电化学发光免疫法与酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒血清标志物的结果分析

目的分析电化学发光免疫法(ECLIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物的效果。方法回顾性分析同期16 451例ELISA法检测及15 541例ECLIA法检测的HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe、抗-HBc的结果,并收集205名临床患者的血清标本,采用2种方法检测,用Kappa检验判断各方法学检验结果的一致性程度。结果 ECLIA和ELISA法检测HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe和抗-HBc的符合率分别为100%,94.6%,92.2%,82.4%和74.6%。结论 ECLIA法与ELISA法检测HBV标志物符合率较好,但ECLIA法为半定量检测,敏感度更高,更适于在血站筛查以及临床手术等对结果极为敏感的情况下应用。     

3种方法测定低浓度乙型肝炎病毒表面抗原效果评价

目的 评价电化学发光免疫分析法(ECLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)法及金标法分别测定低浓度组乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的临床效果.方法 采用ECLIA法、ELISA法及金标法测定乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量检测阳性患者的HBsAg低浓度组.用ELISA法及金标法同时测定经ECLIA法筛选的HBVDNA定量检测阳性患者HBsAg模式如下的临床标本:HBsAg COI在1～50的临床标本60例,HBsAg COI小于1的临床标本20例作为阴性对照,广东省临床检验中心提供的临界值控制品作为质控.结果 ECLIA法测定灵敏度为0.08 ng/ml,HBsAg的批内CV为2.35%;ELISA法测HBsAg灵敏度为0.7 ng/ml,批内CV为15.9%,金标法灵敏度1 ng/ml.60例ECLIA法检测阳性标本中ELISA法检出阳性为28例,金标法检出阳性为20例.结论 在低浓度的HBsAg检测中,需运用ECLIA法检测,以最大程度地减少假阴性结果,并针对临床患者在感染不同时期出现不一致的ELISA及金标法检测结果进行合理解释.     

ELISA法和电化学发光免疫法检测血清HBsAg结果比较分析

目的对酶联免疫吸附试验（ELISA）和电化学发光免疫法（ECLIA）检测血清中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）结果进行比较分析。方法采用ELISA和ECLIA 2种方法分别检测8 913例血清中的HBsAg。结果 ELISA法和ECLIA法检测出的总阳性数和总阳性率分别为519例占5.82%,451例占5.06%;以ECLIA法为参照,ELISA法假阴性率为0.67%,假阳性率为1.43%,相对敏感性为88.3%,相对特异性为98.5%二者的符合率为97.9%;403例阳性标本用ECLIA法复检,ELISA法的假阳性率为11.9%,相对敏感性为100%,相对特异性为50%,二者的符合率为88.1%;116例弱阳性标本用ECLIA法复检,ELISA法的假阳性率为69%,相对敏感性为100%,相对特异性为50%,二者的符合率为31%;8 394例阴性标本用ECLIA法复检,ELISA法的假阴性率为0.71%,相对敏感性为50%,相对特异性为100%,二者的符合率为99.3%。结论血清HBsAg ELISA法检测存在一定的假阴性率和假阳性率,敏感性和特异性较ECLIA法差,且随HBsAg浓度变化较大。ECLIA法快速、准确、敏感性、特异性更高。     

单人份核酸检测在血液乙型肝炎病毒筛查中的应用

目的 通过对血液标本的核酸和血清学的检测(NAT)结果进行比较分析,从而探讨核酸检测在血液病毒筛查中的作用.方法 对血液标本进行血清学和核酸检测.使用诺华诊断血液筛查系统对标本进行单人份核酸检测.如标本核酸检测为阳性,则需要对标本进行鉴别;鉴别结果为HBV DNA标本,采用电化学发光法进一步检测乙型肝炎血清标志物五项.结果 10 127例血液标本中检测出NAT(+)标本30例,其中NAT(+)、ELISA(-)的标本12例,ELISA漏检率为1.18‰,鉴别后有6例标本为HBV DNA(+)、ELISA(-),乙型肝炎血清标志物五项为全阴性或抗-HBc(+),未检出HIV RNA或HCV RNA;另有7例标本为NAT(-)、ELISA双试剂(+),其中3例为HBsAg(+),4例为抗-HCV(+).结论 核酸检测可以有效降低酶联免疫法漏检造成的输血风险,但其也存在漏检的情况,因此核酸检测和血清学检测相结合可作为血液筛查检测中的重要手段.     

电化学发光法检测HCV抗体可靠性分析

目的评价电化学发光法检测丙型肝炎病毒IgG型抗体的可靠性。方法用Roche E601测定新鲜患者标本和质控品的HCV-Ab,通过分析精密度、准确度、阴性和阳性符合率、检测低限、阴性标本可靠性等性能指标评价该检测系统测定HCV-Ab结果的可靠性。结果低、高值标本批内、批间精密度的变异系数(CV)均比厂家要求小;60个室间质评样品检测结果中,HCV抗体阴性符合率为100%(40/40)、阳性符合率100%(20/20);该系统的检测临界值为0.004NCU/ml;40份HCV抗体浓度在0.8COI1.0(接近临界值)且HCV RNA检测结果均小于5.0×102的患者样本,用该检测系统检测均为阴性,阴性标本可靠性为100%。结论该检测系统检测丙型肝炎病毒抗体的性能能够满足临床要求。     

高敏发光技术定量检测乙型肝炎病毒表面抗原的临床应用

选取2014年~2015年我院的临床常规标本中纳入137例阴性标本和188例潜在干扰标本,验证该技术定量检测HBs Ag的基本性能:包括重复性,功能灵敏度,线性与准确性。两个浓度下的日内、日间精密度相比较,差异具有统计学意义(P0.05);功能灵敏度达0.004ng/ml;在0-1150ng/ml范围内呈现较好的线性相关性(低浓度:y=3.264x+0.079,r=0.995和高浓度:y=2301.581x-33.001,r=0.998);HISCL检测HBs Ag系统能够准确评价CAP质控品结果,其符合率达100%。HISCL检测HBs Ag系统具有HBs Ag定性与定量检测的性能,可满足临床检测宽线性范围与检测快速的要求。     

乙型肝炎病毒表面抗原定量检测方法的改进

目的探索当前乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定量方法检测不准的原因并找出解决办法。方法将自配的HBsAg定量稀释液应用于HBsAg稀释定量中,与原方法进行了对比,并做了线性范围、精密度、回收试验、线性相关等方法评价试验。结果本研究发现了HBsAg管状颗粒干扰和抗原过剩是测不准的2个重要原因,找到了可使管状颗粒解聚的稀释液,建立了改进的定量方法。通过先行稀释测量,解决了抗原过剩的干扰,稀释线性良好。建立了血样直接测量的校正公式,从而解决了HBsAg管状颗粒的干扰。通过方法评价试验,测出了改进的电化学发光法方法的线性范围为0.1~250 U/mL,平均精密度为1.9%,平均回收率为97.4%。结论改进法准确性达到了临床要求,可作为HBsAg定量方法推广应用。     

电化学发光法和酶联免疫法检测低水平HBsAg

目的比较电化学发光免疫分析(electro-chemiluminescence immunoassay,ECLIA)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测低值乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的结果,为选择最佳临床检测策略提供依据。方法先以时间分辨免疫荧光(time resolved fluorescence immunoassay,TRFIA)试剂盒进行血清标本HBsAg定量,再分别用ECLIA进口试剂盒、ELISA国产试剂盒做定性检测,并对结果进行统计分析。结果在348例TRFIA法检测乙肝病毒表面抗原浓度介于(0.5～1.0)ng/ml的临床标本中,ECLIA和ELISA 2种方法检测HB-sAg皆为阳性的有310例;电化学发光检测阳性有340例,ELISA检测阳性有312例,二者阳性符合率90.8%。对32例二者不符合的标本用时间分辨免疫荧光分析复查,ECLIA(+)ELISA(-)的30例TRFIA复检仍为阳性;ECLIA(-)ELISA(+)的2例TRFIA复检亦为阳性。ECLIA与ELISA在对低水平HBsAg的检出差异有统计学意义(χ2=22.781,P<0.01)。结论 ECLIA比ELISA的特异性好和敏感度高。在临床诊治与检测低水平的乙肝病毒携带者建议用具有更高灵敏度和特异性的方法。     

乙型肝炎病毒携带孕产妇的产程观察与护理

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)携带孕产妇的产程观察与护理。方法:选取2014年6月~2016年5月我院收治的HBV携带孕产妇90例,随机分为对照组和观察组各45例。对照组予以常规护理,观察组在对照组基础上予以产程观察并加强护理,比较两组孕产妇护理满意度及新生儿HBV阳性率。结果:干预后,观察组新生儿HBV阳性率低于对照组(P<0.05);观察组护理满意率高于对照组(P<0.05)。结论:HBV携带孕产妇分娩过程中加强产程观察及护理,可减少新生儿HBV感染发生率,提高护理满意度。     

电化学发光法检测肿瘤标记物的探讨

肿瘤标志物（TumorMarker）顾名思义是反应肿瘤各项指标的物质。肿瘤标志物一般不存在于正常的人体组织,仅见于胚胎组织,由于肿瘤细胞的无限增殖使其原始细胞增多,这些肿瘤标志物也超出了正常组织的含量,从而提醒了胂瘤存在的形态、方式、肿瘤的分化情况及愈后情况等”。故检测人体中肿瘤标志物的含量可以监测病人病情以及观察治疗的效果。临床实验室用于检测肿瘤标志物的方法主要包括酶联免疫分析、化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析等,而电化学发光免疫分析测量技术,具有更高灵敏度、稳定性和无放射性污染等优点,相对于其他传统方法具有较大的优势。下面从几个具体的试验比如回收实验和精密度实验,并采用对10份合格血清标本的AFP含量进行对比实验检测,并对检测结果进行了统计分析和比较,旨在进一步了解电化学发光免疫分析法对肿瘤标志物检测的影响嘲以及EcLIA和其他传统的检测方法的差异,从而提高肿瘤标志物的检测率,以提高服务的质量。     

时间分辨免疫荧光法和电化学发光法检测HBsAg的对比分析

目的用电化学发光法作为标准,探讨时间分辨免疫荧光法在检测HBsAg上的应用。方法对临床348份血清标本、一份HBsAg高值梯度稀释血清及生物制品检定所标准血清分别用电化学发光法和时间分辨免疫荧光法分别检测,比较两种方法检测结果的阴阳性符合率、灵敏性、特异性、准确性、线性范围以及阳性标本的定量相关性等。结果对临床348份血清检测结果阴阳性符合率为98.26%;阳性标本的定量相关性为γ=0.9641(P<0.001);两种方法的线性范围,时间分辨免疫荧光分析法约为1:2～1:2048(0.21～223.07ng/ml),电化学发光约为1:2～1:4096(0.15～223ng/ml)。结论时间分辨免疫荧光法与电化学发光法在HBsAg的定量检测上的灵敏性、准确性和线性范围都基本相当。     

乙型肝炎感染者不同血清标志物HBV DNA的表达及意义

目的探讨血清HBV DNA水平与HBV标志物（HBVM）表现模式的相关性。方法血清HBV DNA定量榆测采用PCR ELISA法，HBVM采用ELISA法。结果在HBVM阳性的430例血清中，有232例HBVDNA阳性，占54，0％。血清HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性者HBVDNA阳性率占94．8％，≥106copies／ml占65．9％；HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性者HBV DNA阳性占29．4％，≥106copies／ml占17，5％。结论血清HBVM阳性患者中约54．0％的血清HBV DNA阳性，且HBeAg阳性患者中HBV DNA含量及阳性率明显高于抗-HBe阳性者；在抗-HBs、抗-HBc阳性或HBsAg阴性者血清内也有HBVDNA阳性者。     

乙肝病毒携带孕产妇心理状态的质性研究

目的了解乙肝病毒携带孕产妇的心理状态。方法采用深度访谈法收集12名产妇的资料,并用现象学分析法进行分析。结果乙肝病毒携带孕产妇因自身和家属疾病认知水平低下,影响着母亲角色的良好适应,母婴传播的风险又让她们充满困惑。结论对乙肝病毒携带孕产妇及其家属提供专业信息支持,呼吁社会共同关注,让乙肝病毒携带孕产妇走出困惑,促进母婴健康。     

乙型肝炎病毒前C区基因变异检测及意义

目的　用PCR产物直接测序法检测乙型肝炎病毒前C区基因变异,以指导临床合理使用抗病毒药物。方法　应用套式聚合酶链反应扩增包括前C区基因在内的DNA片段,采用Sanger双脱氧链末端终止法,在ABIPRISM310型核苷酸序列分析仪上直接测序。结果　对8例临床标本进行测序,检出5例G     

乙型肝炎及丙型肝炎病毒对肝细胞癌临床病理特征及预后的影响

目的：探讨乙肝病毒及丙肝病毒感染对肝细胞癌的临床病理特征及预后的影响。方法：收集1995—2000年在复旦大学肝癌研究所行手术切除的355例肝细胞癌患者临床病理资料及术后随访资料。其中乙肝相关肝细胞癌163例（HBV组）,丙肝相关肝细胞癌73例（HCV组）,119例非病毒相关肝细胞癌作为对照组（NBNC组）,分析乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒对肝细胞癌的临床病理特征及预后的影响。结果：临床病理特征：乙肝相关肝细胞癌患者年龄轻,男性患者比例高,甲胎蛋白（AFP）均值高;丙肝相关肝细胞癌患者年龄最大,术前丙氨酸氨基转移酶（ALT）升高伴白蛋白降低者比例高,体检发现的小肝癌居多,肿瘤分期相对较早;NBNC组患者由于无肝病背景,往往缺乏定期体检,多因出现临床症状就诊,故发现时以大肝癌为主,合并血管侵犯,肿瘤突破包膜者比例高。术后生存情况：HBV-HCC组患者中位生存期为15个月,1-,3-,5～7-年生存率分别为：71.0%,34.0%,30.7%和11.53%;HCV-HCC组中位生存期为19个月,1-,3-,5～7-年生存率分别为90.3%,68.2%,41.9%和31.41%。提示丙肝病毒相关肝细胞癌总体预后好于乙肝病毒相关肝细胞癌（χ2=10.92,P〈0.001）。多因素分析提示病毒感染类型是肝细胞癌预后的独立影响因素。相对于无病毒感染肝细胞癌患者而言,乙肝相关肝细胞癌术后死亡的风险是前者的1.5倍（P=0.03）,而丙肝相关肝细胞癌术后死亡的风险是其0.85（P=0.58）。结论：乙肝病毒与丙肝病毒相关肝细胞癌的临床病理特征及预后有显著差异。丙肝相关肝细胞癌总体预后好于乙肝相关肝细胞癌。     

乙型肝炎病毒特异性CTL表位变异分析

目的初步调查乙型肝炎病毒(HBV)特异性CTL表位的序列特点,同时探讨乙型肝炎重症化和慢性化的可能机理。方法本研究采用PCR扩增法获取HBV全基因并测序,参考国外文献报道的17个热点HBV特异性CTL表位氨基酸序列,分析其与本文获得的CTL表位氨基酸序列的差别。对患者各个表位变异的差异进行卡方检验。结果获得46份HBV全基因组序列,急性乙型肝炎(AHB)15例,慢性乙型肝炎(CHB)18例,慢性重型乙型肝炎(CSHB)13例。其中40份属于B基因型,6份属于C基因型。对17个表位进行分析发现,B基因型中变异较大的表位有S183-191,S382-390,C18-27,X36-44,X52-60和X115-123;C基因型中有P816-824,C18-27,X36-44,X52-60和X115-123。P816-824表位在CHB和CSHB组的变异率为27.8%和46.2%,显著高于AHB组(0%,P0.01);C23-31表位在CHB组的变异率为22.2%,显著高于AHB和CSHB组(0%,0%,P0.05)。结论了解HBV CTL表位序列特点,分析其与文献报道的CTL表位的差异情况,对防治乙型肝炎的重症化和慢性化具有指导意义。     

乙型肝炎病毒基因变异对干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效的影响

目的：探讨乙型肝炎病毒基因不同位点变异及基因型对干扰素疗效的影响。方法：研究17例HBeAg阳性慢性乙型肝炎病人的临床表现、生化、血清学和病毒学指标，并分析这些病人干扰素治疗(IFN-α2b 3MU，每周三次，疗程6个月)前血清标本中的病毒X基因和前c／c基因的DNA序列。结果：所有发生T^1762-A^1764突变的5例病人对干扰素治疗均有应答，而其余12例病人中仅2例有应答。在5例既有前c区A^1896变异又有c区抗原决定簇aa107—118变异的病人中，4例无应答，1例有应答。其他3例有A^1896位点变异的病人中，2例同时伴有1～2处淋巴细胞表位变异的病人有应答，而1例伴有5处淋巴细胞表位变异的病人无应答。应答的血清HBV DNA复制水平低而抗HBc—IgM滴度高。所有病人的血清HBV DNA基因型均为B型或C型。结论：提示HBV基因变异、血清病毒载量和抗HBc—IgM滴度等可能是干扰素治疗效果的预测指标，但有待临床和实验室研究的进一步验证。     

血友病A患者血制品治疗后HBV和HCV感染指标分析

目的对血友病A患者替代治疗后血液传播乙型、丙型肝炎病毒(HBV、HCV)的感染指标进行检测。方法对经本院确诊的35例血友病A患者采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗-HCV、HBV六项指标。结果 35例血友病A患者的抗-HCV阳性率为88.6%,输血次数和输注血液制品为主的种类与患者抗-HCV阳性率有相关性(P<0.01)。HBV六项指标检查,其中5例患者抗-HBe阳性(占14.3%),明显低于抗-HCV阳性率。结论血友病A患者替代治疗输血次数越多,感染风险越大,而较少输注以冷沉淀为主的血液制品的患者,其感染风险相对较小,且目前HCV感染率明显高于HBV感染率。     

慢性HBV携带者的肝组织损伤研究

目的:分析慢性HBV携带者的肝组织病理改变,为慢性HBV携带者的诊治提供依据。方法:113例慢性HBV携带者进行肝组织学检查和血清学、病毒核酸检测。结果:57.52%的慢性HBV携带者肝组织炎症(G)在2级以上,HBeAg阴性携带者G≥2占70.59%,符合抗病毒治疗指征。肝组织炎症活动程度分级与HBV-DNA滴度无相关性(P>0.05),肝组织炎症分级与纤维化分期显著相关(χ2=51.589,P<0.001)。结论:对慢性HBV携带者应建议行肝脏穿刺检查,尤其是HBeAg阴性的慢性HBV携带者,以提高诊断的准确性并进行合理治疗。     

反向斑点杂交技术检测HBV基因型方法的评价

目的评价用于检测乙型肝炎病毒（HBV）基因型的反向斑点杂交（RDB）方法。方法应用RDB检测723例HBV阳性标本的HBV基因型。其中对423例HBV序列测序结果清晰可读的样本进一步使用NCBI在线数据库分析、系统进化法分析其HBV基因型,并与RDB法结果进行比较。将样本HBV序列与所用的探针序列进行比对,以评价单个碱基突变对该方法的影响。结果 RDB法检测的检出率为97.6%。RDB检测结果与NCBI在线数据库分析法的一致性为98.8%;与系统进化分析法一致性为100%。与对应探针有1个碱基差异的HBV A型1例、B型12例、C型46例和D型1例均被成功检出。结论 RDB是一种灵敏、准确、有效,且具有很高临床应用价值的HBV基因型检测方法。单碱基的突变不会影响其对HBV的分型结果。