3种方法测定低浓度乙型肝炎病毒表面抗原效果评价

目的 评价电化学发光免疫分析法(ECLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)法及金标法分别测定低浓度组乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的临床效果.方法 采用ECLIA法、ELISA法及金标法测定乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量检测阳性患者的HBsAg低浓度组.用ELISA法及金标法同时测定经ECLIA法筛选的HBVDNA定量检测阳性患者HBsAg模式如下的临床标本:HBsAg COI在1～50的临床标本60例,HBsAg COI小于1的临床标本20例作为阴性对照,广东省临床检验中心提供的临界值控制品作为质控.结果 ECLIA法测定灵敏度为0.08 ng/ml,HBsAg的批内CV为2.35%;ELISA法测HBsAg灵敏度为0.7 ng/ml,批内CV为15.9%,金标法灵敏度1 ng/ml.60例ECLIA法检测阳性标本中ELISA法检出阳性为28例,金标法检出阳性为20例.结论 在低浓度的HBsAg检测中,需运用ECLIA法检测,以最大程度地减少假阴性结果,并针对临床患者在感染不同时期出现不一致的ELISA及金标法检测结果进行合理解释.     

化学发光法对ELISA检测HBsAg“灰区”标本的再分析探讨

目的探讨用化学发光法对乙型病毒性肝炎患者,乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测灰区标本的再分析及其临床意义。方法用低浓度质控血清对两种ELISA试剂盒进行测试,同时对用ELISA法检测的80例患者HBsAg弱阳性标本用化学发光法定量复检。结果目前国内两种较好的ELISA试剂盒的A值都低于其cutoff值区域("灰区");化学发光法的阳性率与HBsAg阴性组差异有统计学意义。结论不顾及ELISA"灰区"的标本,就有一定的阳性标本漏检,对HBsAg弱阳性的研究和报道应引起临床医生的重视,对HBsAg弱阳性患者应定期随访。     

乙型肝炎病毒携带产妇进行乳汁H BV DN A检测对哺乳的指导价值

[目的]探讨乙型肝炎病毒携带产妇乳汁中乙型肝炎病毒DNA（HBV DNA）携带状况与母乳喂养安全性的关系,从而正确指导乙型病毒性肝炎产妇产后母乳喂养。[方法]采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测280例 HBV 携带产妇血清 HBV 免疫血清学标志物,将其分为乙型肝炎病毒 e抗原（HBeAg）阳性组和 HBeAg阴性组,同时采用荧光定量 PCR法检测血清及乳汁 HBV DNA含量。[结果]280例病人血清中 HBV DNA阳性172例（61.4%）,乳汁 HBV DNA阳性128例（45.7%）;血清 HBV DNA阳性组172例产妇乳汁中检测出 HBV DNA阳性124例（72.1%）,108例血清 HBV DNA阴性者中2例（1.8%）乳汁 HBV DNA阳性;HBeAg阳性组122例检测出血清 HBV DNA 阳性105例、乳汁 HBV DNA 阳性96例;HBeAg 阴性组158例检测出血清HBV DNA阳性67例、乳汁 HBV DNA阳性30例。[结论]在乙型肝炎病毒携带者母乳喂养问题上,应以 HBV DNA 检测为参考标准;乳汁 HBV DNA含量与血清 HBV DNA含量呈正相关,对血 HBV DNA阳性产妇,建议人工喂养,并母婴隔离;对血清HBV DNA阴性产妇可以哺乳,但应给予正确的哺乳指导。     

乙型肝炎病毒表面抗原低水平阳性血清的病毒核酸载量分析

目的：对电化学发光法检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg ）低水平阳性标本的病毒核酸载量进行分析,判断感染状态。方法收集湖北省中山医院检验科2012年6月至2012年10月电化学发光检测HBsAg COI值在0．8～5．0的血清标本130份,进行荧光定量PCR检测,获得 HBV-DNA载量值。结果130份标本中 HBV-DNA检测阳性2份。结论 HBsAg低水平阳性条件下联合 HBV DNA检测对乙型肝炎诊断有重要的临床价值。     

时间分辨荧光免疫法定量检测乙肝病毒血清标志物的临床意义

目的探讨时间分辨荧光免疫法用于定量检测乙型肝炎病毒血清标志物的临床意义。方法采用时间分辨荧光免疫法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)同时对196例患者HBV血清标本进行5项指标检测。结果 TRFIA法检测患者标本乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)的阳性率分别为59.7%、24.5%、25.5%、29.1%、78.6%。ELISA法检测患者标本HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb的阳性率分别为52.1%、18.4%、21.4%、23.5%、67.9%。TRFIA法检测的阳性率均显著高于ELISA法(P<0.05)。结论 TRFIA法测定乙肝病毒血清标志物的相对灵敏度高,的可为临床疗效观察及乙肝疫苗的接种提供科学依据。     

乙型肝炎病毒表面抗原定量检测与乙型肝炎病毒DNA表达关系的探讨

通过电化学发光技术和聚合酶链反应(PCR)技术分别检测乙型肝炎患者乙型肝炎病毒表面抗原(HbsAg)及乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)表达水平,探讨乙型肝炎病毒表面抗原定量与乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸(HBVDNA)表达水平的关系,以期应用乙型肝炎病毒表面抗原定量检测作为临床药物疗效监测指标.     

胶体金试纸法检测乙型肝炎病毒表面抗原假阴性和假阳性结果分析

本文采用胶体金试纸法和酶联免疫法（ELISA）同时检测了门诊及住院患者血清标本5627份，初步探讨了胶体金试纸法检测乙型肝炎病毒表面抗原时产生的假阴性和假阳性原因。分析如下。     

ELISA法和电化学发光免疫法检测血清HBsAg结果比较分析

目的对酶联免疫吸附试验（ELISA）和电化学发光免疫法（ECLIA）检测血清中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）结果进行比较分析。方法采用ELISA和ECLIA 2种方法分别检测8 913例血清中的HBsAg。结果 ELISA法和ECLIA法检测出的总阳性数和总阳性率分别为519例占5.82%,451例占5.06%;以ECLIA法为参照,ELISA法假阴性率为0.67%,假阳性率为1.43%,相对敏感性为88.3%,相对特异性为98.5%二者的符合率为97.9%;403例阳性标本用ECLIA法复检,ELISA法的假阳性率为11.9%,相对敏感性为100%,相对特异性为50%,二者的符合率为88.1%;116例弱阳性标本用ECLIA法复检,ELISA法的假阳性率为69%,相对敏感性为100%,相对特异性为50%,二者的符合率为31%;8 394例阴性标本用ECLIA法复检,ELISA法的假阴性率为0.71%,相对敏感性为50%,相对特异性为100%,二者的符合率为99.3%。结论血清HBsAg ELISA法检测存在一定的假阴性率和假阳性率,敏感性和特异性较ECLIA法差,且随HBsAg浓度变化较大。ECLIA法快速、准确、敏感性、特异性更高。     

杭州地区体检人群乙型肝炎病毒标志物阴性结果分析

目的分析2014年杭州地区体检人群乙型肝炎病毒血清学五项标志物(HBV-M)全阴模式的分布特征,为预防和控制HBV-M阴性人群感染乙型肝炎病毒(HBV)提供对策。方法采用ELISA对体检人群的血液标本进行HBV-M(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb)检测。对保存的300例HBV-M阴性标本,分别使用化学发光免疫分析法检测HBsAg、HBsAb和PROCLEIX ULTRIOAssay检测HBV-DNA,对HBV-DNA反应性标本进行病毒载量测定。结果在检测的9 143例体检者的标本中,2 213例标本为HBV-M阴性,阴性率为24.20%;男女HBV-M阴性率比值为1∶1.21。使用化学发光免疫分析法和PROCLEIX ULTRIOAssay分别检测出1例低浓度的HBsAg标本(HBsAb及HBV DNA均无反应性),4例低浓度的HBsAb标本(HBsAg及HBV DNA均无反应性),2例HBV-DNA反应性标本(HBV-M阴性)。其中1例HBV-DNA反应性标本定量检测为560IU/mL。结论杭州地区ELISA HBV-M阴性的体检人群中,少数人可检出低浓度的HBsAg或HBsAb或HBV DNA。针对ELISA HBV-M阴性人群,建议接种乙肝疫苗前进行HBV-M和HBV-DNA定量检测,以确定是否需要接种乙肝疫苗及接种乙肝疫苗的方案。     

乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白检测的临床价值探讨

目的:探讨乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白(HBV-LP)、HBV DNA和乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)在乙型肝炎病毒复制、病情观察和治疗中的临床意义.方法:采用酶免疫法检测384份乙型肝炎患者血清中HBV-M和HBV-LP,采用荧光定量PCR法检测HBV DNA,用自动生化仪检测肝功能,并进行统计分析.结果:117例乙型肝炎患者血清中HBV-LP水平与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关(r=0.835,P＜0.001).87例HBV DNA阳性血清中HBV-LP阳性率为87.4%.97例HBeAg阳性患者HBV-LP阳性率92.8%,98例HBeAg阴性患者HBV-LP阳性率68.4%.肝功能异常的乙型肝炎患者HBV-LP阳性率为95.8%,明显高于肝功能正常的乙型肝炎患者的63.3%.结论:血清HBV-LP水平能反映乙型肝炎病毒感染者体内乙型肝炎病毒复制程度和肝细胞的破坏,为判断乙型肝炎病毒复制、病情观察和预后提供了一个新的血清学指标.     

FQ-PCR和ELISA法检测HBV标志物的比较

目的 了解乙型肝炎病毒(HBV)感染不同血清学标本酶联免疫吸附反应(ELISA)阳性与HBV-DNA阳性结果的比较情况.方法 对200例血清同时进行荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV-DNA及ELISA方法测定HBVM.结果 乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性组HBV-DNA阳性率为80.7%(146/181), HBsAg(-)组HBV-DNA阳性率为5.6%(1/18),二者差异有统计学意义(P＜0.001).其中75例HBsAg、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)均为阳性的血清HBV-DNA阳性率为100.0%(75/75),HBsAg、乙型肝炎病毒抗体(抗-HBe)、乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)均为阳性组血清HBV-DNA阳性率为77.9%(46/59),HBsAg( )、抗-HBc( )组血清HBV-DNA阳性率为53.2%(25/47),乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)阳性、抗-HBe( )、HBcAg( )组血清HBV-DNA阳性率为12.5%(1/8).结论 ELISA检测结果相同的患者,其体内HBV-DNA的复制情况存在很大的差别.判断肝脏中HBV复制及有无传染性依据HBsAg阳性或HBeAg阳性是不够的,易造成部分乙型肝炎的漏诊.对于HBsAg阴性只要有HBV感染后的任何血清学依据,都应检测血清HBV-DNA作为诊断乙型病毒性肝炎的进一步筛选,必要时应同时行肝活检加以证实.     

电化学免疫发光分析法联合核酸检测定量法在ELISA HBsAg-/NAT+血液样本中的应用价值

目的分析电化学免疫发光法(ECLIA)联合核酸检测(NAT)定量法在ELISA HBsAg-/NAT+血液样本检测中的应用价值。方法选择血站采集的无偿献血者血液样本22843例,酶联免疫吸附法(ELISA)检测为乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性的血液样本行NAT检测,先行混合检测,后行拆分检测。选取拆分检测为初检ELISA HBsAg-/NAT+的血液样本行NAT定量检测,NAT定量检测为阳性的血液样本进一步行ECLIA联合NAT定量检测。结果经ELISA检测,22843例血液样本中HBsAg阳性65例,HBsAg阴性22778例。将ELISA检测为HBsAg阴性的22778血液样本进一步行NAT检测,经混合检测,27个混样池为阳性;经拆分检测,29例血液样本呈HBV-DNA阳性。对29例初检ELISA HBsAg-/NAT+血液样本进一步行NAT定量检测,阳性率为65.52%(19/29),其中5例HBV-DNA病毒载量≥20 IU/mL,14例HBV-DNA病毒载量<20 IU/mL。19例ELISA HBsAg-/NAT+血液样本经ECLIA检测,HbsAg、HBeAg全阴,HBsAb阳性3例(15.79%),HBeAb阳性7例(36.84%),HBcAb阳性15例(78.95%),血清模式为全阴5例(26.32%),单纯HBcAb阳性7例(36.84%)。19例ELISA HBsAg-/NAT+血液样本经ECLIA联合NAT定量检测,4例处于窗口期,15例处于隐匿性感染期。结论血站血液样本初检中存在一定的漏检现象,NAT检测可在大量ELISA阴性样本中快速筛检出HBV-DNA阳性标本,ECLIA联合NAT定量检测可帮助献血者明确自身HBV感染状态,值得临床应用和推广。     

HBsAg初筛反应性献血者的HBV感染特征分析及其屏蔽策略

目的分析HBsAg初筛反应性献血者的HBV感染特征并探讨其屏蔽策略。方法 2016年1月-6月来本中心献血的无偿单采献血者,选取其中HBsAg初筛反应性的单采献血者为研究组,选取HBsAg初筛非反应性成功捐献单采血小板,但HBsAg酶免检测和核酸检测均阳性的单采献血者为对照组,2组血液标本进行HBsAg定量检测、HBV-DNA定量检测和HBV两对半检测。结果 80名HBsAg初筛反应性献血者的酶免检测阳性预测值为98.75%(79/80);HBsAg定量中位数为384.9 IU/mL,HBV-DNA阳性率为90%(72/80),HBV-DNA定量中位数为3.38log IU/mL,均高于对照组并具有统计学意义;HBV两对半检测"135"模式百分比、"145"模式的HBsAg定量值和HBV-DNA定量值均高于对照组并具有统计学意义。结论 HBsAg初筛反应性献血者具有较高的HBV传染性,应直接屏蔽或者按照酶免检测阳性结果进行归队管理。     

妇女慢性乙型肝炎标志物和新生儿感染的关系研究

目的探索妇女慢性乙型肝炎标志物和新生儿感染的关系。方法回顾性分析2017年8月至2018年8月于海南省人民医院接受治疗的712例慢性乙型肝炎患者及其新生儿的临床资料,检测孕妇和新生儿HBV-DNA载量分析和乙型肝炎标志物定量。统计不同孕妇类型血HBV-DNA阳性率和乳汁HBV-DNA阳性率、新生儿HBsAg阳性率和新生儿HBeAg阳性率。统计不同血HBV-DNA定量下乙型肝炎小三阳、乙型肝炎大三阳、乳汁HBV-DNA阳性率以及新生儿HBsAg阳性率和新生儿HBeAg阳性率。结果乙型肝炎中共有291例血HBV-DNA阳性患者,83例乳汁HBV-DNA阳性患者;其中乙型肝炎大三阳孕妇血HBV-DNA阳性率(93.49%)和乳汁HBV-DNA阳性率(48.52%)分别显著高于乙型肝炎小三阳孕妇(24.49%、0.18%),差异有统计学意义(P <0.05)。乙型肝炎孕妇中共有20例HBs Ag阳性新生儿,129例HBeAg阳性新生儿;其中乙型肝炎大三阳孕妇新生儿HBs Ag阳性率(7.10%)和新生儿HBeAg阳性率(73.37%)分别显著高于乙型肝炎小三阳孕妇新生儿(1.47%、0.92%),差异有统计学意义(P <0.05)。随着血HBV-DNA定量的增加,乙型肝炎小三阳占比不断下降(98.72%、80.95%、72.73%、57.14%、9.09%、0),乙型肝炎大三阳占比不断上升(1.28%、14.29%、18.18%、38.10%、88.31%、95.83%),差异有统计学意义(P <0.05)。随着血HBV-DNA定量的增加,新生儿HBs Ag阳性率不断上升(0、0、0、4.76%、5.19%、13.89%),新生儿HBeAg阳性率不断上升(1.28%、9.52%、18.18%、23.81%、70.13%、76.39%),差异有统计学意义(P <0.05)。结论乙型肝炎小三阳或者HBV-DNA阴性产妇发生宫内感染的可能性较大,且乙型肝炎大三阳和HBV-DNA定量较高的产妇新生儿感染发生率较高。     

孕产妇及其新生儿的HBV检测结果相关性分析

目的 通过对HBsAg阳性孕产妇及其新生儿的HBV检测结果分析,探讨HBV宫内感染的高危因素及其预防措施。方法 从陕西省人民医院产前检查中筛选254例HBsAg阳性孕产妇及其新生儿作为研究对象,检测两者HBV标志物,并同时用荧光定量PCR检测孕产妇血清HBV-DNA。结果 254例HBsAg阳性孕产妇,其新生儿脐血HBsAg和HBeAg阳性率分别为5.12%和13.78%; HBeAg阳性组孕产妇的新生儿脐血HBV感染阳性率53.33%,远高于HBeAg阴性组的3.61%,差异有统计学意义(P<0.001); 新生儿脐血HBsAg和HBeAg阳性率随孕产妇HBV-DNA含量的增加而升高,差异有统计学意义(K-W秩和检验,P<0.001); HBeAg阳性孕产妇的HBV-DNA检测阳性率100.00%,远高于HBeAg阴性孕产妇的阳性率19.59%,差异有统计学意义(Fisher确切概率法,P<0.001)。结论 孕产妇HBeAg和HBV-DNA阳性是新生儿HBV宫内感染的高危因素; 对于没有实时定量检测条件的基层医院和妇幼保健院,HBeAg筛查就尤为重要; 对育龄妇女孕前进行HBV的干预和治疗,使HBV-DNA和HBeAg转阴后妊娠,是降低HBV宫内感染的有力措施。     

对乙型肝炎病毒联合检测的评价

目的 研究乙型肝炎(下称乙肝)病毒(HBV)血清标志物、前S2抗原检出情况与HBV-DNA结果之间的关系.方法 对472例临床样本采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别进行HBV血清标志物5项、前S2抗原的检测,同时运用荧光定量聚合酶链反应法检测HBV-DNA的含量.结果 HBV表面抗原(HBsAg)、HBV e抗原、HBV核心抗原抗体(抗-HBc)阳性组前S2抗原阳性检出率为98.7%和HBV-DNA阳性检出率为84.4%均显著高于HBsAg、抗e抗原抗体、抗HBc阳性组(P＜0.01);159例血清HBV-DNA呈阴性组中前S2抗原检测出67例阳性;130例前S2抗原检测呈阴性组中血清HBV-DNA检出38例阳性.结论 前S2抗原、HBV-DNA及HBV血清标志物检测都可对HBV的复制情况进行评估,但并不同步,需联合应用方可对HBV感染、复制情况作出较全面的评估.     

乙型肝炎病毒前S1蛋白检测的临床价值

目的分析乙型肝炎前S1蛋白(Pre-S1)与HBeAg及HBV-DNA的相关性,探讨Pre-S1蛋白在诊断乙型肝炎病毒复制中的价值。方法收集该院住院慢性乙型肝炎患者血清99例,检测其Pre-S1蛋白、HBV标志物与HBV-DNA定量。结果 HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性者28例,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率均高达90.0%以上。HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性者63例,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为82.5%和69.8%;HBsAg和HBcAb阳性者8例,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率均为87.5%,说明部分HBeAg阴性患者仍有病毒复制,以乙型肝炎病毒HBV-DNA定量大于或等于5.0×102copy/mL为判断乙型肝炎病毒存在的标准,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的阳性检出率比较差异无统计学意义(P>0.05),而HBV-DNA与HBeAg的阳性检出率比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Pre-S1是诊断及判断乙型肝炎病毒复制的非常有价值的血清学参考指标。     

HBsAg弱阳性样本的3种测定方法比较

目的比较胶体金免疫层析试验（GICA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）与微粒子化学发光检测技术（MEIA）检测HBsAg弱阳性样本的结果符合率，以了解3种方法的特异性与灵敏度等诊断指标。方法用3种方法平行检测收集的血清标本HBsAg，并相互比较。结果3种方法检测HBsAg的结果符合率为74．3％，其中ELISA与MEIA结果符合率为94．9％；GICA与MEIA结果符合率为76．9％。GICA检测HBsAg弱阳性样本时的各项诊断指标都不甚理想。结论1．GICA的灵敏度和特异性分别为81．3％和81．3％，较ELISA和MEIA低，检测HBsAg弱阳性样本时存在一定程度的漏检率和误诊率，只能起筛查作用，遇到HBsAg弱阳性的血清标本必须与ELISA法并用，实行双检。2．ELISA较MEIA灵敏度和特异性略低，当测定标本的OD值在临界值附近即检测灰区时建议用MEIA复检。     

HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及临床意义

目的探讨ELISA两步法、化学发光法、荧光定量PCR定量技术对HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及其临床意义,为提高临床检测准确率提供借鉴。方法收集医院门诊和住院受检者经ELISA一步法检测的乙肝两对半4种模式标本(模式1:仅HBeAb阳性;模式2:仅HBcAb阳性;模式3:HBcAb阳性和HBeAb阳性;模式4:HBsAg均为弱反应性的标本),用ELISA两步法及化学发光法检测,再对经化学发光法检测HBsAg结果为阳性的标本用FQ-PCR检测乙肝病毒DNA载量。结果仅HBeAb阳性的标本,共2例,ELISA两步法结果显示HBsAg均为弱反应性,化学发光法结果为阴性;仅HBcAb阳性的标本121例,ELISA两步法结果示HBsAg呈弱反应性者为26例(占21.5%),化学发光法结果阳性8例(占16.7%);HBcAb阳性和HBeAb阳性的标本55例,ELISA两步法HBsAg结果呈弱反应性的为25例(占45.4%),化学发光法结果阳性14例(占25.5%),其中7例用常规PCR方法检测结果拷贝数均小于5.0*102;HBsAg为弱反应性的标本59例,ELISA两步法弱反应性的结果均在临界值附近,化学发光法结果均为阳性。结论对于HBsAg阴性及弱反应性的临床标本,最好采用化学发光法检测或者进行确证试验。     

乙型肝炎病毒载量与乙型肝炎两对半之间的关系

目的 探讨乙型肝炎(下称乙肝)病毒(HBV)载量与乙肝两对半之间的关系.方法 891例血清样本采用酶联免疫吸附试验检测乙肝病毒标志物,LightCylcer检测血清HBV-DNA载量.结果 共检出11种血清学模式,乙肝病毒e抗原(HBeAg)阳性和阴性组的病毒载量分别为106.63 copy/ml和103.13 copy/ml,二者差异有统计学意义(P＜0.01).其中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)( )、HBeAg( )模式组HBV-DNA阳性率最高(100%),平均病毒载量达107.05 copy/ml,其次为HBsAg( )、HBeAg( )、抗-HBc( )模式组,阳性率为97.0%,平均病毒载量为106.14 copy/ml.结论 HBeAg阳性模式HBV载量高于HBeAg阴性模式,HBeAg阳性可以在一定程度上提示病毒的复制状况.