补阳还五汤有效组分对血管内皮细胞黏附分子表达的影响及其信号转导机制

目的 研究补阳还五汤有效组分生物碱、苷对凝血酶刺激的血管内皮细胞株黏附分子表达的影响及其信号转导机制。     

生化汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响

目的:研究生化汤对血瘀证血管内皮细胞黏附分子表达的影响。方法:采用免疫组织化学和RT-PCR二种方法观察生化汤不同剂量(高、中、低)对血瘀证(大鼠)血管细胞黏附分子(VCAM-1)、血管内皮细胞胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。结果:模型组VCAM-1、ICAM-1、PECAM-1、iNOS高表达,生化汤能减少造模动物VCAM-1、ICAM-1、PECAM-1、iNOS的表达,而且随着药物剂量的减少,各分子表达呈递增趋势,具有量效关系。结论:生化汤能降低血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达,且量效关系明显。     

补阳还五汤调节高血压前期大鼠黏附分子表达作用

目的:观察补阳还五汤对高血压前期大鼠主动脉黏附分子表达的影响,探讨补阳还五汤调节血管内皮功能发挥保护血管的作用机制。方法:将20只雄性盐抵抗大鼠(dahl salt resistant rat,SS)随机分为正常对照组(10只),中药对照组(10只);20只雄性dahl盐敏感大鼠(dahl salt sensitive rat,DS)随机分为模型组(10只)和中药治疗组(10只)。采用高盐喂养法制备高血压前期模型。给予补阳还五汤灌胃治疗,共治疗5周。取材,Elisa法检测胸主动脉中P-选择素(P-selectin)、E-选择素(E-selectin)含量;荧光定量PCR法检测胸主动脉单核细胞趋化因子-1(MCP-1,monocyte chemoattractant protein-1),血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1,vascular cell adhesion molecule-1),细胞间黏附分子-1(ICAM-1,intercellular adhesion molecule-1)的mRNA表达。结果:与正常组比较模型组主动脉MCP-1,VCAM-1,ICAM-1mRNA表达与P-selectin、E-selectin含升高(P<0.05);与模型组比较中药治疗组主动脉MCP-1,VCAM-1,ICAM-1mRNA表达与P-selectin、E-selectin含量降低(P<0.05)。结论:补阳还五汤可能通过下调血管黏附分子表达,改善高血压前期大鼠血管损伤。     

补阳还五汤治疗颅脑损伤气虚血瘀证疗效观察

目的观察补阳还五汤治疗颅脑损伤气虚血瘀证的临床疗效。方法 65例颅脑损伤亚急性期气虚血瘀证患者随机分为两组,对照组33例予以西医常规治疗,治疗组32例在西医常规治疗的基础上口服或鼻饲补阳还五汤煎剂,疗程均为30d;比较两组治疗后格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、治疗1个月后格拉斯哥预后评分法(GOS)评分、苏醒率、觉醒时间。结果治疗后治疗组GCS评分较对照组明显提高,差异有统计学意义;治疗3个月治疗组GOS评分比较对照组明显提高,差异有统计学意义;治疗组苏醒率较对照组明显提高、觉醒时间较对照组明显缩短,差异有统计学意义。结论补阳还五汤治疗颅脑损伤气虚血瘀证有一定疗效。     

超微补阳还五汤对气虚血瘀证模型大鼠血液流变学的影响

目的:探讨超微补阳还五汤对气虚血瘀证模型大鼠血液流变学的影响。方法:采用力竭游泳加皮下注射肾上腺素的方法复制动物模型,药物治疗后采血检测血液流变学指标。结果:动物造模后血液流变学参数均升高(与空白组比较,P<0.05),补阳还五汤传统剂型及超微剂型均能降低升高的血液流变学参数(与模型组比较,P<0.05),其中超微低剂量组(相当于传统汤剂组剂量1/3)即与传统汤剂组作用效果相当,而超微等剂量组(与传统汤剂组剂量相同)效果较传统汤剂与低剂量组略好,但无统计学意义(P>0.05)。结论:补阳还五汤超微剂型与传统剂型一样具有降低气虚血瘀证模型大鼠血液流变学参数的作用,而且超微剂型具有节省药材的特点。     

超微补阳还五汤对气虚血瘀模型大鼠血栓前状态的影响

目的：探讨超微补阳还五汤对气虚血瘀证模型大鼠血栓前状态的影响。方法：采用力竭游泳加皮下注射肾上腺素的方法复制气虚血瘀证动物模型,在药物治疗后采血检测血栓前状态指标。结果：动物造模后血流变学参数、内皮素-1、血栓素B2、血小板α-颗粒膜蛋白-140均较空白组升高（与空白组比,P〈0.05）,补阳还五汤传统剂型及超微剂型均能降低升高的血栓前状态各参数（与模型组比,P〈0.05）,其中超微低剂量组（相当于传统汤剂组剂量1/3）即与传统汤剂组作用效果相当,而超微等剂量组（与传统汤剂组剂量相同）效果较传统汤剂与低剂量组略好而无统计学意义（P〉0.05）。结论：补阳还五汤超微剂型与传统剂型一样具有干预气虚血瘀证模型大鼠血栓前状态作用,而且超微剂型具有节省药材的特点。     

补阳还五汤对气虚血瘀模型大鼠血液流变学的影响

目的:研究补阳还五汤对气虚血瘀模型大鼠血液流变学相关指标变化的影响.方法:选用SD清洁级大鼠40只,雌雄各半,随机分为空白组、模型组以及补阳还五汤高(14.0 g/kg)、低(3.5 g/kg)剂量组,每组10只大鼠.除空白组外,其他各组大鼠均气管内一次性注射0.9％氯化钠溶液配制的博莱霉素复制气虚血瘀动物模型(7 m...     

补阳还五汤治疗急性缺血性脑卒中气虚血瘀证30例

目的：观察补阳还五汤治疗急性缺血性脑卒中的临床疗效。方法：将60例急性缺血性脑卒中气虚血瘀证型患者,按照入院时间随机分为治疗组和对照组各30例。两组均采用基础治疗,治疗组加服补阳还五汤,疗程均为2周,分别在1周、2周时观察患者神经功能缺损程度（NIHSS）及日常生活能力状况（Barthel指数）变化情况。结果：在治疗1周、2周时NIHSS评分治疗组均优于对照组,有明显差异性（P〈0．01）,Barthel指数治疗组均高于对照组（P〈0．05）。结论：补阳还五汤能有效阻止急性缺血性脑卒中的进展程度,改善急性脑梗死的预后。     

补阳还五汤治疗中风病气虚血瘀证的机制探讨

中风是以猝然昏仆、不省人事、伴口眼斜、半身不遂、语言不利 ,或不经昏仆而仅以僻不遂为主症的一种疾病。现代医学中的脑血管意外包括脑血栓形成、脑栓塞、高血压脑出血、蛛网膜下腔出血等均归属于中医“中风”范畴。1　中风的病因病机中风为内科急症 ,其病因病机 ,历代诸说纷纭 ,河间主火 ,丹溪主痰 ,明代医家张景岳提出“非风”理论 ,清代王清任则专以气虚立说 ,爰立补阳还五汤。近代医家张伯龙、张山雷、张寿甫总结前人经验 ,遵循《内经》“血之与气并走于上 ,则为大厥”之旨 ,倡导“肝阳化风 ,气血并逆 ,直冲犯脑”之论 ,明确了“…     

补阳还五汤有效组分对血管内皮细胞抗血栓功能及蛋白激酶C的影响

目的探讨补阳还五汤及其有效组分生物碱、苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗血栓功能改变及蛋白激酶C(PKC)活化的影响。方法以凝血酶(10 U/mL)作用于培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304),同时加入药物,24 h后测定上清液中组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平、细胞组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)、凝血酶调节蛋白(TM)mRNA表达及PKCα蛋白表达。结果凝血酶作用内皮细胞后,tPA释放增加(P<0.01),TF、TFPI mRNA表达增强(P<0.05),而PAI-1释放及TM mRNA表达无显著性变化(P>0.05);PKCα表达增强(P<0.05)。补阳还五汤可抑制凝血酶诱导的tPA释放增加(P<0.01),生物碱对tPA释放增加无显著影响(P>0.05);苷(1.25 mg/mL)可使凝血酶诱导的tPA分泌增加(P<0.05);原方、生物碱(2 mg/mL)和苷(5 mg/mL)均可抑制内皮细胞分泌PAI-1(P<0.01)。原方、生物碱(1,2 mg/mL)和苷均可抑制凝血酶诱导的TF mRNA表达增强;生物碱(0.5和1 mg/mL)可抑制TFPI mRNA表达(P<0.05);各药对TM mRNA表达无显著影响;原方、生物碱和苷均可抑制凝血酶诱导的内皮细胞PKCα表达的增强(P<0.01)。PKC激活剂佛波酯(PMA)刺激内皮细胞后,PKCα被激活(P<0.01);PKC抑制剂H7作用于PMA刺激的内皮细胞后,PKCα表达增强不明显,PAR-1受体抑制剂CATG作用于凝血酶刺激的ECV304细胞后,PKCα表达显著抑制(P<0.05)。结论凝血酶可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。补阳还五汤原方、生物碱和苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗凝、纤溶功能的改变具有调节作用,使血管内皮细胞的抗凝、纤溶作用趋于正常,其作用可能主要是通过抑制凝血酶诱导的PKCα的激活而介导的。生物碱和苷类有效组分可能为该方抗血栓作用的药效物质基础。     

补阳还五汤及其有效部位对大鼠脑缺血再灌注后caspase表达的影响

目的研究补阳还五汤及其有效部位生物碱、苷对大鼠脑缺血再灌注后脑组织caspase-1、3、8表达的影响。方法采用颈内动脉线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(M CAO)再灌注模型,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定缺血脑组织中caspase-1、3、8 mRNA的表达。结果脑缺血2 h再灌注22 h后,模型组caspase-1、3、8表达较假手术组均显著增强(P<0.05)。生物碱组、苷组caspase-1表达显著低于模型组(P<0.05);补阳还五汤组、生物碱组、苷组、三七总皂苷组caspase-3与模型组比较均显著降低(P<0.05);生物碱组caspase-8表达较模型组显著降低(P<0.05)。三七总皂苷组caspase-8表达较假手术组显著增强(P<0.05)。结论补阳还五汤及其有效部位通过抑制缺血后脑组织caspase-1、3、8的表达,从而有可能对抗脑缺血再灌注后神经细胞凋亡,保护缺血脑组织。     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后血管内皮生长因子及其受体Flk1的影响

目的探讨补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Fetal liver kinase1,Flk1)的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、补阳还五汤组,大脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血模型,采用免疫组织化学法和酶联免疫法检测各组动物脑内VEGF、Flk1的表达和蛋白水平,同时评价动物神经功能。结果在正常大鼠脑内有少量VEGF和Flk1阳性细胞,脑缺血后VEGF和Flk1阳性细胞增加;与模型组比较,尼莫地平、补阳还五汤均能改善模型大鼠的神经功能缺失症状,增强VEGF和Flk1的表达,提高VEGF蛋白水平(P<0.05);于7、14d补阳还五汤作用强于尼莫地平(P<0.05)。结论补阳还五汤增强大鼠局灶性脑缺血后VEGF及Flk1的表达和提高VEGF蛋白水平,是其抗脑缺血的可能作用机制之一。     

喂饲补阳还五汤的大鼠血清中阿魏酸的高效毛细管电泳分析

目的　采用高效毛细管电泳法测定补阳还五汤及给药大鼠血清中阿魏酸的含量。方法　以毛细管区带电泳分离分析待测样品中的阿魏酸 ,内标法定量 ,紫外检测 ,缓冲液为 2 5 m mol/ L 硼砂 -甲醇 (85∶ 15 ) ,未涂层融硅毛细管 (5 2 cm× 5 0μm,有效长度 30 cm ) ,分离电压 2 0 k V,压力进样 3s,检测波长 32 0 nm ,温度 30℃。结果　在上述条件下 ,阿魏酸在 6 min内得到很好的分离 ,血清中阿魏酸的加样回收率为 97.2 0 % ,补阳还五汤中阿魏酸的回收率为 10 3.2 8% ,RSD分别为 3.73%和 0 .91% (n=3)。结论　该方法可为血清样品及复方制剂中阿魏酸的含量测定提供参考。     

补阳还五汤4类有效部位对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积的影响

目的研究补阳还五汤(BYHWD)中生物碱、多糖、苷、苷元4类有效部位对大脑中动脉闭塞(MCAO)后局灶性脑缺血大鼠脑梗死的作用。方法用颈内动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,检测脑梗死体积,并比较其神经功能行为评分。结果脑缺血6h,模型组脑梗死体积显著增大(P<0.01),神经功能行为评分显著升高(P<0.01);生物碱、多糖、苷、苷元各组脑梗死体积较模型组缩小(P<0.05、0.01);生物碱、苷、苷元和多糖可使MCAO大鼠神经功能行为评分下降(P<0.05、0.01),其中以生物碱和苷的作用较强。结论MCAO后,大鼠脑组织出现梗死,补阳还五汤4类有效部位生物碱、多糖、苷、苷元能减少脑梗死体积,改善脑缺血后神经行为症状。生物碱和苷的抗脑缺血作用较强,这可能是补阳还五汤抗缺血性脑损伤的部分物质基础。     

The effects of Buyang Huanwu Decoction on hemorheological disorders and energy metabolism in rats with coronary heart disease

Ethnopharmacological relevance

Buyang Huanwu Decoction (BYHWD), a traditional Chinese medicine (TCM) formula, has been recognized as a clinical treatment for coronary heart disease (CHD) with qi deficiency and blood stasis syndrome. The effects of BYHWD on hemorheological disorders and energy metabolism in CHD with qi deficiency and blood stasis syndrome are still unclear.

Aim of the study

To investigate whether the ameliorative effects of BYHWD on CHD rats with qi deficiency and blood stasis syndrome are associated with the regulation of hemorheological disorders and energy metabolism.

Materials and methods

The rats were lavaged with 25.68, 12.84 and 6.42 g/kg BYHWD (g weight of mixed crude drugs/kg body weight), respectively, once a day for 21 days. The body weight, exhaustive swimming time and tongue characters were observed and recorded. The whole blood viscosity and plasma viscosity were determined by hematology analyzer. The level of fibrinogen (Fbg) in plasma was determined by using Fbg assay kit. The platelet aggregation induced by adenosine diphosphatase was measured by semi-automatic whole blood platelet analyzer. The level of blood glucose (BG) was determined by LifeScan. The activity of Na⁺-K⁺-ATPase in heart tissues was detected by spectrophotometer.

Results

BYHWD improved the exterior signs of qi deficiency and blood stasis syndrome in rats with CHD, including the body weight, exhaustive swimming time and tongue quality. The whole blood viscosity in rats treated with 25.68 g/kg BYHWD decreased at the shear rate of 10 s⁻¹ (P < 0.05) and the plasma viscosity decreased in rats treated with 25.68 and 12.84 g/kg BYHWD (P < 0.05). The plasma Fbg level and the platelet aggregation decreased in rats treated with 25.68 g/kg BYHWD (P < 0.01). The results also revealed that the BG level decreased and the Na⁺-K⁺-ATPase activity in heart tissues increased in rats treated with 25.68 and 12.84 g/kg BYHWD (P < 0.01).

Conclusion

The results suggest that the ameliorative effects of BYHWD on CHD rats with qi deficiency and blood stasis syndrome are mediated by the improvement of hemorheological disorders and energy metabolism.     

补阳还五汤加味治疗气虚血瘀型中风后遗症疗效观察

目的观察补阳还五汤加味治疗气虚血瘀型中风后遗症的临床疗效。方法将92例中风后遗症患者随机分为治疗组（47例）和对照组（45例）;两组均给予西医常规治疗,治疗组同时给予补阳还五汤加味治疗。观察两组临床疗效和神经功能缺损评分（NDS）变化情况。结果治疗组总有效率为93.6%,对照组为77.8%,两者有显著性差异（P〈0.05）;两组治疗后NDS较治疗前明显降低（P〈0.05,P〈0.01）,且治疗后两组NDS有显著性差异（P〈0.05）。结论补阳还五汤加味治疗气虚血瘀型中风后遗症的临床疗效确切。     

补阳还五汤对老龄大鼠红细胞膜组分的影响

目的:从红细胞膜组分的变化探讨补阳还五汤改善老龄大鼠血液黏度的作用机制。方法:40只Wistar大鼠,随机分为轻龄对照组、模型组、补阳还五汤高、低剂量组,每组10只。给药19 d后,取血测定血液流变学指标以及红细胞膜组分相关指标。结果:老龄大鼠血液黏度明显高于轻龄大鼠,而补阳还五汤可明显降低老龄大鼠的全血黏度和血浆黏度,同时可明显降低红细胞膜上胆固醇和丙二醛(MDA)含量,提高红细胞变形能力和红细胞膜上唾液酸含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结论:补阳还五汤降低血液黏度的机制可能与影响红细胞膜上脂质代谢,提高抗氧化能力,减少氧自由基生成,以及改善红细胞膜上的负电荷荷电量等方面有关。