hsa-miR-126和hsa-miR-518b在食管鳞癌中的表达

目的探讨食管鳞癌及正常组织微小RNA(miRNA)分子表达谱的差异,寻找并验证具有差异表达的miRNA。方法随机选3例首次诊治食管鳞癌患者的手术切除标本,取癌组织及正常粘膜。采用荧光探针杂交芯片扫描技术,获得食管鳞癌miRNA表达谱,并对表达谱的可靠性进行荧光实时定量RT-PCR验证。另取15例首次诊治食管鳞癌患者手术切除标本的癌组织及正常粘膜,对其中具有表达差异的hsa-miR-126和hsa-miR-518b进行进一步验证。结果得到了食管鳞癌及正常组织的MicroRNA表达谱,分析得到表达变化且具有统计学意义(单侧t检验,P<0.05)的miRNA11个,其中上调1个,下调10个。在另外15对验证样本中,hsa-miR-126上调10例(配对t检验,P<0.05),hsa-miR-518b下调12例(配对t检验,P<0.05)。结论 hsa-miR-126和hsa-miR-518b在食管鳞癌组织和正常组织中存在差异表达,hsa-miR-126在食管癌组织中上调,hsa-miR-518b下调。     

肾透明细胞癌差异表达miRNAs的筛选

目的：筛选肾透明细胞癌组织差异表达的miRNAs,并分析其与可能的靶基因作用调控关系。方法：收集8例新鲜的肾透明细胞癌及其癌旁正常肾组织,抽提总RNA,并行Hy3荧光标记,将标记的小RNA与包含1891条探针的miRNA芯片进行杂交,再扫描及数据分析处理。 miRNA芯片结果的可靠性采用RT-PCR方法验证。结果：肾透明细胞癌组织与癌旁正常肾组织比较,存在较多明显差异表达的miRNAs,其中上调miRNAs 106个、下调miRNAs 184个,其中111个miRNAs为16.0版miRNA芯片新增的;显著上调的miRNAs 3个、下调的miRNAs 38个。结论：肾透明细胞癌组织的miRNA表达谱有较强特异性,其与可能的靶基因调控关系复杂,其中miR-155、miR-141、miR-200c及let-7家族等与肾透明细胞癌的发病密切相关。     

探讨miRNA-193b和miRNA-100在乳腺癌中的差异表达

目的 采用已知的miRNA(microRNA)基因中选定的目标基因,筛选与乳腺癌相关miRNAs,并采用 real time-PCR方法验证基因,探讨其在乳腺癌发生发展中的作用,研究结果为探明miRNA在乳腺癌中的差异表达及乳腺癌的基因诊断和治疗提供实验依据.方法 收集乳腺癌组织及对照的癌周组织10对,分别提取RNA.对乳腺癌中的差异表达miRNA基因进行验证.从中选取表达上调明显的miRNA-193b及下调明显的miRNA-100,采用实时定量PCR技术进一步验证结果.结果 证实miRNA的real time-PCR结果与已知基因结果基本吻合,miR-193b是乳腺癌中上调的miRNA基因,miR-100是乳腺癌中明显下调的miRNA基因.结论 对miRNA基因与乳腺癌的关系有进一步深入了解,相对于癌周组织进一步验证了1个表达上调和1个表达下调的miRNA基因,表达上调基因可能为潜在的致癌基因,表达下调基因可能为潜在的抑癌基因.     

子宫内膜样腺癌组织中microRNA差异表达谱分析

目的 探讨子宫内膜样腺癌组织与正常内膜组织中的microRNA(miRNA)表达谱及表达差异,分析差异miRNA在子宫内膜样腺癌发病过程中的作用。方法 使用microRNA芯片筛选出子宫内膜样腺癌组织中差异表达明显的miRNA,使用实时定量逆转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)验证后,通过预测网站预测其靶基因。应用微阵预测分析(PAM)工具预测一组可用于区分不同分化子宫内膜样腺癌的miRNA。结果 共有18个miRNA在子宫内膜样腺癌中表达明显上调,31个明显下调。PTEN、FOX家族等52种基因被预测为差异表达的miRNA的靶基因。mir-200c等9种miRNA被预测为一组可区分不同分化子宫内膜样腺癌的生物标记。结论 筛选出多种子宫内膜样腺癌中有特殊研究价值的miRNA预测靶基因,为子宫内膜样腺癌的进一步研究提供了有效的依据。     

Expression and clinical signifcance of tight junction proteins(occludin and ZO-1) in human esophageal squamous cell carcinoma

目的 探讨紧密连接蛋白occludin及ZO-1在食管鳞状细胞癌及手术切缘正常食管黏膜组织中的表达及其临床意义.方法 采用组织芯片和免疫组化法检测49例食管鳞状细胞癌患者的癌组织及手术切缘正常食管黏膜组织(距肿瘤组织＞5 cm)中occludin和ZO-1的表达,分析食管鳞状细胞癌癌组织中occludin、ZO-1表达与肿瘤的增殖、侵袭和转移之间的关系.结果 食管鳞状细胞癌组织中occludin及ZO-1的阳性表达明显低于手术切缘正常食管粘膜组织 (P＜0.01),且癌组织中occludin、ZO-1的表达与其分化程度及淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 食管鳞状细胞癌的occludin和ZO-1的表达下调或缺失与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移有关,在食管癌的进展中起重要作用.     

食管鳞状细胞癌中紧密连接蛋白occludin、ZO-1的表达及其临床意义

目的探讨紧密连接蛋白occludin及ZO-1在食管鳞状细胞癌及手术切缘正常食管黏膜组织中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片和免疫组化法检测49例食管鳞状细胞癌患者的癌组织及手术切缘正常食管黏膜组织(距肿瘤组织>5 cm)中occludin和ZO-1的表达,分析食管鳞状细胞癌癌组织中occludin、ZO-1表达与肿瘤的增殖、侵袭和转移之间的关系。结果食管鳞状细胞癌组织中occludin及ZO-1的阳性表达明显低于手术切缘正常食管粘膜组织(P<0.01),且癌组织中occludin、ZO-1的表达与其分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌的occludin和ZO-1的表达下调或缺失与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移有关,在食管癌的进展中起重要作用。     

P53和CD44v6在食管鳞癌中的表达及其临床病理意义

目的 探讨P53和CD44v6在食管鳞状细胞癌中的表达及与临床病理参数之间的关联性,并分析其与肿瘤浸润转移的关系.方法 制作组织芯片并应用免疫组织化学PV-9000二步法检测52例食管鳞状细胞癌组织和18例食管炎症炎组织中P53及CD44v6的表达,采用SPSS19.0统计软件分析各临床病理参数之间的关系,并探讨P53和CD44v6之间的关联性.结果 P53和CD44v6在食管鳞癌中的表达高于在食管炎组中的表达（P＜0.05）,且在伴有淋巴结转移的鳞癌病例中的阳性率远高于其在无淋巴结转移组中的阳性率（P＜0.05）;P53和CD44v6在食管鳞状细胞癌中的表达无明显相关性（r=0.202,P＞0.05） 结论 P53和CD44v6在食管鳞状细胞癌中表达明显上调,其高表达预示转移性大及预后较差.     

转化生长因子β 1 (TGF-β 1)对胃癌细胞microRNA表达谱的影响

 目的 探讨转化生长因子β 1 (transforming growth factor β 1,TGF-β 1)对胃癌细胞BGC823 microRNA (miRNA)表达谱的影响及其意义。方法 应用microRNA芯片检测TGF β1处理胃癌细胞BGC823前后的miRNA表达谱;对miRNA 表达谱进行差异性分析;实时荧光定量RT PCR验证差异表达的miRNA;用生物信息学技术分析差异表达miRNA可能调控的靶基因及其意义。结果 TGF-β1处理胃癌细胞BGC823 24 h 和36 h后,miRNA的表达谱存在6个相同的差异表达miRNA,包括3个(miR-27a,miR-29b 1和 miR-194)表达上调,3个(miR-193b,miR-574 3p和miR-130b)表达下调。实时荧光定量RT-PCR结果与芯片一致。结论 TGF-β 1能够影响胃癌细胞miRNAs的表达,这些上调或下调表达的miRNAs可能参与了胃癌的浸润转移。     

上皮细胞钙粘附蛋白和血管内皮生长因子在食管鳞状细胞癌组织中的表达及两者的相关性

目的：探讨上皮细胞钙粘附蛋白（E-cadherin）和血管内皮生长因子（VEGF）在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与食管鳞状细胞癌侵袭转移和预后的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测40例食管鳞状细胞癌标本中E-cadherin和VEGF的表达水平,结合临床资料进行分析。结果：在食管鳞癌组织中E-cadherin阳性率为27.5%,低于食管正常粘膜组织（P＜0.01）;VEGF阳性率为78.0%,高于食管正常粘膜组织（P＜0.01）;E-cadherin的低水平表达、VEGF的阳性表达与食管鳞癌的浸润深度及淋巴结转移显著相关,E-cadherin与VEGF的表达强度之间呈明显的负相关（rs＝-0.4460,P＜0.01）。结论：E-cadherin和VEGF的共同参与食管鳞状细胞癌的浸润转移过程,二者是判断食管鳞癌的生物学行为及患者预后的重要因素。     

乳腺癌差异表达的MicroRNA的筛选研究

 【目的】 应用miRNA芯片技术筛选乳腺癌及癌旁组织差异表达的miRNA,发现与乳腺癌相关的miRNA,为进一步阐明其在乳腺癌发病机制中的作用打下基础。【方法】 收集8例新鲜的乳腺癌及其癌旁组织,抽提总RNA并分离出小RNA进行Cy3荧光标记,将标记的小RNA在miRNA芯片上进行杂交反应,应用实时定量RT-PCR方法验证miRNAs芯片结果的可靠性。【结果】 对芯片数据进行SAM分析,结果筛选获得16个乳腺癌相关miRNAs, 相对于癌旁组织,在乳腺癌组织中9个miRNAs表达上调,7个miRNAs表达下调。其中显著上调的有miR-21,miR-365,显著下调的有miR-497,miR-31。【结论】 筛选得到乳腺癌miRNA差异表达谱,其可能与乳腺癌的发生发展有关。