枇杷叶不同组分提取物在多种疾病中的作用及机制研究

目的 提取枇杷叶中的多糖、黄酮和三萜酸,并分别研究其在抗炎、抗氧化和抗肿瘤中的药理活性。方法 通过水提醇沉法提取多糖,醇沉上清液用于黄酮的富集,水提的残渣经90%乙醇回流提取三萜酸。通过Western blot检测枇杷叶多糖对TGF-β1干预的小鼠系膜细胞中PAI-1表达的影响,观察枇杷叶中的黄酮成分对ABTS自由基的清除作用评价其抗氧化活性;MTT法检测枇杷叶中三萜酸对骨髓瘤细胞ARP1增殖的影响,并通过ARP1细胞小鼠异种移植模型观察三萜酸对皮下肿瘤生长的影响。结果 枇杷叶中多糖、黄酮、三萜酸的含量分别为19.53、48.70、7.86 g/kg。枇杷叶多糖可以抑制PAI-1表达,黄酮浓度在75~150 μg/mL对ABTS自由基具有良好的清除作用,三萜酸可以抑制骨髓瘤细胞ARP1的增殖,IC₅₀为11.57 μg/mL。此外,三萜酸对异种移植小鼠皮下肿瘤的生长具有一定的抑制作用。结论 枇杷叶中多糖可能对肾炎具有一定的治疗作用,黄酮和三萜酸具有一定的抗氧化和抗肿瘤的作用。为枇杷叶的进一步开发利用提供有利的实验基础。      

不同相对分子质量的黑根霉胞外多糖的生物活性

目的 探讨不同相对分子质量黑根霉胞外多糖的抗氧化、抗肿瘤和免疫调节活性。方法 通过分级醇沉从黑根霉的发酵液中分离得到3种不同相对分子质量的多糖,分别命名为RPS-1,RPS-2和RPS-3,检测3种多糖对DPPH、ABTS和羟自由基的清除活性。体外培养小鼠前胃癌细胞MFC、人非小细胞肺癌细胞A549和小鼠巨噬细胞RAW 264.7,给药48 h或24h后CCK-8法检测各组细胞存活率,一氧化氮试剂盒检测RAW 264.7细胞上清液中的NO水平,流式细胞仪检测3种多糖对A549细胞凋亡率的影响。结果 RPS-1,RPS-2和RPS-3均具有较好的抗氧化活性,中等相对分子质量多糖RPS-1对DPPH和ABTS自由基的清除活性显著高于RPS-2和RPS-3（P<0.05）,低相对分子质量多糖RPS-3对羟自由基的清除活性显著高于RPS-1和RPS-2（P< 0.01）。3种多糖均能够抑制MFC细胞和A549细胞的增殖,激活巨噬细胞RAW 264.7,诱导A549细胞凋亡。高相对分子质量多糖RPS-2对MFC和A549细胞增殖的抑制活性高于RPS-1和RPS-3（P>0.05）,RPS-2处理后A549细胞的凋亡率显著高于RPS-1和RPS-3（P<0.05）。高相对分子质量多糖RPS-2促进RAW 264.7细胞增殖的活性显著高于RPS-1和RPS-3（P<0.05）,RPS-2处理后的RAW 264.7细胞释放的NO含量显著高于RPS-1和RPS-3（P<0.01）。结论 3种不同相对分子质量的多糖均具有抗氧化、抗肿瘤和免疫调节活性,低、中相对分子质量多糖RPS-1和RPS-3具有较好的抗氧化活性,高相对分子质量多糖RPS-2具有较好的抗肿瘤和免疫调节活性。     

白花蛇舌草不同提取工艺对抗肿瘤活性的影响

目的 为研制低毒高效的抗癌制剂，确定不同的白花蛇舌草提取物（汤剂，亲脂提取物，粗多糖）的抗肿瘤作用。方法 采用水提取法，醇提取法，脱脂水提醇沉法分别制备了白花蛇舌草汤剂，亲脂提取物和粗多糖，用S-180细胞植入小鼠作为模型。进行了抑制肿瘤的试验。结果 白花蛇舌草的水提液（汤剂）对S-180肿瘤细胞没有明显的抑制作用。白花蛇舌草水溶性的多糖和亲脂提取物对S-180肿瘤细胞具有显著的抑制作用；在抑瘤的同时，多糖部分具有对化学损伤的保护作用；水溶性的多糖和亲脂提取物合并给药并未显示协同抗肿瘤活性。结论 白花蛇舌草的脂溶性部位和多糖具有良好的抗肿瘤应用前景。分别提取比简单的水提取效果好。     

瓜蒌皮提取物对缺血缺氧心肌细胞保护效果及抗氧化能力研究

目的研究瓜蒌皮提取物对缺血缺氧心肌细胞保护效果及抗氧化效果,初步探寻该药材防治心肌缺血的物质基础及作用机理。方法采用水煎粗提法、水提醇沉法,制备瓜蒌皮水煎粗提物组、水提醇沉上清液组分。利用低氧气体、无血清培养液处理大鼠原代心肌细胞,制备缺血缺氧损伤模型。以注射用丹参粉针(Sal)为阳性对照药物,培养液中添加上述提取物培养细胞。倒置相差显微镜观察细胞形态变化,比色法(MTT)测其存活率,生化试剂盒检测细胞总抗氧化能力(T-AOC)以及总自由基/总超氧化物的含量。结果瓜蒌皮水煎粗提物组(TP-T)、水提醇沉上清液组分(TP-1)能够剂量依赖地显著提高缺血缺氧细胞的存活率,并可显著提高细胞的总抗氧化能力,明显增强细胞清除自由基的活性,其中TP-1效果更优(P0.05)。结论瓜蒌皮水煎粗提物及水提醇沉上清液组分对缺血缺氧的心肌细胞均有显著保护作用,TP-1组分效果更好。该保护作用与这些组分的抗氧化能力密切相关。     

五味子多糖质量浓度测定及生物活性研究

目的对五味子多糖的抗氧化活性进行研究。方法通过水提醇沉法提取多糖,利用苯酚-硫酸法测定五味子多糖质量浓度,并采用对五味子多糖清除羟基自由基活性进行测定分析。结果多糖质量浓度为13.3%,Fenton法确定了五味子多糖具有抗氧化活性。结论五味子多糖的生物活性研究为五味子的药理作用、临床应用等提供了参考,为其进一步的研究提供了基础。     

采收时间及加工方式对青钱柳叶化学成分含量及抗氧化和降血糖活性的影响

目的 比较不同采收时间、加工方式对青钱柳叶黄酮、三萜及多糖含量与体外抗氧化和降血糖活性的影响,为青钱柳的采收加工提供依据.方法 采用回流法提取青钱柳黄酮、三萜及多糖,紫外分光光度法检测含量;以青钱柳45％乙醇提取液清除DPPH·、OH·、ABTS+·能力以及对α-葡萄糖苷酶抑制能力为指标,评价青钱柳体外抗氧化活性与降血...     

新疆党参多糖的制备及体内抗肿瘤作用的研究

目的:从新疆党参中提取、纯化多糖并进行抗肿瘤活性的检测.方法:采用水提醇沉法提取、葡聚糖凝胶G75柱层析法纯化,HPGFC法鉴定分子量.用腹水瘤小鼠检测抗肿瘤活性.结果:得到白色粉末状,无味,溶解于水,分子量(Mw)=98521道尔顿的新疆党参多糖.与环磷酰胺合用具有增效作用.结论:新疆党参多糖与化疗药物合用在肿瘤治疗方面有一定的药用价值.     

基于RNA-Seq探讨玉竹多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠的保护作用

目的 探讨玉竹多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠认知功能保护作用的分子机制.方法 采用水提醇沉法提取玉竹总多糖组分并进行含量测定;将30只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、玉竹多糖组(2 g/kg).模型组及玉竹多糖组小鼠每日皮下注射D-半乳糖(150 mg/kg),正常组及模型组每日灌胃等体积生理盐水,同时玉竹多糖组小鼠灌胃...     

不同提取方法对银杏叶多糖含量的影响

【目的】分析不同提取方法对银杏叶中多糖含量的影响,为其进一步开发应用提供依据。【方法】采用水提醇沉法、酶解—水提醇沉法、超声波—水提醇沉法、微波—水提醇沉法制备银杏叶多糖,以称质量法测定提取物得率,同时以苯酚—硫酸法进行显色后通过紫外—可见分光光度计测定多糖含量。【结果】不同提取方法的银杏叶多糖提取物得率及含量分别为:水提醇沉法,12.58%、5.69%;酶法—水提醇沉法,14.05%、6.68%;超声波—水提醇沉法,14.12%、6.82%;微波—水提醇沉法,13.31%、6.15%。其中,含量比较具有显著性差异(P 0.05或P 0.01)。【结论】不同提取方法制备的银杏叶多糖提取物得率和含量不一,其中以超声波—水提醇沉法最高、水提醇沉法最低。     

马勃多糖CGP-Ⅱ抗S180肉瘤及体外抗氧化研究

目的：探讨马勃酸性多糖CGP‐Ⅱ抗S180肉瘤的作用及体外抗氧化作用。方法：水提醇沉法制得马勃粗多糖,再经 HiTrap Capto DEAE阴离子交换层析和Sephacryl S‐300 HR凝胶柱层析进一步纯化得到马勃酸性多糖CGP‐Ⅱ。采用咔唑‐硫酸法测得糖醛酸含量,同时建立小鼠S180肉瘤移植模型,研究CGP‐Ⅱ的体内抑瘤效应。利用氧自由基吸收法（Oxygen Radical Absorption Capacity ,ORAC）、DPPH法评价其体外抗氧化能力。结果：CGP‐Ⅱ糖醛酸含量为17.2％,200 mg／（kg?d）剂量组多糖对S180肉瘤的抑瘤率为48.4％,CGP‐Ⅱ具有一定的DPPH 自由基清除能力和氧自由基吸收能力。结论：酸性多糖CG P‐Ⅱ具有一定的抗肿瘤活性及体外抗氧化作用,本研究为其进一步开发利用奠定了基础。     

石上柏双黄酮类和酚酸类成分体外抗氧化和抗肿瘤活性研究

目的:研究石上柏双黄酮类和酚酸类成分体外抗氧化和抗肿瘤活性。方法:从石上柏中分离出的穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮、银杏双黄酮、莽草酸、丁香酸及咖啡酸取适量,配置成不同浓度的溶液(20、40、60、80、100、120μg/m L)。以维生素C、槲皮素为对照品;采用1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)、2,2'-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS)自由基清除法和铁离子还原能力(FRAP)实验,分别考察每个化合物的抗氧化活性。通过MTT实验,以鼻咽癌CNE-1细胞株和CNE-2细胞株为对象,以顺铂为对照品,考察每个化合物的抗肿瘤活性。结果:抗氧化活性顺序:扁柏双黄酮银杏双黄酮穗花杉双黄酮丁香酸咖啡酸莽草酸;抗肿瘤活性顺序:扁柏双黄酮银杏双黄酮穗花杉双黄酮丁香酸咖啡酸莽草酸。结论:石上柏双黄酮类的抗氧化活性和抗肿瘤活性均强于酚酸类。     

茯苓多糖提取工艺研究

目的:优选茯苓水溶性粗多糖的水提醇沉工艺。方法:以茯苓水溶性多糖提取率为参察指标,以水为溶剂,选取粉碎力度、料液比、提取时间、提取次数、醇沉浓度、浓缩倍数、醇沉时间为影响因素,进行单因素考察,在综合单因素实验的基础上,采用L9(34)正交试验对水提和醇沉工艺进行优化设计,采用硫酸-蒽酮法测定多糖的含量。结果:茯苓水溶性多糖最佳的水提醇沉工艺为:过60目筛、料液比为1∶10,提取时间为100 min,提取1次,提取液浓缩至原体积的1/12,醇沉浓度为80%,静置12 h,过滤,滤饼用体积分数80%乙醇洗涤,60°C减压干燥。结论:此工艺成本低、操作简便、重现性好,可用于茯苓药材及饮片粗多糖的提取。     

苦瓜籽粗多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性

目的: 优化苦瓜籽粗多糖的提取工艺,并对苦瓜籽粗多糖进行体外抗氧化活性研究。方法: 采用水提醇沉法提取苦瓜籽粗多糖,通过苯酚硫酸法测定多糖含量,以多糖提取率为考察指标,考察提取温度、时间、料液比以及提取次数4个因素对苦瓜籽粗多糖提取率的影响。在单因素实验基础上,进行L9（34）正交实验设计,优化苦瓜籽粗多糖的提取工艺。检测苦瓜籽粗多糖对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除率及总还原能力。结果： 温度是影响苦瓜籽粗多糖提取率的重要因素,确定了最佳提取工艺条件是提取温度为 90 ℃,料液比为 1 ∶30,提取时间为 2.5 h,提取 3次,苦瓜籽粗多糖的提取率为5.61%。苦瓜籽粗多糖对DPPH自由基和羟自由基的清除能力接近于维生素C,而对超氧阴离子自由基清除能力和总还原能力不及维生素C。 结论： 该优化工艺适用于苦瓜籽粗多糖的提取,高浓度苦瓜籽粗多糖具有较好的抗氧化活性。     

灵芝活性多糖的提取工艺研究

目的确立水提醇沉法与超声提取法相结合提取灵芝活性多糖的最佳工艺。方法以脾细胞代谢MTT活力为评价指标,采用正交试验对超声时间、水提温度和水提时间等因素进行考察,寻求最佳的提取工艺。结果各因素对灵芝多糖脾细胞代谢MTT活力的影响大小排列为：超声时间〉水提温度〉水提时间,超声时间对灵芝多糖活性影响显著。提取最佳工艺为：超声提取时间20min,水提取温度80℃,水提取时间2h。结论本工艺为提取活性灵芝多糖提供了一定的参考。     

黄芪-莪术不同提取物抗肿瘤作用研究

目的研究不同方法提取的黄芪-莪术提取物的抗肿瘤作用。方法建立人肝癌细胞株HepG2模型,分别以95%乙醇、50%乙醇、水提醇沉、传统水煎四种方法为提取工艺,用CCK-8法检测不同提取物对HepG2细胞抑制生长作用,并用流式细胞法检测其体外诱导HepG2细胞凋亡的情况。用小鼠肝癌H22细胞建立移植性肝癌模型,检测上述提取物体内抗肿瘤活性,用免疫组织化学法检测H22肝癌组织中NF-κB p65的表达情况。结果CCK-8结果显示,与阴性组相比,黄芪-莪术95%乙醇和50%乙醇提取物组最高抑制率分别为89.13%、78.36%,差异有统计学意义(P0.05),醇沉和水煎提取物组最高抑瘤率分别为20.38%、18.78%,差异无统计学意义(P0.05)。流式细胞术结果显示,95%乙醇提取组和50%乙醇提取物组能明显诱导HepG2细胞凋亡,水提醇沉组和传统水煎组效果不明显。95%乙醇、50%乙醇、水提醇沉、传统水煎四种提取物对小鼠H22荷瘤均有一定的抑瘤效果,抑瘤率分别为47.55%、36.12%、29.96%、34.68%。与模型组相比,95%乙醇和50%乙醇提取物组能明显降低H22荷瘤组织中NF-κB p65水平的表达(P0.05)。结论黄芪-莪术95%乙醇、50%乙醇、水提醇沉、传统水煎四种提取物均有抑制小鼠H22荷瘤生长作用,但是只有95%乙醇和50%乙醇提取物能抑制NF-κB p65蛋白的表达,并有抑制人肝癌HepG2细胞生长及诱导其发生细胞凋亡的作用。     

人参多糖的提取分离及其体外抗肿瘤作用

目的：从人参中提取分离人参多糖,对其进行初步鉴定分析,观察人参多糖的体外抗肿瘤活性。方法：采用水提醇沉法和Sevage法提取人参多糖,应用红外光谱对其结构进行初步的鉴定分析;小鼠前列腺癌RM-1细胞株和人宫颈癌HeLa细胞株分为对照组和不同浓度（50、100、200、300、400和500 mg/L）人参多糖组,MTT法检测各组细胞的生长抑制情况,通过细胞毒性T细胞（CTL）实验检测不同浓度人参多糖对肿瘤细胞的间接杀伤作用,即细胞毒性乳酸脱氢酶（LDH）释放率。结果：人参多糖的提取率为8.76%,经鉴定成分为多糖。MTT实验,不同浓度人参多糖处理RM-1和HeLa细胞24 h后,与对照组比较,各浓度人参多糖组细胞存活率差异均无统计学意义(P>0.05)。CTL实验,与对照组比较,不同浓度人参多糖组细胞毒性LDH释放率显著升高(P<0.05);随着人参多糖浓度的增加,细胞毒性LDH释放率先升高后降低,人参多糖浓度为100 mg/L时,细胞毒性LDH释放率最大。 结论：人参多糖可以通过激活T细胞来间接抑制肿瘤细胞生长,起到抗肿瘤的作用。     

枇杷叶黄酮对油脂的抗氧化性能研究

目的研究枇杷叶黄酮对油脂的抗氧化性能,为枇杷叶资源开发利用提供依据。方法以枇杷叶为原料,采用醇提超声法提取出黄酮类化合物,将其不同剂量分别添加到芝麻油和猪油中,利用过氧化值法测定其对油脂的抗氧化性能。结果0.10%枇杷叶黄酮的抗氧化效果和0.05%叔丁基对苯二酚相近,表明枇杷叶黄酮对油脂的抗氧化效果明显,且作用呈一定的量效关系,抗坏血酸与枇杷叶黄酮有协同抗氧化效应。结论枇杷叶黄酮可以作为油脂的抗氧化剂开发利用。     

广金钱草多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性研究

目的研究广金钱草多糖的水提工艺条件及其体外抗氧化活性。方法以提取温度(A)、料液比(B)、提取时间(C)为条件,建立三因素三水平的正交试验,研究广金钱草多糖的水提工艺;体外抗氧化活性的研究,是以邻二氮菲-Fe2+-H2O2体系研究多糖对羟自由基(-OH)的抑制作用,以邻苯三酚自氧化法研究多糖对超氧阴离子自由基(O-2)的抑制作用;多糖的含量测定方法采用苯酚-硫酸法。结果广金钱草多糖水提工艺的最佳条件为温度100℃,料液比为1∶20,提取时间3.5 h,提取3次。广金钱草多糖对-OH、O-2有明显的清除作用。结论从广金钱草中提取的多糖具有清除-OH、O-2的抗氧化作用。     

百合多糖的抗疲劳作用

目的:观察百合多糖对小鼠的抗疲劳作用。方法:用水提醇沉法提取百合粗多糖,通过Sevag法去蛋白,纯化多糖。将60只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、高、中、低剂量给药组。高、中、低剂量给药组分别按2.25g/kg/d、1.5g/kg/d、0.75g/kg/d灌胃百合多糖,正常对照组以等体积生理盐水灌胃,连续灌胃10天后对小鼠进行负重游泳实验及血清指标测定。结果:三个剂量组百合多糖均能延长小鼠游泳时间,增强小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活力,减少小鼠血清中丙二醛(MDA)的生成,提高小鼠抗疲劳能力。结论:百合多糖的抗疲劳、提高运动能力与其抗氧化作用相关。     

柿叶不同溶剂萃取物对糖尿病小鼠抗氧化能力的影响

目的: 研究柿叶不同溶剂萃取物对链脲佐菌素(STZ)糖尿病模型小鼠抗氧化能力的影响。方法: 柿叶乙醇总提物分别用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,得到不同溶剂萃取物。经乙醇提取后得到柿叶残渣,经水煮乙醇沉淀后得水提醇沉萃取物。将实验小鼠随机分成:正常对照组,模型组,格列本脲组[25 mg/(kg·d)],不同溶剂萃取物低、高剂量组。连续灌胃给药15 d,在相应时间采血测定丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)等指标。结果: 乙酸乙酯萃取物和水提醇沉萃取物显著降低STZ所致糖尿病小鼠肝脏MDA含量和提高肝脏SOD活力(P<0.01或0.05),提高肝脏抗氧化能力;氯仿萃取物和正丁醇萃取物对STZ所致糖尿病小鼠无抗氧化作用。结论: 提高糖尿病小鼠机体抗氧化能力可能是柿叶乙酸乙酯萃取物和水提醇沉萃取物降糖作用的机制之一。