Slit2蛋白对TNF-α诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖迁移的影响

目的：观察Slit2蛋白对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖迁移的影响。方法采用川北医学院第二临床医学院实验室培养的大鼠VSMCs ,实验分两部分,第一部分：Slit2单独作用,分为正常对照组和实验组（Slit2蛋白浓度分别为：50、75、100、125、150 ng／mL）;第二部分：Slit2与TNF‐α共同作用,分为正常对照组、阳性对照组（含TNF‐α10 ng／mL）和实验组（TNF‐α10 ng／mL＋Slit250 ng／mL、TNF‐α10 ng／mL＋Slit275 ng／mL、TNF‐α10 ng／mL＋Slit2100 ng／mL、TNF‐α10 ng／mL＋Slit2125 ng／mL、TNF‐α10 ng／mL＋Slit2150 ng／mL）。分别采用CCK‐8及transwell小室法检测各组细胞的增殖及迁移能力。结果第一部分：实验组与对照组OD值及迁移细胞数目比较差异均无统计学意义（P＝0．516,P＝0．52）。第二部分：正常对照组与阳性对照组比较细胞迁移数目差异有统计学意义（P＝0．00）,实验组细胞迁移数较阳性对照组明显减少;CCK‐8结果显示实验组和阳性对照组与正常对照组OD值比较差异有统计学意义（P＜0．05）,而实验组与阳性对照组OD值比较差异无统计学意义（P＝0．173）。结论 Slit2对VSMCs增殖无影响,但能抑制TNF‐α诱导的VSMCs迁移。     

TNF-α所致的胰岛素抵抗

胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)是指一定量的胰岛素与其特异性受体结合后生物效应低于正常。表现为外周组织，尤其是脂肪、肌肉组织对葡萄糖的摄取减少和抑制肝脏葡萄糖输出的作用减弱。IR作为2型糖尿病(tyloe 2 diabetes，T2DM)发展过程中一个早期和重要的特征，同时也是动脉硬化和x综合征(syndrome X)的重要危险因素．     

胰岛素对大鼠血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨胰岛素对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响 .方法　体外进行大鼠血管平滑肌细胞的培养 ,以 5～ 10代细胞为实验对象 ,随机分成空白对照组和胰岛素组 ,胰岛素组又按浓度 1× 10 - 9、1× 10 - 8、1× 10 - 7和 1× 10 - 6 mol· L- 1分为 4小组 ,在加药后 2 4 h、4 8h和 72 h用 MTT法分析细胞增殖活力 ,免疫细胞化学观察细胞核增殖抗原 (PCNA)的表达 ,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的 d UTP缺口末端标记法检测 H2 O2 诱导的细胞凋亡 .结果　加药 4 8h后 ,1× 10 - 9mol· L- 1胰岛素组的 MMT A值 (0 .4 2± 0 .0 4 )高于空白组(0 .30± 0 .0 2 ) ,P<0 .0 5 ,低于 1× 10 - 6 mol· L- 1 胰岛素组(0 .5 2± 0 .0 5 ) ,P<0 .0 5 ;1× 10 - 9mol·L- 1胰岛素作用 4 8h后细胞的 MMT A值比空白组增加 4 0 % ,高于 2 4 h细胞的MMT A值增加率 (2 7% ) ,P<0 . 0 5 ;1× 10 - 9～ 1× 10 - 6mol· L- 1 胰岛素作用 4 8h后细胞 PCNA的表达率 (5 0 %～80 % )均高于空白对照组的 (30 % ) P<0 .0 5 ;加药 2 4 h后 ,1× 10 - 6 mol· L- 1胰岛素组细胞凋亡率 (30 % )低于空白组(70 % ) P<0 .0 5 .结论　胰岛素有明显促 VSMC(vascularsmooth m uscle cells)增殖的作用 ,并且这种作用时间和浓度依赖性 ;同时胰岛素     

血清脂联素、TNF-α与胰岛素抵抗的相关性研究

目的研究正常人和2型糖尿病(T2DM)患者血清脂联素(APN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与胰岛素抵抗的相关性。方法选择20名非肥胖正常人和58例T2DM患者,后者按其体重指数(BMI)水平又分为正常体重组、超重组和肥胖组。测定正常人和T2DM各组患者的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),同时测定受试者空腹状态下血清APN、TNF-α、糖化血红蛋白、空腹血糖和胰岛素水平,分析这些参数在各组人群间的关系。结果与正常对照组相比,T2DM超重组和肥胖组的APN显著降低、TNF-α显著升高(均P<0.01),T2DM各组HOMA-IR显著升高(均P<0.01)。所有受试者APN与BMI和HOMA-IR成显著负相关;TNF-α和HOMA-IR成显著正相关。结论血清APN、TNF-α水平的改变与胰岛素抵抗显著相关。     

高糖对大鼠主动脉血管平滑肌细胞产生一氧化氮及其合酶活性的影响

目的：研究高糖对主动脉血管平滑肌细胞产生一氧化氮（ＮＯ）及其合酶（ＮＯＳ）活性的影响。方法：应用ＮＯ及ＮＯＳ试剂盒测定大鼠主动脉血管平滑肌细胞ＮＯ的含量及ＮＯＳ的活性。结果：高糖能显著抑制培养的平滑肌细胞ＮＯ的产生，并能明显降低ＮＯＳ的活性，具有浓度和时间效应。结论：高糖对平滑肌细胞产生ＮＯ的抑制可能是通过抑制其ＮＯＳ的活性而起作用的。     

L-精氨酸对兔血管平滑肌细胞体外增殖的影响

目的：探讨Ｌ－精氨酸抗动脉粥样硬化（ＡＳ）的作用机制。方法：观察Ｌ－ａｒｇ对兔血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）体外增殖的影响。结果：Ｌ－ａｒｇ显著增加一氧化氮（ＮＯ）含量,明显抑制ＶＳＭＣ,并呈剂量依赖性。加入单甲基－Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）,上述作用被逆转 。结论：Ｌ－ａｒｇ可显著抑制兔ＶＳＭＣ体外增殖,且此作用由Ｌ－ａｒｇ转则ａｒｇ抗ＡＳ的作用可能与此有关。     

镁对高脂高糖膳食诱导大鼠肥胖的影响及其机理探讨

探讨补镁对高脂高糖膳食诱导大鼠肥胖模型形成的影响及作用机制.方法 以雄性SD大鼠为实验对象,用高脂高糖诱导大鼠肥胖模型.将大鼠按体重随机分为6组:A组为普通饲料组、B组为低镁饲料组、C组为高脂高糖饲料组、D组为低剂量补镁组、E组为中剂量补镁组,F组为高剂量补镁组.第9周末处死动物,腹主动脉取血测血糖、血清TC、TG、HDL、VLDL,放射免疫法测血清胰岛素,免疫组织化学方法测定大鼠脂肪组织和骨骼肌肿瘤坏死因子-a(TNF-a)和骨骼肌一氧化氮合酶(NOS)表达.结果 膳食中补充镁的大鼠体重、脂体比、脂肪细胞面积低于高脂高糖饲料组(P相似文献   

一氧化氮合酶抑制剂L-NAME抗大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

许多血管性疾病的产生与一氧化氮(NO)生成不足有关,如:高血压、动脉硬化、PTCA术后再狭窄及与感染性休克相关的血管反应性降低等。NO是由细胞内的左旋精氨酸(L-arginine,L-Arg)经一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)作用而生成的。NO的合成可以被酶抑制剂NG-硝基L-精氨酸甲酯(L-NG-nitro-arginine methyl ester,L-NAME)、氨基胍(aminoguanidine)等抑制。 研究[1,2]发现,L-NAME可以升高大鼠的血压,但不伴心室肥大。因而推测L-NAME可能具有抑制细胞增殖的作用。Mabrouk等[3]在体外试验中证明,L-NAME可以抑制肠动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的     

三七总皂甙对兔高胆固醇血清刺激的兔主动脉平滑肌细胞增殖及其释放一氧化氮的影响

目的 :为观察tPNS对HCS刺激的RASMC增殖及其释放NO的影响。方法 :运用兔HCS刺激体外培养的RASMC而形成的细胞异常增殖为模型 ,通过MTT法、电镜观察和Green法 ,观察了tPNS对RASMC的保护作用及其对NO释放的影响。结果 :HCS可明显抑制NO的释放、刺激RASMC增殖并导致其表型的改变 ,而tPNS可诱导NO的释放 ,明显抑制HCS对RASMC的刺激增殖作用 ,与HCS组相比具有显著差异 (P <0 .0 1)。结论 :tPNS抗动脉粥样硬化作用可能部分是通过调节NO的合成而抑制RASMC增殖来实现的。     

黄酒对TNF-α诱导的大鼠血管内皮功能的影响

目的：探讨黄酒对TNF-α诱导的大鼠血管内皮功能的影响。方法大鼠原代主动脉血管内皮细胞（VECs）经分离培养及纯化鉴定后,取第3～4代细胞用于实验。不同浓度酒精（1.0%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%、2.0%）与50μg/L TNF-α共同孵育大鼠 VECs）48h,MTT 法检测酒类对细胞活性的影响,确定最佳干预浓度后分为对照组、TNF-α组、TNF-α＋瑞舒他汀组（10μmol/L）、TNF-α＋酒精组（0.5%、1.0%、1.5%）、TNF-α＋黄酒组（0.5%、1.0%、1.5%）,共9组。培养24h后收集样品,硝酸还原酶法测定培养液上清液NO的含量,化学比色法测定血浆中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性,免疫印迹法检测VECs中eNOS、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达量。结果与TNF-α组相比,瑞舒伐他汀组、黄酒1.0%组、黄酒1.5%组eNOS活力、eNOS的表达及NO含量升高（P＜0.01或0.05）,ICAM-1表达降低（P＜0.01或0.05）;与瑞舒伐他汀组相比,黄酒1.0%组及黄酒1.5%组eNOS表达降低,ICAM-1表达升高（P＜0.01或0.05）。结论小剂量黄酒能够增强eNOS的活力及其表达,可使NO含量增加,抑制ICAM-1表达,具有类他汀样作用。     

脑梗死患者肿瘤坏死因子α与胰岛素抵抗关系的研究

胰岛素抵抗 (ＩＲ)为心脑血管病共同的病理基础[1] ,探讨其原因具有重要的意义。研究表明 ,非胰岛素依赖型糖尿病(ＮＩＤＤＭ)患者的血清肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ α)水平与ＩＲ程度呈正相关[2 ] ,但有关脑梗死患者的血清ＴＮＦ α与ＩＲ关系的研究报道较少。为此 ,我们对动脉硬化性脑梗死患者ＴＮＦ α与ＩＲ的关系进行了研究。一、对象与方法1 对象 :(1 )脑梗死组 :1 997年 8月至 1 998年 2月在我院住院的急性期脑梗死患者 (发病 3ｄ) 6 7例 ,男 37例 ,女 30例 ,平均年龄 6 1岁± 1岁 ;恢复期脑梗死患者 (病期 2 8～ 35ｄ) 2 4例 ,男 1 6例…     

高胰岛素水平对血管平滑肌细胞NO生成的影响

培养大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）,检测高胰岛素（HI）对VSMC膜蛋白激酶C（PKC）活性的影响,并采用硝酸还原酶法和免疫印迹法检测HI加或不加PKC抑制剂－H7对脂多糖（LPS）＋γ－干扰素（γ－IFN）诱导NO生成和一氧化氮合酶（iNOS) 表达的影响。结果：HI预处理的VSMC,膜PKC活性明显高于对照（P＜0．05）,LPS＋γ－IFN诱导NO生成显著低于对照（P＜0．01）,加H7培育,NO的生成量较HI处理组明显提高,但低于对照（P＜0．01）。免疫印迹示HI处理的VSMC,iNOS表达下降,提示：高胰岛素血症可能通过激活VSMC膜PKC,部分抑制iNOS表达,减少NO产生。     

胰岛素下调AP-1抑制血管平滑肌α肌动蛋白的表达以及对细胞增殖的影响

目的研究胰岛素诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)转录因子激活蛋白-1(activator protein 1,AP-1)表达下调对VSMC表型转换标志蛋白α肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,SM-α)表达调控及细胞增殖的影响。方法流式细胞术检测不同浓度(0、25、50、100、125 nmol/L)的胰岛素刺激VSMC 24 h后的细胞周期。设计AP-1表达质粒载体,转染至血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)。分为4组:空白对照组、胰岛素实验组、AP-1表达载体组、胰岛素+AP-1表达载体组。分别采用Western blot、RT-PCR检测AP-1蛋白及SM-α蛋白的表达及mRNA水平。结果细胞周期分布结果显示,不同浓度的胰岛素刺激VSMC 24 h后,VSMC的S期百分比升高至峰值后开始下降[(23.49±1.17)%、(28.08±0.68)%、(30.44±1.77)%、(47.47±0.88)%、(46.23±1.65)%,P<0.05],100 nmol/L的胰岛素刺激VSMC 24 h后,VSMC的S期百分比达到峰值(47.47±0.88)。RT-PCR及Western blot检测结果显示,胰岛素刺激VSMC可下调AP-1[(0.47±0.09)、(0.46±0.14),P<0.05]及抑制SM-α的表达[(0.41±0.03)、(0.32±0.03),P<0.05]。结论胰岛素能下调转录因子AP-1表达,进而抑制表型转换标志蛋白SM-α的表达,诱导VSMC发生增殖。     

重组人白介素10对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察重组人白介素10(rhIL-10)对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。方法：离体培养大鼠胸主动脉VSMC并分别接受不同浓度rhIL-10,肿瘤坏死因子（TNF－α），血小板源性生长因子（PDGF－BB）的刺激，采用MTS／PES法确定VSMC的增殖状态并与对照组比较。结果：与对照组相比，TNF－α和PDGF－BB均对VSMC增殖具有明显的刺激作用（P＜0．05）。单独应用rhIL-10对血管平滑肌细胞生长没有影响。在TNF－α和PDGF－BB分别刺激下，rhIL-10均可抑制VSMC的生长（P＜0．05）。结论：rhIL-10可抑制细胞因子和生长因子诱导的VSMC增殖。     

尼群地平对猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响

观察不同剂量的尼群地平对培养的猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响。结果表明：不同剂量的尼群地平对平滑肌细胞增殖的抑制作用汪样，最佳剂量为２．５μｇ／ｍｌ     

重组人白介素10对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察重组人白介素１０（ｒｈＩＬ－１０）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响。方法 离体培养大鼠胸主动脉 ＶＳＭＣ并分别接受不同浓度ｒｈＩＬ－１０、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ－ＢＢ）的刺激,采用ＭＴＳ／ＰＥＳ 法确定ＶＳＭＣ的增殖状态并与对照组比较。结果　与对照组相比,ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ均对ＶＳＭＣ增殖具有明显的刺 激作用（Ｐ＜０．０５）。单独应用ｒｈＩＬ－１０对血管平滑肌细胞生长没有影响。在ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ分别刺激下,ｒｈＩＬ－１０均可 抑制ＶＳＭＣ的生长（Ｐ<０．０５）。结论　ｒｈＩＬ－１０可抑制细胞因子和生长因子诱导的ＶＳＭＣ增殖。     

大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响并探讨其作用机制?方法:分离大鼠胸主动脉,组织贴块法培养VSMC,以AngⅡ为诱导剂,建立VSMC细胞增殖模型?应用MTT法,CellTiter-Glo■ Assay法检测细胞增殖,观察不同浓度的大豆异黄酮及亚硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对AngⅡ诱导的VSMC增殖的影响?硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)含量;化学比色法测定一氧化氮合酶(NOS),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平;半定量RT-PCR检测VSMC iNOS mRNA的表达?结果:大豆异黄酮能剂量依赖性的抑制VSMC增殖,该作用可被L-NAME部分抵消;大豆异黄酮能升高NOS?iNOS和NO水平,增加iNOS mRNA的表达?结论:大豆异黄酮可呈剂量依赖性的抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖,该作用可能通过上调iNOS基因表达?升高NO水平实现的?