颠茄类生物碱的毛细管气相色谱和色—质联用分析

本文用毛细管气相色谱和气相色谱-质量选择检测器分析颠茄生物碱类(莨菪碱、东莨菪碱、山莨菪碱和樟柳碱)的研究。对颠茄生物碱与不同硅烷化试剂、反应能力、反应时间以及反应温度作了探索。结果表明,MSTFA是最好的硅烷化试剂。文内给出了这些生物碱的原型和硅烷化衍生物的保留值和它们的特征性碎片离子。这些数据有助于该类生物碱的鉴定。方法已初步应用于这些生物碱在生物合成中的转化研究。此外,还讨论了颠茄生物碱类TMS衍生化的优点。     

三尖杉生物碱的毛细管气相色谱分析

OV-17SCOT玻璃毛细管柱在恒温条件下,除能分离有抗肿瘤活性的酯碱类化合物外,还能分离填充柱不能分离的11-羟基三尖杉碱和脱甲基三尖杉酮碱。分析了不同产地的三尖杉植物提取物中的总生物碱,用毛细管气相色谱和质谱联用鉴定了从A产地得到的总生物碱中的4个峰,其中一个可能属于酯碱类型的新生物碱。并测定了混合酯碱的含量,结果表明目前采用的紫外光谱法误差太大,应提高对杂质检查的要求或经薄板层析分离后,再测定含量。     

颠茄合剂中生物碱的含量测定

目的：建立颠茄合剂中莨菪碱的含量测定方法。方法利用莨菪碱在一定 pH条件下能与酸性染料（溴甲酚绿）定量结合成有色离子对,经氯仿提取后,以硫酸阿托品为对照,在波长416nm 下测定吸收度。结果在7．84～27．44μg· mL －1浓度范围内呈良好线性关系,r ＝0．9998。平均回收率93．85％,RSD＝2．56％。结论本法准确度好,灵敏方便实用,可用于该制剂的含量测定,控制制剂质量。     

液上气相层析分析法

序言液上气相层析分析法(Gas Chromato-graphic Head Space Analysis,下简称GC-HS)是将液面上分析法与气相层析分析法联用的一种技术,具有较高的分辨力以及较高的灵敏度与选择性。本法可以解决一般气相层析法或其他分析方法在技术上难以解决的问题,而且可使分离步骤大大简化,方法的专属性也较高,既适用于溶剂残留、塑料或聚合物单体、食品或天然产物中的芳香成分、血醇以及血中气体等方面的微量分析,也可用于研究测试必要的物理化学参数,是一种有效的分析手段,不仅如此,而且在药物质量控制及各种作物(包括植物药)上农药残留量测定以及环境卫生检测方面都有广阔的应用前途。     

生物碱的安培滴定Ⅱ.颠茄与曼陀罗中总生物碱的含量测定

利用前报的方法,测定颠茄和曼陀罗中生物碱含量,并与药典法比较,结果一致.本法相对平均偏差低于2%.     

仲胺生物碱的选择性层析检出方法

在薄层层析中检出生物碱的试剂通常使用碘化铋钾和碘铂酸。这些试剂不能将仲胺生物碱和叔胺生物碱区分。作者报道了一个可在薄层层析中选择性地检出仲胺生物碱的方法。该方法即利用仲胺和氯醌及乙醛作用可产生一深蓝色的二烷基氨基乙烯醌的反应:     

比色法测定颠茄合剂中莨菪类生物碱的含量

目的建立比色法测定颠茄合剂中莨菪类生物碱的含量。方法方法采用在一定pH溶液中,莨菪类生物碱与酸性染料溴甲酚绿定量结合成有色离子对,用有机溶剂提取后比色测定,测定波长为415nm,硫酸阿托品为对照品。结果在2.5～19.5μg·mL-1范围内线性良好,平均回收率100.5%。结论本法样品用量少,操作单位,准确实用,可用于颠茄合剂的含量测定。     

rolC基因对颠茄托品烷生物碱合成的影响

发根农杆菌浸染植物后产生的发根可合成高水平次生代谢产物,这种代谢增强作用是由rol基因诱导激发的,因此可利用rol基因提高颠茄中托品烷生物碱(tropane alkaloids, TAs)的合成能力。本研究以颠茄为实验材料,将发根农杆菌pRiA4质粒上的rolC基因通过CaMV35S启动子驱动,导入颠茄中超表达。分析转基因颠茄的表型、TAs含量以及TAs合成途径关键酶基因转录表达水平表化。结果表明,转基因颠茄表现出根系发达、雄性不育、雄蕊柱长高于雌蕊、提前开花、节间缩短、花小且多、腋芽和侧芽增多、顶端优势下降和叶片狭长等表型;转基因颠茄的TAs含量均显著高于对照,莨菪碱、山莨菪碱和东莨菪碱含量最高可达对照的2.58、3.59和15.77倍; TAs合成途径中的3个关键酶基因腐胺N-甲基转移酶(PMT)、托品酮还原酶I (TRⅠ)和莨菪碱6-β-羟化酶(H6H)的表达量与对照相比表达上调。以上研究表明rolC基因通过上调颠茄TAs合成关键酶基因的表达提高了颠茄中TAs的合成能力,为利用rolC基因进行高TAs含量的颠茄分子育种奠定了基础。     

分光光度法测定颠茄片中莨菪类生物碱的含量

目的：建立用分光光度法测定颠茄片中莨菪类生物碱的含量。方法：采用在一定的PH溶液中,莨菪类生物碱与酸性染料溴甲酚绿定量地结合成有色离子对,用有溶剂提取后比色测定,测量波长为415mm,酸阿托品为对照品,结果：在0－17．5ug/ml浓度范围内线性良好,平均回收率为101．1％,结论：本方法操作简便,准确,实用,可作为颠茄片的含量测定方法。     

气相色谱法测定复方颠茄合剂中樟脑含量

目的:建立复方颠茄合剂中樟脑的含量测定的气相色谱法方法.方法:采用Agilent DB-WAX毛细管柱,柱温100℃;检测器为FID,载气为氮气(99.99%),流速3.0 ml·min-1.结果:樟脑在0.18～0.92 mg·ml -1浓度范围内进样量和樟脑峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 0);樟脑的平均回收率为97.89%(RSD=2.13%).结论:该法简便、快速、准确.     

血浆中异丙基安替比林的气相层析测定法

对血浆中的异丙基安替比林,以往是先经薄层层析分离然后用紫外分光光度法测定,亦有用3%OV-17填充柱的气相层析法。本文报道用毛细管气相层析法测定,简便、快速、灵敏度高。此外,人血浆中的咖啡因及异丙基安替比林的代谢物脱甲基异丙基安替比林亦     

毛细管气相色谱法测定柠檬酸三乙酯含量

目的 建立毛细管气相色谱法测定柠檬酸三乙酯的含量.方法 色谱柱:DB-1301(15 m×0.53 mm×1 μm);柱温采用程序升温:先80℃保持0.5 min,然后以20℃·min-1的速度增加到220℃并保持10 min;采用氢火焰离子化检测器(FID),检测器温度:275℃;进样口温度:225℃;载气:氮气,流速:2.3 ml·min-1;分流比:20:1;进样量:1.0 μl.结果 柠檬酸三乙酯在24～36 g·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 17),平均回收率为99.91%,RSD值为0.06%.结论 该方法准确、简便、专属性强,可以作为柠檬酸三乙酯含量分析法.     

rolB基因对颠茄表型发育和托品烷生物碱合成的影响

发根农杆菌pRiA4质粒上的rol基因是促进次生代谢的强效基因,可利用rol基因对颠茄进行分子育种以提升颠茄中托品烷生物碱(tropane alkaloids, TAs)含量。本研究将rolB基因在颠茄植株中进行超表达,为了研究rolB基因对颠茄TAs生物合成的影响,分析了转基因颠茄的表型、TAs含量及TAs合成途径中关键酶基因的表达水平。结果表明,转基因颠茄根系发达,叶片增大、叶片鲜重增加、叶片颜色加深,花朵增大、花形改变,雌蕊高度降低,花粉活力下降。转基因颠茄茎中TAs的含量显著高于对照,东莨菪碱、山莨菪碱、莨菪碱的含量分别为对照的2.11～2.91、1.23～2.37、4.88～5.20倍。与对照组相比, TAs合成途径中的关键酶基因N-甲基腐胺转移酶(PMT)、吡咯烷聚酮合酶(PYKS)、托品酮还原酶I (TRI)、芳香族氨基酸氨基转移酶4 (ArAT4)、UDP-糖基转移酶1 (UGT1)和莨菪碱6-β-羟化酶(H6H)的表达上调,且托品酮还原酶II (TRII)作为代谢分流基因表达下调。研究表明rolB基因通过增强TAs合成途径代谢流和减弱竞争支路代谢分流,增强了颠茄根中T...     

麻黄中麻黄生物碱的气相色谱测定法

本文应用毛细管气相色谱法,配备氮磷检测器对麻黄中六种生物碱:麻黄碱、伪麻黄碱、去甲麻黄碱、去甲伪麻黄碱、甲基麻黄碱和甲基伪麻黄碱进行分离、测定。对生药样品预处理方法作了较大改进,采用直接碱化醚提法。简化操作步骤。用内标法,线性方程定最测定了国产十二种麻黄,结果与高效液相色谱法基本一致。     

毛细管气相色谱法测定大蒜素注射液含量

目的 建立了毛细管柱测定大蒜素注射液含量的方法.方法 检测器温度:260℃,进样口温度:230℃,载气以氮气,火焰离子化检测器监测,柱流量:1.5ml/min,进样量:1μ1分流比:10:1.结果 三硫二丙烯的检测浓度在0.1～6ng/ml,r=0.99995,Y=0.00414 0.3 1386x.结论 最低检出限为3ng,方法简单、灵敏高,分离度好.     

毛细管电泳法及其在生物碱分析中的应用

生物碱是植物中一类重要的化学成分,在植物中分布较广。至少有５０多科１２０属以上的植物中已证明有生物碱存在［１］,已知的生物碱种类至少在３０００种以上［２］。生物碱类化合物大多具有生理活性,往往是许多药用植物,包括许多中草药的主要有效成分,如阿片中的镇痛成分吗啡,麻黄中抗哮喘成分麻黄碱和黄连中的抗菌消炎成分小檗碱等。生物碱的分析方法很多,其中高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）是目前最常用的方法［３］。由于ＨＰＬＣ色谱柱易被中药中的其他成分污染,而且不易再生,因此要求在样品前处理时尽可能地除去干扰成分,这就…     

毛细管气相色谱法测定头孢拉定残留溶剂

目的建立测定头孢拉定中残留溶剂的顶空进样和直接进样毛细管气相色谱法。方法二氯甲烷与丙酮测定采用顶空进样法,色谱柱为HP INNOWAX PEG 20M毛细管柱（30.0 m×320 μm,0.25 μm）,柱温50 ℃,2.6%碳酸钠溶液为溶剂;二甲基甲酰胺测定采用直接进样法,色谱柱为DB 624（6%氰丙基苯基 94%二甲基聚硅氧烷固定液）石英毛细管柱（30.0 m×0.53 mm,3.0 μm）,柱温为120 ℃维持4 min,以20 ℃·min 1速率升至180 ℃,维持3 min,二甲基亚砜为溶剂。结果被测物均能得到很好的分离,峰面积与浓度呈良好的线性关系,精密度和回收率良好。结论该法可用于头孢拉定原料药中残留溶剂的检测。     

毛细管气相色谱法测定敌敌畏乳油含量

目的：建立敌敌畏乳油的含量测定方法。方法：敌敌畏乳油加含十五烷内标三氯甲烷溶剂溶解后,在程序升温条件下,采用直接进样方式．用毛细管气相色谱法测定敌敌畏含量。结果：敌敌畏与十五烷内标的峰面积与浓度的线性关系良好,r均〉0．9994,回收率均〉95％,连续5次进样的RDS〈5％。结论：该方法适用于敌敌畏原药与适宜的乳化剂和溶剂配制的敌敌畏乳油含量测定。     

毛细管气相色谱法测定血清非洛地平浓度

采用毛细管气相色谱电子捕获检测器，以尼群地平为内标物质，对人血清中非洛地平的测定方法进行了初步的研究。实验结果，样品与内标的峰高比（Ｈｓ／Ｈｉ）同样品浓度间线性良好，线性范围０．５～４０ｎｇ·ｍｌ－１，回归方程Ｃ＝７．５７６Ｈｓ／Ｈｉ－０．０４３２，ｒ＝０．９９８９。最低检测限０．４ｎｇ·ｍｌ－１（信噪比３∶１）；精密度试验，日内误差ＲＳＤ＜６．３％，日间误差ＲＳＤ＜７．５％；方法平均回收率为８０．４％。结果显示，本法适于血清中非洛地平原形药物的测定。