜0.05);与低转移潜能前列腺癌细胞系LNCaP相比,在高转移潜能前列腺癌细胞系C4-2B中HSP27表达水平明显上调,两者之间有显著性差异(P<0.01);Transwell侵袭实验显示,下调HSP27表达能低前列腺癌细胞的体外侵袭能力（P<0.05）。结论HSP27表达与前列腺癌的Gleason评分、转移、临床分期和血清中PSA水平相关,HSP27可作为判断前列腺癌恶性程度和靶向治疗的分子标记物。     

RASSF1A基因在前列腺癌中甲基化检测及其表达

目的探讨RASSF1A基因在中国人前列腺癌和前列腺增生组织中的表达及其甲基化检测。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测33例前列腺癌、28例前列腺增生和5例癌旁组织中的RASSF1A mRNA表达,并采用甲基化特异性PCR法分析其甲基化状态。结果48．5％的前列腺癌组织和17．9％的前列腺增生组织中RASSF1A表达缺失,66．7％的肿瘤组织中发现甲基化,高前列腺特异性抗原(PSA)和高TNM者启动子区甲基化的频率明显高于低PSA和低TNM者(P=0．01和0．049)。启动子区甲基化与发病年龄、细胞分化不相关,仅在2例前列腺增生组织中发现甲基化。结论RASSF1A甲基化可作为一个分子标志物,成为诊断肿瘤和预后的新方法。     

前列腺癌组织EZH2基因的表达及其意义

目的:探讨EZH2基因在列腺癌组织中的表达意义. 方法:采用半定量RT-PCR检测前列腺癌、前列腺上皮内瘤(PIN),良性前列腺增生中EZH2表达状况并对其扩增产物进行测序. 结果:前列腺癌40例组织中,EZH2表达率(100%). 良性前列腺增生组织无表达, PIN 20例中仅有1例有表达. 晚期前列腺癌组织表达明显高于早期前列腺癌(P＜0.05);低分化前列腺癌表达高于中高分化前列腺癌(P＜0.05);激素依赖性前列腺癌表达高于激素非依赖性前列腺癌(P＜0.05). EZH2表达高低与前列腺血清总PSA浓度无关(P＞0.05). 结论:EZH2基因表达状况与前列腺癌分期、分级有关,其表达对判断前列腺癌病理生物学特性和前列腺癌治疗有重要意义.     

下调PMEPA1表达对肝癌细胞HepG2增殖与转移的影响

目的 观察沉默前列腺跨膜雄激素诱导蛋白1(PME-PA1)对肝癌细胞HepG2增殖和迁移的影响.方法 应用qRT-PCR、免疫组化染色和Western blot方法检测PMEPA1在肝癌细胞HepG2中mRNA和蛋白表达情况.分析PME-PA1在肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系.使用siRNA干扰肝癌细胞HepG2中PMEPA1的表达,并应用MTT法,Transwell法检测肝癌细胞HepG2的增殖及迁移能力.结果 PMEPA1蛋白在HCC组织中表达高于正常肝组织.肝癌组织内PMEPA1蛋白表达与HCC患者肿瘤大小(P=0.0366)和淋巴结转移(P=0.0358)密切相关.与HCC患者性别、年龄、AFP水平高低、脉管浸润、组织学分级及TNM分期等均无相关性.PMEPA1-siRNA肝癌细胞HepG2 PMEPA1蛋白及mRNA表达均下调(P<0.01).siPMEPA1转染细胞增殖能力及迁移能力均降低(P<0.01).结论 PMEPA1表达可能促进HCC的增殖和迁移.     

SOX9基因在前列腺癌与前列腺增生中的表达以及意义

目的 通过检测SOX9基因在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达情况,探讨SOX9在前列腺癌中的分子机制和临床意义.方法 使用实时荧光定量PCR方法检测SOX9基因在54例前列腺癌和52例前列腺增生组织中的表达,并对比在前列腺癌患者的年龄,血清PSA水平,Gleason评分,临床分期和远处转移的表达差异,再通过免疫组化方法验证SOX9在前列腺癌和前列腺增生中的表达差异.结果 使用实时荧光定量PCR检测SOX9基因,发现其在前列腺癌中表达值为(8.94±0.75),前列腺增生中表达值为(5.46±0.69),有显著性差异(P＜0.05).SOX9基因表达随着前列腺癌患者血清PSA水平、Gleason score、肿瘤TNM分期升高而升高,有远处转移比无远处转移表达升高(P＜0.05),而与患者年龄无明显相关(P＞0.05).免疫组化结果显示前列腺癌组织和前列腺增生组织中SOX9阳性表达率分别为92.6％和15.4％,差异有显著性(P＜0.05).结论 SOX9基因表达检测有助于前列腺癌的诊断和指导前列腺癌的恶性程度分期.     

人前列腺癌组织中DNMT1、GSTP1和APC的表达

目的:检测人前列腺癌(PCa)组织中DNA甲基转移酶1(DNMT1)、谷胱甘肽s转移酶P1(GSTP1)和结肠腺瘤性息肉病基因(APC)的表达.方法:采用免疫组织化学方法检测56例前列腺癌(高分化癌9例、中分化癌17例、低分化癌30例)组织和10例良性前列腺增生(BPH)组织中DNMT1、GSTP1和APC的表达.结果...     

CXCR4在前列腺癌组织中的表达与意义

目的:探讨趋化因子受体在前列腺癌组织中的表达及其意义.方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测45例前列腺癌及10例前列腺增生组织中趋化因子受体CCR1、CCR3、CXCR4和CCR5的表达情况,应用ELISA双抗体夹心方法检测相应患者血清中趋化因子SDF-1的含量,并应用免疫发光方法检测相应患者血清中前列腺特异性抗原PSA的含量.结果:在前列腺癌组织上检测到趋化因子受体CXCR4的表达(表达率55.5%),PSA＞20 ng/ml与PSA＜20 ng/ml的前列腺癌组织上CXCR4的表达率分别为61.2%和42.8%,而前列腺增生组织中未发现这4种趋化因子受体的表达;与前列腺增生患者相比,在前列腺癌患者血清中SDF-1含量明显升高[(567.9±90.73)vs(169.1±46.01)pg/ml,P＜0.01].结论:在前列腺癌组织上发现有趋化因子受体CXCR4的表达,其表达可能在前列腺癌的发生、发展和转移中起重要作用.     

缺氧诱导因子-1α在前列腺癌中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在前列腺癌发病机制中的作用。方法各取50例石蜡包埋的前列腺癌组织(前列腺癌组)和良性前列腺增生组织(良性前列腺增生组),采用免疫组化法测定两组组织中HIF-1α蛋白的表达。结果前列腺癌组HIF-1α蛋白的阳性表达率和阳性表达强度均显著高于良性前列腺增生组(依次为:74.00%vs 12.00%;OD值为0.17±0.04 vs 0.14±0.03)(P<0.01或P<0.05)。前列腺癌组HIF-1α蛋白的阳性表达率低分化高于高、中分化(87.10%vs 52.63%,P<0.05),在伴有骨/淋巴结转移高于不伴有转移(81.58%vs 50.00%,P<0.05),而与TNM分期(Ⅲ~Ⅳ期和Ⅰ~Ⅱ期)、年龄(>70岁和≤70岁)间差异无统计学意义(依次为:84.38%vs66.67%;75.86%vs 71.43%)(P>0.05)。HIF-1α的阳性率在Gleason分级、TNM分期、骨及淋巴结转移间两两呈直线正相关(n=37,r=0.735、0.710、0.734,P<0.01)。结论 HIF-1α在前列腺癌组织中表达增强,其可能参与了前列腺癌的形成过程,增强表达的HIF-1α蛋白可能与前列腺癌的恶化有关,预示预后不良。     

前列腺癌组织中Twist和HIF-1αmRNA表达及临床意义

目的探讨Twist和HIF-1αmRNA在前列腺癌组织中表达及临床意义。方法应用原位杂交技术分别检测30例前列腺增生组织、30例前列腺上皮内瘤变组织及70例前列腺癌组织Twist、HIF-1αmRNA表达情况。结果①Twist、HIF-1αmRNA在30例前列腺增生组织、30例前列腺上皮内瘤变组织及70例前列腺癌组织中的表达分别为13.3%、46.6%、65.7%和16.7%、50.0%、71.4%,差异有统计学意义(χ2=23.15,P<0.01;χ2=25.57,P<0.01);Twist、HIF-1αmRNA在同组间表达差异无统计学意义(P>0.05)。②Twist及HIF-1αmRNA的表达均与前列腺癌的Gleason分级、临床分期、骨转移及组织坏死相关(P<0.05),而与年龄无关(P>0.05)。③Twist、HIF-1αmRNA在前列腺癌组织中过度表达,且两者之间呈正相关(r=0.34,P<0.01)。结论 Twist、HIF-1αmRNA在前列腺癌发生发展过程中起着重要作用,两者表达检测有利于更好地评估前列腺癌的生物学行为,提高对患者预后判断的准确性。     

前列腺癌组织中DNMT1的表达与GSTP1、APC甲基化状态的关系及临床意义

目的探讨前列腺癌组织中DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)的表达与谷胱甘肽S转移酶P1(glutathione S transferase P1,GSTP1)、结肠腺瘤性息肉病(adenomatous polyposis coli,APC)甲基化状态的关系及临床意义。方法采用RT-PCR的方法检测56例前列腺癌(prostate cancer,PCa)组织和10例前列腺增生(benign prostatichyperplasia,BPH)组织中DNMT1和GSTP1、APC的mRNA表达,采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)的方法检测GSTP1、APC的启动子区CpG岛甲基化状态。结果大多数PCa组织中DNMT1 mRNA高表达(在低分化癌中阳性率为90.0%),而GSTP1和APC低表达(在低分化癌中阳性率分别为23.3%和33.3%),BPH组织中DNMT1 mRNA低表达(40.0%),而GSTP1和APC高表达(分别为90.0%和80.0%),低分化癌与BPH相比,差异有统计学意义(P<0.05);大多数PCa组织中GSTP1、APC启动子区CpG岛呈高甲基化状态(在低分化癌中阳性率分别为83.3%和73.3%),而BPH组织中呈低甲基化(阳性率分别为10.0%和20.0%),低分化癌与BPH相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PCa组织中GSTP1、APC失活的机制可能与DNMT1的高表达导致其启动子区CpG岛异常高甲基化有关。     

前列腺癌相关基因PAX5启动子甲基化的临床意义

目的：探讨PAX5基因启动子甲基化作为前列腺癌生物标志物的临床价值。 方法：采用Real time RT-PCR检测前列腺细胞系（RWPE-1、LNCaP、PC-3、DU145）中PAX5 mRNA的表达,甲基化特异性PCR(MSP)法分析4株前列腺细胞的甲基化状态;去甲基化药物处理后,Real time RT-PCR法检测肿瘤细胞PAX5基因mRNA表达; Real time MSP法检测64例前列腺癌患者、22例前列腺增生患者与47例健康体检者血清中PAX5基因启动子甲基化水平,并统计分析血清PAX5基因启动子甲基化水平与临床病理参数的相关性;运用ROC曲线分析PAX5基因启动子甲基化在前列腺癌诊断中的价值。结果：Real time RT-PCR结果显示,与正常前列腺上皮细胞RWPE-1相比,PAX5 mRNA在3株前列腺癌细胞中均表达下调;LNCaP、PC-3、DU145前列腺癌细胞均可检测到PAX5基因启动子甲基化,而正常前列腺上皮细胞RWPE-1不存在PAX5基因启动子甲基化;去甲基化药物可恢复PAX5基因mRNA表达;Real time MSP结果显示,前列腺癌患者的血清PAX5基因启动子甲基化水平显著高于前列腺增生患者和健康体检者;前列腺癌患者的血清PAX5基因启动子甲基化率与Gleason评分和TNM分期有关;ROC结果显示PAX5基因的诊断价值优于PSA。结论：本研究结果提示启动子甲基化是前列腺癌细胞中PAX5基因表达下调的主要原因,血清PAX5启动子甲基化是一种潜在的前列腺癌诊断标志物。     

3种胃癌细胞株中GSTP1基因表达及其启动子区甲基化状态的研究

目的研究候选基因GSTP1在胃癌细胞株中的表达及其启动子区的甲基化状态,初步探讨胃癌细胞株GSTP1基因表达水平与其启动子区甲基化的相关性。方法采用RT-PCR和Western blot技术分别检测GSTP1在人胃癌细胞株MGC803、BGC823和SGC7901中的mRNA和蛋白表达水平。甲基化特异性PCR(MSP)法检测启动子区域甲基化状态。分别用不同浓度的去甲基化药物5-氮杂胞苷处理GSTP1基因启动子区高甲基化状态细胞后,再检测GSTP1基因蛋白表达水平。结果人胃癌细胞株BGC823和SGC7901中GSTP1 mRNA和蛋白呈阳性表达,MGC803中mRNA和蛋白呈阴性表达;BGC823和SGC7901细胞GSTP1基因启动子区域未发生甲基化,而MGC803细胞启动子区呈高甲基化状态;经5-氮杂胞苷药物干预后,MGC803细胞的GSTP1蛋白表达明显增强。结论胃癌MGC803细胞株中GSTP1基因表达沉默与启动子区高甲基化状态有关。     

前列腺癌组织中核干因子基因表达的临床意义

目的探讨核干因子（nucleostemin gene,NS）基因在前列腺癌（prostate cancer,PCa）组织中的表达及其与血清前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）及免疫组织化学法检测NS在PCa及良性前列腺增生（BPH）组织中的表达,分析其在PCa中的表达水平与血清PSA的关系。结果45例PCa组织标本中,NSmRNA的阳性表达率为80．0％（36／45）。20例BPH组织中均未见阳性表达。在高分化、中分化、低分化PCa组织中NS蛋白阳性表达例数分别为4、19、13例。NS蛋白表达与PCa恶性程度呈正相关（r=0．954,P〈0．05）,与患者血清PSA水平无明显相关性（r=0．237,P〉0．05）。结论NS蛋白表达与PCa的分级密切相关,可作为一种诊断PCa的新肿瘤标志物。     

探讨KAI1/CD82基因在鼻咽肿瘤中的意义

目的探讨KAI1/CD82基因在人鼻咽癌细胞株及鼻咽部组织中表达水平的差异。方法应用PCR法检测5种人鼻咽癌细胞株、28例鼻咽癌和15例非肿瘤性鼻咽部组织KAI1/CD82 mRNA的表达情况。结果不同转移习性的人鼻咽癌细胞均扩增出KAI1/CD82 mRNA,随细胞转移习性增高,KAI1/CD82 mRNA表达水平降低;KAI1/CD82 mR-NA在鼻咽癌组织中的阳性表达率为42.9%,低于非肿瘤性鼻咽组织的73.3%,两者差异无统计学意义;KAI1/CD82mRNA在鼻咽癌组织中的表达与患者的性别、年龄、病理类型、T分期等无相关性。随N分期进展,KAI1/CD82 mRNA阳性表达率逐渐降低。无淋巴结转移组(N0)85.7%比有淋巴结转移组(N1-N3)28.6%表达明显增高,两者差异有统计学意义。结论 KAI1/CD82基因在低转移性人鼻咽癌细胞株中高表达,而在高转移性人鼻咽癌细胞株中低表达。KAI1/CD82基因在鼻咽癌组织中低表达,在非肿瘤性鼻咽部组织中高表达,提示该基因在鼻咽癌的发生、发展中可能起到一定作用。KAI1/CD82基因在鼻咽癌组织的低表达与鼻咽部淋巴结转移有关,提示该基因在抑制鼻咽癌转移的过程中起重要作用。     

N-MYC下游调节基因-2蛋白在前列腺肿瘤组织中的表达

【目的】N-MYC下游调节基因-2(NDRG2)在前列腺癌及前列腺增生中的表达与临床病理特征和生物学行为的关系【方法】前列腺肿瘤标本51例,其中前列腺增生标本9例,前列腺癌标本42例,均为存档石蜡切片,应用免疫组织化学(S-P法)研究NDRG2表达。【结果】NDRG2在前列腺增生组织表达为82.35%,在前列腺癌组织为32.69%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。NDRG2表达水平同Gleason评分呈负相关(r=-0.5197),在不同临床TNM分期间、在血清PSA浓度≤20 ng/ml与PSA浓度>20 ng/ml组间差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】NDRG2表达在前列腺癌组织低于前列腺增生组织,且表达与Gleason评分呈负相关。表明NDRG2有可能参与了前列腺癌的发生及发展过程。     

非那雄胺抑制前列腺癌细胞LNCaP增殖的基因芯片观察

目的 探讨非那雄胺抑制前列腺癌细胞增殖的分子机制,筛选特异性的治疗靶点。方法 利用基因芯片技术检测非那雄胺作用前列腺癌细胞株前后LNCaP差异表达的基因。结果 非那雄胺能够显著抑制前列腺癌细胞株LNCaP的增殖,在96条基因中受非那雄胺作用有差异表达的基因有29条,其中表达上调的基因有11条,下调的基因有18条。结论 非那雄胺抑制LNCaP增殖可能涉及多基因、多通路的共同作用。     

前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA表达

目的：检测前列腺癌患者及对照者外周血单个核细胞前列腺特异性抗原(PSA）mRNA表达,并探讨其临床意义。方法：选择39例前列腺癌患者,12例健康体检者作为对照,取5 mL静脉血,肝素抗凝,Ficoll密度梯度离心分离外周血单个核细胞,RT-PCR检测PSA mRNA表达。结果：①39例前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA表达阳性检出率66.7%（26/39）,其中血清PSA＞20.0 μg·L^-1者23例,PSA mRNA表达阳性检出率87.9%（20/23）;血清PSA≤20.0 μg·L^-1者16例,PSA mRNA表达阳性检出率37.5%（6/16）。对照组未见阳性表达。②16例血清PSA≤20.0 μg·L^-1的前列腺癌患者PSA mRNA阳性表达的Gleason评分为：1~4分0/3,5~7分1/8,8~10分5/5,6例阳性者均为中、低分化癌。 结论：外周血单个核细胞PSA mRNA的检测在血清PSA＞20.0 μg·L^-1的前列腺癌患者中具有较高的敏感度,是一种可靠的检测方法。血清PSA≤20.0 μg·L^-1的前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA的检测可以预示微转移的发生。